凝血因子异常性疾病 及其检验

因子Ⅷ缺乏
受检溶血液
＞15秒
受检溶血液+硫酸钡吸浆 ＜15秒
受检溶血液+血清 受检溶血液+血浆
＞15秒 ＜15秒
最短基质血浆凝固时间
因子Ⅸ缺乏 因子Ⅺ缺乏 存在抗凝物质
＞15秒
＞15秒
＞15秒
＞15秒
＜15秒
＞15秒
＜15秒 ＜15秒
＜15秒 ＜15秒
＞15秒 ＞15秒
方法学评价
本试验是临床上常用的一种传统方 法，操作繁琐、敏感性较差，目前已经 由凝血因子活性测定取代。
遗传及分子生物学—遗传方式
（1）血友病甲、乙患者与正常女子婚配， 所生儿子全部正常，女儿全部为携带者。
（2）正常男子与血友病甲、乙携带女子 婚配，儿子半数是患者、半数正常；女 儿半数为携带者。
（3）血友病甲、乙患者于女性携带者婚 配，儿子中半数是是患者、半数正常； 女儿半数为携带者、半数为患者。
（1）高凝状态，如DIC的高期。
（2）血栓性疾病，如心肌梗死、脑 血管病变、糖尿病伴脑血管病变、 肺梗死、深静脉血栓、妊高症等。
注意事项 同活化部分凝血活酶时间。
方法评价
本试验方法简便、敏感性与准确性都较高。 是检测外源性凝血有无障碍的试验。主要用于 检测多种凝血因子缺乏性疾病，特别是对抗凝 溶栓性药物应用进行监控。
在血友病时测定此项目是起到一个排除作用。
（二）确证试验
1、简易凝血活酶生成试验及纠正试验 (STGT)
原理 ：是用受检者稀释全血溶血液作为试验 所需的全部凝血因子的来源，自身红细胞溶解 产物替代PF3，按一定时间加入基质血浆（提 供凝血酶原和纤维蛋白原），测定凝血活酶生 成所需时间，以检查内源性凝血系统凝血活酶 生成有无障碍。
（4）男性患者与女性患者婚配，其子女 均为患者。
临床表现
主要特征是反复的出血，ห้องสมุดไป่ตู้别是 1、 深部组织血肿和关节积血。也可出
现尿血、便血、咳血、呕血、颅内 出血、外伤性出血等。
二、实验室检查
（一）筛选试验 1、活化部分凝血活酶时间（APTT） 原理： 在抗凝血中加入白陶土，激活因子Ⅻ、
因子Ⅺ；加入脑磷脂，代替血小板第三因子 （PF3）提供凝血的崔化表；从加入钙离子到 血液凝固所需的时间既称为活化部分凝血活 酶时间。 参考值 ：30-40秒
Ⅲ型，VWF的抗原性和活性均极度减低或缺如。 是常染色体隐性遗传，临床出血严重。
（二）检验
1、血浆VWF抗原性测定 应用免疫火箭电泳法、ELISA法等
免疫学方法都可以测定其在血浆中的含 量。和参考值比较，是否缺乏。Ⅰ型、 Ⅲ型明显降低，Ⅱ型降低或正常。
（2）瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验
一般情况下，血小板聚集是由纤维 蛋白原介导完成的，在特殊诱导剂瑞斯 脱霉素诱导下，血小板之间的聚集是由 VWF来完成的。测定时分别作ADP与瑞 斯脱霉素诱导的血小板聚集反应，ADP 诱导的正常、瑞斯脱霉素诱导的减低， 说明VWF量减少或结构异常。三个型的 基本都减低。
临床意义 —活化部分凝血活酶时间延长
（1）因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ减少。见于血友病甲、乙、 因子Ⅺ缺乏症，还见于血管性血友病。
（2）先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ减少及纤维蛋白 缺乏。
（3）获得性多种凝血因子缺乏，如DIC、原发性纤 溶症、严重的肝病、和VK缺乏等。
（4） 抗凝治疗。
临床意义—活化部分凝血活酶时间缩短
(3） 0.025mol/L氯化钙溶液应新鲜配制。 （4）须用枸酸钠液抗凝，其它抗凝剂不可以， 血液和抗凝剂比例要适宜。
(5）分离血浆时务必除去血小板。
(2)凝血酶原时间(PT)
原理: 在抗凝血浆中加入足够量的组织凝血 活酶（组织因子）和适量的钙离子，既可以 满足外源性凝血的全部条件。从加入钙离子 到血液凝固所需的时间既称为凝血酶源时间. 参考值 凝血酶原时间：11-13秒
凝血酶原比值：0.82-1.15
临床意义—凝血酶原时间延长：
血友病时本实验结果正常。
先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减少及纤维蛋 白缺乏。
获得性多种凝血因子缺乏，如DIC、原发性纤 溶症、严重的肝病、和VK缺乏等。
口服抗凝药的监控：控制凝血酶原比值或INR 值在2-3为抗凝治疗的合适范围。
临床意义—凝血活酶时间时间缩短 很少见。
临床意义
血友病甲时，凝血因子Ⅷ活性减 低，重型≤1%；中型≤2%—5%；轻 型≤6%—25%；亚临床型26%— 45%。血友病乙时，，凝血因子Ⅸ活性 减低，临床分型同血友病甲。凝血因子 Ⅺ缺乏症凝血因子Ⅺ活性减低。
二、血管性血友病
（vonwillebranddisease,VWD）
（一）概述
很少见。 （1）高凝状态，如DIC的高凝期。 （2）血栓性疾病，如心肌梗死、脑血
管病变、糖尿病伴脑血管病变、肺梗 死、深静脉血栓、妊高症等。
方法学评价
本试验方法简便、敏感性与准确性都 较高，是检测内源性凝血有无障碍的试 验，能检出轻型血友病,但不能对血友病 分型.
注意事项
（1）采血顺利、抗凝充分，不应有溶血及凝血。 （2）采血后应在2小时内进行测定。
病因 血管性血友病是由于构成因子Ⅷ复合
物中的血管性血友病因子（VWF）基因 合成与表达缺陷而导致VWF的质、量异 常所导致的出血性疾病。VWD是仅次于 血友病甲的另一种常见的出血性疾病。
分型
临床大体将其分三型：
Ⅰ型，VWF量减少，结构基本正常。本型患者 为常染色体显性遗传，临床出血较严重。
Ⅱ型，主要是结构异常所致。根据不同的异常 结构分为5个亚型（A、B、M、N）。多数是 常染色体显性遗传，表现为轻-中度皮肤、黏 膜出血倾向。
2 血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ促凝活性测定
原理 受检血浆中分别加入乏Ⅷ、乏Ⅸ、乏Ⅺ的 基质血浆、白陶土磷脂悬液和钙离子，分别 记录血浆凝固所需时间。从各自的标准曲线 中分别计算出受检血浆中因子Ⅷ、因子Ⅸ、 因子Ⅺ相当于正常人的百分率。
参考值
均为100%±20% 方法学评价
是目前诊断血友病的最常用方法，能 够对凝血因子定量进行测定．不但能对 各型血友病进行诊断，还能区分轻、中、 重型和亚临床型血友病。
纠正试验：在简易凝血活酶生成试验延 长的受检稀释全血溶血液中分别加入一 定量的正常硫酸钡吸附血浆、正常血清 和正常新鲜血浆，分别测定正常基质血 浆的最短凝固时间，以测定加入的纠正 物是否能纠正（缩短）患者的血浆凝固 时间。
参考值: 最短的凝固时间 ＜15秒
临床意义
简易凝血活酶生成纠正试验结果与临床意义