瑞香狼毒细胞悬浮培养及黄酮积累的研究
瑞香狼毒茎中黄酮提取工艺及抑菌活性研究
瑞香狼毒茎中黄酮提取工艺及抑菌活性研究
李彪;巩红冬;郭淑青
【期刊名称】《甘肃高师学报》
【年(卷),期】2024(29)2
【摘要】为合理开发利用瑞香狼毒茎中的黄酮,文章运用正交实验研究瑞香狼毒茎中黄酮的最优提取工艺,并分析瑞香狼毒茎黄酮对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的作用.结果表明:瑞香狼毒茎黄酮提取的最佳条件为温度70℃,乙醇浓度50%,料液比1∶20,回流时间保持2.5 h,提取率高达23.34%;瑞香狼毒茎黄酮对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用,其对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑制浓度都为12.5 mg/mL,对大肠杆菌的最小抑制浓度为6.25 mg/mL.
【总页数】5页(P18-22)
【作者】李彪;巩红冬;郭淑青
【作者单位】甘肃民族师范学院化学与生命科学系
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.藏药瑞香狼毒多糖提取工艺的优化及其抑菌和抗氧化活性研究
2.不同干燥方式对瑞香狼毒总黄酮提取及抑菌活性的影响
3.瑞香狼毒花多糖提取工艺优化及其抑菌
活性研究4.瑞香狼毒根提取物及不同溶剂萃取物对马铃薯腐烂茎线虫触杀活性研究5.瑞香狼毒根中总黄酮类化合物提取工艺的研究
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瑞香狼毒抗癫痫活性部位筛选及活性部位中总黄酮含量测定
郑新元 刘恩莉 李青 山
【 摘
要 】 目的
探索瑞香狼毒抗癫痫活性部位 、 部位 中总黄酮含量测定方法及总黄 酮含量 与抗癫痫 活性
采用乙醇提取和不同溶剂萃取等手段 ． 通过惊厥实验模型对瑞香狼毒各提取部位的活性 初步确定 乙醚
活性之间的关系。 方法
筛选 ， 确定其抗癫痫活性部位 ； 采用紫外分光光度法对 活性部位 中总黄酮进行了含量测定 。结果
Ｃｈｉ ｎａ
【 ｓ ａ ｔ Ｏｂｅｔ ｅ ｏｓｒｅ ｒｈ ｃｖ ｏ ｏ ｅｔ ｏ ． ｈ ｍ ｅ ｓ ｅＬａａ ｓ ｅｉ ｐｙａｄｄｔｒ ｎ Ａｂｔ ｃ】 ｊｃ ｖ Ｔ ｃ ｎｆ ｅａｔ ｅ ｍｐｎ ｎｓ ｆ ｃ ａ ａｊ ｍ ｇｉ ｔ ｐｌ ｓ ｎ ｅ ｍｉｅ ｒ ｉ ｅ ｏｔ ｉ ｃ Ｓ ａ ｎ ｅ ｅ
ｔｌｆ ｖ ｎ ｉ ａ ． １ ｉ ｔ ｅ ｘｒ ｃ Ｓ ５ ０ ％ ｉ ｃ ｔ ｎ ｘ ｒ ｃｉｎ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ ＵＶ～ ｉ ｓ ｅ ｔ ｐ ｏｏ ｔ Ｄ ａ ａ ｏ ｏｄ ｗ ｓ ８ ５ ％ ｎ ｅｈ ｒｅ ｔ ｔ ．７ ｌ ａ Ｕ ｎ ａｅｏ ｅｅ ｔ ｔ ． ａ ｏ ｎ ｌｓｏ ｖｓ ｐ ｃｒ ｈ ｔｍｅｒ ａ — ｏ ｙ
ｐ ａ ｅ ｏ ｂ ｎ ａ ｃ ｒ ｔ ， ｅ ｒ ｄ ｃｂ ｅ ａ ｄ ｅ ｓ － ｏ ｕ ｅ ａ ｐ ｏ ｃ ｏ ｅｅ ｉａ ｉｎ ｏ ｏａ ａ ｏ ｏ ｄ ｃ ｎ ｅ ｔ ｎ ａ ｔ ｅ ｅ ｒ ｄ ｔ ｅ ａ ｃ ｕ ａ ｅ ｒ ｐ ｏ ｕ ｉ ｌ ｎ ａ ｙ ｔ － ｓ ｐ ｒ ａ ｈ ｆｒｄ ｔｒ ｎ ｔ ｆ ｔ ｌ ｖ ｎ ｉ ｏ ｔｎ ｓ ｉ ｃ ｉ ｍ ｏ ｔ ｌ ｆ ｖ
瑞香狼毒化学成分及药理作用的研究进展
113BIOTECHWORLD 生物技术世界狼毒,史载于《神农本草经》,具有杀虫的功效,有一定毒性,分布于中国东北和西北等地区,主治腹胀,结核,心腹疼痛等,又名红狼毒,断肠草。
近年来,国内外学者对其作出了大量的研究,从瑞香狼毒中已分离出抗癌及抗肿瘤的有效成分,为了进一步系统化的研究,现综述如下。
1 化学成分研究1.1 二萜类当前从狼毒中分离得到许多生理活性二萜成分,Niwa分离出huratoxin,pimelea factor P2,subtoxin A等,这类成分主要是抗肿瘤的活性物质。
其中发现具有抗癌活性的simplexin,尼地吗啉和buratoxin,还发现抗白血病的化合物和抗HIV-1病毒的化合物。
此外,还鉴定分离出neostellerin [1]等。
其中尼地吗啉的抗癌活性相对于长春新碱和阿霉素要略高。
1.2 黄酮类从狼毒中分离得到黄酮类成分有异狼毒素,二氢山奈酚,雁皮素A、C,异狼毒素B,荛花醇A, B,槲皮素,二氢山奈酚,瑞香素乙等多种黄酮类化合物。
1.3 香豆素类经试验证实,从瑞香狼毒中提取分离出来的香豆素类化合物有东莨菪素、伞形花内脂、牛防风素、茴芹香豆素、瑞香苷、新瑞香素、异西瑞香素B等为瑞香狼毒的有效的活性成分。
香豆素类一般用于植物生长调节、平滑肌松弛等作用。
1.4 木脂素类已分离的此类化合物有拉帕酚F、clemastanin B、牛蒡苷、木兰勒宁C、鹅掌楸树脂醇B、(-)-松脂醇、罗汉松树脂醇、(+)-樟树宁、(-)-松脂醇单甲醚、isoh-inokinin、(-)-松脂醇二甲醚(又名桉叶素)、ile-mastanin B、(+)-matairesinol、isohinokinin、(-)-pinoresinol monomethyl ether、syringinoside等。
1.5 挥发油类化合物杨伟文等利用GC-MS从瑞香狼毒的挥发油中分离出了27种挥发油成分,已鉴定出结构的有12种,含量占精油总量的 62.5% .其中含量成分较高的有麝子油醇(占精油总量22.1%)。
狼毒属植物化学成分及药理活性研究进展
狼毒属植物化学成分及药理活性研究进展近年来，国内外学者对瑞香科Thymelaeaceae狼毒属Stellera植物的化学成分及药理活性进行了较为深入的研究，发现该属植物的化学成分主要包括萜类、香豆素、黄酮、木脂素及挥发油等化合物；药理学研究表明狼毒属植物中二萜及双黄酮成分具有抗肿瘤、抗HIV病毒以及免疫调节等方面的活性。
该文对狼毒属植物的化学成分及药理活性方面的研究进行了系统综述，以期为该属植物活性物质的深入研究、药用价值的提升及其综合开发利用提供科学依据。
标签：狼毒属；化学成分；生物活性；综述；进展瑞香科Thymelaeaceae植物在世界上约有48属650余种，主要分布于温带和热带地区。
在我国有10属，分别为瑞香属DaphneL、荛花属WikstroemiaEndl、狼毒属StelleraL、沉香属AquilariaLam、草瑞香属DiarthronTurcz、结香属EdgeworthiaMeisn、毛花瑞香属EriosolenaBl、鼠皮树属RhamnoneuronGilg、假狼毒属StelleropsisPobed、欧瑞香属ThymelaeaMill，共100多种，其中以瑞香属与荛花属居多，分布遍及全国，主要生长在长江以南各省区[1]。
狼毒属StelleraL.植物为多年生草本或灌木，全世界共有10～12种，在我国有2种[1，2]。
瑞香狼毒是该属的代表性植物，也是传统中药之一，其味苦性平，具有散结、逐水祛痰、破积杀虫之功效；主治水肿腹胀、痰食虫积、心腹疼痛、症瘕积聚、结核、疥癣等[3-4]。
台湾狼毒S.formosana为我国台湾特有种，中医学上用其根作为行水、消积、杀虫药，但液汁有大毒，多为外用[5]。
之前虽有学者对瑞香狼毒的研究进展做过报道，但未见针对该属植物系统的综述。
本文通过系统的文献检索，对1980—2015年有关狼毒属植物化学成分及药理作用的研究做一较为系统的综述，以期为该属植物药用价值的深入研究和综合开发利用提供参考。
瑞香狼毒抗癌作用研究进展
瑞香狼毒抗癌作用研究进展近年来动物实验与临床试验均证实，瑞香狼毒在抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、调控细胞周期、调节机体免疫系统等方面具有突出的防治肿瘤作用，并已从中分离出具抗癌活性的单体化合物。
本文从抗癌活性成分、抗癌机制、临床运用、不同炮制品对抗癌作用的影响、毒副作用5方面对狼毒抗癌作用进行综述。
Abstract：In recent years，animal experiments and clinical trials have confirmed that Euphorbiae Ebracteolatae Radix has outstanding medicinal value of cancer prevention in the aspects of inhibition of tumor cell proliferation，inducing apoptosis，cell cycle regulation and regulation of immune. It also has been reported that monomeric compounds with function of anti-tumor activity have been separated. This article reviewed anti-cancer effects of Euphorbiae Ebracteolatae Radix from five angles，which were anti-cancer active ingredient，anti-cancer mechanisms，clinical application，the effects of different processed products on anti-cancer effects and side effects.Key words：TCM；Euphorbiae Ebracteolatae Radix；anti-cancer；review狼毒首载于《神农本草经》，为不常用品种。
瑞香狼毒药理活性研究进展
李文娟 等 发现 瑞香 狼毒对 人体 常见 病 原细 菌 和真 菌有 抑制 作
细 胞水 平 的研究 发现 ， 瑞香 狼毒 水提 物对体 外培 养 的小 鼠移 植肿 用 ， 初测 瑞香 狼毒 中的抑 菌活 性物质 主要 为 中偏强极 性成 分 。郭东 艳
瘤 细胞 的生 长 、 集落 形成 和 Ｍ Ｔ ｒ甲脂 化合 物生 成有 明显 的抑制 作用 ， 等 研究 表 明乙醇为 瑞香 狼 毒根 抑 菌 活 性物 质提 取 的最 佳 溶 剂 ， 并 且 这种 抑制 作用 与提 取物 的剂 量 呈 正 相关 。贾 正 平等 从整 体 水平 得 出瑞 香狼毒 根 中含 有 １ ， ７ ， ７一 三 甲基 一 二环 ［ ２ ， ２ ， １ ］一 ２一庚 酮 、 Ｎ 探讨 瑞香 狼 毒水提 物 的抗癌 作用 及机 制 ， 得 出直 接抑 制癌细胞 增 殖及 苯基 一 １ ３ 一 萘胺、 邻 苯 二 甲 酸二 一（ ２一乙 基 ）一己 酯 、 邻 苯 二 甲酸 Ｄ Ｎ Ａ合 成 是瑞 香狼 毒重 要抗 癌机 制 。王 润 田等 进 一步 提 出瑞香 狼 二辛酯 等 ２ ６ 种 可能 的抑菌 成分 。
仅毒 性强 ， 而且 有广 泛 的药 理作用 ， 具有 抗艾 滋病 、 抗肿 瘤 、 抗氧 化 、 抗 疗 指数 高达 １ ４ ． ９ ， 故认 为 瑞 香狼 毒 丙 酮 提 取 物是 一 种 有 希望 的 抗癫 微生 物 、 降压 、 抗辐 射等 多方 面 的 生物 活 性 。二 萜 类化 合物 尼 地 吗啉 痫 药物 。 具 有 很强 的抗 癌活 性 ， 被 公认 为瑞 香狼 毒抗 肿瘤 作用 的主要成 分 。 近年 来 ， 国 内外 学者 发现 瑞香 狼毒 具有 多种 药理 活性 ， 如： ①抗 肿
瑞香狼毒的研究概况
瑞香狼毒的研究概况
权宜淑
【期刊名称】《陕西中医》
【年(卷),期】1999(020)009
【摘要】综述近年对瑞香狼毒研究概况。
最人瑞香狼毒根中分离出的狼香素为双氢双黄酮化合物。
此后，分离出了呋喃香豆素类、挥发油、酚类、木脂体以及二萜原酸酯类化合物；药理研究证明瑞香狼毒的醇、水提出物均有抑制小鼠移植性肿瘤的作用，经筛选，从醇提物中分离出的二萜尼地吗啉有强抗癌活性；相用瑞香狼毒治疗恶性肿瘤５４例，其中原发性肝癌４３例，肺癌６例，另有宫体癌、宫颈癌、卵巢癌、胰腺癌及脑胶质瘤各１例，收到良好效果。
【总页数】2页(P425-426)
【作者】权宜淑
【作者单位】陕西省中医药研究院
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
【相关文献】
1.中药瑞香狼毒抗肿瘤作用研究概况 [J], 梁秀艳;吴琳华
2.蒙药瑞香狼毒及其奶制品中新狼毒素甲、瑞香素乙、新狼毒素乙的比较研究 [J], 吴七十三;王青虎;刘瑛;代那音台
3.瑞香狼毒抗肿瘤作用及机制研究概况 [J], 樊俊杰
4.瑞香狼毒提取物尼地吗啉的抗肿瘤研究概况 [J], 王园园;王鑫;王义善
5.瑞香狼毒根中异新狼毒素A和新狼毒素B对松材线虫和拟松材线虫的触杀活性研究 [J], 崔海燕;金辉;王丹丹;路利芹;秦波
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瑞香狼毒化学成分及药理研究进展
瑞香狼毒化学成分及药理活性研究进展瑞香狼毒( Stellera chamaejasme Linn .)为瑞香科狼毒属多年生草本植物，又名断肠草、断肠草、馒头花、山萝卜等，其根入药，其性味苦平，有大毒。
瑞香狼毒始载于《神农本草经》，治水肿腹胀、痰、食、虫、积等疾。
[1]民间主要用于治疗淋巴结核、神经性皮炎等，但因其毒性大，并不常用。
[2]瑞香狼毒作为土农药早已应用于民间，将瑞香狼毒根晒干研成细粉，翻地时放入沟内，可杀死地下害虫；其水浸液喷洒可防治菜粉蝶幼虫、猿叶虫及蚊子幼虫；用其做成人工毒饵可诱杀粘虫、苍蝇，其茎叶加水煎熬后，其浸出液倒人厕所，可杀死苍蝇幼虫。
[3]对其化学成分方面的研究始于20世纪60年代。
1963年我国化学家黄文魁从瑞香狼毒中分离得到第1个单体化合物并命名为狼毒素。
在以后的几十年中，先后有几十种单体化合物被分离得到，但对这些单体化合物的活性研究却不太多。
国外对瑞香狼毒的研究报道最早见于1974年，苏联学者Tikhomirova[4]分离并鉴定出了4种呋喃型香豆索，其后苏联学者Modonoval[5]和蒙古学者Narantuyaa[6]又分离得到了几种香豆素类化合物。
日本的一些学者从上年世纪80年代开始对瑞香狼毒进行研究，先后分离得到了23个单体化合物，其中11个具有抗HIV病毒作用，7个具有抗癌作用。
目前国内外许多学者做了大量有关瑞香狼毒的化学成分、药理等方面的工作，得到了多种活性成分，阐明了许多重要化合物的结构，药理实验表明瑞香狼毒的提取物具有多种生物活性，如对人体自血病、胃癌细胞的生长有抑制作用、抗艾滋病病毒[7][8]、对大肠杆菌、绿脓杆菌、志贺氏菌、宋内氏痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌及霍乱弧菌等肠道致病菌[9-13]有完全抑制作用；同时还具有杀灭菜青虫[14][15]，仓储害虫[16][17]，蚜虫[18][19]和菜粉蝶幼虫[20]的作用。
对瑞香狼毒的化学成分、药理成分的进一步研究，能用来寻找新的药物，以攻克目前人类所面临的顽症，以对抗那些已经产生抗药性的农作物病虫害，并能不断发现新的化合物及其新功能来更好的造福人类，同时也能更好的解决瑞香狼毒在部分地区造成的危害，来解决当前各层畜牧业工作者所面临的困境。
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摘要 ： 以瑞 香 狼 毒 顶 芽 、 叶片 和 茎 段 为 外植 体 ， 察不 同植 物 生 长 凋节 剂对 愈伤 组 织 诱 导 率 及 生 长 状 态 的影 响 。 由 考 疏 松 型 的 愈 伤组 织 建 立 稳 定 的瑞 香狼 毒细 胞 悬 浮 培 养 体 系 ， 用 正交 试验 法初 步 研 究 碳 源种 类 和 植 物 生 长 调 节 剂 采
的重要 途径 。利 用植 物细胞悬 浮培养 生产 黄酮类化 合物 的研究报 道 已有 不少 。其 中 ， 袁宗 泉等口 报道 了细胞生 长期 、 丙氨酸 和放线 菌 一Ｄ对银 杏 （ ｉｋ ｏ ｉ ｂ ） 苯 Ｇ ｎ ｇ ｂｌ ａ 黄酮产 量的影 响 ； 德修等 口 ｊ ｏ 赵 报道 了不 同理 化因子对 水母
进行 了阐述 ； 罗建平 等 报道 了茉莉 酸 甲酯 、 杨酸 和一 氧 化氮 诱 导及 稀 土元 素对 怀 槐 （ ａ ｋａａ ｌｒｎ ｉ） 。 水 Ｍａ ｃｉ ｌｕｅ ｓ ￣ ｓ
悬 浮培养 细胞异黄 酮合成 的影 响及细胞 结构变 化 ； 崔兴 华等口 。报道 了黑暗培 养条 件下 甘薯 （ｐ ｍｏａｂ ｔｔｓ 悬 Ｉ ｏ ｅ ａａａ ） 浮细 胞黄酮类 物质 的积 累情 况 。尽 管上述 这些 报道为 其他植 物 细胞 培养 及 黄酮积 累 的研 究提 供参 考 ， 是每 种 但 植物 基 因型 及生长条 件等存 在差 异 ， 因而没有标 准 的培 养 条件来 适 合昕有 植 物 的细胞 培 养及 产 物积 累 。 由于 目
对 细 胞 生 长 和黄 酮 积 累 的 影 响 。结 果 表 明 ， 附加 了 ２ ４Ｄ １ ０ｍｇ ｌ ＮＡ ． ／ 在 ，一 ． ／ ＋ Ａ ０ １ｍｇ Ｌ的 ＭＳ培 养 基 上诱 导茎 段
可 获 得适 于悬 浮 培 养 的 疏 松 型愈 伤 组 织 ， 导率 达 到 ９ 。正交 试 验 中各 因素 对 细 胞 生 长 和 黄酮 含 量 的影 响 效 应 诱 Ｏ
酸等 。其 中酚类成 分 中的黄酮类化 合物 一因有抗肿 瘤 、 ＨＩ 、 菌』 、 抗 Ｖ【 抑 １ 杀虫 。 等 药用 价值 而被 广泛 研
究。
由于瑞香 狼毒这 些药用 成分 主要通 过定期 到生长地 取材再 分离 纯化来 获取 ， 免会受 到植 物收获 期 、 难 地理 环 境、 土壤 结构 、 季节气 候 、 植物 病虫 害等 因素影响 ， 因而 ， 在产业 化过 程 的研 究 中还可 以考 虑用 细 胞悬 浮 培养 方式 来获取 。这一 途径具 有生产周 期相对 较短 ， 不受地 区和季 节限制 ， 避免病 虫危 害 ， 得产物 品质稳 定 ， 于大规模 所 利 培养 ， 可人为 调控细胞 生长 及其药用 成分 的代谢 途 径获 得 “ 产细 胞 株” 且 高 等优 点一一 已成 为开 发药 用植 物 资源 ，
雪莲 （ ａ ｓｕ ｅ ｄ ｓ ） Ｓ ｕｓｒａ ｍｅ ｕａ 培养 细胞 中黄酮形成 的影 响 以及 高产黄酮 雪莲 细胞 系的筛选 等 。Ｓ ｔ ｍｉ ｈ和 Ｒ ｉｕ ｅ 对植 ｄ
物 细 胞 悬 浮 培 养 与 黄 酮 类 化 合 物 的 积 累 关 系及 李 燕 等 对 植 物 组 织 和 细 胞 培 养 中 黄 酮 类 物 质 积 累 的 影 响 因 素
均 为 ２ ４ Ｄ 碳 源＞ Ｎ ， ＞ ＡＡ＞ ６Ｂ 较 高 浓 度 的 ２ ４Ｄ、 ＡＡ 和 ６Ｂ 均 有 利 于细 胞 生 长 和 黄 酮 积 累 ； 糖 最 有 利 于 － Ａ； ， Ｎ Ａ 蔗 细胞 生 长 和黄 酮 积 累 ， 次 是 葡 萄 糖 和 果糖 ； 于 细胞 生 长和 黄 酮 积 累 的培 养 摹 为 ： ＋２ ４ Ｉ ． ／ ＮＡ 其 适 Ｍｓ ，一 ）２ ０ ｍｇ Ｉ ＋ Ａ １ ０ ｍｇ Ｉ Ａ ０ ５ ｍ ／ ． ／ ＋６ Ｂ ． ｇ Ｉ ＋蔗 糖 ３ ／ 。细 胞 生 长 与 黄酮 积 累呈 极 显著 正 相 关 （ ． ６ ） Ｐ ０ ０ ， 属 于 ０ｇ Ｉ Ｒ 一０ ９ ７ ， ％ ． １ 这 生长 偶 联 型 的 次 生 代谢 模 型 。
关键 词 ： 香 狼 毒 ； 瑞 细胞 悬 浮 培 养 ； 酮 ； 黄 碳源 ； 物生 长 调 节 剂 植
中 图分 类 号 ： ４ ． ６ ． ； ４ Ｑ９ ９ ７ １ １ Ｑ９ ２ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ４ ５ ５ （ ０ ０ ０ １ ２Ｏ １ ０ ７ ９ ２ １ ） ６０ ３ 一 ８
瑞香 狼毒 （ ｔ ｌｒ ｋ ｍａｊ ｓ ｅ 为瑞香 科狼毒 属多 年生草本 植物 ， Ｓ ｅ ｅａｃ ａ ｅａ ｍ ） ｌ 又名 断肠草 ， 分布 于东北 、 华北 、 西南 、 西 北 等地 的干 草原 、 沙质草原 和典 型草原 上 ， 是我 国重要 纪 ６ ０年代 起 ， 国学者 已从 瑞 香 我 狼毒 中分离 并鉴定 出 ３ ０多种化合 物 ， 主要包括 甾醇 、 酚类成 分 、 氨基 酸 、 萜 类 、 甙 、 三 蒽 狼毒 甙及 有 毒 高分 子有 机
前 尚未见到 有建立瑞 香狼 毒细胞悬 浮培 养体系 以及用来 积 累黄 酮 的研究 报道 ， 以本 研究 通 过不 同植 物 生长 调 所
１ ３２— １ ３９
草 业 学 报
ＡＣ１Ａ 、 ＰＲＡ ＴＡ ＣＵ ＩＴＵ ＲＡ Ｅ ＮＩ ＳＩ ＣＡ
第 ｌ卷 ９
第 ６期
２ ０年 １ Ｏ１ ２月
Ｖ ０ ． ９， １ １ Ｎｏ． ６
瑞 香狼 毒细胞 悬浮 培 养及 黄酮 积 累的研 究
王 文 星 ， 琪 ， 莹 ， 猛 ， 成有 安 汪 王 曹