脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告模板一要点
脓汁和粪便标本中病原菌检测实验报告二
脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：14临床输血学号： 3140704004姓名：宁立军组别：第七组合作者：牛恺文黄可秀朱晋辉实验室：第六实验室指导老师：罗军实验的得分：一、实验目的通过革兰氏染色并在油镜下观察细菌形态结构、细菌的生化反应和细菌的血清学反应等手段区别和鉴定脓汁标本中和粪便标本中细菌，检测病原微生物，并进行细菌药物敏感性试验。
二、实验器材1器材接种环接种针打火机马克笔酒精灯电热恒温培养箱物显微镜电炉试管（带棉塞）称量纸药勺牛皮纸橡皮筋尺子锥形瓶高压蒸汽灭菌器镊子玻片吸水纸2 试剂药品普通营养琼脂培养基蒸馏水脓汁标本粪便标本石蜡油生理盐水结晶紫卢戈碘液 95%乙醇稀释复红葡萄糖微量发酵管（2支）乳糖微量发酵管（2支）青霉素抗菌素纸片链霉素抗菌素纸片庆大霉素抗菌素纸片兔血浆福氏志贺菌诊断血清三、方法与步骤1培养基制备称取一定量的肉汤培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸一次，趁热分装；称取一定量的营养琼脂培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸三次（煮至刚刚冒泡，立刻置于台面，半分钟后再煮），使完全溶解，趁热分装。
（平板培养基：以无菌操作，倾注平皿10ml，琼脂完全凝固后，平板倒放，4℃冰箱保存备用。
斜面培养基：培养基趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。
）贴上标签后灭菌使用。
2空气与人体体表细菌学检查根据空气中细菌气溶胶粒子，在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到培养基表面，培养以后，计数菌落形成单位（CFU），了解空气的污染情况。
平板盖打开，盖朝下放在平板旁，琼脂平板暴露15分钟即可。
在普通平板上接种手指上的细菌。
第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。
3细菌分离培养接种前，接种环烧灼灭菌。
取标本在平板表面上方密集涂布5～10 mm²。
烧掉接种环上多余的标本。
冷却后，应用分区划线分离法，将脓汁标本接种于营养琼脂平板（2份），粪便标本接种于伊红美蓝平板（2份）。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告本实验旨在通过对脓汁和粪便标本的检测，确认其中的病原菌种类及数量，并提供合理的治疗建议。
一、实验原理病原菌是引起感染的主要原因之一，其种类和数量的检测是诊断和治疗感染的关键步骤之一。
本实验将通过培养、鉴定和计数脓汁和粪便标本中的病原菌，以确定感染的类型和程度，从而为治疗提供依据。
二、实验材料和试剂1. 脓汁标本和粪便标本；2. 消毒用具（酒精棉球、焊接器等）；3. 细菌培养基（营养琼脂、MacConkey琼脂、血琼脂）；4. 鉴定试剂（青霉素酶、氧化/还原试验等）；5. 光学显微镜；6. 均质器；7. 精密天平。
三、实验步骤1. 标本制备将脓汁标本和粪便标本均匀搅拌，取出适量标本（大约1克）并转移到无菌离心管中。
2. 标本清洗使用去离子水将标本管中的标本沉淀洗涤三次，去除杂质。
3. 均质标本使用均质器将标本转移到无菌均质袋中，并进行均质处理。
4. 鉴定菌落计数将均质标本分别接种在营养琼脂、MacConkey琼脂和血琼脂培养基上，并在37°C下培养24-48个小时。
随后使用光学显微镜进行菌落计数和观察颜色和形态。
根据颜色和形态等特征，初步确定病原菌的种类。
5. 鉴定试剂检测针对感染可能的病原菌种类，使用相应的鉴定试剂进行检测，以确定病原菌的确切种类。
6. 病原菌计数根据菌落计数结果，对病原菌进行定量计数，以进一步确定感染的程度。
四、结果分析经过实验分析，使用光学显微镜和鉴定试剂检测，可以初步确定脓汁标本中的病原菌可能为金黄色葡萄球菌。
通过菌落计数和定量计数，可以确定金黄色葡萄球菌的数量为10^6CFU/mL。
而粪便标本中则检测出大肠杆菌，其数量为10^5CFU/g。
五、诊断和治疗建议1. 脓汁标本中检测出的金黄色葡萄球菌，提示患者可能患有金黄色葡萄球菌感染，建议对患者进行进一步检查，以确认诊断。
2. 粪便标本中检测出的大肠杆菌，建议患者增加膳食纤维的摄入，加强个人卫生，避免感染传播。
微生物实验报告2012054015杨小静
脓汁和粪便标本中病原菌的分离培养与检测专业：中西医临床医学七年制学号：2012054015 姓名：杨小静实验目的：本次脓汁粪便标本中病原微生物的检测实验，旨在通过培养基制备，病原菌的分离与培养，以及细菌鉴别实验如革兰氏染色法，血浆凝固酶试验，药敏试验，半固体接种法实验，从而对医学微生物学主要的研究方法和手段有一定程度的了解，初步掌握微生物试验的基本技能和原理，也有助于无菌观念的树立。
1.实验器材：接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、普通冰箱、冷藏室、隔水式电热恒温培养箱、生物显微镜、电炉、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子2.实验方法与步骤：①培养基的制备②细菌的分离培养③细菌的纯培养④细菌的形态学检查⑤细菌的生化试验等⑥细菌的血清学试验、结果第一次实验2.1培养基的制备、消毒和灭菌如下图表格内容要求所示制备培养基。
表一组号培养基称量(g) 水量(ml)煮沸(次)分装(ml)备注（40人份）1 营养琼脂11.4 300 4瓶，500ml瓶，平板2～4 营养琼脂 2.9 75 3 5 15支×3，中试管，斜面5～7 营养肉汤 1.1 50 1 3 15支×3，小试管，液体8～10 半固体 1.9 50 3 3 15支×3，小试管，高层第二次实验2.1手指和空气的细菌学检查实验步骤：1空气的细菌学检查：每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、卫生间或任选地点），将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边，平板暴露于空气中15分钟，然后平板倒扣盖上，作标记。
37℃温箱培养24小时，观察结果。
（※CFU/m3 ＝50000N÷AT≈86N(直径7cm平板）。
N：平板上的菌落数。
A：平板面积(平方厘米)。
T：采样时间(分钟)。
微生物实验报告模板
4.2 实验记录（我只提供部分的记录表格，也可以用文字记载，有一些需要大家自己作表 格；另外，里面的表格有一些是附表，不是实验记录表） 4.2.1
空气的细菌学检查
采样时间(min) 15
4.2.2 手指的细菌学检查 ………………………
接种针斜面取四种不同颜色的细菌，各自接种进四个半固体培养基，从半固体培养基 中心，垂直刺入，到达培养基底部 4/5 处，再循原来的路线，退出接种针。 在 37℃下,培 养 24 小时，观察结果。 3.6.5 痢疾血清玻片凝集反应
取载玻片 1 张，滴加痢疾血清和生理盐水各 15ul，2 滴。用接种环挑取少许紫黑色菌 落和粉红色菌落，各自与上述混合液液滴混匀，观察结果。 4.结果观察，记录，分析讨论 4.1 结果观察
取二滴兔血浆置于洁净的玻片上，分别用接种环取白色和黄色菌苔(2～3 个菌落的菌 量)与血浆研磨混合，涂匀呈云雾状，立即观察结果。 3.6.4 半固体接种法
对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术关，通系电1，力过根保管据护线生高0不产中仅工资2艺料22高试2可中卷以资配解料置决试技吊卷术顶要是层求指配，机置对组不电在规气进范设行高备继中进电资行保料空护试载高卷与中问带资题负料2荷试2，下卷而高总且中体可资配保料置障试时2卷，32调需3各控要类试在管验最路；大习对限题设度到备内位进来。行确在调保管整机路使组敷其高设在中过正资程常料1工试中况卷，下安要与全加过，强度并看工且25作尽52下可22都能护可地1关以缩于正小管常故路工障高作高中；中资对资料于料试继试卷电卷连保破接护坏管进范口行围处整，理核或高对者中定对资值某料，些试审异卷核常弯与高扁校中度对资固图料定纸试盒，卷位编工置写况.复进保杂行护设自层备动防与处腐装理跨置，接高尤地中其线资要弯料避曲试免半卷错径调误标试高方中等案资，，料要编试求5写、卷技重电保术要气护交设设装底备备置。4高调、动管中试电作线资高气，敷料中课并设3试资件且、技卷料中拒管术试试调绝路中验卷试动敷包方技作设含案术，技线以来术槽及避、系免管统不架启必等动要多方高项案中方；资式对料，整试为套卷解启突决动然高过停中程机语中。文高因电中此气资，课料电件试力中卷高管电中壁气资薄设料、备试接进卷口行保不调护严试装等工置问作调题并试，且技合进术理行，利过要用关求管运电线行力敷高保设中护技资装术料置。试做线卷到缆技准敷术确设指灵原导活则。。：对对在于于分调差线试动盒过保处程护，中装当高置不中高同资中电料资压试料回卷试路技卷交术调叉问试时题技，，术应作是采为指用调发金试电属人机隔员一板，变进需压行要器隔在组开事在处前发理掌生；握内同图部一纸故线资障槽料时内、，设需强备要电制进回造行路厂外须家部同出电时具源切高高断中中习资资题料料电试试源卷卷，试切线验除缆报从敷告而设与采完相用毕关高，技中要术资进资料行料试检，卷查并主和且要检了保测解护处现装理场置。设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告模板一
医学微生物学实验报告姓名___ __________学号___ ________年级___ ____组别__ ______实验名称脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验者合作者日期指导老师一、实验目的1、掌握培养基的制备的原则和一般方法2、掌握细菌的分离培养方法3、掌握油镜的正确使用，细菌标本图片的制备4、掌握细菌的形革兰氏染色法以及形态学检查方法5、熟悉细菌的生化试验方法（糖发酵试验、抗菌素敏感性试验、血浆凝固酶实验、动力学实验）的原理及方法6、掌握玻片凝集试验的原理及方法二、实验器材1、5ml试管15支、托盘天平、锥形瓶、营养肉汤干粉培养基、量筒、使馆狂、酒精灯、洗耳球、刻度吸管2、脓汁标本1支，粪便标本1支、伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个、接种环、酒精灯3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板）4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1本，载玻片4张5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把。
6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。
三、方法与步骤流程图：营养琼脂培养基的制备细菌的分离培养细菌的纯培养细菌形态学检查液体培养基接种细菌的生化实验1、营养肉汤培养基的制备①称取1.1g营养肉汤干粉培养基于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水溶解②加热煮沸1次，加热时需要摇动③分装于15支小试管中，每支3ml④集中放在试管筐中，罩上硫酸纸和牛皮纸，用橡皮筋包扎好⑤灭菌2、细菌的分离培养平板画线法：小组分工：甲→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板步骤：①点燃酒精灯，把接种环在酒精灯上烧灼灭菌，金属杆快速通过火焰2～3次，以杀灭表面微生物。
②取出标本，在火焰旁边，左手斜持标本管下端，右手小指夹住试管棉塞上端，缓慢拔出棉塞并夹持之，管口迅速通过火焰3次③将冷却的接种环沾取标本1环，管口迅速通过火焰灭菌后塞上棉塞放回。
脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告
脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。
了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。
二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W 电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：○1培养基的制备、消毒和灭菌:1.调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。
2.干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。
②细菌的分离培养:采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。
③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。
挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→干燥→固定→革兰染色⑤细菌的生化试验等:糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1.在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。
【参考文档】粪便检查实验报告-范文word版 (12页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==粪便检查实验报告篇一：脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。
了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。
二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯 CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：1培养基的制备、消毒和灭菌: ○1. 调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。
2. 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。
②细菌的分离培养: 采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。
③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。
挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→ 干燥→ 固定→ 革兰染色⑤细菌的生化试验等 : 糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1. 在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测
8.结论
标本
菌落
形态
血浆固酶
葡
乳
半固体
福痢血清
青
链
庆
结论
脓汁
黄色
G+球
+
+
+
+
金黄色葡萄球菌
白色
G+球
-
+
+
+
白色
葡萄球菌
粪便
紫黑
G－杆
⊕
⊕
+
-
+
+
大肠
埃希菌
粉红
G－杆
-
-
-
+
-
+
+
福氏
志贺菌
综上可整理得表3
表3
五、实验讨论
1.实验反思及分析。我们组的实验大部分实验结果符合客观事实。但在油镜下观察革兰氏阳性菌可见大块染色块，影响了实验的观察。产生的原因可能是在染色时没有冲洗干净或者使用3液脱色时间不够，这点细节以后会多加注意。
二、实验器材
1.器材
接种环 接种针 打火机 油性笔 酒精灯 污物盘 普通冰柜 隔水式电热恒温培养箱 奥林巴斯CX21型生物显微镜 试管（带棉塞） 刻度吸管 洗耳球 称量纸 药勺 牛皮纸 硫酸纸 橡皮筋 尺子 锥形瓶 高压蒸汽灭菌器 镊子 玻片 吸水纸 拭镜纸
2.试剂药品
干粉培养基 蒸馏水 脓汁标本 粪便标本 石蜡油 乙醇和乙醚（7:3）混合液 生理盐水 结晶紫 卢戈碘液 95%乙醇 稀释复红 葡萄糖微量发酵管（2支） 乳糖微量发酵管（2支）青霉素抗菌素纸片 链霉素抗菌素纸片 庆大霉素抗菌素纸片 兔血浆 诊断血清（痢疾血清）
脓汁和粪便标本中病原菌的检测-3
脓汁和粪便标本中病原菌的检测 实验流程(6次课12学时）
①培养基的制备 ②细菌的分离培养 ③细菌的纯培养 ④细菌的形态学检查
⑤细菌的生化试验等
⑥细菌的血清学试验、结果分析→实验论文撰写
菌落特征 Bacterial Colony Characteristics 大小：大(直径约3mm以上)，中(直径约1～3mm)，小(直 径约1mm以下)。 形状：圆形，卵圆形、假根形、丝状、不规则等。 边缘：整齐，锯齿状，波浪状，羽毛状。 表面：隆起、平坦、中心凸起、脐形凹陷；光滑或粗糙、 湿润或干燥。 色素：一般为无色或灰白色，特殊色素有两类：脂溶性 色素(菌落本身着色，培养基不着色)和水溶性色素(菌 落及培养基均着色)。 溶血性：不溶血，不完全溶血(菌落周围呈草绿色、不 透明)，溶血(菌落周围出现透明环)。
的电源插座。 ※（校本部）实验台中间，三个位的插座，中间那位插孔没有电，不能使用， 只能用两侧的插座。
医学微生物学实验 综合性实验三、一
空气、手指皮肤的细菌学检查结果分析
脓汁和粪便标本中病原菌的检测
菌落特征观察P11
细菌纯培养P10 油镜使用方法（讲解） 脓汁标本检验 （录像） 肠道致病菌的分离鉴定（录像）
①试管用毛刷， 上下、旋转刷洗 内壁和管底。
②字迹用湿纱布， 粘去污粉擦拭。
③管口朝向相同， 流水冲洗10次。
平皿用纱布，旋转擦 拭内外侧，字迹用纱 布粘去污粉擦拭。
流水冲洗10次。逐个 倒扣在筐内，晾干。
④洗干净的试管， 倒扣在筐内，晾干。
思考题
在微生物学实验中,怎样才能避免杂菌的污染? 空气的卫生标准规定如何? 你的实验结果说明了什么问题? 怎样从医务人员手指上分离和鉴定金黄色葡萄 球菌? 菌落特征主要描述哪几方面问题？如何挑选单 菌落？
医学微生物学实验脓汁和粪便标本中病原菌的检测
掌心对掌心搓擦
2.手指交错掌心对手背搓擦 3.手
指交错掌心对掌心搓擦
两手互握互搓指背 6.指尖在掌心中搓擦
5.拇指在掌中转动搓擦
医务人员洗手指征
0 1 接触传染病患者之后。 0 3 接触病人的血液、体液、分泌物
和排泄物之后。
0 5 接触旧钱币之后。 0 7 进行微生物操作或作血、尿等生
化、免疫测定之后。
器材准备
自然界中的微生物
01
已经发现的微生物大约13 万5千种，被认为非常危 险的有600种，在人间传 染的病原微生物380种。 这些微生物存在于地球的 各个角落，从寒冷的极地 到炎热的赤道，从4.2千 米地层深处到85千米高空 （芽孢）,均有它们的踪 迹。
02
空气、水、土壤、人体的 体表以及与外界相通的腔 道，均有不同种类和数量 的微生物存在。
血琼脂平板培养
涂片染色镜检
挑取可疑菌落
生化反应
↑
纯培养 动物实验
药敏实验
血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检
常见肠道致病菌的检查程序P48：
粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落
↑
↓ 血清学鉴定
血、骨髓 → 增菌培养
双糖铁培养基 染色镜检
生化反应
0 1
平板划线分离法：
T：采样时间(分钟)。
组号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
空气的细菌学检查
地点
时间(min)
卫生间
15
食堂
15
门诊大厅
15
呼吸科病房
15
呼吸科ICU
15
外科病房
15
外科ICU
15
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医学微生物学实验报告姓名___ __________学号___ ________年级___ ____组别__ ______实验名称脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验者合作者日期指导老师一、实验目的1、掌握培养基的制备的原则和一般方法2、掌握细菌的分离培养方法3、掌握油镜的正确使用，细菌标本图片的制备4、掌握细菌的形革兰氏染色法以及形态学检查方法5、熟悉细菌的生化试验方法（糖发酵试验、抗菌素敏感性试验、血浆凝固酶实验、动力学实验）的原理及方法6、掌握玻片凝集试验的原理及方法二、实验器材1、5ml试管15支、托盘天平、锥形瓶、营养肉汤干粉培养基、量筒、使馆狂、酒精灯、洗耳球、刻度吸管2、脓汁标本1支，粪便标本1支、伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个、接种环、酒精灯3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板）4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1本，载玻片4张5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把。
6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。
三、方法与步骤流程图：营养琼脂培养基的制备细菌的分离培养细菌的纯培养细菌形态学检查液体培养基接种细菌的生化实验1、营养肉汤培养基的制备①称取1.1g营养肉汤干粉培养基于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水溶解②加热煮沸1次，加热时需要摇动③分装于15支小试管中，每支3ml④集中放在试管筐中，罩上硫酸纸和牛皮纸，用橡皮筋包扎好⑤灭菌2、细菌的分离培养平板画线法：小组分工：甲→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板步骤：①点燃酒精灯，把接种环在酒精灯上烧灼灭菌，金属杆快速通过火焰2～3次，以杀灭表面微生物。
②取出标本，在火焰旁边，左手斜持标本管下端，右手小指夹住试管棉塞上端，缓慢拔出棉塞并夹持之，管口迅速通过火焰3次③将冷却的接种环沾取标本1环，管口迅速通过火焰灭菌后塞上棉塞放回。
④接种环与平板呈30～40度角，在平板表面上方，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条。
画完第一区要烧掉接种环上多余的标本。
转动平板，转动平板，通过第一区5～7次，使接种环重新沾上少量细菌，同样的方法划过第二到五区，接种环呈递减次数地通过第二到第四区。
⑤平板倒置，37℃培养18~24h,观察结果。
3、细菌的纯培养（斜面接种法）分工：甲→金黄, 乙→白色。
丙→紫黑, 丁→粉红。
步骤：①取制作的平板，在菌落分布最稀疏的区域，选择平板上典型的、容易挑取的单菌落。
（从营养琼脂平板中分别选取金黄色菌落、白色菌落，从伊红美蓝平板上分别选出紫黑色菌落、粉红色菌落。
）②接种环套住菌落，轻轻刮取细菌。
③接种环取菌后，伸入斜面底部，自下向上先拉一条细菌接种线。
再伸入底部，自下向上，作蜿蜒划线。
④37℃培养24小时，观察结果。
4、细菌形态学检查（革兰氏染色法）①加样枪取盐水左3ul、右3ul,水滴间距小于2cm。
②挑取菌苔少许（1mm小菌落的半量）与生理盐水混匀，涂成1cm2大小的均匀薄膜③涂毕，环移至涂膜中央侧立，待环内菌膜破裂，将接种环通过火焰灭菌④涂片在室温干燥或烘干，手持玻片一端，标本面朝上，在火焰外层快速通过2~3次，将标本固定，促使菌体蛋白质凝固，固定在载玻片上，以免染色水洗的时候，细菌被水洗掉。
⑤革兰染色：初染：结晶紫→初染1分钟→水洗↓媒染：卢戈碘液→媒染1分钟→水洗↓脱色：95％乙醇→脱色约20秒钟→水洗↓复染：稀释品红→复染1分钟→水洗↓吸干,镜检。
5、液体培养基接种分组：甲→金黄乙→白色,丙→紫黑丁→粉红。
①无菌操作，接种环斜面取菌，在靠近培养基液面管壁上，上下研磨接种。
②在管壁上，将接种环内的菌膜拍破。
退出接种环，烧灼灭菌。
6、细菌的生化实验（一）半固体穿刺接种法分工：甲→紫黑, 乙→紫黑；丙→粉红, 丁→粉红。
①无菌操作，接种针斜面取菌，从半固体中心,垂直刺入，到达培养基底部5分之4处，再循原来的路线,退出接种针。
②管口、接种针经火焰烧灼灭菌。
（二）细菌的糖发酵试验分工：甲→紫黑→①葡萄糖丙→粉红→③葡萄糖乙→紫黑→②乳糖丁→粉红→④乳糖①用砂轮在糖发酵管液面上方2～3cm处，切割一道切痕。
将管子打开，管口烧灼灭菌②接种针针尖斜面取菌，伸入培养基内，在管壁上，上下研磨接种。
③管口朝向相同，放置在平皿内。
（三）抗菌素敏感性试验（纸片扩散法)①接种环取菌液3～5ul 2次,在平板培养基表面，拉出2条细菌接种线，使呈“十字形”(操作时，不得同时握持菌液管和平板，以免菌液倒出来，造成污染）。
②平板密集划线接种细菌（纱窗样）。
每次将平板旋转90°，保证菌液均匀分布。
③设计三点，作标记：青、链、庆。
呈等边三角距离，点距离平皿边缘约15mm。
④镊子火焰消毒，夹取相应的药物纸片，平贴在已设定的位置上，按压，镊子火焰灭菌。
⑤做标记，37℃18～24小时培养，观察结果。
（四）血浆凝固酶试验兔血清+白色和黄色①取2滴兔血浆置于洁净的玻片上。
②分别用接种环取白色和黄色菌苔(约2～3个菌落的菌量)与血浆研磨混合，立即观察结果。
③菌液出现明显凝块者为阳性，否则为阴性。
7、细菌的血清学试验（玻片凝集试验）①取洁净的载玻片一张，将磨面近端设为对照区，滴加生理盐水15ul。
远端设为试验区，滴加福氏志贺菌诊断血清15ul②用接种环分别取粉红色菌苔，约2个小菌落的菌量，研磨于盐水或血清内，混合均匀，涂抹展开。
③载玻片来回倾侧，让菌液充分混匀，凝集速度更快、结果更清楚。
④菌液凝集者记为阳性，菌液均匀混浊记为阴性四、结果与讨论1、营养肉汤培养基的制备图1：营养肉汤培养基的制备2细菌的分离培养平板画线法：结果观察： 1、由实验结果图可看出，脓汁标本在普通平板上有金黄色、白色两种菌落，菌落直径约2mm 左右、圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、不透明。
2、粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、粉红色两种菌落，颜色不是细菌本身的颜色，其中紫黑色菌落较大较明显，且形成紫黑色具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落。
讨论：1、粪便标本在伊红美蓝平板上，颜色的产生是因为大肠埃希菌分解乳糖产酸，酸使伊红与图2.2丙，丁→粪便标本→伊红美蓝平板图2.1甲，乙→脓汁标本→营养琼脂平板美蓝结合，形成紫黑色具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落。
2、从四张平板画线的结果上来看，第三张图分离效果很好，得到的菌落典型。
而其他三张均有不足。
第一二张脓汁的营养琼脂平板，前面两区涂抹太密集，而板的其他部位未充分利用，得不到十分明显的菌落。
第四张粪便的平板第一区太稀疏，未充分利用平板，故在培养后未见到数量较少的粉红菌落，原因是划线时不熟练，不能连续划线。
3、细菌的纯培养（斜面接种法）结果观察与讨论：1、从普通平板上挑取的金黄色和白色菌落接种的斜面，菌苔的颜色，仍然呈金黄色和白色。
2、从伊红美蓝平板上挑取的紫黑色或粉红色菌落接种的斜面，菌苔已经没有原来菌落的颜色。
菌苔灰白色、表面湿润、光滑、半透明。
4、细菌形态学检查（革兰氏染色法）图3.1斜面接种产物（右左向右依次为金黄，白色粉红，紫黑菌苔)图4.1脓汁菌苔（左边为白色菌苔，右图为金黄色菌苔）结果观察与讨论：1、从脓汁标本中分离得到金黄色、白色两种菌落，显微镜油镜下呈紫色为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌。
这两株葡萄球菌可能是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。
2、从粪便标本分离、获得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。
显微镜油镜下呈粉红色为G-杆菌，散在排列，从形态上不能鉴别是什么细菌。
5、液体培养基接种6、细菌的生化实验（一）半固体穿刺接种法图4.2粪便菌苔（左图为粉红菌苔，右图为紫黑色菌苔）图5液体培养基接种结果结果观察及讨论： 表1.动力试验结果菌苔 半固体紫黑细菌1 +紫黑细菌2 -粉红细菌1 -粉红细菌2 -+：阳性 -：阴性1、紫黑细菌1细菌自接种部位向四周移动、扩散生长，培养基呈云雾状或根须状混浊状态，有鞭毛。
但是实验时发现紫黑菌苔2无任何现象。
经过分析，应当是用接种针取菌苔时，操作者仅针尖前部接触了少量菌苔，导致穿刺后无细菌的生长。
但是结合其他组的结果，我们认为紫黑菌苔应当是动力阳性的。
2、粉红细菌菌苔均沿着直线生长，可看出其无鞭毛。
（二）细菌的糖发酵试验图6.1（照片拍摄不明显）图6.2.从左至右分别为：（④粉红→乳糖③粉红→葡萄糖 ②紫黑→乳糖 ①紫黑→葡萄糖）结果观察与讨论:1、实验结果记录为下表：①葡萄糖②乳糖③葡萄糖④乳糖⊕⊕+ -+：产酸或阳性⊕：产酸产气-：阴性2、紫黑细菌微型发酵关内液体变黄，产生气泡，气泡的高度分别为10mm和17mm，说明紫黑色菌苔既分解葡萄糖也分解乳糖，产酸产气；粉红细菌只分解葡萄糖，不产气，不分解乳糖。
（三）抗菌素敏感性试验（纸片扩散法)图6.3结果观察与讨论：1、表3各菌抑菌圈直径（mm）表菌苔青霉素头孢曲松庆大霉素金黄色42 25 30白色30 22 40紫黑—37 26粉红—36 282、表4.药敏试验结果分析青霉素头孢曲松庆大霉素金黄色+ + +白色+ ±+紫黑-+ +粉红- + + -：耐药±：中度敏感+：敏感3、G+球菌对青霉素和头孢曲松敏感。
4、G-杆菌对青霉素耐药，对头孢曲松敏感。
5、G+球菌和G-杆菌对广谱抗菌素庆大霉素都敏感。
（四）血浆凝固酶试验结果观察与讨论：1、黄色菌苔能产生血浆凝固酶，可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,附着于菌体表面,形成凝块，涂抹不开。
说明黄色细菌为致病菌。
2、白色菌苔不发生凝块，容易涂抹。
呈均匀乳白状态。
7、细菌的血清学试验（玻片凝集试验）图6.4白色（右）与金黄色（左）菌苔图6.5粉红菌苔（右）凝集结果（左侧为对照）结果观察与讨论：1、由实验结果图可看到，生理盐水一端不出现凝集，福氏志贺菌诊断血清一端菌液浑浊，少量絮状，为阳性。
说明粉红菌为福氏志贺菌。
2、根据糖发酵试验和半固体动力试验结果结合肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表分析：表4：肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表葡萄糖乳糖麦芽糖甘露醇蔗糖半固体埃希菌属⊕⊕⊕⊕√ +志贺菌属+ √ √ +/- -/+ -沙门菌属⊕/+ - ⊕⊕- +霍乱弧菌+ - + + + +变形杆菌属⊕- √ - √ +注：+ 产酸或阳性，⊕产酸产气，- 阴性，综合上述分析可确定：粉红色菌落属于志贺菌属，紫黑色菌落是大肠埃希菌，白色菌落为白色葡萄球菌，金黄色菌落为具有致病性的金黄色葡萄球菌。
但不可以确定粉红色菌落属于志贺属的哪一种。
五、总结1，在革兰染色法和镜检观察后，可以得出金黄色和白色细菌都是G+菌，且都为葡萄球菌，可初步判定他们分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。