2012年9月淮北师范大学期末考试范围名词解释细胞工程名词解释

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细胞工程总结

细胞工程总结

一、名词解释:细胞工程(cell engineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。

1.脱分化:脱分化:具有特异结构和功能的细胞转化成没有特异结构和功能的细胞的过程称为脱分化。

(如根、茎、叶)2.饲喂培养:将饲喂的细胞用培养基作平板,此平板称饲喂层,用X射线或紫外线照射,使核失活但细胞存活,然后将原生质体以液体浅层培养或平板技术铺在饲喂层上。

3.核重编成:使在体细胞中被关闭,而在正常胚胎发育中表达的基因重新被激活的过程。

4.细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain5.热力灭菌:主要是利用高温使菌体变性或凝固,酶失去活性,而使细菌死亡。

6.人工种子:是将植物立体培养产生的体细胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜的条件下发芽出苗7.植板率:每个平板接种细胞总数中形成细胞团的百分率。

植板率=每平板形成的细胞团数/每平板接种的细胞总数8.胚胎移植: 是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。

9.体细胞无性系:以单体细胞为材料,采用无性繁殖法繁殖的品种(品系)称无性系品种(品系),简称无性系10.过滤灭菌:过滤灭菌法,即用筛除或滤材吸附等物理方式除去微生物仓鼠细胞Hamster cells 白细胞抑制因子leukocyte inhibitory factor, LIF 干细胞Stem cells二、简答1.细胞活力鉴定方法:取纯化后的植物原生质体悬浮液0.5ml置于小试管中,加入含2mg/L 的FDA的丙酮溶液,使最终浓度为0.01%,混匀,放置5分钟,荧光显微镜观察(激发光滤光片QB-24,压制滤光片JB-8),有活力原生质体发绿色荧光,不产生荧光为无活力。

细胞生物学与细胞工程名词解释

细胞生物学与细胞工程名词解释

细胞生物学与细胞工程名词解释Chapter 1 绪论1、细胞(cell):细胞是由膜包围着含有细胞核(或拟核)的原生质所组成,是生物体结构和功能的基本单位,也是生命活动的基本单体。

2、细胞生物学(cell biology):是研究和揭示细胞基本生命活动规律的学科,它从显微、亚显微及分子水平上研究细胞结构与功能,细胞增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡,以及细胞信号转导,细胞基因表达与调控,细胞起源与进化等重大生命过程。

3、细胞工程(Cell Engineering ):以细胞为研究对象,运用细胞生物学、分子生物学等学科的原理和方法,按照人们的意志设计改造细胞的某些性状,从而培育出新的生物改良品种或通过细胞培养获得自然界中难以获得的珍贵产品的新兴生物技术。

Chapter 2细胞的统一性与多样性1、原核细胞(prokaryotic cell):没有明显可见的细胞核,同时也没有核膜和核仁,一般只有拟核。

2、真核细胞(eucaryotic cell):是组成真核生物的细胞,具有典型的细胞结构,有明显可见的细胞核、核膜和核仁和核基质。

3、中膜体(mesosome):中膜体又称间体或质膜体,是细菌细胞质膜向细胞质内陷折皱形成的,每个细胞有一个或数个;其中含有细胞色素和琥珀酸脱氢酶等呼吸酶;具有类似线粒体的作用,故称为拟线粒体。

4、细胞器(organelle):存在于细胞中,用光镜、电镜或其他工具能够分辨出的,具有一定特点并执行特定机能的结构。

Chapter 3 细胞生物学研究方法1、分辨率(resolution):是指能清楚的区分开两个质点间的最小距离。

2、显微结构(microscopic structure):光镜下所见到的物体结构。

3、超微结构(ultrastructure)又称为亚显微结构(microscopic structure):是在光学显微镜下观察不到而只能在电子显微镜下观察的结构。

Chapter 4 细胞质膜1、血影(Ghost):将红细胞放入低渗溶液中,质膜破裂,同时释放出血红蛋白和其他可溶性蛋白,这时红细胞膜的仍然可以重新封闭起来,此时的红细胞被称为血影。

细胞工程复习提纲有答案

细胞工程复习提纲有答案

细胞工程复习提纲一、名词解释细胞工程:是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科;细胞分化:是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,包括时间上和空间上的分化;时间上的分化:是指一个细胞在不同的发育阶段可以形成不同的形态和功能;细胞全能性:是指分化细胞保留着全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能;无性生殖:不涉及性别、没有配子参与、没有受精过程的生殖都属于无性生殖;有性生殖:是两个配子融合为一,成为合子或受精卵,再发育成为新一代个体的生殖方式;脱分化:又称去分化,是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程,即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程;植物组织培养:是将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料无菌条件下培养在人工培养基上,在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术;愈伤组织:脱分化后的植物细胞经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团,称之为愈伤组织外植体:主要指用于离体培养的植物或组织切段;胚状体体细胞胚:又叫胚状体,是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物;人工种子:是指将植物离体培养中生产的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳;体外受精:是指将哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术;试管动物:是指将供体的精子和卵子在体外受精,体外培养胚胎发育到一定阶段通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物;胚胎分割:即是将一枚胚胎用显微手术的方法分割成二分、四分甚至八分胚,经体内或体外培养,然后移植入受体中,以得到同卵双生或同卵多生后代的技术,也是胚胎克隆的一种方法;性别控制:就是通过人为干预或操作手段使母畜繁殖所需要的后代;细胞核移植:是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术;细胞融合:是指用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术;非对称细胞融合:利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再与另外一个完整细胞进行融合;原生质体:去除细胞壁后裸露的细胞称之为原生质体染色体组:生物体配子的全部染色体称为一个染色体组;染色体工程:按照一定的设计,有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体,从而达到定向改变遗传性和选育新品种的目的的技术单倍体:细胞中含有正常体细胞的一半染色体数,即具有配子染色体数目的个体;同源多倍体:多倍体的染色体来自于同一物种或在原有染色组的基础上加倍而成;异源多倍体:多倍体的染色体来自于不同一物种;雌核发育:精核进入卵细胞后未与卵核融合而退化,卵核未经受精而单独发育成单倍体;植物细胞培养:是在离体条件下,将分离的植物细胞通过继代培养增殖,获得大量细胞群体的一种技术;次级代谢产物第7讲是通过次级代谢合成的产物,大多是分子结构比较复杂的小分子化合物,例如抗生素、激素、生物碱、毒素等;毛状根,冠瘿组织第8讲是由根癌农杆菌Agrobacteriumtumefaciens感染引起的植物肿瘤组织,它能在无外加植物激素的培养基上生长;;接触性抑制:是某些动物细胞体外培养的生长特性之一;是指由于细胞相互接触而抑制细胞运动性的现象;微载体培养第10讲微载体培养:解决空间分布与贴壁,连续灌注培养;多克隆抗体:一种抗原通常具有多个不同的抗原决定族,因此能刺激多个B淋巴细胞产生相应的单克隆抗体,因此血清中的抗体是针对不同抗原决定族的单克隆抗体混合物,称为多克隆抗体;单克隆抗体:动物脾脏有上百万个B淋巴细胞,一个细胞就是一个克隆,它针对抗原上的一个抗原决定族产生的抗体是单克隆抗体;灭活病毒疫苗:通过化学、物理或简单加热的方法使病毒失去在宿主体内生长复制的能力,但仍保留了病毒的免疫原性,接种人体后能产生对此病毒的抵抗力,这种将病毒杀灭后制备的疫苗被称为灭活疫苗;减毒活疫苗:采用自然法或人工法通过动物传代或细胞传代筛选对人毒性低的变异株病毒;转基因生物反应器:将外源基因转入细胞或动植物,利用细胞增殖或者动植物代谢制备外源基因的表达产物的技术;微藻:一般是指那些在显微镜下才能辨别形态微小的藻类干细胞:动物胚胎和成体组织中存在的能一直进行自我更新、保持未分化状态、具有分裂能力的未分化细胞;胚胎干细胞:是一种全能干细胞,它是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞系,可以分化成任何一种组织类型的细胞;成体干细胞:又称组织干细胞,传统的观念认为它们是存在于成体组织的未分化细胞,现在认为也包括未成年动物的组织干细胞,它们具有不断增殖和自我更新能力、又具有多向分化潜能;组织工程:是利用生命科学、医学、工程学原理与技术,单独或组合地利用细胞、生物材料、细胞因子实现组织修复或再生的一门技术;二、简答题1、细胞工程的主要研究内容研究范畴有哪些第1讲答:细胞工程的研究内容有:动物细胞与组织培养、植物细胞与组织培养、细胞融合、细胞核移植、染色体工程、胚胎工程、干细胞与组织工程、转基因生物与生物反应器;1、简述细胞工程技术的应用第1讲答:细胞工程的应用包括:•优质植物快速培育与繁殖•动物胚胎工程快速繁殖优良、濒危品种•利用动植物细胞培养生产活性产物、药品•新型动植物品种的培育•在医学器官修复或移植中的应用•制备转基因动植物的生物反应器•珍稀动植物资源的保存与保护•在遗传学、发育生物学等领域的理论研究•在能源、环境保护等领域的应用3、植物组织培养的应用第2讲答:1.无性系快速繁殖;2.种苗脱毒;3.新品种选育:1 利用培养变异,筛选优良突变体;2利用远缘杂交幼胚培养,获得杂种植株,克服其杂交不亲和性;3利用细胞融合技术,克服远缘杂交不亲和性;4倍性育种;4.离体种质保存5.在遗传、生理生化和病理等研究上的应用;4、植物组织细胞培养中要用到哪些激素在细胞分化中的调节作用如何第2讲答:生长素:在植物组织培养中,生长素主要用来刺激细胞分裂和诱导根的分化;细胞分裂素:诱导芽的分化促进侧芽萌发生长、促进细胞分裂与扩大;5、植物组织培养再生植株有哪些途径第2讲答:器官发生途径:成熟细胞—遇上组织—出根出芽—完整植株体细胞胚发生途径:成熟细胞—分生细胞—胚状体—完整植株其中体细胞胚发生途径包括:器官外植体直接发生途径、悬浮培养细胞发生途径、愈伤组织发生途径;6、简述人工种子制备的基本过程第2讲答:胚状体同步发育,人工种皮制作,人工胚乳配制,包埋,贮藏与发芽;7、简述胚胎移植的技术路线第3讲答:8、简述多莉羊技术路线第3讲答:1-供核细胞获得与取核,2-卵母细胞收集与去核,3-细胞核融入卵细胞4-重构胚的培养5-妊娠监护----简单流程请自行添加描述;9、你认为英雄、伟人可以通过克隆再生吗第3讲答:主观题10、克隆动物存在哪些问题答:1.技术尚不成熟;遗传疾病问题;3 克隆人带来的社会、伦理学问题;11、怎样制备、分离和鉴定原生质体第4讲制备:两步法:果胶酶处理材料——游离出单细胞——纤维素酶处理单细胞——分离出原生质体一步法:外植体——酶液配制:注意纤维素酶、果胶酶和渗透压稳定剂甘露醇的配比及pH——酶液离心——过滤灭菌后-20℃保存——外植体放入酶液,真空泵抽引渗透处理——26℃摇床振荡2-8小时分离:飘浮法:无菌下,浓度较高溶液如20%蔗糖溶液加入离心管——加入原生质体混合液——封口后,离心,原生质体漂浮在上面——用吸管收集原生质体液面,放入液体培养基或甘露醇悬浮洗涤原生质体2-3次——将原生质体悬浮在液体培养基中备用沉降法:微孔滤膜过滤酶混合液——低速离心3-5min——弃去上清液和酶液——液体培养基或甘露醇悬浮洗涤原生质体2-3次——将原生质体悬浮在液体培养基中备用不连续梯度法:离心管中配制成不同的浓度梯度——加入原生质体混合液——离心5min,原生质体位于某一浓度梯度,用吸管收集——液体培养基或甘露醇悬浮洗涤原生质体2-3次——将原生质体悬浮在液体培养基中备用鉴定:低渗爆破法:爆破后是无形的;渗透压调节剂:葡萄糖、甘露醇、山梨醇等;染色法:有活力的原生质体吸收不同染料显示与死亡细胞不同的颜色来分析;FDA二乙酸荧光素能自由地穿越细胞质膜,在活细胞内,FDA被酯酶裂解即发荧光荧光素,由于荧光素不能自由通过质膜,因而可以在荧光显微镜下通过具荧光的细胞的观察确定细胞活性酚藏花红染色法%:酚藏花红能使无活力的原生质体染成红色,有活力的原生质体不着色;伊凡蓝Ev an’s blue染色法%:有活力但受损伤的细胞和死细胞能够摄取这种染料,活细胞不摄取;氧电极法:光照下放出氧气,黑暗耗氧气;12、为什么要对融合细胞进行筛选第4讲细胞融合是一个随机的物理过程,经融合后细胞将以多种形式出现,需要通过培养和筛选,除去不需要的细胞,分离出需要的杂种细胞,从而解决融合细胞的选择问题;13、举几个单倍体和多倍体的例子第5讲单倍体:全雄系芦笋雄性蜜蜂和蚂蚁三倍体桑树:表现为体细胞较大、叶肉厚、叶色深、叶质较好、抗寒性增强;花卉:三倍体花器官增大、色彩更鲜艳,同时还能使花期延迟,大大提高了花卉的观赏价值和商业价值;三倍体鲍鱼:具有高度不育性,因而使体细胞生长方面的能量相对增加,增强了鲍鱼的抗逆性和抗病能力,提高了生长速度;此外,还可以延长鱼类寿命、控制过度繁殖三倍体西瓜:无籽西瓜14、为什么动物的多倍体比植物少第5讲植物:1大多数植物是雌雄同体或雌雄同花的,它们的精原细胞和卵原细胞可能同时发生不正常的减数分裂,使配子中染色体数目不减半,这种配子通过自体受精而自然形成了多倍体;2植物的繁殖比较容易,如果多倍体植物不能形成种子,它还能依靠营养器官的无性繁殖来产生后代,因此在生物进化过程中,植物多倍体有可能被保存下来;动物:1高等动物的远源杂交能力很弱,这样难以形成杂种个体;2多倍体动物高度不育,染色体异常通常会造成胚胎死亡,因此很难得到多倍体的子代个体;15、单倍体产生原理第5讲假受精:远缘花粉刺激未受精卵细胞分裂发育成单倍性的胚;组织培养:花药、花粉雄配子、未授粉的子房胚珠雌配子的培养;雄核发育Androgenesis或孤雄生殖:卵细胞不受精,卵核消失,或卵细胞受精前失活,由精核在卵细胞内单独发育成单倍体,因此只含有一套雄配子染色体;这类单倍体的发生频率很低;雌核发育Gynogenesis或孤雌生殖:精核进入卵细胞后未与卵核融合而退化,卵核未经受精而单独发育成单倍体;16、怎样制备植物的单细胞第6讲1.由完整的植物器官分离单细胞1酶解法选择专一性水解酶在温和的条件下将植物细胞壁物质纤维素、果胶、多糖降解,从而使细胞彼此分开,这种方法称为酶解法;经常采用的生物酶包括:纤维素酶、果胶酶等;2机械法第一种方法:用刀片刮叶片第二种方法:叶片研碎、离心2.由愈伤组织分离单细胞通过培养植物外植体诱导产生愈伤组织,并使其大量增殖,再通过机械震荡或者酶解的方法使细胞分离从而获得游离的细胞;17、常见的植物细胞培养生物反应器有哪些第7讲1机械搅拌式生物反应器2气升式生物反应器3鼓泡式生物反应器18、体外培养动物细胞的形态有哪几种第9讲成纤维细胞型细胞:外形与体内成纤维细胞形状相似,细胞大致呈梭形或不规则形;成群细胞呈现放射状、旋涡状等形式;多数细胞之间排列疏散,有较大的细胞间隙上皮型细胞:类似上皮细胞的细胞,特点是:扁平状,形态较为规则,细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形,中央有扁圆形核,生长时彼此紧密连接成单层细胞游走型细胞:呈散在生长,一般不连成片,胞质常突起,呈活跃游走或变形运动,方向不规则;此型细胞不稳定,有时难以和其他细胞相区别多形型细胞:多形型细胞是一些形态上不规则的细胞;多形型细胞不常见,只有某些像神经组织细胞等难以确定其稳定形态的,才可归于多形细胞19、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同第11讲植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同,不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁,然后再融合;动物细胞融合是两个体细胞直接融合;20、转基因动物反应器主要有哪些第12讲乳腺生物反应器动物血液生物反应器动物膀胱生物反应器禽蛋生物反应器蚕茧精液21、简述转基因动物制备中目的基因导入的方法第12讲1电穿孔法:利用脉冲电场提高细胞膜的通透性,在细胞膜上形成纳米级的微孔,达到增加通透性的效果,从而使外源DNA转移至细胞中;优点是简单、效率较高;2显微注射法:利用显微操作技术转移外源基因的方法;此法转入基因长度可达数百kb;并能随机地整合在受体细胞染色体DNA上,因此应用范围广;但是这种整合有时会导致转基因动物基因组的重排、易位、缺失或定点突变;3裸露DNA直接注射4磷酸钙—DNA共沉淀法:这种方法是受二价金属离子能促进细胞吸收外源DNA的启发而发展起来的;当核酸以磷酸钙—DNA共沉淀物的形式在时,细胞摄取DNA的能力显著加强;但转移效率较低,仅有1%~5%的外源DNA可以进入受体细胞核中,大约仅有1%的DNA可以在细胞中稳定表达;5脂质载体包埋法:将需转移的外源DNA或RNA与脂质体混合,带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体内形成DNA-阳离子脂质体复合物;由于脂质体具有磷脂双层结构,与细胞膜类似,因此可以与受体细胞膜融合,从而将外源DNA转入宿主细胞;效率高;6病毒介导的生物学方法:将目的基因重组到反转录病毒载体上,感染细胞;病毒进入细胞后,利用宿主细胞的酶体系自行反转录和复制,从而可以使病毒单拷贝基因组稳定地进入宿主细胞;22、三大经济微藻指哪三类第13讲1螺旋藻Spirulina2.小球藻Chlorella3.杜氏藻Dunaliella23、怎样利用微藻培养生产生物柴油第13讲以微藻等水生植物油脂为原料通过酯交换工艺制成可代替石化柴油的再生性柴油燃料;24、干细胞具有哪些特征第14讲1.自我更新特征:1对称分裂symmetric division是指一个干细胞分裂产生的两个子细胞全是干细胞;2不对称分裂asymmetric division是指一个干细胞分裂成一个干细胞和一个短暂增殖细胞,称之为祖细胞progenitor cell;由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配,使得祖细胞分裂形成两个专一功能的分化细胞,不具备自我复制的能力2.增殖特征:1增殖的缓慢性一般情况下,干细胞处于休眠或缓慢增殖状态;缓慢增殖还可以减少基因发生突变的可能性;2增殖的自稳性也称自我维持,是指干细胞能自我更新维持自身数目的恒定,主要是通过不对称分裂来实现;3.分化特征:1具有分化潜能2可以去分化与转分化25.组织工程三要素第15讲1.种子细胞2.支架材料3.生长因子三、问答题1、试述植物组织培养的基本过程第2讲1培养材料的收集2培养材料的消毒3制备外植体4接种和培养5根的诱导6炼苗和移栽老师PPT第2讲P34-392、试述试管动物培育流程第3讲1精子的采集与体外获能,卵子采集与成熟培养2体外受精3胚胎体外培养4胚胎移植5体内发育、出生老师PPT第3讲P143、试述原生质体融合的方法第4讲1生物法:病毒诱导细胞融合2化学法:NaNO3诱导融合、高pH的高浓度Ca2+离子诱导融合、PEG诱导、高Ca2+和pH诱导PEG结合诱导3物理法:电融合诱导法老师PPT第4讲P26-394、试述多倍体的诱导方法第5讲1植物多倍体A化学法:细胞松弛素B,秋水仙素B生物方法:体细胞杂交,利用染色体加倍个体与未加倍个体杂交繁殖多倍体后代2动物多倍体A物理方法:温度休克法、水静压法B化学法:细胞松弛素诱导法、6-甲氨基嘌呤诱导法C生物法老师PPT第5讲P22-325、试述植物单细胞培养的方法第6讲看护培养:用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖;饲养层培养:把处理过的如X射线处理无分裂能力或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞,使其分裂和生长;液体浅层静置培养:将一定密度的悬浮细胞接种在培养皿或三角瓶中封口静止培养;细胞同步化培养:进行同步化培养可获得生长周期一致的细胞作为研究材料,常用方法有体积选择法、冷处理法、饥饿法、抑制法这里特指的是植物单细胞小规模培养,不清楚题目是否包括固定化培养6、试述影响植物细胞培养生产次级代谢产物的因素第7讲一、生物因素1细胞株稳定、高产、生长速度快的细胞株是细胞大规模培养生产代谢产物的前提;在进行植物细胞培养生产有价值的代谢产物时必须弄清楚产物的合成部位,也就是应该考虑到不同部位来源细胞的特性;缺乏适合的细胞株是目前许多代谢产物无法利用细胞培养生产的主要限制之一;2细胞凋亡细胞凋亡是植物细胞培养过程中不可避免的现象,但是可以通过条件改变进行调控来减少细胞凋亡;关键是要保证充足的营养供给以及避免有害代谢产物的积累,这可以通过采用合适的培养工艺来实现;3细胞团细胞团的形成影响稳定的悬浮体系的维持,同时造成了培养物的显著异质性,细胞团表面与内部的细胞存在营养吸收和代谢产物分泌的差异;此外,细胞团容易受剪切力影响而破碎,引起培养液粘度增加,致使气体交换与传递受到影响;适当大小的细胞团有利于代谢产物积累;4生物合成机制次级代谢产物的生物合成不同于蛋白质合成,涉及多基因参与基因簇,机制非常复杂,影响因素非常多;结合目标产物进行生物合成机制研究,揭示代谢途径及诱导合成机制是细胞培养的重要生物学问题,有利于指导建立优化的培养工艺与技术;二.化学因素1营养盐:一方面是保证植物细胞生物量的增长;另外一方面是要保证细胞能合成和积累次级代谢产物;2前体precursor :缺乏某一种前体时细胞就不能合成某一种代谢物;如果在培养基中加入外源前体将会有助于合成该代谢产物或使其产量增加;3诱导子:广义诱导子、狭义诱导子、内源性诱导子、外源性诱导子4反馈抑制:植物次级代谢产物在培养系统的积累有时会对目标产物的合成具有反馈抑制;可以采用流加/半连续培养、两相培养等工艺技术可以克服;三、物理因素主要包括:光照、温度、通气、搅拌、pH值等;1光照:光对细胞代谢产物的合成有很重要的影响;光照时间长短、光质、光强等都会对代谢产物合成和积聚产生作用;光对许多酶有诱导或抑制作用;2温度:温度会影响酶的活性;细胞的生长速率与培养温度紧密相关;植物细胞培养一般在25℃左右进行;3pH:会影响培养液的渗透压、酸碱度,酶的活性,从而影响细胞代谢;植物细胞液体培养的pH 变化范围在5-6 之间,最佳的起始pH在-之间;如果对培养液pH 进行控制,将有利于次级代谢产物的生成;7、试述毛状根产生的机制第8讲发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物、少数单子叶植物及个别的裸子植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根;发根农杆菌之所以具有这种致根性,是因为它具有能诱导毛状根产生的RiRoot inducing质粒;在通常状态下,Ri质粒上Vir区的基因处于抑制状态,当发根农杆菌感染寄主植物时,受损伤的植物细胞合成的低分子苯酚化合物乙酰丁香酮使Vir区处于抑制状态的基因被激活,产生一系列限制性核酸内切酶,在酶的切割作用下产生T-DNA链,T-DNA进入植物细胞核内,整合进植物细胞的基因组;其整合和表达的结果导致了大量毛状根的产生;8、试述动物组织、细胞培养的培养基及培养条件第9讲动物细胞培养基一般可分为天然、合成、无血清培养基等几种;培养条件:温度:人类和哺乳类动物细胞培养适宜温度为±5℃;pH:哺乳动物细胞为;渗透压:细胞在高渗透压或低渗透压溶液中会发生皱缩或肿胀,甚至破裂;用BSS 溶液可维持细胞渗透压,调控培养液酸碱度平衡;气体:细胞的生长代谢离不开O2和CO2,作为代谢产物的CO2还有调节pH作用;用二氧化碳培养箱可使培养环境中的氢离子浓度保持恒定以提供一个比较稳定的pH范围;9、什么是微载体培养步骤有哪些第10讲微载体Microcarrier:是直径60-250μm的适用于贴壁依赖型细胞生长的微粒;一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成;微载体培养细胞的步骤1选择合适微载体类型2浸泡水化及消毒3接种4培养观察和细胞计数5消化与细胞回收6细胞收获7传代培养10、试述HAT选择系统的基本原理第11讲HAT培养基中的氨基蝶呤可阻断细胞正常途径合成DNA;融合所用的瘤细胞一般是HGPRT或TK缺陷型,也不能采用正常途径合成DNA;两条途径被阻断后,瘤细胞未融合的以及与自身融合的因不能正常合成DNA而死亡;融合细胞具有亲代双方的遗传性能,具有来自淋巴细胞的HGPRT与TJ,可采用不就途径合成DNA,因此可在HAT培养基中存活与繁殖;11、试述单克隆抗体制备的基本过程第11讲。

细胞工程期末复习-名词解释

细胞工程期末复习-名词解释

细胞工程复习题一、名词解释[1]细胞工程:是指主要以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。

[2]细胞融合:是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。

[3]细胞重组:从活细胞中将细胞器及其组分分离出来,再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合,使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术[4]细胞培养:泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长[5]细胞全能性:指分化细胞保留全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能。

[6]细胞分化:是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,包括时间上和空间上的分化。

[7]细胞核移植:是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。

主要包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植。

[8]细胞悬浮培养:是将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式[9]细胞系:由原代培养经传代培养纯化,获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。

第一次传代培养后的细胞即称之为细胞系[10]细胞株:是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群,称细胞株[11]细胞凋亡:也叫程序性细胞死亡是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡[12]细胞团培养:细胞培养时,本身代谢就慢或者脆弱,细胞密度太低或者太高都会导致细胞的凋亡,死亡的细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物,这些絮状物在显微镜下看就是细胞聚集。

[13]体细胞核移植:体细胞核移植又称体细胞克隆,原理即细胞核的全能性,是动物细胞工程技术的常用技术手段[14]冠瘿组织:是由根癌农杆菌感染引起的植物肿瘤组织,它能在无外加植物激素的培养基上生长。

(细胞工程)名词解释

(细胞工程)名词解释

一、名词解释细胞工程:是应用细胞生物学和分子生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。

通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株,并可以产生新的物种或品系。

外植体:是指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。

植物组织培养:(广义)又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

(狭义)组培指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

愈伤组织:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在外植体切面上产生。

胚状体〔embroid〕:—对应于胚〔embryo〕,在离体培养过程中产生一种形似胚(具有明显的根端和芽端),功能与胚相同的结构。

离体无性繁殖:是在人工控制的无菌条件下,使植物在人工培养基上繁殖的技术。

跟常规的繁殖方法相比它是一种微型操作过程,因此,有时就直接称之为微繁继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料(愈伤组织.芽等)。

细胞分化:指导致细胞形成不同结构,引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。

细胞脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分化组织状态的过程。

细胞再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程,重新形成各类组织和器官的过程。

人工种子:亦称体细胞种子。

早期的人工种子概念是:体细胞胚经过人工种皮包被后而形成的体细胞种子。

现在指任何一种经人工种皮包被或裸露的,具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。

植物细胞全能性:指每个植物细胞都具有形成完整植株的能力,因为每个细胞都具有全套的遗传基因,无论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。

细胞工程学名词解释

细胞工程学名词解释

细胞工程学名词解释总结高技术:指那些能带来高经济效益、具有高增值作用,并能向经济和社会各领域广泛渗透的新技术。

生物技术:指通过技术手段,利用生物体或生物过程来生产有经济价值产品或创造新物种的综合技术。

狭义指基因重组、细胞融合、固定化酶与细胞、生物反应器等技术领域。

广义包括资源、能量、粮食、饲料生产以及为净化环境所进行的物质分解及发酵技术等。

细胞工程:是指以细胞为研究对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定细胞、组织产品或新型物种的综合技术。

生化工程:是由生物科学与化学工程相结合的交叉学科,研究生物技术的实验室成果转化为生产力过程的工程技术问题。

干热灭菌:指在干燥环境(如火焰或干热空气)进行灭菌的技术。

主要适用于玻璃器皿的消毒灭菌。

湿热灭菌:湿热灭菌即高压蒸气灭菌,指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法。

(是最常用和最有效的一种方法。

布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿及某些培养用液都可用此法消毒灭菌)。

细胞计数:用血球计数板计数细胞悬液中的细胞数目,然后根据需要进行必要的调整。

MTT法:又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。

在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

活细胞表现出线粒体脱氢酶活性,可将染料MTT还原为难溶的紫色结晶物沉积在细胞内,经酸性异丙醇溶解后呈现的色度可反映出生活细胞的代谢水平,而死细胞则无此酶活性。

活体染色:在体外条件下用某种染色剂对活的组织或细胞进行染色,而对活细胞的生理活动不产生任何明显的影响。

成集落试验:在集落刺激因子存在下培养细胞,可刺激培养细胞分化产生大小不同的细胞集落,这样的集落形成细胞称体外培养集落形成细胞,它是检验培养细胞能否增殖的过硬指标之一。

污染:一切与培养无关的杂质(微生物、化学物、细胞等)进入培养系统,影响培养物的正常生理机能。

动物细胞工程:以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作,使细胞产生某些人们所需要的生物学特性,从而改良品质,加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。

细胞试卷

细胞试卷

细胞工程学一、名词解释1、细胞工程:是指以细胞为研究对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定细胞、组织产品或新型物种的综合技术。

2、愈伤组织:由脱分化的细胞经过分裂产生的无组织结构无明显极性的松散细胞团,它具有再分化成为完整植物体的潜能PGD试管婴儿3、超数排卵:利用促性腺激素处理,使得卵巢中有更多的卵泡发育,更多的卵被排出,利用手术的取出卵母细胞。

目的是最大限度地利用母畜的生殖能力。

4、细胞固定化:是指将游离的细胞包埋在支持物内部或表面、培养液呈流动状态进行无菌培养的一门技术。

5、动物细胞培养:是将来自动物体的某些器官或组织的细胞,在模拟体内生理条件下在体外进行培养,使之存活并生长。

6、细胞系:有原代培养经传代培养纯化,获得的能在体外生存的细胞群体7、单克隆抗体:经过免疫哺乳类动物单一的B淋巴细胞,可以分泌单一性抗体,这种具有特异性的,同质性的抗体为多克隆抗体8、成体干细胞:是成体组织内具有自我更新及分化产生1种或1种以上子代组织细胞的未成熟细胞。

10、转基因生物反应器:将外源基因转入细胞或动植物,利用细胞增殖或动植物代谢制备外源基因的表达产物的技术称为转基因生物反应器技术,转入外源基因或细胞的动植物称之为转基因生物反应器。

二、填空题1、毛状根诱导的方法有_________、________________、__________________。

外植体接种法茎秆接种法原生质体—农杆菌共培养法2、由于大多数植物次级代谢产物在细胞生长停止后才大量合成,即属于_________,植物细胞培养制备次级代谢产物一般采用__________工艺。

非生长偶联型两步法培养3、植物细胞培养制备代谢产物分为_________、__________两类。

初级代谢产物次级代谢产物4、人工种子结构上从外向里包括三部分:(1)_____________ (2)_____________(3)_____________。

(大学试卷)细胞工程(B)答案

(大学试卷)细胞工程(B)答案

《细胞工程》(B)答案一大题:名词解释1、细胞工程是指应用细胞生物学的方法,有计划地改变细胞遗传物质并使之增殖,从而生产有用的代谢产物或培养细胞组织及至完整个体的技术。

2、细胞的全能性:即每一个细胞都包含着全套的遗传信息,也就是说它们具有遗传的全能性,每一种细胞都有发育为个体的潜在能力。

3、继代培养:由最初的外植体上切下新增殖的组织,继续转入新的培养基上培养。

4、接触抑制:是指随着细胞数量的增多,细胞间开始接触并边接成片,这时细胞的运动会停,这种由于细胞间接触而发生的抑制的现象称之为接触抑制。

5、细胞拆合:是把完整细胞的细胞核和细胞质用特殊的方法分离开来,或把细胞核从细胞质中吸取出来,或用紫外线等把细胞中的核杀死,然后再把同种或异种的细胞核和细胞质重新组合起来,培育新的细胞或新的生物个体。

6、细胞系:从外植体培养产生的细胞群称作细胞系。

7、多倍体:胞中含有三个或三个以上染色体组的个体叫多倍体。

8、抗体:机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的一类能与抗原发生特异性结合反应的球蛋白——免疫球蛋白。

主要存在于动物的血清、淋巴液、组织液及其它外分泌液中。

因此也将抗体介导的免疫称为体液免疫。

二大题:填空题1、粗面型内质网(rough endoplasimic reticulum,RER,)和光面型内质网(smooth endoplasimic reticulum,SER,)。

2、起动期、分裂期、形成期3、固体培养、固定化细胞培养、液体培养(悬浮细胞培养);单细胞培养、愈伤组织培养、茎类培养、胚培养、单倍体细胞培养、原生质体培养。

4、平衡盐水(BSS)、天然培养基、合成培养基5、全能干细胞、多能干细胞、专能干细胞三大题、判断题1、×2、√3、√4、√5、×四大题:简答题1、细胞骨架(cytoskeleton)是指真核细胞中的蛋白纤维网络结构。

细胞骨架不仅在维持细胞形态,承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用,而且还参与许多重要的生命活动,在植物细胞中细胞骨架指导细胞壁的合成。

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细胞工程名词解释第一章绪论1、细胞工程:应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。

广义的包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术,狭义则是指细胞融合和细胞培养技术。

2、细胞培养(cell culture)和组织培养(tissue culture):都属于体外培养(in vitro culture),是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。

是细胞工程的最基本技术。

3、细胞融合(cell fusion):又称细胞杂交(cell hybridization),是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。

4、染色体工程:借助于物理和化学等方法,使生物体染色体数目、结构和功能发生改变的技术。

5、胚胎工程:以生殖细胞和胚胎细胞为对象进行的操作,主要技术包括体外受精、胚胎切割、胚胎移植等。

6、干细胞:是动物体内具有分化潜能,并能自我更新的细胞。

第二章细胞工程的理论基础7、细胞全能性:一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。

8、脱分化:离体培养条件下,一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程。

9、再分化:脱分化后的分生细胞(愈伤组织)在特定的条件(离体培养)下,重新恢复细胞分化能力,并经历器官发生形成单极性的芽或根,或经历胚胎发生形成双极性的胚状体,进一步发育成完整生物体。

10、愈伤组织:脱分化后的细胞,经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。

11、体细胞胚或胚状体:离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物(不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞)。

12、外植体(Explant) :用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。

13、不定芽(不定根):现存芽(根)以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形成的芽(根),离体培养中通常指从愈伤组织发生的根或芽。

14、体细胞无性系变异:Larkin 和Scowcroft(1981)提出由任何形式细胞培养所得的再生植株统称为体细胞无性系(somaclones)。

而将这些植株所表现出来的变异称为体细胞无性系克隆变异。

比较完整体细胞无性系变异的概念是:体细胞培养的任何阶段所产生的变异(细胞,原生质体,愈伤组织,再生植株等)统称为体细胞无性系变异。

15、嵌合体:同一个体中有两个以上的细胞系并存。

16、正选择法:把细胞群体置于某种选择剂或选择条件下,使突变体可以正常生长,而正常细胞不能生存而死亡,从而达到分离的目的的一种选择方法。

17、生理适应(physiologic adaptation):通常是在某种外界条件存在时才表现出变异,外界条件不存在时,变异也随之消失。

18、负选择法:使正常型细胞生长,而突变的细胞处于抑制不分裂状态,然后用一种能毒害生长细胞而对不分裂的细胞无害的药物来淘汰生长正常的细胞。

19、“绿岛”法:在整体的植株水平上用某种化学物质作用于植株叶片,致使细胞发生突变,在叶片的局部呈现绿色斑点,切下这部分细胞进行组织培养,使抗性细胞分化成完整的植株。

在筛选某些病毒(如TMV烟草花叶病毒)的抗性变异细胞时,也可以采用这种方法。

第三章细胞工程实验室及实验基本操作20、有菌的范畴:暴露在空气中的物体,至少其表面都是有菌的。

如植物的表面、超净工作台的台面,未处理的工具和手等。

第四章植物组织器官培养技术21、离体无性繁殖(propagation in vitro) :利用离体培养技术,将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养,在短期内获得大量遗传形状一致的个体的方法。

也称之为快速繁殖(rapid clone propagation)、微繁(micropropagation) 。

22、单株无性系或单芽无性系:用上述方法得到的植株群体来自一个单株或单芽,他们的遗传组成相同,称为单株无性系或单芽无性系。

23、繁殖系数(breeding coefficient):也叫增殖率,指繁殖材料在一个培养周期内增殖的倍数。

24、不定芽:现存芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形成的芽25、指示植物(indicator test plants):具有能够辨别某种病毒的专化性症状的寄主植物。

26、酶联免疫吸附测定(ELISA):通过化学的方法将酶与抗体或抗原结合起来,形成酶标记物。

然后将它与相应的抗原或抗体起反应,形成酶标记的免疫复合物。

结合在免疫复合物的酶,在遇到相应的底物时,催化无色底物生成有色底物,通过比色计可以准确测定。

优点是灵敏度高,测定快速,每次可以同时测定多个样品。

27、看护培养:用一块愈伤组织或植物离体组织看护单细胞使其生长增殖的一种单细胞培养方法。

第五章细胞培养28、植物细胞培养(plant cell culture):是指在离体条件下对植物单个细胞或小的细胞团进行培养使其增殖的技术。

29、细胞悬浮培养:30、最低有效密度:在悬浮细胞培养中,使悬浮培养细胞能够增殖的最少接种量称为最低有效密度或者临界的起始密度。

31、植板率(%)=(形成的细胞团数/接种的细胞数)×100%第六章原生质体培养及体细胞杂交32、原生质体:33、原生质体培养:34、原生质体融合(Protoplast fusion),即细胞融合(Cell fusion),也叫体细胞杂交(Somatic hybridization),超性杂交(Parasexual hybridization)或超性融合(Parasexual fusion)。

是指不同种类的原生质体不经过有性阶段,在一定条件下融合创造杂种的过程。

35、对称融合(asymmetric fusion)-即两个完整的细胞原生质体融合。

36、非对称融合(symmetric fusion)-利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合。

37、胞质体(Cytoplast,无细胞核,只有细胞质)38、微小原生质体(Microprotoplast,只有1条或几条染色体的原生质体)39、同核体:同源原生质体的融合体40、异核体:非同源的原生质体的融合体41、多核体:含有双亲不同比例核物质的融合体42、异胞质体:具有不同胞质来源的杂合细胞。

43、核质体:有细胞核而带有少量细胞质的亚原生质体。

第七章人工种子44、人工种子概念:狭义:将胚状体,包裹在含有养分和具有保护功能的物质中,并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。

广义:在胚状体或一块组织(顶芽、腋芽)、一个器官(小鳞茎等)之外加上必要的营养成分(人工胚乳)后,用具有一定通透性而无毒的材料将其包裹起来,形成的与天然种子相似的颗粒体。

45、人工种子转换:指人工种子在一定条件下,萌发、生长、形成完整植株的过程。

46、转换率:第八章植物种质保存47、种质:是决定生物遗传性状,并将遗传信息从亲代传递给子代的遗传物质。

48、种质库:是指以种为单位的群体内的全部遗传物质,它有许多个体的不同基因所组成。

又称基因库。

49、种质资源:具有种质并能繁殖的生物体统称为种质资源或遗传资源。

50、植物种质资源又称植物遗传资源:是指一定地域上对人类有用的所有植物总和,是人类生存和发展必不可少的物质基础。

51、植物种质资源保存:是指通过人为的技术措施保护植物种质资源,使其不至于流失或灭绝。

52、原生境保存:是指在原来的生态环境中, 就地进行繁殖保存种质, 一般野生品种资源采用这种方式保存。

如建立自然保护区, 天然公园等。

53、非原生境保存:种质保存于该品种资源原产地以外的地区, 如建设低温种质库的种子保存,田间种质库的植株保存,以及试管苗种质库的组织培养物保存,基因文库保存等。

第九章动物细胞工程概述54、动物细胞与组织培养:从物体内提出组织或细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或者组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。

55、接触抑制:细胞从接种到长满底物表面后,由于细胞繁殖数量增多相互接触后,不再增加。

56、密度抑制:细胞因营养的枯竭和代物的影响导致细胞分裂停止57、细胞原代培养:从新鲜供体取得组织细胞后在体外进行首次培养,一般持续1-4周。

58、细胞传代培养:细胞在培养器皿中生长一时间后,被分开接种到新的培养器皿中的过程。

59、细胞系:原代细胞经第一次传代后,形成的细胞群体,即具有增殖能力,类型均匀的培养细胞。

60、细胞株:细胞系经过克隆或其他方法而得的单一类型的具有特定性质或标志的细胞群。

61、抗原:进入动物体内对机体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。

特点:外源性、结构性、特异性。

62、抗体:动物免疫系统分泌的中和或消除抗原物质影响的糖蛋白。

63、抗原决定族:决定抗原性可以引起机体产生抗体的特殊化学基团。

64、单克隆抗体(monoclonal antibody ,McAb):是指由一个B细胞活化、增殖、分化产生的子代细胞克隆分泌的、针对一个抗原决定簇的抗体,即由单一B细胞克隆合成的均一抗体。

65、多克隆抗体(Polyclonal antibody ,PcAb):由多克隆B细胞群产生的、针对多种抗原决定簇的混合抗体。

66、。

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