花粉生活力测定
利用化学药剂染色的方法测定花粉生活力,这是一种间接的测定方法,简便而快速,但比较粗略,有时不能真实反映出有发芽力花粉的数量。
四、实训步骤
1.蔗糖琼脂培养法
(1)培养基的配制:在100ml的蒸馏水中,加入琼脂1g、蔗糖10~25g(因植物花粉种类而异),置于烧杯中加热煮沸,然后将该烧杯置水浴锅或盛热水的杯中备用,以防培养基冷却凝固,适于羽衣甘蓝花粉萌发的蔗糖浓度为150g/L,硼对促进羽衣甘蓝花粉萌发的作用最大,适宜的浓度为20mg/L。
发芽数
发芽数
发芽数
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
发芽率
五、实训作业
1.分别计算出蔗糖琼脂培养法和染色法所测的花粉萌发率,比较两种方法的优劣。
2.蔗糖琼脂培养法中那种培养基更适合花粉的萌发,说明原因。
②试液的配制
Ⅰ.磷酸盐缓冲液。在100ml的蒸馏水中,溶解0.832g的Na2HPO4·2H2O和0.273g的KH2PO4,调整pH值为7.17。
Ⅱ.TTC溶液。称取0.02~0.05g的TTC,溶解在10ml的磷酸盐缓冲溶液中,放入棕色滴瓶内,置于暗处。TTC为有毒性物质,操作时应注意安全。
Ⅲ.步骤和方法。取少量花粉放在载玻片上,在花粉上滴1~2滴的配制液,用镊子使其混合后,盖上盖玻片。将此载玻片置于人工气候箱中(35~40℃)约15~20min。在显微镜(100倍)下观察,凡具有生活力的花粉粒呈红色,其次呈淡红色,失去生活力的和不育的花粉粒表现无色。
Ⅱ. 0.15gα-萘酚溶于100ml的50%酒精溶液中。
Ⅲ.0.25g碳酸纳溶于100ml的蒸馏水中。
以上三种溶液分别放入棕色瓶中备用,使用时将这三种溶液等量配成试剂A,放入棕色滴瓶中备用。
使用前配制0.3%H2O2液为试剂B,装入棕色滴瓶中备用。
③步骤和方法:取花粉少量撒于载玻片上,加上试剂A和试剂B各一滴,用镊子使花粉散开,盖上盖玻片,3-5min后置于显微镜下观察。被染色后呈红色的花粉粒,则表示有过氧化物酶存在,花粉有生活力;能发芽,如呈黄色或无色,则表示无生活力。
萌发率
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
2.染色法
TTC法
①原理:凡具有生活力的花粉,在其呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生活力的花粉则无此反应。因此,当TTC渗入有生活力的花粉时,花粉中的脱氢酶在催化去氢过程中与TTC结合,使无色的TTC变成三苯基甲(TTF)而呈红色。
利用花粉发芽试验测定花粉生活力是一种直接的测定方法,其结果也最可靠,但操作较麻烦,要有一定设备和一定时间。
4.是用染色方法来鉴定花粉的生命力。其原理是在活的花粉内有过氧化氢酶存在。它可以促进过氧化物(如HO)放氧分解。这些刚被放出的活性氧很容易使还原剂氧化。在本实验中所用的无色联苯胺-萘酚都是还原剂,但他们被氧化后却都表现红色或玫瑰红色。如果花粉是活的,那么这个反应很快,则花粉被染成红色或玫瑰红色;如果花粉是死的,则这一反映迟迟不能进行,花粉也就保持原色。此色优点是比较快捷,但比较间接。
时间分配
教学内容
讲解实训原理演示实训过程,布置实训任务
观看多媒体
结合实训过程讲解
20min
教学内容
指导实训
蔗糖琼脂培养法
学生练习思考
90min
教学内容
指导实训
染色法
学生练习思考
45min
教学内容
检查实训内容的掌握
记录实训结果完成实训报告
25min
教学反思
湖北生物科技职业学院教案附页
一、花粉生活力测定的意义
二、实训材料及仪器药品
园艺植物的雄花、载玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、干燥器、TTC
三、花粉生活力的测定方法
1.是将待测花粉直接授粉,然后统计结实率和结子数。此法的缺点是需时间较长,且实验结果易受气候条件的影响;
2.是将待测粉受到柱头上,隔一定时间切下柱头,在显微镜下检查花粉的萌发情况,根据萌发率的高低来鉴定花粉的生命力;
湖北生物科技职业学院
课 时 教 案
讲授人
张薇
课 时
学时
序 号
课题内容
实训一花粉生活力的测定
教学时间
设计思路
先讲后做,了解花粉生活力贮藏及生活力的测定方法和原理。
教学目标
知识目标:掌握花粉生活力测定的意义和测定方法
能力目标:会进行花粉生活力的测定
素质目标:培养学生的团队精神和动手能力
教学重、难点
及解决办法
蔗糖浓度
视野1
视野2
视野3
视野4
视野5
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发数
萌发率
萌发率
萌发率
萌发率
(3)播花粉后的检查:在播花粉后,根据不同植物,经不同时间,在显微镜下检查花粉发芽情况。3~4h后检查,每次检查3-5个视野,统计花粉总粒数和发芽粒数填写下表。(花粉发芽以其花粉管伸长超过花粉直径为标准)
本实验6人一小组,每人每个浓度制作一个玻片,每片观察5个视野,每视野约有100粒花粉,统计每种测定方法中具有生活力花粉的百分率,将观察结果记入下表。
(2)发芽床的设置和播撒花粉:在盖玻片上滴一滴培养基,用棉耳棒蘸上花粉少许,均匀撒于培养基表面,但应防止花粉埋入培养基中而影响花粉发芽。播撒花粉后,要在显微镜下检查花粉是否分布均匀,再将载玻片置入用湿纱布或湿滤纸垫底以保湿的大培养皿中,盖上皿盖。在各载玻片上贴上标签,注明花粉种类、采集时间、蔗糖浓度、播粉时间和操作者,然后置于25~28℃的温箱中。
过氧化物酶测定法
①原理:具有生活力的花粉含有活跃的过氧化物酶,它能使过氧化物放出活性氧,氧是在花粉萌发,进行许多综合反应时必需的,使各种多酚及芳香族胺发生氧化而产生特定颜色。因此,通过对过氧化物酶测定后的呈色反应来间接判断花粉有无生活力。
②试液的配制
Ⅰ.0.20g联苯胺溶于100ml的50%酒精溶液中。
3.是在培养基上进行花粉的人工萌发,检查待测花粉萌发率的高低。将花粉播种在特定的培养基上,并在一定的环境条件下来测定其发芽能力的方法。培养基常用蔗糖、琼脂(1%)和蒸馏水配制而成。不同植物的花粉,对蔗糖浓度要求不同,一般柑桔花粉要求25%左右,苹果和梨10~15%,桃10%左右为宜。蔗糖浓度高低可调节培养基的渗透压,以防止花粉在培养基上破裂。培养基以微酸性为宜,一般在pH5.2~6之间。发芽温度在20~25℃左右,并需要空气和湿度,为了促进花粉发芽,在培养基中还可加入少量的硼酸和维生素B1。
本实验6人一小组,每人制片3片,每片观察5个视野,每视野约有100粒花粉,统计每种测定方法中具有生活力花粉的百分率,将观察结果记入下表。
玻片
视野1
视野2
视野3
视野4
视野5
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
发芽数
发芽率
粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
花粉粒
发芽数
发芽数
教学重点:花粉生活力测定的原理和意义。
解决办法:通过多媒体结合案例讲解后学生动手操作,教师指导。
教学方法及手段
演示、学做
教学准备
多媒体课件、植物花粉、载玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、干燥器、TTC
教学过程及内容
讲解花粉生活力测定的原理和方法
实际操作蔗糖琼脂培养法和染色法
教学过程
教师活动
学生活动
教案设计说明
实验四 花粉生活力的测定
• 一、目的 学会用染色法进行花粉生活力的 测定方法。 二、材料 金丝桃即将开放的花蕾。 三、药品 碘-碘化钾溶液 蒸馏水 四、用具 显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、 培养皿、镊子等。
• 五、原理:
• 多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累 较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。发 育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或 积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。因 此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
1
2 3 4 5
• 花的解剖结构观察 • 1、依据花被的有无(双被花,单被花,无被花),对 称类型(辐射对称,左右对称,不对称),雄雌蕊有无 (两性花,单性花,无性花,杂性花)分析; • 2、雄蕊的类型(分离雄蕊,单体雄蕊,二体雄蕊,多 体雄蕊,聚药雄蕊); • 3、雌蕊的类型(单雌蕊,离生雌蕊,合生雌蕊); • 4、子房的位置 • 子房上位(花下位,花周围);子房半下位(周位花); 子房下位(上位花); • 5、胎座的类型:边缘胎座、侧膜胎座、中轴胎座、特 立中央胎座、基生胎座、顶生胎座
• 【注意事项】 • 此法不能准确表示花粉的活力。因为核期 退化的花粉已有淀粉积累,遇碘呈蓝色反 应。另外,含有淀粉而被杀死的花粉粒遇I2KI也呈蓝色。
• 七、作业 在低倍镜下观察5个视野,计算染色与 未染色的花粉粒数,将计算结果填入表中, 并计算其有生活力的花粉百分数。
测定 花粉 总数 染色数 染色数 有生活力花粉百分 (蓝色) (黄褐色)数(%)
• 六、方法和步骤 • 1、溶液的配制: • I2-KI溶液:取2g KI溶于5~10ml蒸馏水中,加入1g I2,待 完全溶解后,再加蒸镏水300ml。贮于棕色瓶中备用。 • 2、采集花粉 • 采集即将开放的金丝桃的花蕾。 • 3、压片与镜检 • 将花蕾剥开,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊 子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖 上盖玻片,在显微镜下观察。凡是被染成蓝色的为含有淀 粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。 观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率, 以染色率表示花粉的育性。 •
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉是植物生殖过程中非常重要的一环,其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
花粉生活力测定方法是通过一系列的实验和观察,来评估花粉的生长和发育能力,从而为植物的繁殖提供科学依据。
本文将介绍几种常见的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和爱好者有所帮助。
首先,传统的花粉生活力测定方法是通过染色观察花粉管的生长情况。
首先,将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察花粉管在一定时间内的生长情况,通过显微镜观察花粉管的长度和形态,从而评估花粉的生活力。
这种方法简单直观,但需要显微镜等设备,且操作较为繁琐。
其次,现代的花粉生活力测定方法中,常用的是荧光显微镜观察法。
通过将花粉与特定的荧光染料结合,使花粉在荧光显微镜下呈现出特定的荧光信号,从而可以清晰地观察花粉管的生长情况。
这种方法操作简便,观察效果明显,对于大规模的花粉生活力测定具有很大的优势。
另外,还有一种常见的花粉生活力测定方法是通过花粉萌发率来评估花粉的生活力。
这种方法是将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察一定时间内花粉的萌发情况,通过统计萌发的花粉数量来评估花粉的生活力。
这种方法简单易行,可以在较短的时间内获取较为准确的结果。
除了上述几种方法外,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,如分子生物学技术的应用、电子显微镜的观察等,这些方法在花粉生活力测定领域也取得了一些重要的进展。
综上所述,花粉生活力测定是植物繁殖和生长研究中的重要内容,而花粉生活力的准确测定则需要科学、准确的方法。
不同的方法各有优劣,研究者可以根据具体的实验目的和条件选择适合的方法进行花粉生活力的测定,从而为植物繁殖和生长研究提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的几种常见的花粉生活力测定方法对相关领域的研究者和爱好者有所帮助,也希望在未来的研究中能够有更多更准确的花粉生活力测定方法被发展和应用。
花粉活力测定的3种办法
精心整理实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】-KI300ml。
???I2~3张片??基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉生活力测定方法是一种评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的指标。
它通过采用定量和定性的方法来测定人体对花粉的反应和影响,以便为患者提供相应的治疗和干预措施。
下面我将详细介绍花粉生活力测定方法的原理和步骤。
首先,花粉生活力测定方法需要进行花粉源的采集和制备。
花粉源可以是空气中的自然环境采集或人工培养的花粉。
采集后,需要将花粉样本进行处理和制备,包括去除杂质和保持花粉的活力。
其次,花粉生活力测定方法中常用的技术是皮试和血清学检测。
皮试是一种常用的检测方法,主要通过在患者皮肤表面划一道小口,然后将一定浓度的花粉溶液滴在皮肤上,观察皮肤是否出现过敏反应,如红肿、瘙痒等。
这种方法简单快捷,可以初步筛查患者的过敏反应。
血清学检测是通过采集患者的血液样本,检测血清中花粉特异性IgE抗体水平来评估过敏反应的程度。
常用的检测方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA),这些方法可以检测到血液中特定花粉过敏原的抗体水平,并根据抗体浓度的高低来评估患者的过敏程度。
除了皮试和血清学检测,还可以进行生活质量评估。
这是一种主观的方法,通常通过问卷调查的方式,询问患者对花粉过敏的影响程度和日常生活质量的变化。
问卷通常包括患者的症状、疾病活动、工作和学习能力、社交活动和睡眠质量等方面的评估,以便评估花粉过敏对患者生活的影响。
最后,花粉生活力测定方法可以通过统计分析和数据处理来得出评估结果。
根据皮试和血清学检测的结果、生活质量评估和患者的症状表现等,可以综合评估花粉过敏的程度和生活质量的变化。
这些评估结果可以帮助医生为患者制定个性化的治疗方案,包括药物治疗、免疫疗法和生活调整等。
综上所述,花粉生活力测定方法是评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的一种指标。
通过采用皮试和血清学检测、生活质量评估等方法,可以全面分析患者的过敏反应和生活质量的变化,为患者提供针对性的治疗和干预措施。
这种方法对于花粉过敏的预防和管理具有重要的临床意义。
2实验二、花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 力 2.雄性不育系的鉴定
实验目的:
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
(一)I-KI染色鉴定
(二)TTC染色鉴定
(三)花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定:
正常的成熟花粉粒体积较大, 并含有大量的淀粉粒,遇I-KI 呈紫黑色,不正常的花粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
实验方法 TTC染色鉴定:
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶,它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合,生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色,生活力弱的呈浅红色, 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定:
在人工培养基上进 行发芽试验,可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定:
2 .准备 TTC 染色和发芽试验的材料, 置培养箱保温; 3.调试显微镜,I-KI染色鉴定; 4.TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1.测定方法和原理: (一)I-KI染色鉴定:正常的成熟花粉粒体积较大,并含有大量的淀粉 粒,遇I-KI呈紫黑色,不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 (二)TTC染色鉴定:具有生活力的花粉中含有脱氢酶,它能催化底物 使脱下的氢与TTC(氯化三苯基四氮唑)结合,生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色,生活力弱的呈浅红色,无生活力的不显色或 成黄色。 (三)花粉粒发芽鉴定:在人工培养基上进行发芽试验,可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2.实验结果: 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物生殖的重要组成部分,其生活力的测定对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
本文将介绍几种常用的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和生产者有所帮助。
首先,最常见的花粉生活力测定方法是离体培养法。
这种方法首先需要收集新鲜的花药,然后在适当的培养基上进行培养,观察花粉的萌发情况来判断其生活力。
离体培养法的优点是操作简单,结果可靠,因此被广泛应用于植物育种和种子生产中。
其次,荧光显微镜法也是一种常用的花粉生活力测定方法。
这种方法利用荧光显微镜观察花粉颗粒的形态和结构,通过判断其内部结构的完整性来评估花粉的生活力。
荧光显微镜法对花粉的观察更加直观,能够提供更多的信息,但需要专业的设备和操作技能。
另外,还有一种叫做染色法的花粉生活力测定方法。
这种方法通过在花粉颗粒上涂抹特定的染料,然后观察染色情况来判断花粉的生活力。
染色法简单易行,可以快速得到结果,但对染料的选择和浓度有一定要求。
除了上述方法,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,比如电子显微镜法、流式细胞仪法等。
这些方法在技术上更加先进,能够提供更为精细的数据,但也需要更高的成本和专业的操作技能。
综上所述,花粉生活力的测定对于植物育种和种子生产具有重要意义,而不同的方法各有优劣。
在选择具体的测定方法时,需要根据实际情况和研究目的进行综合考虑,以便选择最适合的方法。
希望本文介绍的内容能够对相关领域的研究者和生产者有所启发,推动相关领域的科研工作和生产实践取得更好的成果。
实验:园艺植物花粉生活力测定
天竺葵柱头上的花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
蒂氏荚蒾花粉(灰色) 其中一个已开始萌发
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
勿忘草的花粉 最小的花粉粒之一,直径只有0.005毫米
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花锦葵属植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
桦树的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
柳树花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
染色者为发育不良、生活力弱的花粉。观察3~4个视野,
五、方法步骤:
(三)花粉生活力试验
3.取另一载玻片,加少量同种待测花粉,然后在花
粉上滴试剂Ⅰ和试剂Ⅱ各一滴,仔细搅匀,盖上盖
玻片,用镊子轻轻压实。经3~4分钟后,放在显微
镜下检查。
有生活力的花粉呈红色或玫瑰色,无生活力的 花粉为黄色或无色,连续观察3~4个视野,分别记 录有生活力及无生活力的花粉数。
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒的活力和生长能力,是衡量植物繁殖成功的重要指标。
花粉生活力测定方法是一种用来评估花粉质量和活力的技术手段,对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
传统的花粉生活力测定方法主要包括花粉染色观察法、花粉萌发率测定法和花
粉活力染色法。
花粉染色观察法是将花粉染色后在显微镜下观察其形态和数量,从而评估花粉的活力和质量。
花粉萌发率测定法则是将花粉培养在适宜的培养基上,观察其萌发情况以评估花粉的活力。
花粉活力染色法则是利用染色技术来观察花粉内部的活力指标,如线粒体和细胞核的活跃程度。
随着科学技术的发展,现代的花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
比如,利用生物技术手段对花粉进行基因测序和分析,可以更准确地评估花粉的生活力和遗传信息。
同时,利用先进的显微镜和成像技术,可以对花粉的微观结构和形态进行更精细的观察和分析。
花粉生活力测定方法的发展不仅有助于科学家和植物育种者更好地了解植物的
繁殖机制和生长规律,也为农业生产和生态保护提供了重要的技术支持。
通过准确评估花粉的生活力,可以选择出高质量的花粉进行人工授粉或者种子生产,从而提高植物的繁殖成功率和产量。
此外,对花粉生活力的准确测定也有助于保护植物遗传资源,促进植物多样性的保护和利用。
总之,花粉生活力测定方法是一项重要的植物科学技术,它为我们深入了解植
物繁殖机制和提高农业生产效率提供了重要的技术手段和支持。
随着科学技术的不断进步,相信花粉生活力测定方法将会在未来发挥更加重要的作用。
花粉活力测定的3种方法
实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】90ml水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】???I2-KI300ml。
2~3张片??基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
花粉生活力检测
植物花粉保存与花粉生活力的测定一、实验目的了解花粉生活力测定的一般方法,并掌握培养法测花粉生活力。
二、实验原理不同的植物成熟花粉的生命力长短不一,在自然状态下,成熟花粉有些存活仅数小时,有的课长达1个多月。
通过在干燥、低温、密封等的条件下保存,花粉的呼吸作用被抑制,生活力得以延长。
进行杂交人工授粉前,常对父母本花粉尤其是经过保存的花粉进行生活力测定。
其方法有:形态鉴定、TTC染色法鉴定、花芽萌芽鉴定等。
(1)形态鉴定除饱满、圆形的正常外,其他都不正常。
(2)TTC染色法鉴定脱氢辅酶存在于活的细胞内,当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原,便由无色的TTC变为红色的三苯基甲(TTE)。
当细胞死亡后,NADH会迅速被降解,不会发生相应的颜色反应,故TTC染色法可显示细胞是否存活。
(3)花芽萌发鉴定将花粉置于合适的培养基上进行培养,花粉即可萌发出花粉管,发芽率可作为花粉生活力的检测指标三、实验材料、药品和器具1、实验材料兰花毛豌豆和葛藤正在开放的花2、药品和器具显微镜、凹式载玻片、培养皿、盖玻片、镊子、解剖针、蔗糖硼酸悬浮培养基四、实验内容1、花粉的保存(1)短期保存:低于4°C,冰壶中保存长期保存:(2)长期保存:干燥器中干燥24h,自由水含量低于1%,用石蜡封口,低于1°C的冰箱中保存2、花粉生活力的测定(花粉萌发鉴定法或称培养法)(1)用滴管滴1小滴蔗糖硼酸悬浮培养基于盖玻片上,注意不要滴到边缘,以免与载玻片凹面边缘接触。
(2)取兰花毛豌豆和葛藤正在开放的花的雄蕊,将雄蕊在培养基里反复涂抹几次,让花粉散落在培养基表面。
(3)迅速将盖玻片翻转,放置于凹式载玻片上,让培养基悬浮在凹式载玻片的凹面处,注意不要让培养基接触凹面边缘。
(4)每一个植物做两个重复,放置在显微镜下观察花粉形态。
20min后,观察并花粉发芽状况。
五、实验结果将实验结果填入花粉生活力测定实验记录表处理重复视野Ⅰ视野Ⅱ合计花粉粒数发芽粒数发芽率/%花粉粒数发芽粒数发芽率/%花粉粒数发芽粒数发芽率/%兰花毛豌豆重复Ⅰ70 65 92.8 65 60 92.3 135 125 92.6 重复Ⅱ80 76 95.0 74 70 94.6 154 146 94.8 合计150 141 94.0 139 130 93.5 289 271 93.8葛藤重复Ⅰ40 35 87.5 35 30 85.7 75 65 86.7 重复Ⅱ42 36 85.7 38 31 81.6 80 67 83.8合计82 71 86.6 73 61 83.6 155 137 88.4六、注意事项1、用滴管向盖玻片滴培养基时,要尽量滴在盖玻片中央,要避免液体培养基接触载玻片凹面边缘部分。
