普鲁士蓝染色试剂盒说明书
普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色的步骤包括：
1. 切片：将待染色的组织切成3~5微米的薄片。
2. 烤片：将切片放入烤片机中，在70℃下烤制30分钟。
3. 捞片：将烤好的切片放入水浴锅中，温度设置为49℃，浸泡20秒后取出。
4. 脱蜡、复水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脱蜡，然后放入无水乙醇、75%乙醇、蒸馏水中复水。
5. 染色：将切片放入普鲁士蓝染色工作液中，完全覆盖组织，室温染色1小时。
染色后，用自来水冲洗切片，去除多余的染料。
6. 复染：将切片放入普鲁士蓝染液C中，室温染色3~5分钟。
染色后，用自来水冲洗至切片流水无色。
7. 脱水封片：将切片经3次无水乙醇脱水，每次5分钟，再经二甲苯透明5分钟，然后以中性树胶封片。
以上是普鲁士蓝染色的基本步骤，每一步都需要仔细操作以保证染色效果。
普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理
普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理
首先，普鲁士蓝是一种阳离子染料，可以与阴离子物质发生结合。
它的颜色为深蓝色，对于电镜染色或组织切片的染色非常适用。
其次，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理与铁离子的还原反应有关。
普鲁士蓝染色试剂盒中包含了还原剂和氧化剂。
还原剂将铁离子还原为两价的铁离子，而氧化剂将两价的铁离子氧化为三价的铁离子。
铁离子在试剂盒中的相互转变过程中，会和普鲁士蓝结合形成普鲁士蓝染料。
这种染料具有很强的颜色稳定性和耐光性。
在实际的染色过程中，首先需要准备待染物样本，通常是细胞切片或组织切片。
然后将待染物样本浸入染色试剂盒中，使其充分浸透。
接着，将样本置于特定条件下进行染色反应。
染色反应的条件通常包括温度、反应时间以及试剂盒中存在的其他化学物质的浓度等。
染色反应进行的时间越长，染色的深度越深。
染色反应进行的温度越高，染色的速度越快。
普鲁士蓝染色试剂盒中的其他化学物质对染色反应的影响也非常重要。
例如，存在过量的铁离子会抑制染色反应的进行，而存在过量的氧化剂会使染色淡化。
最后，染色完成后，需要通过温和洗涤、脱水和固定来清洁和稳定染色结果。
这样可以去除多余的染色物质，使染色结果更加清晰和稳定。
总而言之，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理主要涉及阳离子染料的结合特性，以及铁离子的还原和氧化反应。
这种染色方法适用于电镜染色和组织切片的染色研究中，具有简单、快速、稳定等优点。
芽孢染色液配制及使用方法
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芽孢染色液（试剂盒）
试剂盒组成：
染色液A：石炭酸复红染液
染色液B：碱性美蓝染色液
产品说明：
芽胞具有高度的折光性，外膜致密，渗透性低，着色和脱色均较困难。
在加热条件下进行染色时，染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料可被酒精脱色，而芽胞上的染料仍保留，经复染剂复染后，菌体和芽胞呈现出不同的颜色。
操作步骤：
1、制作一适当厚度的细菌涂片，自然干燥，通过火焰加热固定。
2、滴加适量染色液 A 于涂片上，在酒精灯上加热，使染液冒蒸汽但不沸腾。
必要时可续加染液以免干涸。
维持4-5 分钟。
3、待标本冷却后以95%酒精冲洗至无红色染液脱出为止，水洗。
4、滴加染色液B 复染约2-3 分钟，水洗至无染液脱出为止。
5、待干后油镜观察。
预期结果：
菌体呈蓝色，芽孢呈红色。
注意事项：
1. 供芽孢染色用的培养物应控制菌龄，要求大部分芽孢仍保留在菌体内为宜。
2. 加热染色时必须维持在染液冒蒸汽的状态，加热沸腾会导致菌体或芽孢囊破
裂，加热不够则芽孢难以着色。
3. 请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
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提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
储存条件：室温干燥保存，有效期 1 年。
关键词：芽孢染色液
芽孢染色液相关染色产品:
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普鲁士蓝染色试剂盒学习课件.docx
普鲁士蓝染色试剂盒(PERLS STAIN，伊红法)
产品简介：
Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反响，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸别离出来，三价铁与亚铁氰化钾反响，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反响被称为普鲁士蓝反响。
三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反响后可用红色染色剂进展复染，如核固红、伊红、中性红等。
含铁血黄素〔Hemosiderin〕是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。
当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。
Perls 普鲁士蓝反响〔Prussian blue reaction〕又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内，主要显示三价铁盐。
Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。
在判断含铁血黄素沉积时，用Perls 反响可以得到证实，该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。
该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进展复染。
普鲁士蓝染色试剂盒〔Perls stain，伊红法〕，其复染液采用伊红染色液，也是常用的复染液，该复染液染色时间较核固红染色液要短。
保存：RT避光保存，有效期 1 年。
关键词：普鲁士蓝染色试剂盒(PERLS STAIN，伊红法)
普鲁士蓝染色试剂盒(PERLS STAIN，伊红法)相关染色产品:。
阿利新蓝染色液配制及使用方法
北京华越洋生物提供QQ1733351176标准阿利新蓝染色液CAS：75881-23-1分子式：C56H68N16S4Cl4Cu产品简介:阿利新蓝（Alcian）又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。
这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。
该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。
阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。
如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。
pH值为2.5时组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，是带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色。
pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。
中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。
操作步骤（仅供参考）：1、二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。
2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。
3、入阿利新蓝染色液染色30min。
4、流水冲洗5min。
5、入核固红染色液复染5-10min。
6、流水冲洗1min。
北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水，二甲苯透明。
8、中性树胶封片。
染色结果：注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。
染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
普鲁士蓝实验报告
一、实验目的1. 了解普鲁士蓝染色的原理和操作步骤。
2. 掌握利用普鲁士蓝染色观察组织中铁元素分布的方法。
3. 提高实验操作技能，培养严谨的科学态度。
二、实验原理普鲁士蓝是一种亚铁氰化铁，具有较强的亲和力，可以与组织中的铁元素结合形成蓝黑色沉淀。
在酸性条件下，切片内的高铁盐与亚铁氰化钾反应生成亚铁氰化铁，进而与组织中的铁元素结合，形成蓝黑色沉淀。
通过显微镜观察，可以观察到组织中铁元素的分布情况。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 人肝组织切片- 亚铁氰化钾- 氯化铁- 核固红染液- 固定液- 20倍样本体积的固定液- 石蜡切片- 冰冻切片- 显微镜2. 实验仪器：- 烧杯- 移液器- 离心机- 显微镜- 显微摄影仪四、实验步骤1. 样本准备：- 将人肝组织切片置于20倍样本体积的固定液中固定24小时以上，常温运输。
- 固定时间不宜过长，以免组织结构变形，切勿冷冻结冰。
- 石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。
2. 染色：- 将固定好的切片置于烧杯中，加入适量的亚铁氰化钾溶液，在室温下进行染色。
- 染色时间约为30分钟。
3. 核固红染色：- 将染色好的切片用蒸馏水冲洗干净。
- 加入核固红染液，室温下进行染色。
- 染色时间约为10分钟。
4. 脱水封片：- 将染色好的切片用无水乙醇进行脱水处理。
- 最后用中性树胶封片。
5. 显微镜观察：- 将封片后的切片置于显微镜载物台上，使用显微镜观察。
- 观察组织中铁元素的分布情况，记录观察结果。
五、结果与分析1. 铁元素、含铁血黄素呈蓝色，细胞核呈红色。
2. 在显微镜下观察，可见肝组织内存在蓝色颗粒，为铁元素、含铁血黄素的沉积。
3. 铁元素主要分布在肝细胞内的线粒体、溶酶体等细胞器中。
六、讨论1. 普鲁士蓝染色是一种简单、快速、灵敏的染色方法，可用于观察组织中铁元素的分布。
2. 实验过程中，固定时间的控制对组织结构的影响较大，应严格按照实验要求进行固定。
3. 染色过程中，亚铁氰化钾和氯化铁的浓度、染色时间等因素会影响染色效果，应进行优化。
碱性品红水溶液
北京华越洋生物QQ:1733351176碱性品红水溶液(1%)
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2、碱性品红染色：
对于上述处理好的样品，碱性品红水溶液(1%)染色。
注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行碱性品红染色。
3、脱水、透明、封片：
95%乙醇脱水2min。
更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。
二甲苯透明5min 。
更换新鲜的二甲苯，再透明 5min。
用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察，细胞核呈粉红色或红色。
注意事项：
1、如果需要脱水、透明和封片处理，需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
有效期：室温,避光, 6个月
关键词：碱性品红水溶液(1%),Fuchsin basic stain
碱性品红水溶液(1%)相关染色产品:
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北京华越洋生物QQ:1733351176。
普鲁士蓝制备实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习普鲁士蓝的制备方法；2. 掌握普鲁士蓝的合成原理及反应条件；3. 了解普鲁士蓝的物理性质和应用。
二、实验原理普鲁士蓝是一种蓝色的铁氰化物，化学式为Fe4[Fe(CN)6]3。
它是一种具有特殊性质的无机颜料，具有优良的化学稳定性和物理性质。
本实验采用单铁源水热法合成普鲁士蓝。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：电子天平、烧杯、滴定管、搅拌器、高压反应釜、干燥箱、磁力搅拌器、红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电镜等。
2. 试剂：FeSO4·7H2O、K4[Fe(CN)6]、NaOH、H2O（去离子水）、无水乙醇、丙酮等。
四、实验步骤1. 配制溶液：准确称取FeSO4·7H2O 1.5g，溶解于50mL去离子水中，配制成0.03mol/L的FeSO4溶液。
2. 氰化：向FeSO4溶液中加入0.1mol/L的K4[Fe(CN)6]溶液，使Fe2+与Fe3+的摩尔比为3:1。
3. 调节pH值：用NaOH溶液调节溶液pH值至8.5。
4. 水热反应：将上述溶液转移至高压反应釜中，在150℃下反应24小时。
5. 冷却：反应结束后，自然冷却至室温。
6. 过滤、洗涤：将反应产物过滤，用去离子水洗涤3次。
7. 干燥：将洗涤后的产物在60℃下干燥24小时。
8. 研磨：将干燥后的产物研磨成粉末。
9. 分析与表征：对产物进行红外光谱、X射线衍射、扫描电镜等分析。
五、实验结果与分析1. 红外光谱分析：普鲁士蓝的特征吸收峰为Fe-C和C-N键的振动，与理论值吻合。
2. X射线衍射分析：普鲁士蓝的晶体结构为三方晶系，晶胞参数为a=0.984nm，c=1.502nm。
3. 扫描电镜分析：普鲁士蓝粉末颗粒大小约为100-200nm，表面光滑。
4. 普鲁士蓝的制备过程简单，成本低，产物质量稳定。
六、实验结论本实验采用单铁源水热法成功制备了普鲁士蓝，产物质量稳定，具有良好的应用前景。
通过红外光谱、X射线衍射和扫描电镜等手段对产物进行了表征，证实了产物为普鲁士蓝。
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普鲁士蓝染色试剂盒(Perls stain，核固红法) ----北京华越洋生物GT355-H 含铁血黄素（Hemosiderin）是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。
当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。
Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。
在判断含铁血黄素沉积时，用Perls 反应可以得到证实，该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。
该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。
该染色液的复染液采用核固红，是最经典、最常用的复染液。
产品洯成：
规格2×50ml 2×100ml Storage
Perls stain A 25ml 50ml RT避光
Perls stain B 25ml 50ml RT
临用前，取A1、A2等量混合，即为试剂(A)Perlsstain，不宜提前配制。
试剂(B): 核固红染色液50ml 100ml RT 避光
使用说明书 1 份
自备材料：
1、10%的中性福尔马林
2、系列乙醇
3、蒸馏水
4、4%的多聚甲醛
操作步骤（仅供参考）：
（一）石蜡切片染色
1、组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
2、切片厚度4um，常规脱蜡至水。
3、蒸馏水水洗1min。
4、切片入Perls stain（见注意事项4），浸染15-30min。
5、蒸馏水充分冲洗2-5min。
6、入核固红染色液，淡染细胞核5-10min。
7、自来水冲洗1-5s。
8、常规脱水透明，中性树胶封固。
（二）冰冻切片染色
1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3min。
2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
（三）细胞染色
1、4%多聚甲醛固定10～20min。
2、自来水冲洗2 次，每次2min。
3、蒸馏水冲洗2 次，每次2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果：
含铁血黄素或三价铁蓝色
细胞核、其他组织红色
阴性对照（可选）
取相同连续切片脱蜡至水。
置于5%的草酸中，孵育2-6h 后，经Perla stain，需要步骤同上。
结果为阴性。
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、组织固定常采用10%的中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。
避免使用酸性固定剂，酪酸盐处理也会妨碍铁的保存。
3、整个操作过程中容器要干净，避免使用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。
4、Perls stain 染色时，应根据样本情况调整着色时间。
5、所有检查切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要.尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞).
6、系列乙醇应经常更换新液。
7、冰冻切片和细胞的染色,最好根据具体情况摸索实验条件.
8、为了您的健康和安全,请穿实验服并戴一次性手套操作.
有效期：12 个月
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