全自动生化分析仪基本知识与应用

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• 例17 • 全自动生化分析仪的试剂与样品的混合装
置类型为 • A 搅拌棒 • B 加温 • C 机械振荡 • D 加样针 • E 加混合液
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• 例18 某实验室全自动生化分析仪近两天发现部分结果明
显不稳定，仪器自检正常，测定过程没有错误报警，如果 是交叉污染因素，首先应考虑为
• 光源（石英卤素灯） • 常用“干涉滤光片”分光 • 微量流动比色池。 • 终点法项目通常在“仪器”外孵育，时间
和温度的准确性常影响测定结果。
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• 例1 • 临床上所指的封闭式全自动生化分析仪主
要是 • A 质控物封闭 • B 试剂封闭 • C 环境封闭 • D 仪器封闭 • E 技术人员封闭
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• 例22
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• 例23
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• 例24
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• 例25
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• 例26
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• 例27
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• 例28 • 钠电极属于 • A 晶体电极 • B 气敏电极 • C 玻璃电极 • D 酶电极 • E 膜电极
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• 例29 • 很多分析仪都采用双波长或多波长的光路
测吸光度下降速率 • E LD主要作用于第一步反应
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• 例48 • 若遇到溶血标本时，受影响较小的项目是 • A LDL-C • B LDH • C CK • D AST • E ALT
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• 7. 常见受溶血影响较大的项目 • K+ • LDH • CK • AST • ALT • Mg
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• 8.终点法反应的项目 • Glu-GOD，肌苷－肌氨酸氧化酶法，尿酸
，TG-GPO-PAP，T-Ch，
• 9.速率法反应的项目 • ALT，AST，ALP，GGT，TBA，CK,LD， • Glu-HK，UN，NAG，
南京大学医学院附属鼓楼医院
顾光煜
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一、自动生化分析仪的分类
• 根据反应装置： 连续流动式、离心式和分立式 • 根据反应介质： 液相化学、干式化学 • 根据反应通道： 单通道、多通道 • 根据自动化程度： 全自动、半自动 • 根据仪器的复杂程度： 小型、中型和大型 • 根据分析系统试剂开放程度：
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• 例15 • 目前全自动生化分析仪最常用的光栅分光
方式为 • A 前分光 • B 中分光 • C 后分光 • D 前中后分光 • E 前后分光
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• 例16 • 干式生化分析仪保持恒温的方式是 • A 空气式恒温器加热 • B 水浴式循环直接加热 • C 恒温液循环间接加热 • D 金属直接加热 • E 反应液直接加热
• A 清洗剂的类型是否正确 • B 清洗用水是否符合要求 • C 管路冲洗是否彻底 • D 反应杯是否需更新 • E 用校准品对仪器进行重新校正。
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Leabharlann Baidu
• 例19 340nm波长属于
• A 可见光 • B 紫外光 • C 红外光 • D 近红外光 • E 远红外光
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• 例20
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•
ALT
•
AST
•
LD-P
•
UN
•
K+酶法
•
TCO2酶法
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• 2.2 利用NAD→NAD(P)H，吸光度升高的：
• CK • CK-MB • TBA • LD-L • Glu-HK • TBA
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• 3. Trinder反应 • Glu-GOD • 肌苷－肌氨酸氧化酶法 • 尿酸 • GPO-PAP • T-Ch,HDL/LDL-Ch
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• 5.清洗系统 一般先用碱性液冲洗、再 用酸性液冲洗、最后用去离子水冲洗 。
• 6.管路系统 管路系统的老化或长期使 用后反应废物的沉积阻塞常造成反应 结果的重复性差。
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• 7.比色系统
• 7.1 光源 卤素灯波长300~800nm
•
氙灯 波长285~750nm
• 使用寿命1000h左右，光源能量对340nm 影响最大。
目前，全自动生化分析仪主要采用透 射比浊法。
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• 2.电化学分析技术 • 是利用物质的电化学性质，测定化学电池
的电位、电流或电量的变化的分析方法。 • 基本公式：能斯特（Nernst)方程。 • 测量电极与参比电极 • K+电极 颉氨霉素；Na+ 玻璃电极；Cl-
银－氯化银电极；CO2 气敏电极
二级纯水，其微生物菌落（CFU/ml)应低于 •A 1 • B 10 • C 100 • D 1000 • E 100000
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• 例7 • 临床生化实验室用水一般采用： • A 一级水 • B 二级水 • C 三级水 • D 次级水 • E 自来水
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三、全自动生化分析仪 基本结构及工作原理
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• 1.1 波长选择的三个条件
• 待测物质的光吸收最大
• 吸收峰宽而钝
• 常见干扰物在该波长下光吸收最小
• 1.2 吸收光谱分析
•
Lambert-Beer定律
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• 1.3 散射光谱分析 • 散射光谱分析法 光线通过溶液混悬颗粒后
的光吸收或光散射程度的定律方法。 • 透射比浊法 • 散射比浊法
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• 例2 • 全自动生化分析仪可分为小型、中型、大
型，其依据是： • A 单通道和多通道数量 • B 仪器可测定项目的多少 • C 测定程序可否改变 • D 仪器的复杂程度、功能和单位时间测试数量 • E 是否可以同步分析
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• 例3 • 全自动与半自动生化分析仪共同之处为 • A 取样 • B 加试剂混合 • C 检测波长 • D 孵育反应 • E 清洗系统
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• 4.苯衍生物指示反应 • ALP • GGT • NAG
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• 5.免疫透射比浊法 • Ⅳ型胶原 • TnI • Hs-CRP，LP(a) • 尿微量白蛋白，前白蛋白 • 胱抑素C • 载脂蛋白
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• 6. 离子选择电极法 • K+ • Na+ • Cl• TCO2
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• 例9 • 自动生化分析仪的光源能量降低对单色光
影响最大的波长是 • A 340nm • B 405nm • C 450nm • D 500nm • E 630nm
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• 例10 • 自动生化分析仪清洗加样针主要为了 • A 提高分析精密度 • B 提高分析准确度 • C 防止交叉污染 • D 提高反应速度 • E 提高分析的灵敏度
• 黑条白空相间的条码符号 • 光电转换元件 • 常用条码类型：Code39, Code128等
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• 4.反应系统 • 4.1 反应盘 • 4.2 混合装置 多用特氟隆不沾涂层的搅拌棒 • 4.3 温控装置 • 理想的温度波动应小于±0.1℃ • 3种方式：空气浴、水浴、恒温液间接加热 • 强生干化学仪用空气浴恒温
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• 例4 • 干化学式自动生化分析仪所用的光学系统为 • A 分光光度计 • B 原子吸光仪 • C 反射比色计 • D 固定闪烁计数器 • E 免疫比浊计
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• 例5 • 关于分立式全自动生化分析仪的比色杯的
阐述，错误的是： • A 比色杯可以是反应杯 • B 比色杯可以自动制作 • C 比色杯可以是流动比色池 • D 比色杯可以是石英玻璃 • E 比色杯可以是硬质塑料
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二、自动生化分析仪的安装与准 备
• 1.工作环境 空间、电源（UPS)、避免直射阳光、
环境温度和湿度、电磁辐射、化学品。 • 2.水 蒸馏水、去离子水、反渗透水。 • 3.纯水等级：一般二级
二级纯水微生物含量： 最大每毫升菌落数103。
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• 例6 • 临床生化实验室一般采用NCCLS所规定的
封闭系统、开放系统
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1.连续流动式生化分析仪
• 比例泵 • 空气分段 • 透析器 • 管道式，携带污染
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2.离心式全自动生化分析仪
• 几乎“同步分析” • 随机任选式（早期的必须按项目顺序） • 比色杯人工清洗？（一次性）
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3.分立式生化分析仪
• 目前使用生化分析仪主要此种类型。 • 比色杯
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• 9.其他
• 9.1 反应底物 ALT L丙氨酸＋α-酮戊二酸
•
ALP 磷酸苯二钠
• 9.2 用全血标本：糖化血红蛋白
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• 例33
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• 例39
袋式仪器可以自动制作比色杯 比色杯可以兼作反应杯 比色杯不能作流动比色池（半自动）
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4.干式生化分析仪
• 干片分：扩散层、试剂层、指示剂和支持层。 • 利用“反射光度法”和“差式电位法”检
测。 • 以液体样品中的“水”为溶剂。 • 理论基础：KubelkaMunk理论。
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5.半自动生化分析仪
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• 例11 • 大多数全自动生化分析仪比色杯的光径是 • A 0.5~0.7cm • B 0.8~1.0cm • C 1.1~1.9cm • D 2.0~3.9cm • E ≥ 4.0cm
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• 例12
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• 例14 • 全自动生化分析仪比色杯的材料常采用 • A 光学玻璃或一般塑料 • B 普通玻璃或硬质塑料 • C 隔热玻璃或普通塑料 • D 石英玻璃或优质塑料 • E 优质塑料或普通玻璃
• 常规清洗不能完全消除携带污染
• 9.1 常见原因 共用系统
•
保养不当（污垢、老化）
•
清洗液使用不当
•
排列顺序不合理
• 9.2 计算 小于0.3%为正常
• 9.3 常见组合
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• 例8 • 自动生化分析仪比色分析常用的检测器是 • A 固定闪烁计数器 • B 硒电池 • C 镍氢电池 • D 二极管 • E 光电倍增管
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• 例47 • 关于ALT测定中，叙述正确的是 • A L-丙氨酸与β-酮戊二酸为反应底物 • B NADH在氧化还原反应中起作用 • C 第一步反应中的L-丙氨酸将进入下一步反应 • D 在偶联反应中，生化仪将在455nm处检
• 7.2 比色杯 常用石英、硬质玻璃、优质塑料
•
光径0.5~0.7cm。
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• 7.3 单色器 朗伯比尔定律
•
滤光片、棱镜、光栅分光
•
多采用光栅分光
•
多采用后分光测量技术
• 光源 → 比色杯 →单色光器 → 检测器
• 7.4 检测器 发光二极管
• 8 程序控制系统
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• 9. 携带污染
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• 例21
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四、全自动生化分析仪常用分析技术
• 1.光谱分析技术 • 单波长、双波长甚至多波长
• 主波长，特有波长；副波长，为消除干扰而设
• 单波长易受溶血、黄疸、脂浊的干扰；双波长可 消除上述干扰，减少杂散光、噪音干扰
• 常用双波长 比浊 340/700nm； Hb 340/380；NADH 340/380、340/405； ALP 405/476；Trinder 520/600。
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• 1. 常用分析方法 • 连续监测法的定义 • 终点法定义 • 零级反应期 • 一级反应期
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• 2. NAD(P)H系统指示的反应 • 还原型NAD(P)H在340nm有吸收峰；氧化
型NAD(P)则没有。
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• 2.1 利用NAD(P)H→NAD，吸光度下降的：
• 1.样品系统 • 专用样品杯和直接用采血试管 • 凝块和气泡检出功能 • 自动冲洗功能 • 样品预稀释、后稀释、加倍、标准原液系
列稀释等不同的稀释方式。
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• 2.试剂系统 • 冷藏功能 • 液面感应及气泡检出 • 双试剂与多试剂 • 试剂瓶的防蒸发与死体积 • 试剂条码
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• 3.条形码系统 • 三组成部分：扫描系统、信号整形、译码器
技术，是为了减少 • A 试剂的干扰 • B 样品中黄疸、溶血、脂血的干扰 • C 仪器光源的波动 • D 批间差异 • E 批内差异
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五、全自动生化分析仪常用测定项目 的反应原理
• 终点分析法 • 连续监测法 • 干化学分析法 • 电化学分析法