[工学]色谱测定法
色谱法操作形式
色谱法操作形式色谱法操作形式色谱法是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
它通过样品在固定相和流动相之间的相互作用，实现对混合物中各组分的分离和定量分析。
色谱法操作形式主要包括气相色谱法和液相色谱法。
气相色谱法（Gas Chromatography，GC）是一种基于气体载气和固定相之间相互作用的分离技术。
在气相色谱法中，样品首先通过进样器进入色谱柱，然后通过加热使样品挥发，进而与气相载气一起进入色谱柱。
在色谱柱中，样品组分与固定相发生相互作用，不同组分在固定相上停留的时间不同，从而实现分离。
最后，通过检测器检测样品组分的信号，得到各组分的峰图，并根据峰面积或峰高进行定量分析。
液相色谱法（Liquid Chromatography，LC）是一种基于液体载流相和固定相之间相互作用的分离技术。
在液相色谱法中，样品通过进样器进入色谱柱，然后通过液相载流相的流动，进入色谱柱中与固定相发生相互作用。
不同组分在固定相上停留的时间不同，从而实现分离。
最后，通过检测器检测样品组分的信号，得到各组分的峰图，并根据峰面积或峰高进行定量分析。
在色谱法操作中，除了气相色谱法和液相色谱法，还有一些其他的操作形式。
例如，高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种在高压下进行的液相色谱法，具有更高的分离效率和更快的分析速度。
离子色谱法（Ion Chromatography，IC）是一种专门用于分析离子的色谱法，可以对水中的离子进行准确的分析。
毛细管电泳色谱法（Capillary Electrophoresis，CE）是一种基于电场作用下的离子迁移速度差异实现分离的色谱法，具有高分离效率和快速分析速度。
色谱法操作形式的选择取决于样品的性质、分析目的和仪器设备的可用性。
不同的操作形式在分离效率、分析速度、灵敏度等方面有所差异，因此需要根据具体情况选择最适合的操作形式。
色谱测定法
纸色谱法 纸色谱法系以纸为载体, 纸色谱法系以纸为载体,以纸上所含水 分或其他物质为固定相, 分或其他物质为固定相,用展开剂进行展 开的分配色谱.供试品经展开后, 开的分配色谱.供试品经展开后,可用比 移值(R 表示其各组成成分的位置 表示其各组成成分的位置(比移值 移值 f)表示其各组成成分的位置 比移值 =原点中心至斑点中心的距离/原点中心 原点中心至斑点中心的距离/ 原点中心至斑点中心的距离 至展开剂前沿的距离). 至展开剂前沿的距离 .但由于影响比移 值的因素较多, 值的因素较多,因而一般采用在相同实验 条件下与对照物质对比以确定其异同. 条件下与对照物质对比以确定其异同.
色谱法又可根据分离方法分为:纸色谱法, 色谱法又可根据分离方法分为:纸色谱法, 薄层色谱法,柱色谱法,气相色谱法, 薄层色谱法,柱色谱法,气相色谱法,高 效液相色谱法等. 效液相色谱法等.所用溶剂应与供试品不 起化学反应,纯度要求较高. 起化学反应,纯度要求较高.分析时的温 除气相色谱法或另有规定外, 度,除气相色谱法或另有规定外,系指在 室温操作.分离后各成分的检出, 室温操作.分离后各成分的检出,应采用 各品种项下所规定的方法. 各品种项下所规定的方法.
2.操作方法 . (1) 下行法将供试品溶解于适宜的溶剂中 制成一定浓度的溶液. 制成一定浓度的溶液.用定量毛细管或 微量注射器吸取溶液,点于点样基线上, 微量注射器吸取溶液,点于点样基线上, 溶液宜分次点加,每次点加后, 溶液宜分次点加,每次点加后,俟其自 然干燥,低温烘干或经温热气流吹干, 然干燥,低温烘干或经温热气流吹干, 样点直径为2～4mm,点间距离约为 样点直径为 ～ , 1.5～2.0cm,样点通常应为圆形. ～ ,样点通常应为圆形.
然后添加展开剂使浸没溶剂槽内的色谱 滤纸, 滤纸,展开剂即经毛细管作用沿色谱滤 纸移动进行展开,展开至规定的距离后, 纸移动进行展开,展开至规定的距离后, 取出色谱滤纸,标明展开剂前沿位置, 取出色谱滤纸,标明展开剂前沿位置, 俟展开剂挥散后按规定方法检出色谱斑 点.
色谱检测技术的原理和应用
色谱检测技术的原理和应用色谱检测技术的概述•色谱检测技术是一种用于分离和分析复杂混合物的方法。
•色谱检测技术广泛应用于食品检测、药物分析、环境监测等领域。
•色谱检测技术的原理基于样品组分在固定相和流动相之间的相互作用。
色谱检测技术的原理色谱检测技术的原理可概括为以下几个步骤：1.样品注入：将待分析的样品通过自动进样器注入色谱柱中。
2.分离：样品在固定相中发生分离，不同组分根据其相互作用力的不同以不同速度通过柱。
3.检测：分离后的化合物通过检测器进行检测以得到各个化合物的信号。
4.信号处理：检测器输出的信号经过处理后转化为色谱图，供研究人员进行分析和解释。
色谱检测技术的常用方法色谱检测技术有多种常用方法，以下为几种常见的色谱检测技术：高效液相色谱（HPLC）•高效液相色谱（HPLC）是一种在液体流动相中进行的色谱检测技术。
•HPLC广泛应用于药物分析、食品检测等领域，主要用于分析极小量的物质。
气相色谱（GC）•气相色谱（GC）是一种在气体流动相中进行的色谱检测技术。
•GC主要用于分析揮发性或可气化的化合物，如石油产品、环境样品等。
液相色谱（LC）•液相色谱（LC）是一种将液体流动相和固定相结合的色谱检测技术。
•LC广泛应用于食品、制药、环保等领域，可用于分析各种复杂的混合物。
毛细管电泳（CE）•毛细管电泳（CE）是一种基于电动力的色谱检测技术。
•CE适用于分析离子、中性和极性化合物，其灵敏度和分辨率较高。
色谱检测技术的应用色谱检测技术在许多领域中得到了广泛的应用，以下是几个常见的应用案例：食品检测•色谱检测技术被广泛应用于食品检测中，用于检测食品中的残留农药、重金属等有害物质。
•色谱检测技术可以帮助确保食品安全，保护人们的健康。
药物分析•色谱检测技术在药物分析中起着重要的作用，帮助研究人员确定药物的成分和纯度。
•色谱检测技术可以用于药物代谢研究、药物稳定性研究等。
环境监测•色谱检测技术被广泛应用于环境监测中，用于检测空气、水体和土壤中的污染物。
色谱法概论PPT课件
能。
色谱法与其他技术的联用
色谱-质谱联用（GC-MS, LC-MS）
通过将色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合，可实现对复杂样品中目标化合物 的定性和定量分析，广泛应用于药物代谢、环境监测等领域。
色谱-光谱联用（GC-IR, LC-UV/Vis）
色谱与光谱技术的联用可以提供更丰富的化合物结构和组成信息，有助于深入了解化合 物的性质和行为。
实验材料
确保色谱柱、试剂、溶 剂等材料的质量和纯度，
以满足实验要求。
实验设备
检查色谱仪、检测器、 注射器等设备的运行状 况，确保实验过程中设
备正常工作。
实验设计
根据实验目的和要求， 设计合理的色谱条件和
实验方案。
实验安全
注意实验过程中的安全 问题，如使用有毒有害
试剂时的防护措施。
实验操作步骤
色谱柱安装与条件设置
数据整理
整理实验过程中记录的数据，包括 色谱图、峰面积等。
结果分析
对实验结果进行深入分析，探究可 能的原因和影响因素。
03
02
结果判断
根据实验目的和要求，判断实验结 果是否符合预期。
结论总结
总结实验结果，得出结论，并提出 进一步改进和完善的建议。
04
04 色谱法在分析化学中的应 用
在食品分析中的应用
食品成分分析
色谱法用于分离和检测食品中的营养 成分，如脂肪、蛋白质、碳水化合物、 维生素和矿物质等，以确保食品质量 和安全。
食品添加剂分析
食品污染物分析
色谱法用于检测食品中的有害物质， 如农药残留、重金属、霉菌毒素等， 以防止食品污染和保障食品安全。
色谱法用于检测食品中添加的防腐剂、 色素、香料等成分，以控制食品添加 剂的使用量，保障消费者健康。
《色谱法分析法 》课件
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汇报人：
色谱法分析法的优 缺点
优点
分离效果好：能够 将复杂混合物中的 组分分离出来
灵敏度高：能够检 测到微量的组分
应用广泛：适用于 各种样品的分析， 包括气体、液体和 固体
自动化程度高：可 以实现自动化操作 ，提高工作效率
缺点
样品处理复杂，需要专业的技术人员进行操作 分析时间长，需要等待较长时间才能得到结果 仪器设备昂贵，需要投入较大的资金进行购买和维护 操作环境要求高，需要保持实验室的洁净和温度稳定
评估指标：分离度、分辨率、 峰形、保留时间等
分离度：衡量两个相邻峰的 分离程度，越高越好
分辨率：衡量色谱图中两个 相邻谱峰的形状， 越尖锐越好
保留时间：衡量物质在色谱 柱中的保留时间，越短越好
色谱法分析法的应 用
在食品分析中的应用
检测食品中的添加 剂和污染物
鉴别食品中的营养 成分和功能成分
分离原理
色谱法分析法是 一种分离混合物 的方法
原理：利用不同物 质在固定相和流动 相中的分配系数不 同，实现分离
色谱法分析法可 以分为气相色谱 法和液相色谱法
气相色谱法适用 于挥发性物质， 液相色谱法适用 于非挥发性物质
检测原理
色谱法分析法是一种分离和检测混合物的方法 原理：利用不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，实现分离 检测方法：通过检测器检测出各组分的信号，进行定性和定量分析 应用：广泛应用于化学、生物、医药等领域
和杂质
生物技术：检 测生物样品中 的蛋白质、核 酸等生物大分
子
法医学：检测 生物样品中的 毒品、毒物等
色谱法分析法的实 验操作
实验前的准备
样品准备：样品处理、样品 稀释等
色谱法(Chromatography)
色谱法（C h r o m a t o g r a p h y）引论§1概述一、色谱法色谱法早在二十世纪初由俄国科学家建立，并用来分离植物色素。
后来不仅用于分离有色物质，还用来分离无色物质，并出现了各种类型的色谱法。
许多气体、液体和固体样品都能找到合适的色谱法进行分离和分析。
目前色谱法已广泛应用于许多领域，成为十分重要的分离分析手段。
各种色谱法共同的特点是具备两个相，有一相不动，称为固定相；另一相携带样品移动，称为流动相。
当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上有差异，与固定相相互作用的类型、强弱就会有差异，因此在同一推动力下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。
现以填充柱内进行的吸附色谱为例来说明色谱分离过程。
色谱柱内紧密而均匀的固定相，流动相则连续不断地流经其间，将样品一次性注入色谱柱后，各组分就被固定相所吸附，流动相不断地流入色谱柱。
当流动相流过组分时，已被吸附在固定相上的样品分子又溶解于流动相（此过程称为解吸）而随流动相向前移动，已解吸的组分遇到新的吸附剂颗粒，又再次被吸附。
如此在色谱柱内不断地发生吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程。
不同组分其分子结构不同，在固定相上的吸附力也不同，随流动相向前移动的速度也就不同，最后从色谱柱内流出的时间不同，分别用容器盛接，就达到了分离的目的。
各组分间的性质差异即使很小，通过改进措施，如加长色谱柱，也可将它们分离。
二、色谱法分类1．按两相状态分类流动相为气体的色谱法称为“气相色谱法”（GC），其中固定相是固体吸附剂的称为气固色谱（GSC），固定相为液体的称为气液色谱（GLC）。
流动相为液体的色谱法称为“液相色谱法”（LC），同上，液相色谱法也可分成液固色谱（LSC）和液液色谱（LLC）。
2．按分离机理分类根据组分与固定相的作用，可分为：吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法等。
色谱检测方法
色谱检测方法
色谱检测是一种分离和测定混合物中化学成分含量的方法。
它广泛应用于生物化学、药理学、环境科学、食品工业等领域。
色谱检测方法包括气相色谱、液相色谱、毛细管电泳等。
气相色谱是一种用于分离气态和挥发性液态化合物的方法。
其原理是在一段具有不同亲和力的填料中，通过将化合物沿着填料移动，并且吸附和解吸作用达到分离的目的。
行程越短，分离越快，因为吸附能力更强，但分离也更复杂。
液相色谱是一种将混合物中的组分沿着液态识别剂分离的方法。
与气相色谱相比，液相色谱分离能力更强，但速度更慢。
液相色谱可以通过改变识别剂、改变分离柱的性质和选择检测器等方法，实现不同化合物的分离。
毛细管电泳是一种基于离子溶液中电荷移动阻力的分离和检测方法。
利用毛细管的细微尺寸，电荷移动阻力可被最大程度地发挥。
毛细管电泳具有分离能力强的优点，但是比其他色谱技术更为耗时。
色谱检测方法具有灵敏性高、分离性能优越、适用性广等优点。
在生物化学、药理学、环境科学、食品工业等领域中，色谱检测成为一个不可或缺的实验手段。
通过运用色谱检测方法，科学家可以更为准确地测定、分离、鉴定和研究化学成分。
因此，不同类型的色谱检测方法在研究中的应用越来越广泛。
[工学]食品中有机酸的分离与测定
二、试剂 草酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、 延胡索酸所有溶液均用重蒸馏水配制。用 10mmol/L磷酸盐缓冲溶液配制各分析样 品浓度为0.01mol/L， 4℃下保存不超过 3d,使用之前应用分离缓冲溶液稀释到所需 浓度。电泳缓冲溶液为pH6.5的 10mmol/LPBS,其中添加溴化十六烷基溴 化吡啶0.4mmol/L和β-CD15.0mmol/L. 所有溶液在电泳之前均需要用0.25um醋酸 纤维膜过滤。
六、结果计算 将同一色谱条件下得到的样品色谱图和 有机酸标准溶液色谱图进行对照，根据色 谱峰的保留时间定性。必要时可在样液中 加入一定量的某种有机酸标准液以增加峰 高方法来进行定性。根据峰面积或峰高进 行定量，再根据样品稀释倍数即可求出样 品中各有机酸的含量。 图7-3是上述色谱条件下的桔子提取液色谱 图。
三、试剂 离了交换树脂:使用阳离了交换树脂 AmberLite(一种人工合成的酚甲醛离子交 换树脂)CG120、阴离了交换树脂 AmberLite CG4B ; AmberLite IRA410。 四、仪器 气相色谱仪:装有氢火焰离了检测器，程序 升温装置。 色谱柱:填充10%SiLicone Dc560 （6080日）的3mm X 2m不锈钢柱或玻璃柱。
五 操作方法 1 样品处理 (1) 固体样品:称取5-10g样品(视有机酸含量而 定)于加有石英砂的研钵中研碎，用25 mL80% 乙醇转移到50mL锥形瓶中，于750C水浴中加热 浸提15min，在20000r/min下离心20min,沉淀 用10mL80%乙醇洗涤两次，离心分离后，合并 上清液并定容50mL。取5mL上清液于蒸发皿中， 在75℃水浴上蒸干，残渣加5mL流动相溶解，离 心，上清液经0.45um滤膜在真空下超滤后进样。 (2)液体样品:吸取5mL样液(视有机酸含量酌情 减)于蒸发皿中，在75 ℃ 水浴上蒸干，残渣加 5mL 80%乙醇溶解，离心，上清液水浴蒸十， 残渣加5mL流动相溶解，离心，上清液经 0.45um滤膜于真空下超滤后进样。
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塔板数的计算公式：
n5.54( tR )2 16(tR)2
w1/2
w
式中：tR组分的保留时间；W1/2组分色谱峰的半宽度； W为色谱峰的峰底宽度。
柱子的塔板数与峰宽和保留时间有关。保留时间越大， 峰越窄，塔板数就越多。柱效能也就越高。
有效塔板数 n有效，有效塔板高度 H有效
A＝2λdp 固定相的不规则性， 使组分分子路径不同
B＝2γD
浓度梯度引起组分分 子向两边纵向扩散
Cu — 传质阻力项
组分分子达到分配平衡 的速率引起
Ｃ＝Ｃm +Cs
Cm —流动相传质阻力系数 Cs —固定项传质阻力系数
H A BCu u
影响柱效的因素： ●固定相填充均匀度 ●固定相颗粒大小 ●固定相厚度 ●流动相的状态 ●流动相流速
1952年 Nobel 化学奖
分配色谱
2、色谱分析法分类
（1）按两相状态分类
气相色谱法 色 谱 法
液相色谱法
气-液色谱法
气-固色谱法 液-固色谱法 液-液色谱法
（2）按操作形式分类 柱色谱、纸色谱、薄层色谱
（3）按分离原理分类
吸附色谱：组分的吸附能力不同 分配色谱：组分的分配系数或溶解度不同 离子交换色谱：组分对离子交换剂亲和力不同 凝胶色谱：组分分子的大小和形状不同
色Hale Waihona Puke 过程流动相 固定相●●●●●● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ●●●●●● ●●●●●●
●●●●●● ●●●●●●
●●● ●●●
H ●●●●●●● ●● ●● ●
●●●●●●
1
2
3
4
色谱分析法色谱法概述标准版资料
填液充相柱色色谱¨谱：:流动气相固试为色液谱样体和（气混也液称色合为谱淋，物洗两液者的）的。分分离机离理不过同。程也就是试样中各组分 固气定相液色对谱在试分样离称中过各程之组是分在为的色溶谱色解柱能内谱力完的成分不的同。离。 柱中的两相间不断进行着的分
固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液色谱的固定相: 由 担体和固定液所组成。
固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 气固色谱的分离机理:
吸附与脱附的不断重复过程； 气液色谱的分离机理：
气液两相间的反复多次分配过程。
气相色谱分离过程
©当 试 样 由 载 气 携 带 进 入 色 谱
柱与固定相接触时，被固定相
其他色谱方法
薄层色谱和纸色谱： 比较简单的色谱方法
凝胶色谱法: 超临界色谱: 高效毛细管电泳:
九十年代快速发展、 特别适合生物试样分析分 离的高效分析仪器。
3.气相色谱法的特点
（1）分离效率高：
复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。
（2） 灵敏度高：
可以检测出-1(10-6)级甚至-1(10-9)级的物质量.
色谱分析法色谱法概述
第一节 色谱法概述
一、 色谱法的特点、分类和作用
二、气相色谱分离过程
1.气相色谱分离过程
2.分配系数 K
一、 色谱法的特点、分类和作用
俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置：
试样一定色时，谱K主原要取型决于装固定置相性，质；如图技术， 比较简单的色谱方法
选择内容：
第一节 色谱法概述
第二节 气相色谱仪
第三节 色谱理论基础
第四节 气相色谱操作条件选择
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然后添加展开剂使浸没溶剂槽内的色谱 滤纸，展开剂即经毛细管作用沿色谱滤 纸移动进行展开，展开至规定的距离后， 取出色谱滤纸，标明展开剂前沿位置， 俟展开剂挥散后按规定方法检出色谱斑 点。
(2)上行法点样方法同下行法。展开缸内加入 展开剂适量，放置俟展开剂蒸气饱和后，再 下降悬钩，使色谱滤纸浸入展开剂约0.5cm， 展开剂即经毛细管作用沿色谱滤纸上升，除 另有规定外，一般展开至约15cm后，取出晾 干，按规定方法检视。
展开可以单向展开，即向一个方向进行；也 可进行双向展开，即先向一个方向展开，取 出，俟展开剂完全挥发后，将滤纸转动90°， 再用原展开剂或另一种展开剂进行展开；亦 可多次展开、连续展开或径向展开等。
高效液相色谱法 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规 定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行 分离测定的色谱方法。注入的供试品，由 流动相带入柱内，各成分在柱内被分离， 并依次进入检测器，由记录仪、积分仪或 数据处理系统记录色谱信号。 高效液相色谱仪由高压输液系统、进样 系统、分离系统、检测系统、记录系统等 五大部分组成。
离子交换色谱是利用被分离物质在离子交 换剂（树脂、凝胶）上交换能力的不同使 组分分离；常用的交换剂有不同强度的阳 离子交换剂、阴离子交换剂，流动相为水 或含有机溶剂的缓冲液。
分子排阻色谱法又称凝胶色谱法，是利 用被分离物质分子大小的不同导致在填 料上渗透程度不同使组分分离；常用的 填料有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、微孔 聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等，根据固 定相和供试品的性质选用水或有机溶剂 作为流动相。
2．操作方法 (1) 下行法将供试品溶解于适宜的溶剂中 制成一定浓度的溶液。用定量毛细管或 微量注射器吸取溶液，点于点样基线上， 溶液宜分次点加，每次点加后，俟其自 然干燥、低温烘干或经温热气流吹干， 样点直径为2～4mm，点间距离约为 1.5～2.0cm，样点通常应为圆形。
将点样后的色谱滤纸的点样端放在溶 剂槽内并用玻棒压住，使色谱滤纸通过 槽侧玻璃支持棒自然下垂，点样基线在 支持棒下数厘米处。展开前，展开缸内 用各品种项下规定的溶剂的蒸气使之饱 和，一般可在展开缸底部放一装有规定 溶剂的平皿或将浸有规定溶剂的滤纸条 附着在展开缸内壁上，放置一定时间， 俟溶剂挥发使缸内充满饱和蒸气。
1．仪器与材料 (1) 展开容器通常为圆形或长方形玻璃 缸，缸上具有磨口玻璃盖，应能密闭。 用于下行法时，盖上有孔，可插入分液 漏斗，用以加入展开剂。在近顶端有一用 支架架起的玻璃槽作为展开剂的容器，槽 内有一玻棒．用以压佳色谱滤纸；槽的两 侧各支一玻棒，用以支持色谱滤纸使其自 然下垂，避免展开剂沿色谱滤纸与溶剂槽 之间发生虹吸现象。
作为药品的鉴别时，供试品在色谱图中 所显主斑点的位置与颜色(或荧光)，应 与对照品在色谱图中所显主斑点相同。 作为药品的纯度检查时，可取一定量的 供试品，经展开后，按各品种项下的规 定，检视其所显杂质斑点的个数或呈色 深度(或荧光强度)。 作为药品的含量测定时，将主色谱斑点 剪下洗脱后，再用适宜的方法测定。
正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填 充剂有硅胶等。离子交换填充剂用于离子 交换色谱；凝胶或高分子多孔微球等填充 剂用于分子排阻色谱等；手性键合填充剂 斥于对映异构体的拆分分析。
分析前，选择适当的色谱柱和流动相，开 泵，冲洗柱子，待柱子达到平衡而且基线 平直后，用微量注射器把样品注入进样口， 流动相把试样带入色谱柱进行分离，分离后 的组分依次流入检测器的流通池，最后和洗 脱液一起排入流出物收集器。当有样品组分 流过流通池时，检测器把组分浓度转变成电 信号，经过放大，用记录器记录下来就得到 色谱图。色谱图是定性、定量和评价柱效高 低的依据。
生物药物分析测定方法
色谱测定法
色谱测定法
色谱法根据其分离原理可分为：吸附色谱 法、分配色谱法、离子交换色谱法与排阻 色谱法等。 吸附色谱法是利用被分离物质在吸附剂上 吸附能力的不同，用溶剂或气体洗脱使组 分分离；常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、 聚酰胺等有吸附活性的物质。
分配色谱是利用被分离物质在两相中分配 系数的不同使组分分离，其中一相被涂布 或键合在固体载体上，称为固定相，另一 相为液体或气体，称为流动相；常用的载 体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维 素粉等。
用于上行法时，在盖上的孔中加塞，塞 中插入玻璃悬钩，以便将点样后的色谱 滤纸挂在钩上；并除去溶剂槽和支架。 (2) 点样器 常用具支架的微量注射器或 定量毛细管，应能使点样位置正确、集 中。
(3) 色谱滤纸应质地均匀平整，具有一定机 械强度，不含影响展开效果的杂质；也不 应与所用显色剂起作用，以致影响分离和 鉴别效果，必要时可进行处理后再用。用 于下行法时，取色谱滤纸按纤维长丝方向 切成适当大小的纸条，离纸条上端适当的 距离用铅笔划一点样基线，必要时，可在 色谱滤纸下端切成锯齿形便于展开剂滴下。 用于上行法时，色谱滤纸长约25cm，宽度 则按需要而定，必要时可将色谱滤纸卷成 筒形；点样基线距底边约2. 5cm。
1．对仪器的一般要求 所用的仪器为高 效液相色谱仪。仪器应定期检定并符合有 关规定。 (1) 色谱柱 最常用的色谱柱填充剂为化 学键合硅胶。 反相色谱系统使用非极性 填充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常 用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷 镑合硅胶(如氰基硅烷键合相和氨基硅烷 键合相等)也有使用。
色谱法又可根据分离方法分为：纸色谱法、 薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高 效液相色谱法等。所用溶剂应与供试品不 起化学反应，纯度要求较高。分析时的温 度，除气相色谱法或另有规定外，系指在 室温操作。分离后各成分的检出，应采用 各品种项下所规定的方法。
纸色谱法
纸色谱法系以纸为载体，以纸上所含水 分或其他物质为固定相，用展开剂进行展 开的分配色谱。供试品经展开后，可用比 移值(Rf)表示其各组成成分的位置(比移值 =原点中心至斑点中心的距离／原点中心 至展开剂前沿的距离)。但由于影响比移 值的因素较多，因而一般采用在相同实验 条件下与对照物质对比以确定其异同。