痰液脱落细胞学检查
痰和呼吸道分泌物标本采集规范
痰和呼吸道分泌物标本采集规范一、微生物学【概述】痰标本采集方便，无创伤性，临床应用广泛，对病原学诊断具有重要价值。
痰标本的正确采集、处理是临床细菌检验成功的关键，标本采集与处理的规范化是准确、及时向临床提供重要的感染信息的基础。
目前咳痰标本仍是最常用、最简单的采样方法，必须指导或辅助患者深咳痰，及时送检，并通过镜检筛选合格标本。
损伤性采样技术仅在选择病例(抗生素治疗反应不佳；可疑特殊病原体感染，如寄生虫、痰菌阴性肺结核、混合感染或二重感染等)使用。
【操作方法】1、咳痰标本采集要求患者在清晨用药前留取，因为晨痰量多，且含菌量也多。
留取前刷牙，用清水漱口3次，以除去口腔内大部分杂菌，之后用力咳痰。
咳痰较困难者可用3％～5％氯化钠溶液雾化蒸气吸入进行导痰；对咳嗽乏力或昏迷患者，可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物；对不能咳痰的婴幼儿或病重患者，如须采集痰标本做结核杆菌培养，可插胃管抽吸胃液标本送检，也可留取12～24h痰液，经漂浮浓集后检查，以提高结核杆菌检出率。
若做细菌或真菌培养，痰液必须盛于无菌容器内送检。
观察痰量应留取24h痰液，必要时在容器内加入少许防腐剂。
2、咽拭子采样上呼吸道感染可通过咽拭子获取标本。
标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。
用咽拭子采集标本时应小心、认真、准确，避免触及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。
如咽拭子标本发现致病菌，如肺炎链球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等，且数量较多时，提示有该菌所致感染存在。
3、纤维支气管镜抽吸采样以利多卡因做咽喉部局部麻醉后，插入纤维支气管镜(纤支镜)，达到肺炎病灶引流支气管内，纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶或试管及负压吸引装置，用负压将下呼吸道分泌物经纤支镜吸人标本采集瓶内送检。
气管切开或气管插管患者也可用普通无菌吸痰管直接经人工气道插至大约叶支气管水平，接负压装置将痰液经吸痰管吸入标本采集瓶内。
纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物，但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染，所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体。
FISH痰脱落细胞检查诊断肺癌的价值
３ ７℃预热 的 ０ ０５ｍ ｌＬ的 Ｋ １ 渗液 ， 新 吹打 ．７ ｏ ／ Ｃ低 重 悬浮 细 胞 ，７℃ 水 浴 低 渗 ３ ｎ 期 间 吹 打 ５～６ ３ ０ｍｉ，
次 。加入 固定液 ２ｍ （ Ｅ 甲醇 ： 冰醋 酸 为 ３ １ ， 匀 ， ： ）混
规方 法 ） 。 １ ２ １ ＦＳ ． ． ＩＨ检 测 １ Ｌ中痰 液 加 入 ５—１ Ｌ ０ｍ ０ｍ 的痰 液 消化 液 ， 匀 ， 置 １ ２ ｉ ， ５ ０ｒｍｉ 摇 放 ０～ ０ ｍ ｎ １ ０ ｎ ／ 离心 １ ｉ 去上清 ， ０ｍ ｎ后 加入 ５ｍ Ｌ在 ３ ７℃预热 的胶
２ ）与 常规方 法 比较 ， ５ ， Ｐ分 别 ＝０ ０７ ０ ００ 三 种 ．０ 、． １ ； 方法判 断不 同分期 患者 的特异 性无 统计 学差 异 。
析。
１３ 统 计 学方法 ．
采 用 Ｓ Ｓ１ ． Ｐ Ｓ２ ０统 计 软 件 ， 实验
数据 以百分 比表 示 ， 用 独 立样 本 检 验 检 验 ， 采
Ｐ ．５ 差异有 统计学 意义 。 ≤Ｏ ０ 为
２ 结果
的玻片加热至 ５ ６℃。在片子上将 ｌ 的混合探 ０ 针加到一个反应区， 将盖玻片立刻覆盖反应区， 使探 针 溶液 弥漫整 个 覆 盖 区。用 树 胶封 固 ， 封 好 的 片 将
表 １ ０例正常人痰脱落细胞染色体数 目畸变率 （ ２ ％）
探针
０ 个信号点
Ｏ
Hale Waihona Puke 鱼堡堕变 旦１ 个信 号点 ３ 个以上信号点
３． ９ ４． Ｏ ４． ５ ３． ８ ４． ５ ４． ０ ２． ８ ５． ０
痰液脱落细胞学检查
痰液脱落细胞学检查肺癌是发病率较高的恶性肿瘤，其诊断方法主要采用胸部X线、CT技术、纤维支气管镜及痰液涂片细胞学检查。
其中细胞学检查最为简单、易行，患者无痛苦，可反复取材，对于肺癌的早期诊断、治疗有重要意义。
1 标本采集与制片1.1 标本采集1.1.1 自然咳痰法嘱患者反复漱口，将口内的唾液全部吐尽，深呼吸后用力咳痰，反复4～5次，咳出肺深部的痰液。
连续3天送检，以提高检查的阳性率。
1.1.2 雾化吸入咳痰法患者痰液较稠不能自然咳出，通过雾化吸入可获得较好的痰标本。
被检者尽量排尽鼻腔、口腔及咽喉部的分泌物，雾化吸入10～15min，随时将痰咳入干净的玻璃器内。
1.2 标本的制备用竹签挑取有诊断价值的痰液1ml左右置于干净的玻璃片上，然后用竹签将痰的多余的液体部分刮去，剩余粘稠痰液约0.2ml(黄豆粒大小)，用竹签慢慢铺开，涂片厚度约1～2mm，一般涂片4张。
由于痰液标本粘稠度较大，一般选用渗透力较强的固定液带湿固定20min，然后用 H-E染色或瑞-吉氏复合染色。
1.3 标本采集与制片的注意事项1.3.1 留痰的时间过去多主张在清晨，但由于晨痰在体内停留的时间较长，细胞往往发生不同程度的退变；其次，老年人尤其是有慢性咽炎的人，清晨的第一口痰往往是上呼吸道的分泌物，使诊断的准确性降低。
因此，现主张最好在早晨排痰后，留取上午8～9点钟的新鲜痰适宜。
1.3.2 送检痰液要有一定的量以供选择，一般为2～3ml为宜(2～3口痰)。
痰液的性状与阳性率有着密切的关系。
因此，挑送痰液中有价值的部分，可大大提高其阳性率。
将痰液平铺在玻璃容器中，用竹签或镊子挑送带血丝及血丝旁的痰液、灰白色痰丝，尤其是含有乳白色颗粒状物呈螺旋卷曲状的痰丝。
选材时注意观察有无脱落的组织小块。
1.3.3 如果痰液较稀薄，可用痰液细胞浓集法。
可将痰液直接咳人盛有50％乙醇40～60ml瓶中，固定半小时后，用电磁搅拌打碎，然后离心沉淀，取沉淀物涂片。
临床医学检验技术(士)：脱落细胞检查考试资料试题二
临床医学检验技术(士)：脱落细胞检查考试资料试题二1、单选痰液脱落细胞学涂片上，不符合黏液柱状上皮细胞的形态为（）A.圆形B.卵圆形C.圆锥形D.圆柱状E.月牙形正确答案：A参考解析：黏液柱状上皮细胞：细胞（江南博哥）肥大，呈卵圆形、圆锥形或圆柱形。
胞核卵圆形，居底部，其大小、染色和纤毛柱状上皮细胞相似。
胞质丰富，含大量黏液，着色浅淡而透明。
有时可见胞质内有巨大黏液空泡，核被挤压至底部，呈月牙形。
2、单选胸腔恶性积液最常见的疾病是（）A.乳腺癌B.原发性周围型肺癌C.胃肠癌D.卵巢癌E.肺癌正确答案：B参考解析：①肺癌：是导致胸水最常见的恶性肿瘤。
②乳腺癌：为导致女性胸水恶性肿瘤之一。
③胃肠癌：主要出现于腹水中，多数是分泌黏液的腺癌。
④卵巢癌：为女性腹水的常见肿瘤。
以浆液性乳头状囊腺癌和黏液性囊腺癌多见。
⑤胸腔恶性积液最常见的疾病是原发性周围型肺癌。
3、单选最能反映雌激素水平的细胞是（）A.表层细胞B.基底层细胞C.中层细胞D.纤毛柱状上皮细胞E.储备细胞正确答案：A参考解析：月经周期中阴道上皮变化，主要表现在表层角化前和角化细胞所占比率上的变化。
表层细胞最能反映雌激素水平。
4、单选在女性生殖器中，易发生腺癌和鳞癌的部位是（）A.卵巢B.外阴C.阴道D.子宫颈E.子宫内膜正确答案：D参考解析：在女性生殖器中，易发生腺癌和鳞癌的部位是子宫颈。
5、单选在脱落细胞涂片中，可以发现同类相食现象，与下列相关的是（）A.影细胞B.鸟眼细胞C.印戒细胞D.多核上皮细胞E.类上皮细胞正确答案：B参考解析：癌细胞胞质内常见吞噬的异物。
如血细胞、细胞碎片等。
偶见胞质内封入另一个癌细胞，称为封人细胞，也称同类相食现象，因形状如鸟眼，又称鸟眼细胞。
6、单选进行脱落细胞学检查时，可作为测定其他细胞大小的“标尺”的是（）A.淋巴细胞或红细胞B.粒细胞C.上皮细胞D.嗜酸细胞E.组织细胞正确答案：A参考解析：进行脱落细胞学检查时，因红细胞或淋巴细胞大小较恒定，因此可作为测定其他细胞大小的"标尺"。
痰液脱落细胞检查培训课件
痰液脱落细胞检查
4
二、方法学
（一）标本准备 1、咳痰 ❖ ⑴建议用晨痰，涮牙、嗽口后进行，深咳。 ❖ ⑵有条件者可采用雾化吸入后诱咳采痰。 ❖ ⑶纤维支气管镜检后咳取痰液能提高阳性率。
痰液脱落细胞检查
5
2、采集
❖ ⑴一次咳痰建议留取3-5口痰液。
❖ 以上评估可写入报告单内容中，以将标本满 意度信息反馈给临床医师及患者。
痰液脱落细胞检查
26
脱落细胞检查的基本知识
第一节 细胞诊断学的基本概念
一、细胞增生活跃
细胞体积增大，核明显增大，核染色质增多，颗粒 增粗，核仁增大增多，核浆比例失常，胞浆蓝染（ 巴氏），可伴核分裂像。
二、组织修复细胞
组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞。 特征：细胞多成片出现，似合体细胞，排列规则；细胞稍 增大，胞核也增大，核不深染，胞浆尚丰富，深染；核仁明显 增大或增多；可能出现核分裂像 。
及时，涂片在空气中干燥后，细胞的形态特征将明 显受损，所以及时的固定非常重要。
一般要求制片后立即固定，通常＜5秒钟。 固定时间涂片＞15分钟，细胞蜡块＞30分钟。 固定液：为常规固定液。
垂直快速放入或自由落体放入固定液，否则会出现细胞 堆积而引起皱折现象。
必须注意固定液的及时更换。 固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间的交叉污染。
➢ 气味:正常无特殊气味,
血腥味(血性痰),恶臭(合并厌氧感染)， 特殊臭味(晚期肺癌)
痰液脱落细胞检查
11
（2）取样：选择性取有价值的部分
用镊子、竹签等无吸水性材料夹取,不主张 用玻璃制品、棉签等取样。
原则上优先选取以下部位：
肺癌诊断的实验室检查方法
肺癌诊断的实验室检查方法一：影像检查 1．胸部X线检查是最基本的检查方法，在正侧位片中可以显示1cm以上的结节影，200ml以上胸水及肺门纵隔肿大的淋巴结。
2．CT 注射造影剂后血管强...一：影像检查1．胸部X线检查是最基本的检查方法，在正侧位片中可以显示1cm以上的结节影，200ml以上胸水及肺门纵隔肿大的淋巴结。
2．CT 注射造影剂后血管强化可与周围组织区别。
可清楚地显示病灶和血管、周围组织的关系能显示病灶对周围组织的侵犯程度。
显示纵隔和肺门L结肿大，有组于助于分期。
近年螺旋CT可显示肺内<5mm的小结节3．MRI对肺内组织分辨率并不比CT强。
但能区分软组织及周围血管影，对明确纵隔L 结有意义。
4．正电子发射计算机断层显像（PET）能检测出形态学改变之前肿瘤的异常改变，有利于肿瘤的早期诊断，转移和复发.分期和准确的疗效判定。
5．骨γ闪烁显像敏感性为90％，判定肿瘤是否有骨转移。
二：痰细胞学检查是肺癌简便有效的早期诊断方法。
提供组织类型。
阳性率：70－80％6.纤维支气管镜是诊断肺癌的重要方法。
通过活检、毛刷、冲洗等方式，对可见病变的组织学诊断可达71％～94％。
对中央型肺癌诊断有重大意义。
周围型可通过活检。
7.纵隔镜是检查纵隔淋巴结是否转移的有效手段。
8.胸腔镜可用于肺癌的诊断和分期。
对胸膜病变可行活检。
9.B超用于了解肝脏、肾上腺、腹膜后淋巴结有无转移。
可鉴别胸水或胸膜增厚。
10.组织病理检查a支气管镜， b 颈L结，锁骨L结活检。
c肺经肿块穿刺术三：肺癌标记物11.组织多肽抗原TPA, CEA12. 鳞状细胞癌相关抗原（SU-Ag）｝认为对非小细胞肺癌有意义。
13.细胞角质蛋白21－1片断（CYFRA21-1）14.神经系统特异性烯醇化酶（NSE）, 肌酸磷酸肌酶同工酶BB(COK-BB)和胃泌肽（GRPC）等对小细胞肺癌的诊断有帮助。
目前未发现特异性血清肺癌标记物。
肺癌是全球最常见、发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，90%以上的肺癌是由于主动吸烟或被动吸烟所致。
FISH检测痰脱落细胞3、8、9、17染色体异常情况,研究肺癌诊断新手段
FISH检测痰脱落细胞3、8、9、17染色体异常情况，研究肺癌诊断新手段目的：应用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术对痰脱落细胞染色体异常情况进行分析，探讨FISH辅助诊断肺癌的可行性和有效性。
方法：选择2014年6月-2015年6月本院收治的疑似肺癌患者30例作为研究对象，采用3、8、9、17号染色体着丝粒探针对其痰脱落细胞进行FISH检测并进行痰脱落细胞学检查。
结果：肺癌确诊患者痰脱落细胞中3、8、9、17号染色体畸变阳性率分别为41.67%、45.83%、58.33%、41.67%；FISH检测和痰脱落细胞学检查的敏感度分别为83.33%和20.83%，特异性分别为66.67%和100%，诊断符合率分别为80.00%和36.67%，FISH检测敏感度和诊断符合率均高于痰脱落细胞学检查，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。
结论：肺癌的发生发展与染色体畸变有关，FISH检查可明显提高肺癌诊断准确率，可作为肺癌诊断新手段。
肺癌是当今世界上最常见的威胁人类生命健康的恶性肿瘤[1]。
近年来由于女性吸烟人群数量的逐渐增加，肺癌总发病率也随之显著增加[2]。
据相关统计学结果表明，肺癌的发病率和死亡率均占我国大多数城市恶性肿瘤的首位。
影像学检查如胸部X射线、CT检查、肺穿刺活检，支气管镜检查和痰脱落细胞学检查均是临床诊断肺癌的有效手段，MiRNA作为血清标志物也为肺癌早期诊断提供了新的研究途径[3-4]。
与其他方法相比，痰脱落细胞学检查具有取材简单、安全、患者无创伤等优点，且可以判断肿瘤的组织学类型，对肺癌的治疗有重要意义。
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术，可用于检测染色体数目和结构的异常变化，为恶性肿瘤的研究提供了新的技术支持，目前被广泛用于诊断尿路上皮癌、血液系统肿瘤以及宫颈癌等恶性肿瘤[5]。
脱落细胞学的运用范围
脱落细胞学的运用范围
脱落细胞学是一种通过分析脱落细胞（例如尿液、痰液、唾液、乳头分泌物等）来进行疾病诊断和监测的技术。
它在临床医学和研
究领域有着广泛的运用范围。
首先，脱落细胞学在癌症筛查和诊断中发挥着重要作用。
通过
分析脱落细胞，可以发现癌细胞的存在或异常细胞形态学的改变，
从而帮助早期发现癌症，提高治疗成功率。
其次，脱落细胞学也可以用于疾病监测和预后评估。
例如，对
于肾脏疾病患者，通过分析尿液中的脱落细胞可以了解肾小球滤过
膜的情况，帮助医生监测疾病进展和评估治疗效果。
此外，脱落细胞学还可以应用于感染性疾病的诊断。
通过分析
痰液中的脱落细胞，可以发现病原微生物或炎症细胞，帮助医生确
定感染性疾病的病因和严重程度。
除此之外，脱落细胞学还在生殖医学、免疫学、神经科学等领
域有着广泛的应用。
例如，通过分析女性乳头分泌物中的脱落细胞
可以进行乳腺癌筛查，通过分析唾液中的脱落细胞可以进行口腔疾
病诊断等。
总的来说，脱落细胞学在临床医学和研究领域有着广泛的应用范围，可以帮助医生进行疾病诊断、监测和预后评估，对于提高疾病治疗效果和患者生存率具有重要意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
③痰标本不能及时送检，可冷藏保存，<24H。 ④采集标本时及实验结束后，均应注意防污染 ⑤痰液稀薄可采用细胞浓集法。痰液直接咳入 50%乙醇40~60ml，固定30min，电磁 搅拌打碎，离心沉淀，取沉淀涂片。
（二）标本制备
涂片4张，湿片固定20min，H-E染 色/瑞-吉复合染色。
二、痰液正常细胞形态
从肺内咳出的痰液须经过气管、喉、咽、然 后从口腔排出，故痰液成分实际上是上、下呼吸 道、肺泡及口腔等分泌物混合组成。
1.鳞状上皮细胞 正常涂片鳞状上皮多来自口腔，主要为表 层，中层少许。
2.纤毛柱状上皮 来自鼻咽部、气管、支气管等部位。多见纤 毛柱状细胞。圆锥形，顶宽而平，表面有纤毛， 但纤毛易脱落，只残留终板。 3.杯状细胞 高柱状细胞，浆内有多量呈泡沫/空泡状黏 液。正常人少见，慢性炎症增多。 4.基底层细胞
结晶 （1）charcot-Leyden结晶：支气管哮喘、肺 吸虫 （2）胆固醇结晶：慢性肺脓肿、脓胸、慢性肺 结核、肺肿瘤 （3）胆红素结晶：肺脓肿
病原微生物 （1）寄生虫及虫卵：寄生虫病 （2）抗酸杆菌：肺结核 （3）放线菌：放线菌病 弹性纤维： 肺脓肿、肺癌
（一）标本采集 1.自然咳痰法 患者反复漱口，将口内唾液全部吐尽，深呼吸 后用力咳痰，反复4~5次，咳出肺深部痰液。连 续3天送检。 2.雾化吸入咳痰法 患者痰液粘稠不宜自然咳出，通过雾化可获得 较好痰标本。患者排尽分泌物，雾化 10~15min，随时收集标本。
采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率 采集痰液分析基本要求是： ①痰液必须是从肺部咳出，送检量2~3ml； ②痰液必须新鲜。一般检查清晨第一口痰标本 最适宜；细胞学检查以9：00~10：00AM留 取最好。
天津医科大学医学检验学院 秦毅
肺癌—发病率较高恶性肿瘤，诊断方 法主要采用胸部X线 CT 纤维支气管镜及 痰涂片。 肺部脱落细胞学检查简单、易行；患者痛苦 小；可反复取材，是肺癌早期诊断的重要方法之 一。 痰液细胞学检查阳性率为60-70%，是诊 断肺癌的主要方法之一。
一、标本采集与制片
痰液少见，支气管刷片可见。
三、痰液炎症变性细胞形态
1.纤毛柱状上皮退变 纤毛易脱落，细胞与纤毛呈横断性分离，形成 无核纤毛丛及各种形态的无纤毛核、质残体。浆 内或核内常可见一个/数个包涵体。细胞呈肿胀 退变/固缩性退变。
2.多核柱状上皮细胞 体大、呈多边形/不规则形；浆丰富、可见 纤毛；可有多个核、核小、大小一致；一般无核 仁。 3.柱状上皮乳头状增生 柱状上皮呈腺瘤样增生，层次多，形成乳头 状突起。乳头中心由较小、相互重叠细胞组成。 核小、一致、排列紧密，细胞核群周围由一圈较 宽的胞浆带。形/立方形；浆少、嗜碱性；核圆形 /卵圆形、偏位；染色质均匀，可见染色质结节 ，常成团脱落。 5.鳞状上皮化生 痰液中鳞化细胞常有核固缩。
痰液常见有形成分及临床意义 细胞
(1)红细胞 (2)白细胞 支气管扩张、肺癌、肺结核 NC增多见于化脓性感染；EC增多见于支气 管哮喘、过敏性支气管炎、肺吸虫；LC增 多见于肺结核等 (3)上皮细胞 鳞状上皮、柱状上皮、肺上皮细胞无临床 意义，增多见于呼吸系统炎症 (4)肺泡巨噬细胞 肺炎、肺淤血、肺梗死、肺出血 (5)肿瘤细胞 肺癌