巨噬细胞吞噬
巨噬细胞吞噬功能 检测指标
巨噬细胞吞噬功能检测指标
巨噬细胞的吞噬功能是其重要的免疫反应机制之一，用于摄取和消化病原微生物、细胞残骸、死亡细胞等。
以下是常用于检测巨噬细胞吞噬功能的指标：
1. 吞噬指数（Phagocytic index）：用于评估巨噬细胞吞噬能力的定量指标。
它代表了单个巨噬细胞吞噬过的颗粒数量。
2. 吞噬率（Phagocytic rate）：表示巨噬细胞吞噬某种颗粒的能力，通常以百分比形式呈现。
它反映了吞噬事件在总细胞群中的发生率。
3. 吞噬效能（Phagocytic efficiency）：衡量巨噬细胞吞噬过程中的效率，即吞噬活跃度与吞噬细胞总量的关系。
4. 黏附因子（Adhesion molecules）：这些分子介导巨噬细胞与被吞噬物颗粒的结合，对吞噬功能起着重要作用。
常用的黏附因子有CD14、CD11b等。
5. 溶酶体活性（Lysosomal activity）：巨噬细胞内的
溶酶体是吞噬过程中的关键器官，其酶活性可以反映巨噬细胞的消化能力。
这些指标可以通过多种实验方法进行测定，如流式细胞术、显微观察、免疫组化等。
评估巨噬细胞吞噬功能的变化可帮助了解免疫系统活性和疾病状态。
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
一、实验原理
巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成, 然后进入血液到达各组织内, 并进一步分化为各种巨噬细胞, 当病原微生物或其它异物侵入机体时, 能招引巨噬细胞, 而巨噬细胞又有趋化性, 能响应招引因子的招引, 产生活跃的变形运动, 主动向病原体和异物移行, 在接触到病原体和异物时, 即伸出伪足, 将之包围并内吞入胞质, 形成吞噬体, 继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合, 形成吞噬性溶酶体, 通过其中水解酶等作用下, 将病原体杀死, 消化分解, 最后将不能消化的残渣排了出细胞外。
台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂, 台盼蓝染料进入细胞, 细胞变蓝, 即为坏死。
如果细胞膜完整, 细胞不为台盼蓝染色, 则为正常细胞或凋亡细胞。
此方法对反映细胞膜的完整性, 区别坏死细胞有一定的帮助。
二、实验步骤
1. 在小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。
2．24h后注射1%鸡红细胞悬液1ml, 轻按腹部使分散。
3. 20分钟后脱颈骨处死小鼠。
4. 开腹取腹腔液（慎防小鼠血污染）。
5．腹腔液滴于载玻片上, 盖上盖玻片。
6. 显微镜观察吞噬现象。
三、实验结果
四. 结果讨论。
巨噬细胞吞噬功能检测
肿瘤
肿瘤是指机体细胞异常增生形成的肿块，巨噬细胞在肿瘤的发生和发展过程中也起着重要作用。巨噬细胞能够通过吞噬作用 清除受损或变异的细胞，防止肿瘤的形成。
当巨噬细胞吞噬功能异常时，机体对肿瘤细胞的清除能力减弱，容易引起肿瘤的发生和恶化。例如，某些肿瘤细胞能够逃逸 巨噬细胞的吞噬作用，在体内迅速增殖，形成恶性肿瘤。
巨噬细胞能够释放出生长因子等生物 活性物质，促进受损组织的修复和再 生。
参与免疫应答
巨噬细胞是机体免疫系统的重要组成 部分，能够通过吞噬、加工和呈递抗 原，激活淋巴球和抗体反应，参与免 疫应答。
吞噬作用的过程
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识别和接触
巨噬细胞通过识别被吞噬物质 的表面特征，与其接触并形成
吞噬泡。
内陷和形成吞噬泡
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巨噬细胞通过与被吞噬物 质的特异性受体结合，对 其进行吞噬。
免疫吞噬
巨噬细胞通过识别抗原， 对其进行吞噬并加工呈递， 参与免疫应答。
02 巨噬细胞吞噬功能的检测 方法
荧光染色法
总结词
荧光染色法是一种常用的巨噬细胞吞噬功能检测方法，通过荧光物质标记被吞噬的物质，在荧光显微镜下观察荧 光信号的强弱，判断巨噬细胞吞噬功能。
IL-1、IL-6和IL-10等细胞因子可以影响巨噬细胞的吞噬活性。IL-1通常促进吞 噬作用，而IL-6和IL-10则可能抑制吞噬功能。
肿瘤坏死因子（TNF）
TNF-α对巨噬细胞吞噬功能的影响较为复杂，低浓度时可促进吞噬，而高浓度 时则可能抑制。
免疫抑制剂
糖皮质激素
糖皮质激素如地塞米松、泼尼松等 是常见的免疫抑制剂，它们可以抑制 巨噬细胞的吞噬功能，这与其抗炎和 免疫抑制作用有关。
实验一 巨噬细胞吞噬功能实验
实验一巨噬细胞吞噬功能实验1、【实验原理】(1)巨噬细胞作为单核吞噬细胞系统的主要细胞，具有活跃的吞噬功能。
能清除体内抗原物质及变性的细胞，在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。
MΦ受抗原刺激后活化，可使其吞噬功能明显增强。
(2)此实验采用体内法，即：在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡红细胞30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷美蓝染色，油镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数，及观察巨噬细胞中内因被杀死而染为蓝色的鸡红细胞的形态、数目，以判断巨噬细胞中的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异免疫水平。
2、【实验步骤】（1）试验前3d，小白鼠腹腔注射6％无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠腹腔注射鸡红细胞液1ml，轻揉腹部，使红细胞在腹腔中分布均匀，利于吞噬（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用吸管取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后再滴一小滴0.03％冷美蓝溶液，盖上盖玻片。
（4）低倍镜下找到观察区域后，换高倍镜下进行观察，计数3、【实验结果】4、【结果分析】（1）如图所示，在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可以看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
（2）镜下可见吞噬细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核被染成蓝色。
(3)由于未将腹腔液和冷美蓝溶液充分混合均匀，使得视野中出现大片深染区域。
总体实验结果较好，视野中央可见清晰的吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞。
5、【注意事项】（1）涂片的薄厚要适当，否则影响计数。
（2）小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。
（3）如小鼠腹腔液过少，可注入适量生理盐水。
（4）剪开小鼠腹腔时应避免出血，否则将影响试验结果。
（5）被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化，时间过短未被吞噬，必须掌握好吞噬作用时间。
实验二双向琼脂扩散实验1、【实验原理】（1）可溶性抗原与相应抗体特异性结合，两者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下，经一定的时间，可形成肉眼可见的沉淀线/环的现象，称为沉淀反应。
巨噬细胞吞噬
巨噬细胞吞噬
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巨噬细吞噬率和吞噬指数。
吞噬率%= （吞噬鸡血红细胞巨噬细胞÷100个巨噬细胞） ×100% 吞噬指数=100个巨噬细胞中吞噬鸡血红细胞总数÷100个吞噬 鸡血红细胞巨噬细胞
巨噬细胞吞噬
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巨噬细胞吞噬
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捉拿方法:
将小白鼠放在鼠笼盖铁网上，用右手持 其尾巴向后拉，小鼠则会尽力向前蹬。 用左手拇指和食指抓住其头顶部皮肤， 然后用左手小指与手掌之间夹住其尾巴。
腹腔注射
给药方法:
小白鼠给药路径有经口给药、腹腔内注射、尾静脉 注射、皮下注射、皮内注射和肌肉注射等。咱们常 见是腹腔注射。详细方法是: 左手捉住小鼠(如前所 述)，在其腹正中线稍外侧(避开膀胱和血管)用酒精 消毒后，首先将注射针头向头部方向刺入皮下，进 针1～2mm后，再以45°角刺穿腹部肌肉而进入腹腔 (刺穿腹肌时有一落空感)。针头刺入腹腔后切勿左 右摆动，以免损伤肠管或肝脏。注意每次注入液体 量应为0.1～0.2ml／10克体重。
鸡红细胞呈椭圆形, 淡黄色, 具椭圆形细胞核。
在视野中仔细寻找巨噬细胞吞噬鸡红细胞不一 样阶段。有鸡红细胞紧贴在巨噬细胞表面；有红 细胞已个别被吞入；有巨噬细胞已吞入1个或多个 红细胞, 形成了吞噬泡。还可见有吞噬泡体积已 缩小并呈圆形, 这说明该吞噬泡已与溶酶体发生 融合, 泡内物质正在消化分解。
巨噬细胞吞噬
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单核巨噬细胞
巨噬细胞吞噬
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『试验内容和方法』
(一)标本制备
1、在试验前一天，每只小鼠腹腔注射6％淀粉肉汤(含4％ 台盼蓝)lml。
2、试验时每组取一只经上述处理小鼠，腹腔注射1％鸡红 细胞悬液lml。然后轻揉小鼠腹部，使鸡红细胞分散。 (腹腔注射时不要刺伤内脏)
巨噬细胞吞噬作用原理
巨噬细胞吞噬作用原理
巨噬细胞吞噬作用是指巨噬细胞通过将其周围的物质包裹和消化以清除异物和病原体。
巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中的重要防御机制之一。
巨噬细胞的吞噬作用原理包括以下几个步骤：
1. 辨识和粘附：当巨噬细胞接触到异物或病原体时，细胞表面的受体会将其识别为外来物质，并通过粘附结合物质的方式将其固定在细胞表面。
2. 吞噬：吞噬过程分为两个阶段。
首先，巨噬细胞通过细胞膜的膜泡形成将异物或病原体包裹起来，形成吞噬体。
然后，吞噬体与巨噬细胞内部的溶酶体融合，形成吞噬体内含物与溶酶体内消化酶相结合的消化泡。
3. 消化和杀伤：在溶酶体内，消化酶会将异物或病原体内的蛋白质、核酸和其他有机物质降解为小分子。
此外，溶酶体内还含有一些产生活性氧物质的酶，这些物质可以在消化过程中杀死微生物。
吞噬作用的启动与调控与细胞内的信号传导途径密切相关。
巨噬细胞表面的受体能够识别并与外界物质结合，并通过一系列酶促反应和信号传导分子的激活来启动吞噬作用。
这些信号传导途径包括Toll样受体、细胞磷酸酶C、蛋白激酶C等。
总之，巨噬细胞的吞噬作用通过辨识、粘附、吞噬、消化和杀
伤等过程来清除外来物质和病原体。
这是一种重要的免疫防御机制，对维护机体健康起着关键的作用。
巨噬细胞 吞噬 抗原呈递
巨噬细胞吞噬抗原呈递
巨噬细胞是机体重要的固有免疫细胞之一，具有吞噬、抗原呈递、免疫防御和炎症调节等多种功能。
它主要通过其表达的模式识别受体和病原体激活相关分子，从而吞噬病原体。
自噬是一种维持机体稳态平衡的过程，能吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。
自噬在巨噬细胞吞噬、抗原呈递、调节免疫应答和炎性反应过程中起重要作用，巨噬细胞自噬功能下降会影响其吞噬功能。
此外，巨噬细胞激活T细胞的过程也与抗原呈递密切相关。
一旦被树突状细胞激活，T 细胞将离开淋巴结，进入炎症部位，协助战斗。
而激活的巨噬细胞则会在组织中扮演“加油站”的角色，保持着T细胞被持续激活，使它们持续参与战斗。
因此，树突状细胞在淋巴结处激活初始T细胞，而激活的巨噬细胞则再刺激先前已经被激活过的T细胞。
巨噬细胞 吞噬 抗原呈递
巨噬细胞吞噬抗原呈递巨噬细胞是免疫系统中的重要成员，其功能之一是吞噬抗原并呈递给其他免疫细胞。
在这个过程中，巨噬细胞发挥着至关重要的作用。
巨噬细胞是一种专门吞噬和消化病原体、细胞废物和其他异物的细胞。
当它们遇到抗原时，它们会发出伸缩的细胞足，将抗原包围并吞噬进入细胞内。
吞噬抗原后，巨噬细胞会将其分解成小片段，并与主要组织相容性复合物(MHC)分子结合。
这些MHC-抗原复合物将被巨噬细胞表面的MHC分子呈递给其他免疫细胞，如T细胞。
通过呈递抗原，巨噬细胞起到了免疫系统中的“邮递员”作用。
巨噬细胞捕获和处理了大量的抗原，将它们呈递给T细胞。
这种呈递过程激活了T细胞，使其能够识别和攻击与抗原相关的病原体。
这是免疫系统的重要步骤，它使身体能够有效地对抗感染和疾病。
巨噬细胞吞噬抗原并呈递的过程不仅发生在感染时，还在正常的免疫监视中发挥作用。
它们通过巡视组织，吞噬异常细胞和细胞碎片，并将它们的抗原呈递给其他免疫细胞。
这种免疫监视有助于防止癌症和其他疾病的发生。
巨噬细胞吞噬抗原并呈递的过程是一个复杂而精确的过程。
它要求巨噬细胞能够识别和选择合适的抗原，并将其有效地吞噬和处理。
同时，巨噬细胞还需要将抗原正确地呈递给其他免疫细胞，以确保免疫系统能够正确地识别和攻击病原体。
巨噬细胞吞噬抗原并呈递是免疫系统中至关重要的过程，它使身体能够有效地对抗感染和疾病。
巨噬细胞通过吞噬抗原并将其呈递给其他免疫细胞，激活了免疫系统，使其能够识别和攻击与抗原相关的病原体。
这种过程不仅发生在感染时，还在正常的免疫监视中起作用，帮助防止疾病的发生。
巨噬细胞吞噬抗原并呈递的过程是一个复杂而精确的过程，它要求巨噬细胞能够识别和选择合适的抗原，并将其正确地吞噬和处理，同时将抗原正确地呈递给其他免疫细胞。
这种过程的顺利进行对于身体的健康至关重要。
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单核巨噬细胞
『实验内容和方法』 (一)标本制备 1、在实验前一天，每只小鼠腹腔注射6％淀粉肉汤(含4％
的台盼蓝)lml。 2、实验时每组取一只经上述处理的小鼠，腹腔注射1％的
鸡红细胞悬液lml。然后轻揉小鼠腹部，使鸡红细胞分 散。(腹腔注射时不要刺伤内脏) 3、20分钟后向腹腔注射0.5 ml生理盐水，轻揉小鼠腹部， 使其腹腔液稀释。3分钟后用用颈椎脱臼法处死小鼠。 4、将小鼠置于解剖盘中或卫生纸上，剪开腹腔，把内脏 推向一侧，用吸管或不装针头的注射器吸取腹腔液。 5、每人取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片， 标本便制备好了。 6、实验绘图。
『验原理』
高等动物体内存在着具有防疫功能的吞噬细胞 系统，它由粒细胞和单核细胞等白细胞构成，是 机体免疫系统的重要组成部分。巨噬细胞是体内 的一种重要的免疫细胞，具有非特异性吞噬功能， 当机体受到细菌等病原体及其它异物侵入时，巨 噬细胞将向病原体或异物游走，当接触异物时， 伸出伪足将其包围并进行内吞作用，将病原体或 异物吞入细胞，形成吞噬泡，进而初级溶酶体与 吞噬泡发生融合，将异物消化分解掉。本实验将 观察到小鼠巨噬细胞对进入其体内的鸡血红细胞 进行吞噬的情况。
『思考题』
计算巨噬细胞吞噬率和吞噬指数。
吞噬率%= （吞噬鸡血红细胞的巨噬细胞÷100个巨噬细胞） ×100% 吞噬指数=100个巨噬细胞中吞噬鸡血红细胞的总数÷100个吞 噬鸡血红细胞的巨噬细胞
(二)观察
巨噬细胞体积较大，呈圆形或不规则形，表面 具有多个突起(伪足)，胞质中含有数量不等、大 小不一的蓝色颗粒，它们是细胞吞噬含台盼蓝的 淀粉肉汤后形成的吞噬体；
鸡红细胞呈椭圆形，淡黄色，具椭圆形的细胞 核。
在视野中仔细寻找巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不 同阶段。有的鸡红细胞紧贴在巨噬细胞表面；有 的红细胞已部分被吞入；有的巨噬细胞已吞入1个 或多个红细胞，形成了吞噬泡。还可见有的吞噬 泡体积已缩小并呈圆形，这说明该吞噬泡已与溶 酶体发生融合，泡内的物质正在消化分解。
捉拿方法：
将小白鼠放在鼠笼盖铁网上，用右手持 其尾巴向后拉，小鼠则会尽力向前蹬。 用左手的拇指和食指抓住其头顶部皮肤， 然后用左手小指与手掌之间夹住其尾巴。
腹腔注射
给药方法：
小白鼠的给药途径有经口给药、腹腔内注射、尾静 脉注射、皮下注射、皮内注射和肌肉注射等。我们 常用的是腹腔注射。具体方法是：左手捉住小鼠(如 前所述)，在其腹正中线稍外侧(避开膀胱和血管)用 酒精消毒后，首先将注射针头向头部方向刺入皮下， 进针1～2mm后，再以45°角刺穿腹部肌肉而进入腹 腔(刺穿腹肌时有一落空感)。针头刺入腹腔后切勿 左右摆动，以免损伤肠管或肝脏。注意每次注入的 液体量应为0.1～0.2ml／10克体重。