人感染H7N9禽流感病毒病原学特点及实验室检测要求
人感染H7N9采样方法及实验室检测策略
采集鼻咽拭子注意事项
• 1、采样时用干拭子采，不能蘸采样液，因为采样 液中有抗菌素，防止过敏。
• 2、采样液平时保存在-20℃或-70℃，采样前融化 到4℃。
• 3、采样液颜色呈紫色时失效不能用了。
人感染H7N9禽流感病毒鼻咽拭子标本 采集方法（2）
• 三、标本运送：
• • 新鲜的临床采集标本应在4℃条件下随样品送检单24小时
（二）标本转送和检测
• 1.H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染 的病原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理。病 例的临床标本采集后，县级疾病预防控制机构和病例收治 的医疗机构要密切配合，按照生物安全的相关规定进行包 装，在24 小时内送到当地流感监测网络实验室进行检测。
• 2.当地流感监测网络实验室收到标本后24 小时内，立即对 呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引物、H5、H7亚型 的检测。
内运送至市CDC流感检测实验室。未能24小时内送至实验 室的，应置-70℃或以下保存；冻存的标本应在冻存条件 下，低温送至实验室。
• 四、采样时的生物安全防护：
• 采样时应带口罩，穿隔离衣，带一次性手套及帽子。若在 现场进行快速检测，应将现场用过的所有废物带回销毁。
谢谢，祝大家工作顺利！
• 若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测 阳性时，应当于24小时内将其中2管呼吸道相关原始标本 分别送省级疾控中心流感网络实验室和国家具备相应生物安全条件的网络实验室可开展病毒 分离，并将分离的毒株按要求及时送国家流感中 心。
• 3.若当地流感监测网络实验室检测结果为甲型流 感和乙型流感通用引物均阴性时，应当立即将1管 原始呼吸道标本送省级疾控中心。省级疾控中心 收到标本后，应当立即对其中1管进行SARS 、新 型冠状病毒等相关病原体的检测，另1管送国家流 感中心。
H7N9禽流感病毒实验室检测
人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤 其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清 以及间隔2-4周的恢复期血清。如病人死亡， 应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体 解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组 织）标本。医疗机构采集的呼吸道标本每份不 少于3ml。血清标本每份分为2管，每管不少 于0.5ml。
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人感染H7N9禽流感强化监测实施方案
.严重急性呼吸道感染（SARI）病例
（1）5岁以上儿童及成人。 新收入院患者具有以下4项临床表现： ①急性起病； ②腋下体温≥38℃； ③咳嗽或咽痛； ④气促（呼吸频率≥25次/分钟）或呼吸困难 正在住院治疗的患者如出现上述4项临床表现，也视 为严重急性呼吸道感染病例。
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相关技术文件
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
标本采集 为进行病例诊断，医疗机构应尽早采集病人的 相关临床样本。采集的临床标本包括病人的上 呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物 、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道标本（如气管 吸取物、肺洗液、肺组织标本）和血清标本等 。
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
对人感染H7N9禽流感确诊病例可能暴露的禽 类饲养或交易等场所，由疾控机构采集禽类粪 便、笼具涂拭标本和环境污水等标本，技术要 求参考《职业暴露人群血清学和环境高致病性 禽流感监测方案（2011年版）》。（ /jkzt/crb/rgrgzbxqlg_5 295/rgrglgyh/）
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
人感染H7N9禽流感采样以及实验室检测技术
用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟， 1500～2000rpm离心10分钟，收集血清于2ml无菌螺口塑料管 中。
样本采集方法 (5)
鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：
用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取 呼吸道分泌物。先将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负 压，旋转收集器头部并缓慢退出；收集抽取的粘液，并用 采样液3ml涮洗收集器1次（可用小孩导尿管接在50ml注射 器上来代替收集）。
注：应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼 吸道标本）和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复 期血清。
要求 呼吸道标本：发病早期采样，每份不少于3ml 血清标本每份分为2管，每管不少于0.5ml
样本采集方法 (1)
咽拭子：左手用压舌板压住患者舌头，右手用2根聚丙烯纤
维头的塑料杆拭子同时檫拭双侧咽扁桃体及咽后壁，应避免 接触舌头，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，弃去尾部，旋 紧管盖。
胞分类计数减少； 4. 不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所
致的肺炎。
• 包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱 液和鼻洗液）；
◆下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）；
◆ 血清标本；
◆ 如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸 体解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组织）标本；
样本采集方法 (4)
鼻洗液 患者取坐姿，头微后仰，用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患 者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧 杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔
漱口液 用10 ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰，发“噢”声，让生理
盐水在咽部转动。然后，用50ml的无菌螺口塑料管收集洗液。
禽流感病毒H7N9实验活动风险评估报告
禽流感病毒H7N9实验活动风险评估报告一、生物因子（一）一般特性H7N9禽流感病毒是一种新型禽流感病毒，属于甲型流感病毒中的一种，既往仅在禽间发现，未发生人感染的情况。
2013年3月底在我国上海率先出现全球首例人感染H7N9禽流感病例，并逐渐蔓延至全国多个地区。
H7N9型禽流感已经纳入我国法定传染病监测报告系统，为乙类报告传染病，目前尚未有疫苗推出。
该病毒感染以发热及呼吸道症状为主，目前尚不具备有效的人传染人的特性。
截至2014年2月28日，全球已有实验室确诊病例375例，死亡115例，病例分布于北京、上海、江苏、浙江、安徽、山东、河南、福建等地，以长江三角洲地区为多。
甲型流感病毒根据病毒表面的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的差异可以分为多个亚型，HA可分为16个亚型，NA可分为9个亚型。
禽流感病毒中H3、H5、H7、H9亚型可以传染给人。
由于2013年3月底才出现人感染H7N9禽流感病例，因此对这个病毒的生物学特点、致病力、传播力，还没有足够充分的依据进行分析判断，对其实验操作的风险评估参照以往人感染高致病性H5N1禽流感病毒的风险评估进行。
（二）来源甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。
可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H7N9、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3。
此次发现的人感染H7N9禽流感病毒为一种新型重配的禽流感病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒。
2013年4月初，中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室对H7N9禽流感病毒进行基因溯源研究显示，H7N9禽流感病毒基因来自于东亚地区野鸟和中国上海、浙江、江苏鸡群的基因重配，而病毒自身基因变异可能是H7N9型禽流感病毒感染人并导致高死亡率的原因。
研究结果初步显示，H7N9禽流感病毒暂未发现在猪群中的进化痕迹，提示猪在这次病毒基因重配中未发挥中间宿主的作用。
研究人员表示，H7N9禽流感病毒的8个基因片段中，H7片段与浙江鸭群中分离的禽流感病毒相似，对浙江鸭群中的病毒再进行追溯，与东亚地区野鸟中分离的禽流感病毒基因相似；N9片段与东亚地区野鸟中分离的禽流感病毒相似。
9.18传染病预防控制相关 答案
肠道传染病监测与防控1.全球轮状病毒监测网络正式建立时间是：(6分)A2001年B2008年C2020年D2009年考生答案：B难易程度：一般2近年引起我国轮状病毒胃肠炎的优势基因型为：(5分)AG1P8BG9P8CG8P8DG3P8考生答案：B难易程度：一般3我国诺如病毒感染疫情呈上升趋势，发生聚集性/暴发疫情的重点场所是：(5分)A学校和托幼机构B机关企事业单位C养老机构D医疗机构考生答案：A难易程度：一般4以下属于我国法定报告甲乙类肠道传染病的病种有：(10分) A细菌性痢疾B阿米巴痢疾C霍乱D手足口病E伤寒和副伤寒考生答案：A,B,C,E难易程度：一般5引起感染性腹泻的病原中，有疫苗可预防的疾病是：(10分) A轮状病毒感染B诺如病毒感染C副伤寒D霍乱E伤寒考生答案：A,B,C,E难易程度：一般6今年我国霍乱的流行特点是：(10分)A多为食源性传播B流行强度较低C以散发病例为主D甲鱼等海水产品为常见感染来源EO1群小川型和O139群交替流行考生答案：A,B,C,D,E难易程度：一般7接种霍乱疫苗是预防霍乱最有效的手段。
(5分)A正确B错误考生答案：B难易程度：一般8全球腹泻疾病负担依然严重，不同区域差异化不明显。
(5分)A正确B错误考生答案：B难易程度：一般9我国伤寒/副伤寒发病呈持续下降趋势。
但3岁以下儿童发病率呈上升趋势。
(5分)A正确B错误考生答案：A难易程度：一般10《预防和控制肺炎与腹泻病的全球综合行动计划(GAPPD)》中,5岁以下儿童腹泻防控目标为，到2025年，在全球5岁以下儿童中，重症腹泻发病率比2010年降低75%，腹泻死亡率减少到1%。
(13分)1 75%2 1‰备注：全部空答对给分，答案无序难易程度：一般11已上市的霍乱疫苗包括两种，分别为单价灭活全菌-重组霍乱肠毒素B亚单位疫苗、双价灭活疫苗。
(13分)1单价灭活全菌-重组霍乱肠毒素B亚单位疫苗2双价灭活疫苗难易程度：一般12我国上市使用的轮状病毒疫苗有口服五价重配轮状病毒减毒活疫苗、口服轮状病毒疫苗（LLR）口服、口服三价重配轮状病毒减毒活疫苗。
201x最新人感染H7N9禽流感监测与防控-课件
应尽早进行抗病毒治疗
在使用抗病毒药物之前宜留取呼吸道标本。 抗病毒药物应尽早使用，无需等待病原学检测结果。 即使发病超过48小时也应进行抗病毒治疗
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被批准的抗流感病毒药物
注： 1 H3N2, pH1N1, 局部 H5N1 和 H7N9; 2 除了季节性H1N1, 2021-9
抗病毒药物的应用
不宜使用大剂量激素治疗
纳入288例住院H7N9病毒性肺炎患者，年龄中位数 58 (45-68) 岁，男性占69.8%，住院 病死率31.9%.其中204 (70.8%) 接受糖皮质激素辅助治疗
COX回归分析显示：大剂量激素增加H7N9禽流感患者30/60天病死率
小剂量激素无明显影响
治疗
加强支持治疗，维持内环境稳定，防治继发感染。一旦出现继发感 染征象或存在感染的高危因素，应合理选择抗菌药物治疗。
美国CDC称H7N9死亡率可达40%
2003年在捷克、日本、荷兰、美国曾别离到过 H7N9，但从未有过感染人事件！ 2021年首次在中国感染人事件中别离到的H7N9 与以往禽类中发现的H7N9完全不同，是一种重未 出现过的新型禽流感病毒。
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通知
目前，我国处于人感染H7N9禽流感〔以下简称H7N9〕疫情高 发季节，报告病例数明显高于往年同期水平，新发病例 和新发 疫情地区持续出现。为有效应对H7N9疫情，做好H7N9医疗救 治有关工作，切实保障人民群众健康平安，现将有关要求通知 如下： 一、高度重视医疗救治工作； 二、科学开展医疗救治； 三、 加强医务人员培训； 四、进一步加强医院感染管理工作。
发病第42天
主要内容
H7N9概述 H7N9的流行概况及病原学特点 H7N9的主要临床表现 H7N9诊断和治疗 H7N9防控
人感染H7N9禽流感标本采集要求
人感染H7N9禽流感标本采集要求人感染H7N9禽流感病毒的病原学依据《人感染H7N9禽流感诊疗方案》（2013第一版）禽流感病毒属正粘病毒科甲型流感病毒属。
禽甲型流感病毒颗粒呈多形性，其中球形直径80〜120nm,有囊膜。
基因组为分节段单股负链RNA。
依据其外膜血凝素（H）和神经氨酸酶（N）蛋白抗原性不同，目前可分为16个H亚型（H1H16）和9个N亚型（N1〜N9）。
禽甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。
可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3,此次报道的为全球首次发现人感染H7N9禽流感病毒。
该病毒为H7N9和H9N2重配的新型病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒，基因序列分析表明为禽源病毒。
人感染H7N9禽流感监测病例定义：同时具备以下4项条件依据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》（第版）1、发热（腋下体温》38C）;2、具有肺炎的影像学特征；3、发病早期白细胞总数降低或正常，或淋巴细胞分类计数减少；4、不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。
除第4条不同于不明原因肺炎病例定义，以上三条均相符。
不明原因肺炎第4条为：经规范抗菌药物治疗3-5天，病情无明显改善或呈进行性加Sr o标本采集种类：医疗机构应当及时采集病例相矢临床样本。
1、上呼吸道标本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）；2、下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）3、血清标本（发病7天内急性期血清以及间隔2・4周的恢复期血清）尸检标本（如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体解剖，采集肺组织、气管、支气管等组织标本）5、应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）。
四、标本采集主要器材和试剂：1、拭子：WHO及美国CDC规定，鼻烟拭子采集只能用塑料杆的涤纶或人造棉拭子（如常用的聚酯纤维拭子），不能用藻酸钙拭子或木杆拭子，因可能使某些病毒失活或抑制PCR;脫脂棉含有荧光物质，影响实时应荧光定量PCR结果。
人感染H7N9禽流感诊疗方案(2014年版)
Ｈ ７ Ｎ３等 ， 此 次为 Ｈ ７ Ｎ ９禽 流感 病 毒。该 病 毒 为新 型 重配病毒 ， 编 码 ＨＡ 的基 因来 源 于 Ｈ ７ Ｎ ３ ， 编码 Ｎ Ａ 的基 因来 源 于 Ｈ７ Ｎ ９ ， 其 ６个 内部 基 因来 自于 Ｈ ９ Ｎ ２
禽 流感 病 毒 。
致全身炎症反应， 可出现 Ａ Ｒ Ｄ Ｓ 、 休克及 多脏器功 能 衰竭。 个 别 重症 病 例 下呼 吸道 病毒 可持 续 阳性 至病
禽 流 感 病 毒 亚 型 为 Ｈ５ Ｎ１ 、 Ｈ ９ Ｎ ２ 、 Ｈ７ Ｎ ７ 、 Ｈ７ Ｎ ２ 、
Ｈ ７ Ｎ ９禽 流 感 病 毒 可 以 同时 结合 唾液 酸 Ｏ Ｌ 一 ２ ． ３ 型受体（ 禽 流感 病 毒 受体 ） 和唾液酸 仅 一 ２ ， ６型 受 体 （ 人 流 感 病 毒 受体 ） ， 较Ｈ ５ Ｎ １禽 流 感 病 毒 更 易 与人
二、 流 行病 学
四、 临床 表现
根据流感 的潜伏 期及现有人感 染 Ｈ ７ Ｎ ９禽流 感病例 的调查结果 ， 潜伏期一般为 ７天 以内。 （ 一） 症状 、 体征和临床特点。患者一般表现为流感 样症状 ， 如发 热 、 咳嗽 、 少痰 ， 可伴 有头痛 、 肌 肉酸
一
触感染禽类的分泌物或排泄物而获得感染 ； 或通过 接触病毒污染 的环境传播至人 ； 不排 除有限的非持
续 的人传 人 。
、
病原 学
（ 三） 高危人群。 在发病前 １ 周 内接触过禽类或者到
过 活禽 市场 者 ， 特别 是老 年 人 。
三、 发病 机制 和病 理
禽 流感 病 毒属 正粘 病 毒科 甲型流 感病 毒属 。甲
型 流感 病 毒颗 粒 呈 多形 性 ，其 中球 形直 径 ８ Ｏ ～ １ ２ ０ ｎ ｍ， 有 囊膜 。 基 因组为分 节 段 单股 负链 Ｒ Ｎ Ａ。 依
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禽
禽
血清学证据： 2002/北美（Virginia） 1/ILI，血清学诊断
2003/香港 1/ILI 2003/荷兰 2003至今, 15个国家 89/结膜炎、ILI、肺炎; 1名死亡病例 602/ ILI, 肺炎
人感染H4, H5, H6, H7,H9,H10, H11 AIVs. 禽 2003/香港 2/ ILI，肺炎
亚型：
H7N1, H7N2, H7N3, H7N
7, H7N8
野禽居多 LPAI
人感染H7N9禽流感病毒特点
核酸检测
病毒分离
从3个病例中分离到3株病毒
A/Shanghai/1/2013(H7N9) A/Shanghai/2/2013(H7N9) A/Anhui/1/2013(H7N9)
禽 禽 来源不清 禽 禽 禽 来源不清 鸭 来源于疫区的鸟 2003/北美(New York)， 1/肺炎 2004/加拿大 2005/日本(Ibaraki) 2007/英国(Wales) 2007/香港 2004/埃及( Ismaillia) 2/结膜炎、ILI; 1名LPAI；1名HPAI 13/无临床症状，血清学诊断 1/结膜炎、ILI 1/ ILI 2/ ILI
LPAI H7N8、 H7N9（Korea） HPAI H7N3 （Pakistan） HPAI H7N3 LPAI H7N9 HPAI H7N7、 H7N3 、 H7N4
禽中暴发的H7
2006年前暴发的均为HPAI H7 欧洲：意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、 捷克、西班牙、瑞典
近年来人感染禽流感病毒病例
H7N9病毒
亚洲, 7 欧洲, 5 共25株 均为LPAI 无感染人病例 美 洲, 13
亚洲：7株 均来自野禽 5株—韩国 2株—蒙古
H7N9的致病力和传播力
HPAI H7N3 HPAI H7N3
LPAI H7N9
LPAI H7N9
LPAI H7N9
Nose (white bars) , lung (black bars)
序列测定
PB2 PB1 PA HA NP NA MP NS
2个片段来源于H7N9 6个片段来源于H9N2
三株H7N9病毒为同一基因类型
序列特点
耐药性分析 对烷胺类药物是耐药的，即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。
HA连接肽分析 HA蛋白339位连接肽由单个（PKGRGLFG）碱性氨基酸组成，根据既往研究， 具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。 受体结合位点及其它重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点（为 QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸受体 结合位点（为LSG） PB2蛋白627位氨基酸为K，提示致病性增强。 NS1蛋白92位氨基酸为D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。
病毒亚型 A/H7N7 病原来源 鸥 时间/国家 1980/美国 病例数/临床表现 3/结膜炎
A/H7N7
A/H5N1 A/H9N2 A/H9N2
鸭
禽 鸡 禽
1996/英国
1997/香港 1998/中国广东 1999/香港
1/结膜炎
18/ILI，肺炎 5/ ILI，肺炎 2/ILI
A/H7N2
A/H9N2 A/H5N1 A/H7N7 A/H5N1 A/H7N2(NY/107) A/H7N3 A/H5N2 A/H7Nபைடு நூலகம் A/H9N2 A/H10N7 A/H10N7
2010/悉尼(New South 7/上呼吸道感染症状、结膜炎
Wales)
HPAI
4/USA H7N7 1/USA H7N7 1/USA H7N7 1996 2002
89/ Netherlands H7N7 1/ Canada 1 died H7N3 2003 2004
2/ Mexico H7N3
人感染H7N9禽流感病毒病原学特点
及实验室检测要求
河南省疾病预防控制中心 2013年4月3日
病例1
病例2
病例3
既往禽H7Nx病毒简介
HPAI H7N3 LPAI H7N9
HPAI H7N7 、 H7N3、 H7N1 LPAI H7Nx、H7N2、 H7N3、H7N1、H7N9
LPAI H7N9
人感染H7N9禽流感病毒
实验室检测要求
标本采集、保存、运送与实验室检测
做好人员安排以及试剂、耗材准备；
参照近期将下发的《全国不明原因肺炎病例监测、 排查和管理方案（2013年）》和《人感染H7N9禽流 感标本采集及实验室检测策略》进行。 依托市级、省级流感监测网络实验室，开展核酸检 测和病毒分离工作。
2006 2007
1959
1977 19791/England 1/ USA 1980 7/ Italy 1/ Canada H7N7 H7N2 H7N3 H7N3 1/ USA H7N2
4/ Wales H7N2
LPAI
1/ Norfolk H7N3
H7感染人（>100人）
美国、英国、意大利、荷兰、加拿大
LPAI H7N9不需经过适应便可在小鼠体内有 效复制，且能在雪貂上下呼吸道有效复制。
LPAI H7N9在雪貂模型中不传播。
中国地区H7 AIV
A/Baer's pochard/HuNan/414/2010(H7N1) A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2) A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3) A/duck/Hubei/126/1985(H7N8) A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7) A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1) A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1) A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3) A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3) A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3) A/magpie-robin/China/28710/93(H7)