生物复习专项练习：微生物的培养与应用_微生物的实验室培养_实验制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌

实验——制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌课后
练习(2)
1．下列不属于微生物常用的分离、纯化方法的是（）
A．单细胞挑取法
B．平板划线法或稀释涂布平板法
C．接斜面法
D．选择培养基分离法
2．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。

实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。

请回答与此实验相关的问题。

(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。

除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。

(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________。

(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。

要使该实验所得的结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。

(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。

一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。

3．下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。

请回答：
(1)
充当碳源的成分是________和________。

培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______________两种。

在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是______________。

(3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片，可能的原因是什么？
________________________________________________________________________。

4．关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（）
A．溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上直接倒入烧杯
B．常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线利喷洒化学试剂等
C．配制同体培养基时加入琼脂，其目的是为微生物生长提供碳源
D．用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
5．近期网络上流行一种利用制作酸奶来判断牛奶好坏的方法，以下自制酸奶的方法也随之在网络广泛流传：
①将牛奶倒入玻璃杯，放在沸水中加热10分钟。

②降温到420C，每杯牛奶加入0.15g酸奶发酵剂。

③用干净小勺搅拌均匀，在杯子外封上保鲜膜。

④在420C下保温5小时后，放在40C冰箱中冷藏1小时。

请回答相关问题：
(1)牛奶在沸水中加热10分钟，属于____(消毒/灭菌）的方式，你推测酸奶发酵剂中含有的成分是____，第②步降温到42℃的目的是____，第③步封上保鲜膜的目的是____________
(2)除了沸水中加热10分钟外，本过程中还有哪些操作避免了酸奶被杂菌污染？其原理是？（写出两条即可）
①操作: ________，原理: ____________________________________________________。

②操作: ________,原理：_____________________________________________________。

(3)酸奶中的多种活菌对健康有益，若要检测不同酸奶中各种有益菌的数量是否达标，可采用____法。

6．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。

在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。

利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( )
①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌
A．④②③B．①②③
C．①③④D．③④
7．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是( )
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上
C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4℃保藏的方法
8．下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是（）
A．细菌能在培养基中以二分裂方式迅速扩增
B．噬菌体和大肠杆菌都可直接在蛋白胨培养基中增殖
C．灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌
D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法分散细菌得到单菌落的效果更好
9．现有四种突变型细菌1、2、3、4，它们都不能合成生长所必需的物质E。

A、B、C、D都是合成E物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序。

于是在培养基中分别单独加入这几种物质并分析了这几种物质对各种突变型细菌生长的影响b结果如右表（表中+表示细菌能正常生长—表示不能正常生长）根据以上结果，推测这几种物质最可能的合成顺序是（）
A→C→E
C．C→B→A→D→E D．C→D→B→A→E
10．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（）
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置
参考答案：
1．答案： C
解析：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种微生物的过程称为微生物的分离与纯化，常用的分离、纯化方法有：单细胞挑取法、平板划线法等。

接斜面法一般是将得到的单菌落接种到试管的固体斜面培养基上，以便做鉴定或扩大培养或保存之用。

2．答案： (1)氮源(碳源不作要求) 碳源无机盐水
(2)高压蒸汽灭菌
(3)恒温箱无菌水
(4)多高
解析：本题主要考查培养基的营养物质及其作用，灭菌方法，细菌培养的条件、方法和结果分析等方面知识。

用于培养微生物的培养基中，一般要含有微生物生长所需要的碳源、氮源、水和无机盐等成分，碳源、氮源一般分别由糖类和蛋白质所提供。

对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

在检测湖水中细菌的污染情况时，应设置对照，才能得出可靠的结果。

3．答案： (1)牛肉膏蛋白胨灭菌
(2)平板划线法稀释涂布平板法蘸取酒精；引燃灭菌(3)菌液浓度过高；培养过程中被杂菌污染；利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针进行灭菌处理
解析：牛肉膏和蛋白胨都是从天然物质中提取出来的，都含有丰富的有机物，可以为微生物提供碳源和氮源。

平板划线法和稀释涂布平板法都能使菌体分散开，但如果操作不当，会使分离效果不理想。

4．答案： D
解析：溶化时将称好的牛肉膏同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，A选项错误;灼烧是灭菌，B选项错误;加入晾脂是使培养基变为半固态或固态，c选项错误;移液
管稀释菌液时，使菌液与水充分混匀应吹三次，D选项正确。

5．答案：（1）消毒乳酸菌避免高温使菌种失活避免杂菌掉落，构建无氧环境
（2）①操作：加入酸奶发酵剂原理：迅速使乳酸菌形成优势种群，抑制杂菌生长
②操作：封上保鲜膜原理：避免杂菌掉落、并抑制耗氧杂菌生长
③操作：42℃下保温5小时原理：这是乳酸菌的最适温度，其它杂菌在此温度下竞争力弱。

④用干净的小勺原理：防止小勺带上过多的杂菌
（3）稀释涂布平板（法）
6．答案： A
解析：缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，霉菌能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌，放线菌能生长。

7．答案： D
解析：对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后灭菌，将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。

8．答案：解析： B
试题分析：细菌繁殖方式是二分裂方式，A正确；噬菌体是没有细胞结构的病毒，需要在活细胞中才能生活，在蛋白胨培养基中不能增殖，B错误；灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争，C 正确；稀释涂布平板法比平板划线法分散细菌得到单菌落的效果更好，D正确。

考点：本题考查微生物的培养和分离的知识。

意在考查能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。

9．答案： B
解析：试题分析： A、B、C、D是合成E物质的一系列必需产物。

这些突变型菌株可能在合成E 物质的某条途径被阻断，本实验通过单独补充相应的物质，来寻找合成E物质的过程。

由突变型1中单独加入C物质和E物质可以存活，可得C→E，由突变型2中单独加入A、C、E物质可以存活，可得A→C→E，由突变4中单独加入A、B、C、E可以存活，可得B→A→C→E，综合四组实验可得D→B→A→C→E。

故选B
考点：本题考查微生物的培养，意在考查考生获取有效信息的能力，并能运用这些信息，结合所
学知识解决相关的生物学问题。

10．答案： A
解析：试题分析：操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，因为牛肉膏有黏性，B正确；待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板，C正确；待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置，D正确。

考点：本题考查知识点为培养基的制作作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。