糖化血红蛋白测定方法
糖化血红蛋白测定仪器使用方法
糖化血红蛋白测定仪器使用方法
糖化血红蛋白测定仪器的使用方法如下：
1. 准备工作：将糖化血红蛋白测定仪器放置在水平稳定的工作台上，并接通电源。
2. 校准仪器：根据仪器使用说明书的指导，进行仪器的校准。
校准可以确保仪器的准确度和可靠性。
3. 样品处理：将采集的血样加入预先提供的试剂中，按照指定的比例混匀。
待混合液稳定后，取出一定量样品。
4. 操作仪器：将取出的样品加入仪器提供的测试池中，确保样品完全覆盖测试池。
按下开始/测试按钮启动测试程序。
5. 等待结果：在仪器显示屏上，可以观察到样品的测试进度。
等待一定时间后，仪器会自动显示测试结果。
6. 计算结果：根据仪器提供的测试结果，可以计算出血液中的糖化血红蛋白含量。
根据仪器使用说明书，进行相应的计算和解释。
7. 清洁和维护：测试结束后，及时清洁仪器的测试池和其他零部件，保证仪器的正常使用和长寿命。
需要注意的是，具体的操作步骤可能会因不同型号的糖化血红
蛋白测定仪器而有所不同。
在使用仪器前，应仔细阅读仪器的使用说明书，并按照说明书的指导进行操作。
糖化血红蛋白的测定方法及其在临床中的应用ppt课件
糖结合的血红蛋白（HbA1c）占全部血红蛋白的比例。非糖 尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4%-6%。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
正常成人体内的血红蛋白
Hb
成人 Hb
HbA (ßß)
97%
HbA2 ()
2.5%
HbF ()
0.5%
胎儿 Hb
未糖化 HbA0
94%
A1a 和 A1b 含量极低
HbA1a
HbA1
6%
HbA1b
糖化
80%
HbA1c
- 主要的糖化血红蛋白 -
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HbA1c的临床应用
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主要有三方面
糖尿病的诊断
监测糖尿病患者长期血糖的控制状况 HbA1C的监测目的在于消除血糖波动对病情控制的影响。 是国际公认的糖尿病监控“金标准”。
对于非重度溶血标本，可进行测定。 HPLC分析图中可出现 变性峰形。
存在未检出结果的情况 贫血患者当Hb浓度太低时＜65g左右，低于最低检出量， 可采取低速离心后适当弃去部分血浆调节Hb浓度至正常水 平。
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糖化血红蛋白高效液相色谱法和金标法的区别
糖化血红蛋白高效液相色谱法和金标法是两种常用的检测糖尿病患者血糖控制情况的方法，它们在原理、操作流程、应用范围等方面存在着一定的差异。
本文将从这些方面对这两种方法进行比较，帮助读者更好地理解它们的异同。
一、原理1. 糖化血红蛋白高效液相色谱法（HPLC）糖化血红蛋白高效液相色谱法是利用高效液相色谱仪对血液中的糖化血红蛋白进行检测的方法。
其原理是利用高效液相色谱柱对血浆样品中的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白进行分离，并通过检测器检测各组分的信号强度，从而 quantitatively 测定血浆中糖化血红蛋白的浓度。
2. 金标法金标法是一种基于化学发光原理的糖化血红蛋白检测方法，其原理是将血浆样品中的糖化血红蛋白与金标记的抗糖化血红蛋白抗体结合，形成复合物，然后通过化学发光仪测定复合物的发光强度，根据发光强度来确定糖化血红蛋白的浓度。
二、操作流程1. 糖化血红蛋白高效液相色谱法（HPLC）（1）取血浆样品，处理样品使之具备色谱法测定的条件。
（2）注射样品至高效液相色谱仪中，经过柱分离和检测器检测。
（3）根据检测结果计算糖化血红蛋白的浓度。
2. 金标法（1）取血浆样品，加入金标记的抗糖化血红蛋白抗体，形成糖化血红蛋白-抗体复合物。
（2）加入化学底物，产生化学发光反应。
（3）用化学发光仪测定发光强度，根据发光强度计算糖化血红蛋白的浓度。
三、应用范围1. 糖化血红蛋白高效液相色谱法（HPLC）HPLC法需要专门的设备和技术人员进行操作，适用于临床检测中心或大型医院。
2. 金标法金标法操作简便，不需要复杂的设备，可以在医院的常规化验室中进行。
金标法更适用于基层医疗机构和社区诊所等地方。
四、总结糖化血红蛋白高效液相色谱法和金标法是两种常用的检测糖尿病患者血糖控制情况的方法，它们在原理、操作流程、应用范围等方面存在着一定的差异。
熟悉这些差异，有助于临床医生根据实际情况选择合适的方法进行检测，以更好地指导糖尿病患者的治疗和管理。
糖化血红蛋白HbA1c的测定方法与临床应用
糖化血红蛋白HbA1c的测定方法与临床应用近年来，糖尿病发病率呈不断上升的趋势。
糖化血红蛋白与糖尿病及其并发症密切相关。
糖化血红蛋白分为HbA1a、HbA1b和HbA1c，其中最重要是HbA1c。
HbA1c是血红蛋白与血糖结合的产物，该过程缓慢且不可逆，因红细胞的半寿期为60d，所以HbA1c能反映患者测定前2～3个月的平均血糖水平，是判定糖尿病患者长期血糖控制水平的良好指标。
1 HbA1c的测定方法1.1免疫比浊法此法是利用抗原抗体反应来测定HbA1c。
在样本中加入抗HbA1c抗体缓冲液，使HbA1c与抗HbA1c抗体结合形成可溶性的抗原抗体复合物，再加入一种含多聚半抗原的缓冲液，与反应液中剩余的抗HbA1c抗体反应形成不溶性的抗原抗体复合物，利用比浊法检测HbA1c的含量；另一通道同时检测总血红蛋白，计算得出HbA1c的百分比。
此法准确率高，重复性好，经实验证实，该法回收率可达97.9%，CV<2%[1]。
1.2乳胶凝集法原理是利用抗原抗体反应直接测定总血红蛋白中的糖化血红蛋白（HbA1c）的百分含量。
样本中的总Hb和HbA1c作为抗原与试剂中相应的抗体结合形成抗原抗体复合物进而发生凝集反应，凝集量随HbA1c浓度的高低而变化。
使用生化分析仪来进行比浊测定HbA1c的浓度，利用终点法通过检测反应液的吸光光度值，可反映出凝集量，进而推算出HbA1c的百分含量。
1.3酶法原理是变性后的全血样本经蛋白酶作用，糖化血红蛋白β-链上的缬氨酸被释放出来，糖化的缬氨酸作为底物经果糖缬氨酸氧化酶（FVO）的氧化作用产生H2O2，之后H2O2在过氧化物酶的作用下与相应的显色剂耦联显色[2]，通过测定吸光度得出HbA1c的浓度。
直接酶法可直接检测出样本中HbA1c的百分比，而且处理后的样本与氧化还原剂反应，除去了小分子和高分子干扰物质[3]。
酶法检测HbA1c可用于自动生化仪，准确率高、重复性好、特异性高。
糖化血红蛋白几种常见检测方法
直存在 ， 故体 内衰老红细胞 比新生红细胞的糖化 血红蛋 白含量约 公司产品 ， 相应 的仪器 以英 国 Ｄ Ｅ Ｓ ＩＮ ＩＩ Ｒ Ｗ ＣＥ ＴＦＣ公司 Ｄ 糖 化 Ｓ５ 高出 １５倍 。每一个红细胞 内都有血红蛋 白， ． 而红细胞 的寿命为 血红蛋 白仪为例（ ｉ ａ 司 ＩＳ Ａ亦为 同一产 品） 采用微 Ｂｏ—Ｒ ｄ公 ＡＴ ，
白结合越多 ， 糖尿病 病情 也越 重 。它 避免 了每 日的血糖 值 的波 白 Ｓ Ｈ Ｓ 与血红蛋 白 Ｃ Ｈ Ｃ 的存 在与否 ， （ ｂ） （ｂ） 在计算糖 化血红蛋
动， 与病人抽血时问、 是否空腹 、 否使用胰 岛素等因素无关 。当 是 白值 时会 自动扣除变异体产生 的影响 ， 从而使 结果更为准 确 ， 可 变异系数 （ Ｖ） ＜２ Ｃ 值 ％。同时该 仪器 配有专 门 的稀 释 溶血 糖尿病控制较好时其浓度在一定值范围 ， 如糖尿病控制不佳时其 靠 ， 可直接进行全血操作 ， ｍ ｎ即可 报告结果 ， 自动储 存样 品 ５ ｉ 并 浓度可高至正常 的 ２倍 以上 。因此成为糖 尿病治疗 过程 中疗 效 器 ， 层析柱价格也较为低廉 ， 适合 于较多标本的医院检测 ， 监测的重要手段 。Ｈ Ａ ｃ检测 用于 常规实验 室始 于 ２ 纪 ７ 检测结果 ， ｂ１ ０世 ０
Ｈ ｂ及 Ｈ Ａ ｂ １带正电荷 ， 电泳时向负极
ｂ 带 目前临床实验室 中应用的糖化 血红蛋 白检测方法 主要有两 移动 。因为 Ｈ Ａ的 Ｂ链 Ｎ一末端所 带电荷被 糖基 消除 ， 电量 ｂ 等 泳 所 ｂ １即 Ｇ ｂ 身带 红 Ｈ 本 大类 ： 一类 方法基 于糖化血红蛋 白与非糖化血红蛋 白所带的电荷 少 于 Ｈ Ａ， 电点 低 ， 动速 度慢 ， 以 Ｈ Ａ 所 ｂ ｂ的量来表示 。毛细 不 同， 如离子层析法 、 电泳等方法 ； 另一类方法基于血红蛋 白上糖 色 ， 以可直接 比色或扫描 。用 Ｈ Ａ１占 Ｈ 化基团 的结构特点 ， 如亲 和层析 、 离子捕 获法和免疫 法等 。其 中 管 电泳也能分离检测糖化血红 蛋 白和血红 蛋 白的变 异体。普通 高效液相离子层析法（ Ｐ Ｃ 被公认为金标法 。 ＨＬ）
糖化血红蛋白测定方法简述
糖化血红蛋白测定（glycosylated hemoglobin A，GHb）成人红细胞中的血红蛋白有HbA （占95％～97％以上），HbA2（占2.5％），HbF（占0.2％）。
当HbA中的部分血红蛋白被糖基化后，其中由于HbA的β链N末端的缬氨酸分子与葡萄糖等己糖分子相结合而使其在血红蛋白电泳中成为HbA之前的快泳、HbA1组分，在离子交换柱层析中亦在HbA之前首先被洗脱，糖化Hb可分为HbA1a（其中与1，6-二磷酸果糖结合的为HbA1a1；与6-磷酸葡萄糖结合的为HbA1a2），HbA1b（尚无明确定义，包括HbA1b1，HbA1b2，HbA1b3），HbA1e（与葡萄糖结合）和HbA1d（α链和β链内氨基以及α链的N末端基团上的烯化血红蛋白；包括HbA1d1，HbA1d2，HbA1d3）共九种。
最重要的是HbA1c.HbA1e的生成量取决于血糖的浓度，正常人约占4％～6％。
由于红细胞的半寿期是60天，所以GHb的测定可以反映测定前8周左右病人的平均血糖水平。
GHb测定方法很多，两种最基本的方法是：测定HbA1组分和仅测定HbA1c.高压液相色谱（HPLC）法可精确分离HbA1各组分；并分别得出HbA1a、HbA1b、HbA1c、HbA1d的百分比，CV3％，是参考方法，其次还有低压液相色谱（LPLC），目前二者均有高精度的自动化仪器，作为常规方法用于临床；硼酸亲和柱层析法CV（1％～4.7％），阳离子交换柱层析法CV（2％～16％），测定的血红蛋白类型为HbA1.前者在样本量不大的实验室仍可使用；后者在分离过程中对pH 和温度的要求极高，HbF是其干扰因素。
电泳法CV（4％～10％），分离Hb类型和干扰因素与阳离子交换柱层析法相同；比色法可用于自动生化仪，无血红蛋白分离步骤，干扰因素小，具特异性和敏感性，但CV较大（4％～18％），且样品用量大，用浓度单位报告的方式还未被广大临床医师接受。
糖化血红蛋白的测定方法及临床应用
糖化血红蛋白的测定方法及临床应用发布时间：2022-02-18T03:38:12.906Z 来源：《航空军医》2021年10期作者：袁君黄石公张小林郜斌[导读] 糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin , GHb）)反映血糖控制程度,是糖尿病诊断和治疗的重要指标，广泛应用于临床。
它可反应患者采血前2～3个月（8~12周）的血糖控制状况，并可用来监督血糖控制的情形，还可作为调整处方剂量的依据。
GHb检测方法发展迅速，早期检测以电泳法、微柱层析法应用较广泛，目前免疫比浊法和化学发光法（IVIA法）检测已开始在临床应用。
袁君黄石公张小林郜斌（宁夏回族自治区第五人民医院石炭井医院宁夏石嘴山 753000）【摘要】糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin , GHb）)反映血糖控制程度,是糖尿病诊断和治疗的重要指标，广泛应用于临床。
它可反应患者采血前2～3个月（8~12周）的血糖控制状况，并可用来监督血糖控制的情形，还可作为调整处方剂量的依据。
GHb检测方法发展迅速，早期检测以电泳法、微柱层析法应用较广泛，目前免疫比浊法和化学发光法（IVIA法）检测已开始在临床应用。
【关键词】糖化血红蛋白，检测，临床意义 1 GHb的生物化学特征成人细胞中的血红蛋白（Hb）主要是HbA1，占90%以上，HbA2占2.5%，HbF占0.2%其余为HbA3，凡连接有已糖的HbA1统称为GHb。
其中HbA1又可分为HbA1a，HbA1b和HbA1c。
HbA1c最多，占GHb总量的80%。
HbA1c的β链N―末端缬氨基酸氨基与葡萄糖醛基通过非酶促反应而连接；HbA1a1的N―末端可连接1，6―二磷酸果糖；HbA1a2可与葡萄糖―6―磷酸连接。
这种Hb与糖结合的形成过程称为糖基化作用，GHb是HbA合成化学修饰的结果。
GHb是在红细胞生存期间，HbA1与血中已糖（主要为葡萄糖）缓慢、连续的非酶促反应产物，为HbA1合成后化学修饰的结果，且两者结合后不再解离，所以对高血糖和血糖、尿糖波动较大的患者具有监测病情发展的实用价值。
糖化血红蛋白
1、在一新鲜的血液中加高、中、低三种不同的标准参比物，同时用三种不同方法进行回收试验，每一浓度测定5份，取均值。
2、通过对两种方法进行的准确度、重复性、线性回归，以及其他干扰因素进行综合分析。
Hplc法具有准确性高、重复性好、线性佳，影响因素少，而且操作十分简便，检测时间短等优点。
免疫法法虽然准确度、重复性、回归线性还可以，但受到一定条件的限制，试剂保留时间较短。
3、临床实验室主要使用的测定血中糖化血红蛋白(HbA1c)的方法是免疫比浊法。
方法学的差异对临床样本和质控品的影响不同。
我们依据美国国家临床实验室标准化委员会( NCCLS) 批准的《用患者样本进行方法学对比及偏差估计EP9-A 指南文件》( Method Comparison and Bias Est imat ion Using Patient Samples; Approved Guideline; EP9-A) ,4、我们根据NCCLS 的标准化文件EP9-A 对测定糖化血红蛋白的两种方法进行了比较。
EP9-A 文件为临床实验室设备的使用者及生产厂家提供了对评价测定同一被测物的两种方法之间偏倚的实验设计。
对于使用者, 评价的目的在于两种方法在允许范围内能否得到相同的结果。
在实验室中,经常会进行方法学评价的实验, EP9-A 为临床实验室工作者提供了采用患者样本进行方法学比较的标准化途径。
根据 EP9 -A 文件, 比较实验至少应有 40 例样本,排除异常点数不得多于1个,当 r2< 0. 95 时, 应增加测定样本。
5、因此, 在使用质控品评价或监控方法准确性(如进行室间质评)时,应选择适当的产品。
在使用定值质控品评价方法的准确性时,应考虑测定原理对测定结果的影响。
6、[摘要 ] 目的: 建立高效液相色谱 (HPLC )测定糖化血红蛋白(GHb)方法, 并对其进行评价。
方法: 以 Bio-Rex 70阳离子交换树脂为填料, 在 HPLC仪上采用梯度洗脱分离测定GHb , 对其分析性能进行评价。
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糖化血红蛋白测定方法
糖化血红蛋白测定方法是一种用于评估血液中长期血糖控制情况的方法，常用于糖尿病患者的管理和监测。
常见的糖化血红蛋白测定方法包括：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：将血液样本经过制备处理后，采用高效液相色谱仪进行分析，通过检测血红蛋白A1c（HbA1c）的比例来评估平均血糖水平。
2. 免疫测定法：利用特异性抗体识别和结合HbA1c，测定血液中HbA1c的浓度。
常用的免疫测定方法包括免疫凝集法、免疫比浊法和免疫放射法等。
3. 整体反应液层析法（TOSOH G8）：采用高性能层析技术分离并测定血液中HbA1c的浓度。
这些方法的原理基本相同，通过测定HbA1c的浓度来评估血液中的平均血糖水平，一般以百分比（%）表示，正常血糖控制下HbA1c的水平在4%到5.6%之间。