植物病原物的分类及鉴定
园林植物病原真菌的分类和命名
园林植物病原真菌的分类和命名程度上，带有人为的而未全面反映生物的系统发育。
自林奈(Linnaeus，1753)起到20世纪50年代的近两百年间，生物分为动物界和植物界的两界系统一直沿用着，基本上没有什么变动。
由于真菌不像植物那样可以进行光合作用，也不像动物那样以吞食和消化的形式获得营养物质，真菌是从外界吸收营养物质，真菌与植物还有许多其他差异。
因此，早在一百多年前，就有人提出生物仅分为动物界和植物界是不够的。
但生物究竟应该分为几个界，众说纷纭，意见不一。
除了林奈的两界系统外，先后有学者提出将生物分为三界、四界、五界和八界系统。
现简介如下。
1．两界系统自林奈(Linnaeus，1753)开始，将生物分为动物界(Animalia)和植物界(Plaiatae)两个界，真菌虽不进行光合作用，但因其固着生活，并且具有细胞壁而被归为人植物界中。
植物界则进一步分为藻菌植物、苔藓植物、蕨类植物和种子植物四个门。
藻菌植物门(Thallophyta)是许多营养体无根、茎、叶分化的低等植物。
它们以裂殖、芽殖或产生孢子等形式繁殖，其中包括藻类、真菌、黏菌、放线菌和细菌等。
由于藻菌植物门中包括许多性状很不相近的低等植物，作为一个分类单元的意义不大，以后就有人主张取消藻菌植物门而将这些低等植物分为许多门。
除藻类植物外，细菌、黏菌和真菌分别列为裂殖菌门(Schizomycophyta)、黏菌门(Myxomyeophyta)和真菌门(Eumyeophyta)。
·2．三界系统黑格尔(Haekel，1866)在两界系统的基础上，增加了原生生物界(Protista)，真菌仍属于植物界；科纳德(Conard，1939)增加了菌界(Mycetalia)，真菌属于菌界；斯坦尼(Startler，1970)增加了原生生物界，真菌属于原生生物界。
3．四界系统科普兰(Copeland，1938，1956)认为，生物可划分为动物界、植物界、原生生物界和菌界。
第二章植物病害基础知识10(2)
A无隔菌丝 B有隔菌丝
1. 有隔菌丝
2. 无隔菌丝
有隔菌丝
有 隔 菌 丝
无隔菌丝
真菌的菌丝
真菌的菌丝
菌丝一般从孢子萌发而来，形成菌丝体，最后 再产生孢子。
孢子萌发产生菌丝
后期菌丝产生孢子
菌丝生长
菌丝的正常功能是摄取养分并不断生长发育。 依真菌的种类不同，菌丝在寄主体内的寄生 方式也不同： a) 生长在寄主细胞内的真菌，由菌丝直接从寄 主内吸收养分； b) 生长在寄主细胞间的真菌，则以菌丝体上产 生的特殊结构——吸器，伸入细胞内吸取养 分。
动物的病害。
有益真菌可被用来制药、生产食品和用于生防等。 寄生植物的真菌能引起植物病害，称植物病原真菌。
（一）真菌的一般性状
（一）真菌的一般性状
1.真菌的营养体
（1）菌丝体 典型的真菌营养体为 纤细分支的丝状体，单根的丝状体 称为菌丝，很多菌丝交织成团，称 菌丝体。低等真菌菌丝为无隔菌丝， 高等真菌菌丝为有隔菌丝。 真菌的菌丝体
3、子囊菌亚门
除酵母菌为单细胞外，其它子囊菌的营养体都是分 枝繁茂的有隔菌丝体；
无性繁殖在孢子梗上产生分生孢子。产生分生孢子 的子实体有分生孢子器、分生孢子盘等。
有性繁殖产生子囊和子囊孢子，大多数子囊产生在 子囊果内，少数裸生。 子囊果：产生子囊和子囊孢子的结构体称子囊果； 根据其不同形态，子囊果分四种类型：闭囊壳、子囊 壳、子囊盘、子囊腔。
丝孢菌
分生孢子着生在分生孢子梗上， 有少部分不产生分生孢子，只 产生菌核。 丝孢菌中很多是重要的植物病 原菌。如稻梨孢菌引起的水稻 稻瘟病，丝核菌引起水稻纹枯
病及多种作物立枯病。
梨孢属
腔胞菌
植物病原学
名词解释：菌物：一类营养体通常为丝状体，有真正的细胞核、具细胞壁，多数真菌不能进行光合作用，是异养型，以吸收的方式从外界获取营养，通过产生孢子进行繁殖的真核生物。
菌物的无性繁殖：指菌物不经过核配、减数分裂，营养体直接以断裂、裂殖、芽殖和原生质割裂的方式产生后代新个体的繁殖方式。
菌物的有性繁殖：指菌物通过细胞核结合和减数分裂产生后代的生殖方式。
菌物的生活史：指从一种孢子萌发开始，经过一定的营养生长和繁殖阶段，最后又产生同一种孢子的过程。
同宗配合：交配因子存在于同一条染色体上，单个菌株可以分化出有性器官并完成有性生殖。
（大豆疫霉）异宗配合：两个性亲和的不同交配型的菌株共同培养才能完成有性生殖。
（辣椒疫霉）单主寄生：多数植物病原真菌在一种寄主植物上就可以完成生活史。
转主寄生：有些真菌则需在两种不同的寄主植物上才能完成生活史的。
多型现象：一个生命循环中两个或多个结构形态的现象。
分体产果：真菌在繁殖时营养体一部分转化繁殖体整体产果：真菌在繁殖时营养体全部转化为繁殖体。
锁状联合：担子菌在有性繁殖过程中，在双核菌丝顶端形成的一种特殊结构，使得顶端细胞在细胞分裂中保持 2 个不同质的核，保证有性过程顺利进行。
营养体亲和性：不同菌株间菌丝融合并生存的能力，表示菌株间的亲缘关系。
营养体不亲和：不同菌株间菌丝不融合或融合后不能生存，融合结构及相间的菌丝迅速死亡（细胞凋亡？）并产生分隔的现象。
当真菌营养生长到一定阶段，就开始进入繁殖阶段，形成各种繁殖体，即子实体。
质粒：染色体外能独立复制的小分子共价闭合的环状DNA分子。
多分体现象：多分体现象为植物病毒所特有，仅存在于+ssRNA病毒中。
多分体病毒：指病毒的基因组分布在不同的核酸链上，并且分别包装在不同的病毒粒体内。
（单个粒体不能侵染，必须是一组粒体同时存在才能全部表达遗传特性）菌物包括粘菌、卵菌和真菌三大类。
真菌与人类的关系：有益：地球清洁工、医药、菌根、食用菌、工业真菌、农用真菌、遗传学研究材料、生物测定材料、生物工程菌株。
植物病理学-农学-第二章 植物病原学-细菌、病毒
7、韧皮部杆菌属（Liberobacter）
新设立的属，这是一类在韧皮
部中寄生危害的病原菌，以柑桔 黄龙病菌为代表，至今尚未能人 工培养，但已在电镜下观察菌体 梭形或短杆状，革兰氏阴性，过 去一直称为类细菌或韧皮部难养 菌（ Phloem fastidious bacteria ， PFB） 。
马铃薯环腐病
9、螺原体属（Spiroplasma） 菌体的基本形态为螺旋形，繁殖时可产生分枝，分枝亦呈螺 旋形。螺原体在固体培养基上的菌落很小，煎蛋状，直径 1mm 左右，常在主菌落周围形成更小的卫星菌落。菌体无鞭 毛，但在培养液中可以做旋转运动。 传病介体：叶蝉、飞虱等。 引起柑桔僵化病、玉米矮化病等
植物病原原核生物的重要类群
门及特征
薄壁菌门(有细胞壁的格 栏氏阴性细菌) (Gracilicutes) 细胞壁10～13nm,肽聚糖 含量1～3%
重要植物病原属
假单胞菌属 Pseudomonas 土壤杆菌属 Agrobacterium 食酸菌属 Acidovorax 黄单胞杆菌属 Xanthomonas 伯克氏菌属 Burkholderia 嗜木杆菌属 Xylophilus 拉尔氏菌属 Ralstonia 欧氏菌属 Erwinia 草螺菌属 Herbaspirillum 泛菌属 Pantoea 根瘤杆菌属 Rhizobacter 木杆菌属 Xylella 韧皮部杆菌属Liberibacter 棒状杆菌属 Corynebacterium 棒型杆菌属 Clavibacter 短小杆菌属 Curtobacterium 节杆菌属 Arthrobacter 红色球菌属 Rhodococcus 鸭茅草杆菌属 Rathayibacter 链霉菌属 Streptomyces 芽孢杆菌属 Bacillus
园艺植物病理学 第三章(4) 其它病原生物
体内，2龄幼虫在体内进入休眠状态。其孵化与根系分泌物有
关。 一个生长季可发生3-4代。
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大豆胞囊线虫病根部胞囊放大27Leabharlann 菜用大豆胞囊线虫28
小麦禾谷胞囊线虫病
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(三)根结线虫属(Meloidogyne) 与胞囊线虫相似，区别是植物受害的根部肿大，形成瘤状 根结；雌雄异型。雄虫细长、尾短、无交合伞；成熟雌虫梨形。 雌虫的卵全部排入卵囊中；成熟雌虫的虫体不变厚，不变为深 褐色。 重要种：南方根结线虫、花生根结线虫（M. arenaria）、 北方根结线虫（M. hapla）和爪哇根结线虫（M. javanica）。 孵化出的2龄幼虫遇合适的寄主即侵入，雌虫的幼虫和成虫 内寄生，唾液可刺激细胞增大；雄虫的幼虫内寄生，雄虫成
生殖系统：卵巢、子宫、阴门、受精囊；精巢、输精管、泄 殖腔、交合刺、交合伞
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唇 口 口针 食道 中食道球 排泄孔 唾液腺 神经环 肠
唇区 口针 角皮 口针基部球
卵巢
精巢
真皮索 体壁肌 角质环纹
卵 受精囊 子宫 阴门 肛门
侧尾腺
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精子 交合刺 交合伞
植物病原线虫的生活史和生态 生活史：卵、幼虫、成虫、交配产卵的过程。 线虫一般有4个龄期；蜕皮一次，增长一龄。垫刃目线虫的 第一龄幼虫是在卵内发育的。
时，果实吸水膨胀开裂将种子弹射出去 (主动方式)。
桑寄生科种子表面有槲寄生碱保护，经过鸟类消化道时亦 不受损坏。列当、独脚金的种子极小，成熟时蒴果开裂，种子 随风飞散传播，一般可达数十米远。菟丝子等种子或蒴果常随 寄主种子的收获与调运而传播扩散。寄生藻靠游动孢子或接合
子萌发产生的游动孢子传播。
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寄生性植物的主要类群：
实训8植物病害病原物的分离培养和鉴定
实训8植物病害病原物的分离培养和鉴定实训8 植物病害病原物的分离培养和鉴定1(实训目标通过对植物病原物分离培养方法的学习和实际操作，掌握病原物分离培养的基本原理和基本方法，为植物病原物的鉴定及病害的正确诊断提供依据;了解各种病原物的形态和生物学特性，为植物病害的有效防治打下基础。
2(实训材料(1)材料新采集的植物真菌、细菌、线虫病害的典型症状植株、PDA培养基、牛汁胨平板培养基等。
(2)仪器用具超净工作台、显微镜、解剖镜、恒温箱、三角瓶、灭菌培养皿、解剖剪、小镊子、移植环、酒精灯、70%酒精、95%酒精、0.1%升汞水或7%漂白粉消毒液、5%来苏尔、灭菌水、滤纸、蜡笔、标签、胶水、火柴、玻璃漏斗(直径10,15cm)、铁架台、橡皮管、弹簧夹、尖嘴玻璃管、网筛、挑针、竹针或毛针、凹穴玻片等。
3(实训内容(1)植物病原真菌的分离培养;(2)植物病原细菌的的分离培养;(3)植物病原线虫的分离培养。
4(操作步骤与方法1)植物病原真菌的分离培养对植物病原真菌通常采用的是组织分离法。
此方法的基本原理是:创造一个适合真菌生长的无菌营养环境，促使染病植物组织中的病原真菌在人工培养基上大量生长、繁殖，使其成为纯菌种，以便为病原鉴定和病害诊断提供实物依据。
(1)分离材料的选择及处理选择新鲜的典型症状植株、器官或组织，洗净，晾干，取新鲜病斑病健交界部分，切成,5mm见方小块用作分离材料。
将分离材料置于灭菌的小容器中，先用70%酒精漂洗约2,33s，迅速倒去，以避免材料表面产生气泡;然后用0.1%升汞溶液消毒1~2min(消毒时间因材料厚度不同而异;消毒剂也可根据不同情况选用漂白粉、次氯酸钠等)，再经无菌水漂洗3,4次，最后用灭菌的滤纸吸干材料上的水。
(2)工具的消毒、灭菌先打开超净工作台通风20min以上，用70%酒精擦拭手、台面和工作台出风口进行消毒;分离用的容器和镊子用95%酒精擦洗后经火焰灼烧灭菌。
分离也可在没有尘土而空气相对静止的室内进行，方法是擦净工作台，在台面上铺一块湿毛巾，地面洒水，然后在室内喷洒5%来苏尔熏蒸灭菌2~3h即可。
植物病害基础知识
2.在维管束组织内扩展
细菌从水孔或伤口侵入,进入维管束组织,引 起莠蔫症状。
常见的细菌病害
青枯病、软腐病、角斑病、溃疡病、辣椒疮痂病、桃穿孔病、水稻白 叶枯病、水稻细菌条斑病、姜瘟病等
白叶枯病（水稻）
细菌性角斑病（豆角） 细菌性缘枯病（黄瓜）
细菌性腐烂病（香蕉）
黑腐病（甘蓝） 青枯病（瓜类、西红柿、豆类）
水流传播
人为传播
昆虫等 介体传播
一、植物病原真菌
是一类大多数能形成丝状分枝的营养体， 有细胞壁和细胞核， 不含有叶绿素和其他光合色素， 有性生殖和无性生殖产生孢子的生物群。
真菌与细菌的异同
真菌：有完整细胞结构，有真正的细胞核。 细菌：有完整细胞结构，只有核区(胶体状)，核酸 游离在核区。
根据腐烂的部位有根腐、基腐、茎腐、果腐、花腐等
白菜软腐病
番茄脐腐病
4、病状的类型--萎蔫
萎蔫：植物根茎的维管束组织受到破坏
而发生的缺水凋萎现象，而根茎的皮层 组织完好。
分为：枯萎、黄萎、青枯。
黄瓜枯萎病
5、病状的类型--畸形
畸形：植物受病原物产生的激素类物质的刺激 而表现的异常生长现象。
（1）增生型：病组织的薄壁细胞分裂加快，数量迅速增多，局部组织出 现肿瘤或癌肿、丛枝、发根等。 （2）增大型：病组织的局部细胞体积增大（巨型细胞），但细胞数量 并不增多。如根结、徒长恶苗等。
病症。
黄瓜霜霉病
豇豆白粉病
豇豆锈病
黄瓜细菌性角斑病
三、 症状的变化
1．典型症状
一种病害在不同阶段或不同抗病性的品种上或者在不同的环境条件下出现不同 的症状，其中一种常见症状成为该病害的典型症状。 2．综合症 有的病害在一种植物上可以同时或先后表现两种或两种以上不同类型的症状， 这种情况称谓综合症。例如稻瘟病在芽苗期发生引起烂芽，在株期侵染叶片则表现 枯斑，侵染穗部导致穗茎枯死引起白穗。
第二章 检疫性植物病原生物
1.3.3冬孢子形态鉴定
在油镜下随机测量30个冬孢子的网脊高 在油镜下随机测量30个冬孢子的网脊高 度，每个孢子按上下左右测量4 度，每个孢子按上下左右测量4次，求平 均网脊高度值，按照GB/T18085-2000标 均网脊高度值，按照GB/T18085-2000标 准，TCK的冬孢子的平均网脊高度值约 准，TCK的冬孢子的平均网脊高度值约 0.71~1.42；若大于等于1.43um或网脊高 0.71~1.42；若大于等于1.43um或网脊高 度值小于或等于0.7um时，不是TCK。 度值小于或等于0.7um时，不是TCK。
1.2.5越冬及传播
病菌以冬孢子或菌瘿在土壤中、种子表面或粪 肥中越冬。冬孢子附在种子表面或菌瘿混入种 子间调运而作洲际传播，也可以通过被污染的 的包装材料、容器和运输工具等远传。病区土 壤带菌是主要的侵染源，在收获或储运期间， 菌瘿或冬孢子常会撒落在田间和被风吹到附近 的田块。脱粒时孢子粉亦可随风飞散、随河水、 灌溉水在田间传播。冬孢子经过家畜消化道而 不影响它的活性，所以粪肥和秸杆也能传病。
小麦矮腥黑穗病 Tilletia controversa
病原菌特征 小麦矮腥冬孢子萌发需 有长期低温与光照（5℃， 长期低温与光照（ 400-600lx， 400-600lx，3-4周）； 小麦矮腥冬孢子通过短 时间的激发就有自发荧 光现象（ 50W 高压汞灯， 光现象 （ 50W 高压汞灯 ， 2-3 分钟 ， 发光率 80% ） ； 分钟， 发光率80% 小麦矮腥冬孢子网脊基 部至顶端的垂直高度较 大（1.425±0.144µm） 大（1.425±0.144µm）
我国西北高原冬麦区和新疆、青藏高原 晚播冬麦区的条件极为适宜TCK的发生， 晚播冬麦区的条件极为适宜TCK的发生， 为高危险区；江淮流域及华北、东北的 冬麦区也基本适宜于病害的发生，属危 险区；西南高海拔地区有时也具备病菌 入侵的条件，故也可能受害。
植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理研究
植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理研究一、本文概述植物病原菌是威胁全球农业可持续发展的重要因素之一，它们引发的植物病害会导致作物减产、品质下降，甚至造成整个生态系统的破坏。
因此，寻找并利用拮抗微生物来防治植物病害，已成为当前植物保护领域的研究热点。
本文旨在探讨植物病原菌拮抗微生物的筛选方法、鉴定技术，以及深入研究其拮抗机理，以期为农业可持续发展提供新的生物防治策略。
本文将详细介绍拮抗微生物的筛选过程，包括采样方法、初筛和复筛步骤等。
通过从各种环境样本中分离和筛选出具有拮抗活性的微生物，为后续研究提供丰富的资源库。
本文将阐述拮抗微生物的鉴定方法，包括形态学观察、生理生化特性分析以及分子生物学鉴定等，以确保所获得的拮抗微生物种类准确可靠。
在此基础上，本文将重点研究拮抗微生物的拮抗机理。
通过比较基因组学、转录组学、蛋白质组学等多组学手段，揭示拮抗微生物与植物病原菌之间的相互作用关系，明确其拮抗作用的分子机制。
还将通过室内生物测定和田间试验，验证拮抗微生物的实际应用效果，为其在实际生产中的应用提供科学依据。
本文旨在通过系统研究植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理，为农业病害的生物防治提供新的思路和方法。
这不仅有助于推动植物保护领域的发展，也将为农业可持续发展和生态环境保护做出积极贡献。
二、材料与方法为了筛选拮抗微生物，我们从各种植物病害的土壤中收集了多种微生物，并选取了代表性的植物病原菌，如灰霉病菌、青枯病菌等。
这些病原菌是在植物病理实验室中通过常规方法分离和纯化的。
用于微生物培养和筛选的培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯葡萄糖培养基等，这些培养基均按照标准方法进行配制和灭菌。
实验过程中所使用的试剂均为分析纯，购自国内知名试剂公司。
实验仪器包括显微镜、培养箱、分光光度计、PCR仪等，这些仪器均经过定期校准和维护。
将收集到的微生物在牛肉膏蛋白胨培养基上进行初步培养，然后通过平板对峙法观察微生物对病原菌的拮抗作用。
第十五章植物生物胁迫抗性的鉴定与选择
（三）植物的抗病机制
1、加强氧化酶活性
当病原微生物侵人作物体时，该部分组织的氧化酶活性 加强，以抵抗病原微生物。凡是叶片呼吸旺盛、氧化酶 活性高的马铃薯品种，对晚疫病的抗性较大； 凡是过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶活性高的甘蓝品种， 对真菌病害的抵抗力也较强。这就是说，作物呼吸作用 与抗病能力呈正相关。
抗病性鉴定是评价寄主品种、品系或种质对特定病害 抵抗或感染程度。
鉴定方法包括自然鉴定、接种鉴定、离体鉴定等， 在 实际工作中根据植物、病害种类、目的要求和设备条 件而定。
(一)田间自然鉴定
对于树体大、多年生的果树及观赏植物进行田间鉴定， 可将待鉴定的材料按一定的株行距定植于大田，全年不
使用任何杀菌药，并于发病盛期，每份材料调查100300个果实或叶片的发病程度，计算病情指数。 它的优点是能较全面准确地反应被鉴定材料的抗病性，
植物的抗病机制
植物对病原微生物有防御反应的主要物质： (1)植物防御素 (2)木质素
(3)酚类化合物
(4)不饱和内酯 (5)抗病蛋白 (6)免疫信息物质 (7)激发子
（四） 物理结构特征与抗病性的关系
1、角质层或蜡质 角质层的某些特征， 如叶面防水特性， 使得那些由 水滴携带的真菌的湿润孢子不能停留在叶面上， 从而 起着抵抗病菌侵入的作用。 有的植物的角质层含有能够抑制某些真菌生长的物质。 有的研究发现， 蜡质层有减缓或延缓发病的作用。
（四） 分级标准和方法
（１） 定性分级。主要根据侵染点及其周围枯死反应 的有无或强弱、寄主大小、色泽及其产孢的有无、多 少， 把病斑分为免疫、高抗到高感等级别。
第一节 植物的生物胁迫
一、植物病原生物及其类型
植物的生物胁迫是由能侵染、寄生于植物体并影响植 物正常生长发育的生物造成的， 这样的生物通常称为 病原生物。 病原生物的种类很多， 包括线形动物门的线虫、节肢 动物门的屁虫、原生动物门的鞭毛虫、菌藻植物门的 寄生藻、双子叶植物门的寄生性种子植物（如寄生于 大豆、高粱的菟丝子） 、真菌门５ 个亚门的真菌、 薄壁菌门和厚壁菌门的细菌、软壁菌门的螺原体和支 原体、病毒和类病毒。具有重要影响的病原生物及其 生物学特性、传播、流行和危害见表１５‐１ 。