第5章-思考题解析
《工程热力学》第五章 思考题答案
思考题5-4
摩擦等耗散效应
不可逆根源：
温差
有限势差下 进行的过程
压差 浓度差等
3
思考题5-5
4
思考题5-8
1)错 闭口系熵方程 dS Sg S f ,Q
2)错 开口系熵方程 dS (si mi s j mj ) Sf ,Q Sg
Sf,m Sf ,Q Sg
3)错 可逆绝热过程为定熵过程，反之不成立
如：不可逆放热过程，当放热引起的熵减等于不可逆引起 的熵增时（亦即当放热量等于不可逆耗散所产生的热量 时），它也可以表现为熵没有发生变化。
5
思考题5-8 4)错 可逆吸热过程为熵增大过程 5)错 使孤立系统熵增大过程为不可逆过程 6)对
6
思考题5-9
1)错
s12
2
1 cV
dT T
Rg
ln
v2 v1
s12
2 dT 1 cp T Rg ln
p2 p1
s12
2
1 cV
dp p
2
1 cp
dv v
2) dS Sf,m Sf ,Q Sg
S不可逆＝S可逆
Sf
不一定
,Q
Sg,不可逆 Sg,可逆 7
思考题5-9
3)错，对于闭口系，绝热过程，无论是膨胀还是压 缩
dS Sg S f ,Q Sg 0, S f ,Q 0
S 0
4) 错
ds 0
δq Tr
0
8
思考题5-10
9
思考题5-11
不可逆绝热压缩 dS Sg S f ,Q
Sg 0, S f ,Q 0
S 0
10
可逆绝热压缩过程的技术功为 面积1-2T-j-m-1
微型计算机原理作业第五章 习题与思考题
第五章习题与思考题典型例题解析例5-1 计算机输入/输出控制方式有哪几种?各有什么特点?答：CPU与外设进行数据传送，系统中对数据传送的控制方式一般分为四种：①程序控制方式，程序控制方式是指CPU与外设间的数据传送是在程序的控制下完成的一种数据传送方式，这种方式又分为无条件传送和条件传送二种。
在这种I/O方式中，程序设计简单，硬件软件较省，但费时，CPU效率较低，实时性差，主要用于中低速外设和实时性要求不高的场合。
②中断控制方式，中断控制方式是指利用中断技术控制CPU与外设进行数据传送的一种方式。
这种方式实时性好，不需要反复查询等待，减少了CPU等待时间，CPU与外设可并行工作，但这种方式需要进行现场保护及恢复等工作，仍花费CPU时间。
③DMA方式，DMA方式是指由专门硬件控制，不需CPU介入，直接由存储器与外设进行数据传送的方式。
这种方式不需CPU介入，减少了CPU的开销，能实现高速的数据块传送，提高了效率。
但这种方式增加了硬件开销，提高了系统的成本。
④IOP方式，IOP方式是指由输入/输出协处理器IOP控制数据传送的方式。
这种控制方式由于输入/输出协处理器具有单独的指令系统，因此能在数据传送时，同时进行数据处理，数据传送支持DMA方式，因此传送速度快而且不须CPU介入，CPU与IOP可并行工作，效率高。
这四种方式中，程序控制方式和中断方式属于软件控制方式，DMA方式和IOP方式属于硬件方式。
例5-2 试述I/O端口两种编址方法的特点与区别。
..答：I/O端口的编址方法有二种：即I/O端口单独编址方式和I/O端口与存储器单元统一编址方式。
I/O端口与内存单元地址统一编址方式是将I/O端口地址与内存地址统一安排在内存的地址空间中，即把内存的一部分地址分配给I/O端口，由I/O端口来占用这部分地址。
这种方式控制逻辑较简单，I/O端口数目不受限制，所有访问存储器的指令都可用于I/O端口，指令丰富，功能强。
电力电子第四版 第5章 思考题与习题答案详解
习题与思考题1.无源逆变电路和有源逆变电路有什么不同？答： 有源逆变是将逆变电路的交流侧接到交流电网上，把直流电逆变成同频率的交流电返送 到电网。
应用于直流电机的可逆调速、绕线转子异步电机的串级调速、高压直流输电和太阳 能发电等方面。
无源逆变是逆变器的交流侧直接接到负载，即将直流电逆变成某一频率或可 变频率的交流电供给负载。
蓄电池、干电池、太阳能电池等直流电源向交流负载供电时，需 要采用无源逆变电路。
2.电力电子电路中的开关器件有哪些换流方式？各有什么特点？答：换流方式可分为以下四种：①器件换流：利用全控型器件(GTO、GTR、IGBT和电力 MOSFET等)的自关断能力进 行换流。
②电网换流：由电网提供换流电压称为电网换流。
在换流时，只要把负的电网电压 施加在欲关断的晶闸管上即可使其关断。
这种换流方式不需要器件具有门极可关断能力，也 不需要为换流附加元件，但不适用于没有交流电网的无源逆变电路。
③负载换流：由负载提 供换流电压称为负载换流。
在负载电流相位超前于负载电压的场合， 即负载为电容性负载时， 可实现负载换流。
④强迫换流：强迫换流需要设置附加的换流电路。
给欲关断的晶闸管强迫 施加反向电压或反向电流的换流方式称为强迫换流。
强迫换流通常利用附加电容上储存的能 量来实现，也称为电容换流。
上述四种换流方式中，器件换流只适用于全控型器件，其余方式针对晶闸管而言。
3.什么是电压型逆变电路和电流型逆变电路？各有什么特点？答：逆变电路按照直流侧电源性质，可分为电压型逆变电路和电流型逆变电路两类。
直流侧 电源是电压源的逆变电路，称为电压型逆变电路，而直流侧电源为电流源的逆变电路，称为 电流型逆变电路。
电压型逆变电路有如下主要特点：1）直流侧为电压源或并联大电容，电容抑制了直流电压纹波，使直流侧电压基本无脉 动，直流侧近似为恒压源，直流回路呈现低阻抗。
2）输出电压为矩形波，输出的电流波形和相位因负载阻抗不同而不同。
第5章 农业的起源和发展课后思考题解答
1、结合农业发展的阶段，探讨农业和社会发展的相互影响并分析四大文明古国出现的必要条件。
农业和社会发展的相互影响：（一）原始农业阶段：主要是迁移农业，“刀耕火种”对土地进行轮作，在环境可承载范围有积极作用，发展农业、改善自身生活，科技获得一定发展。
（二）传统农业阶段：属于自然经济，农具、技术改进，基本上靠人力，社会发展由于农民生活的贫困而缓慢曲折。
（三）现代农业阶段：农业生产出现巨大飞跃，进入商品农业阶段，农业社会化程度很高。
现代农业的产品保证了第二三产业的顺利进行。
四大文明古国出现的必要条件：1.埃及尼罗河的影响因素：1、水源主要来自上游热带雨林区（雨量大且均匀）。
2、第二水源地埃塞俄比亚高原热带草原气候分旱、雨两季（雨季始于6月终于10月），雨季降雨使大量腐殖质进入河里，每年的定期的洪水带来丰富营养的淤泥，有利小麦种植。
3、平水期满足小麦在11月播种，5月收获，无水灾且有充足灌溉水源。
洪水期留下的富含营养的淤泥对小麦生长极为有利。
（上述条件使小麦高产、为文明发展提供优越条件）农业因素：埃及具有丰富的农业种植经验技术和深厚的文化底蕴。
良好的对外防守环境：东有西奈荒漠，西有利比亚沙漠，北有大片河口沼泽，南有沙漠瀑布便利的运输条件：河运发达，在尼罗河上，往北顺流而下，往南借北风逆流而上。
2．巴比伦气候：地中海气候，冬季降雨。
水源：位于幼发拉底河、底格里斯河之间的新月形地带，河水冬季来自雨水，春季来自高山冰雪融水，水源充足。
农业方面：秋种、夏收的小麦，生长期内有雨水、河水灌溉，产量较高。
3.印度有利的气候水文条件：热带季风气候，河流有高山冰雪融水和夏季的西南季风的雨水补给。
夏汛洪水给河流两岸带来富含营养的沉积物。
4.中国地形上：黄土高原边缘地区，黄土土质疏松，含矿物质多，利于土地开垦、作物种植。
气候上：年降水量在600mm~650mm之间，气温7月平均26℃、2月平均－2℃，高温与雨季结合，利于作物生长。
第5章 习题与思考题和答案
4．下段程序执行的输出结果是。
S=0:T=0:U=0
For i=1 To 3
For j=1 To i
For K=j To 3
S=S+1
Next K
T=T+1
Next j
U=U+1
Next i
Print S;T;U
A．3 6 14B．14 63C．14 3 6D．16 4 3
Next j
If j>Int (Sqr(n-m))ThenPrint n,m,n-m
EndIf
Next m
Next n
EndSub
六
（1）编程序计算：1！+3！+5！+….+11！
（2）输入两个正整数m和n，求其最大公约数a和最小公倍数b，计算最大公约数a的方法如下：先算出m/n余数r,若r等于0，则n为最大公约数；若r不为0，则把原来的n值作为新的m值，把原来的r值作为新的n值，继续运算。这样辗转相除，直到r为0，此时的n值为最大公约数a,最小公倍数则可用原始m与n值的积除以最大公约数求得。
Private Sub Form_click()
Dim k,a,b as integer
a=20
b=2
k=2
Do While k<=a
b=b*2
k=k+5
Loop
Print b
End Sub
5.写出以下程序在单击命令按钮后的输出结果。
Private Sub Form_click()
k=0
fori=1 to 5
If n <= 0 Or m <= 0 Then
电工学 唐介 第5章 思考题及习题 解答 答案
第5章 变 压 器
5.2 (3) 两个匝数相同（N1= N2 ）的铁心线圈分别接 到电压相等（U1= U2）而频率不同（f1＞f2）的两个交流电 源上时，试分析两个线圈中的主磁通Φ1m 和Φ2m 的相对大 小（分析时可忽略线圈的漏阻抗）。
5.4 (1) 在求变压器的电压比时，为什么一般都用空 载时一、二次绕组电压之比来计算？
空载时： U1≈E1，E2 = U20 = U2N ，而负载时： U1≈E1， E2≈U2 ，显然用空载时一、二次绕组电压之比来计算电 压比精确度较高。
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第5章 变 压 器
5.4 (2) 为什么说变压器一、二次绕组电流与匝数成 反比，只有在满载和接近满载时才成立？空载时为什么 不成立？
5.4 (2) 为什么说变压器一、二次绕组电流与匝数成 反比，只有在满载和接近满载时才成立？空载时为什么 不成立？
5.4 (3) 满载时变压器的电流等于额定电流，这是的 二次侧电压是否也等于额定电压？
5.4 (4) 阻抗变换的公式即式（5.4.11）是在忽略什么 因素的条件下得到的？
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第5章 变 压 器
5.2 (1) 额定电压一定的交流铁心线圈能否施加大小 相同的直流电压？
【答】 如果给交流铁心线圈施加了与交流电压大小 相等的直流电压会把线圈烧毁。这是因为交流铁心线圈 上施加的交流电压绝大部分被感应电动势所平衡 （U≈E），漏阻抗上的电压很小，因而励磁电流很小。 如果是施加同样大小的直流电压，由于线圈中没有感应 电动势与之平衡，全部电压降落在线圈本身的电阻上， 该电阻值是很小的，因此将会产生很大的直流励磁电 流，使线圈烧毁。如果系统有过流保护装置，此时保护 装置将动作跳闸。
5.微观第五章 思考题答案详解
第五章思考题A、B、C详解一、思考题A：基础知识题1.1（错）。
它是等产量线与等成本线的切点。
1.2（对）。
正常利润就是经济利润与会计利润的差额，经济利润是在会计利润中再剔除正常利润（或机会成本）后得到的，经济利润也称为超额利润。
1.3 D 经济学上长期和短期的划分标准是企业调整生产要素需要的时间。
1.4 C 这是属于规模报酬问题，与长期生产函数有关。
当长期边际成本高于长期平均成本时，长期平均成本上升，对应的是规模报酬递减。
1.5 A 一定产量下成本最小的投入组合是要求是等产量曲线不变，调整等成本曲线，调整到与等产量曲线相切的位置。
由于题中等成本曲线与等产量曲线没有交点和切点，而等产量曲线固定，只能调整等成本曲线，向外移动（即增加成本），直到与等产量曲线相切。
故是增加投入，选A。
1.6 A 显性成本（Explicit Cost）是指企业在生产要素市场上购买或租用所需要的生产要素的实际支出，即企业支付给企业以外的经济资源所有者的货币额。
本题中企业购买或使用生产要素所发生的成本正是这部分的有形成本，所以是显性成本，选A。
1.7 D AFC=TFC/Q，由于TFC在短期中固定不变，而Q在不断增加，故AFC 是不断减少的，所以它的曲线是一直趋于下降，选D。
1.8 答案：边际报酬递减规律又称边际收益递减规律，是指在其他技术水平不变的条件下，在连续等量地把一种可变要素增加到其他一种或几种数量不变的生产要素上去的过程中，当这种可变生产要素的投入量小于某一特定的值时，增加该要素投入所带来的边际产量是递增的；当这种可变要素的投入量连续增加并超过这个特定值时，增加该要素投入所带来的边际产量是递减。
1.9 答案：（1）边际产量递减规律的基本内容是：在技术水平不变的情况下，当把一种可变的生产要素投入到一种或几种不变的生产要素中时，最初这种生产要素的增加会使产量增加，但当它的增加超过一定限度时，增加的产量将要递减，最终还会使产量绝对减少。
物理化学核心教程第二版思考题习题答案—第5章化学平衡
第五章 化学平衡一．基本要求1．掌握化学反应等温式的各种形式，并会用来判断反应的方向和限度。
2．了解标准平衡常数的定义，掌握标准平衡常数的各种表示形式和计算方法。
3．掌握标准平衡常数K 与r m G ∆在数值上的联系，熟练用热力学方法计算r m G ∆，从而获得标准平衡常数的数值。
4．了解标准摩尔生成Gibbs 自由能f m G ∆的定义和它的应用。
5．掌握温度对化学平衡的影响，记住van ’t Hoff 公式及其应用。
6．了解压力和惰性气体对化学平衡的影响。
二．把握学习要点的建议把本章放在多组分系统之后的目的，就是要利用多组分系统中介绍的化学势的概念和各种表示方式，来导出化学反应等温式，从而用来判断化学反应的方向与限度。
本章又用到了反应进度的概念，不过其值处在0 1 mol -的区间之内。
因为在利用化学势的表示式来计算反应的Gibbs 自由能的变化值时，是将化学势看作为一个定值，也就是在有限的反应系统中，化学进度为d ξ，如果在一个很大的系统中， 1 mol ξ=。
严格讲，标准平衡常数应该用绝对活度来定义，由于本教材没有介绍绝对活度的概念，所以利用标准态化学势来对标准平衡常数下定义，其含义是一样的。
从标准平衡常数的定义式可知，标准平衡常数与标准化学势一样，都仅是温度的函数，因为压力已指定为标准压力。
对于液相反应系统，标准平衡常数有其相应的形式。
对于复相化学反应，因为纯的凝聚态物质本身就作为标准态，它的化学势就是标准态化学势，已经归入r m G ∆中，所以在计算标准平衡常数时，只与气体物质的压力有关。
学习化学平衡的主要目的是如何判断反应的方向和限度，知道如何计算平衡常数，了解温度、压力和惰性气体对平衡的影响，能找到一个经济合理的反应条件，为科研和工业生产服务。
而不要过多地去考虑各种浓度表示式和各种平衡常数表示式之间的换算，否则会把自己搞糊涂了，反而没抓住主要内容。
由于标准平衡常数与r m G ∆在数值上有联系，r m ln p G RT K ∆=-，所以有了r m G ∆的值，就可以计算p K 的值。
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51.试述PCR扩增的原理和步骤。
答：PCR技术是体外快速扩增特异DNA序列的一种方法。
基本原理：通过模拟体内DNA复制的方式，在体外以DNA为模板，4种脱氧核苷酸为原料，用特异引物为延伸起点，在DNA聚合酶的催化下，通过温度变化控制DNA 的变性和复性，完成特定基因的体外复制。
步骤：○1变性，双链DNA模板在高温下解开成单链；○2退火，温度降低后引物与模版的特定序列相结合；○3延伸，DNA聚合酶催化新链DNA合成。
最终这三步经过多次循环后使两条引物间DNA区段的拷贝数呈指数增加，从而短时间内获得所需的大量的特定基因序列。
2.试比较常规重组载体构建和恒温一步法载体构建的异同点。
答：常规重组载体构建过程：○1合成目的基因片段两端的引物；○2PCR扩增目的基因；○3对目的基因和质粒载体进行双酶切（用相同的外切核酸酶）；○4 T4 DNA连接酶将酶切后目的基因和质粒载体连接成一个整体，连接温度为22℃时，1～2 h完成连接，4℃或16℃连接时，需要反应8 h以上完成连接反应。
恒温一步法载体构建：其主要特征是载体与片段的连接不依赖T4 DNA连接酶。
主要过程：○1将载体线性化，通过引物设计在插入片段两端引入线性化载体的末端序列；○2PCR扩增插入片段后，其两端具有与线性化载体末端相同的序列；○3按一定比例加入插入片段和线性化载体，再加入dNTP，在T5外切核酸酶、DNA聚合酶和TaqDNA连接酶的混合催化下，50℃恒温反应15～30min即可完成连接反应。
3.比较荧光染料SYBRGreenⅠ和TaqMan荧光探针的主要不同点。
答：SYBRGreenⅠ荧光探针：1种荧光，波长520nm；加入到PCR反应体系中的荧光染料SYBRGreenⅠ仅能与双链DNA结合，被激发出绿色荧光，其荧光强度反映PCR产物的产量，可以检测PCR反应中获得的全部双链DNA，但是不能区分不同的双链DNA。
TaqMan荧光探针：含有短波长和长波长2种荧光。
在PCR反应开始前，两种荧光由于荧光共振能量转移作用而检测不到荧光。
PCR反应开始后，随着双链DNA变性产生单链DNA，TaqMan探针结合到与之配对的靶DNA序列上，并被具有外切酶活性的TaqDNA聚合酶逐个切除而降解，从而解除荧光淬灭的束缚，短波长的荧光基团在激发光下产生绿色荧光，它的荧光强度反映新合成目的DNA的产量。
4.分析基因组DNA文库和cDNA文库的主要区别。
答：基因组DNA文库是把某种生物的基因组DNA切成适当大小，分别与载体结合，导入微生物细胞形成克隆，理论上基因组DNA文库含有一种生物的全部DNA序列。
应用：主要用于分离特定的基因片段、分析特定基因结构、研究基因表达调控，还可以用于全基因组物理图谱的构建和全基因组序列测定等。
cDNA文库是指以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA 克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
应用：筛选目的基因、大规模测序、基因芯片杂交等功能基因组学的研究。
5.cDNA合成时的方向性是如何实现的？答：为保证所获得双链cDNA的方向性，应该在cDNA合成的过程中，选用活性较高的反转录酶及甲基化dCTP，再在cDNA两端加上不同内切酶所识别的接头序列，即可保证其方向性。
6.热不对称交错多聚酶链式反应（TAIL-PCR）的主要技术和原理？答：TAIL-PCR是使用一套巢式（nested）特异引物（T-DNA边界引物，TR）和一个短的随机简并引物（AD），用于扩增T-DNA插入位点侧翼序列，从而获得转基因植物插入位点特异性分子证据。
TAIL-PCR分三轮反应：第一轮反应（primaryreaction，PCRⅠ）是TAIL-PCR 的重要环节，先进行5轮高严谨性循环，特异性引物TR1与模板退火，只能发生单引物循环，T-DNA上游侧翼序列得到线性扩增。
再大幅度降低退火温度，使AD及TR1均与模板DNA相结合，指数扩增一个循环。
此后，两个高严谨、一个低严谨循环交替进行，共15个循环。
特异性序列（两端分别拥有TR1和AD序列）和非特异性序列Ⅰ（只有TR1，没有AD序列）大大超过非特异性序列Ⅱ（两端均为AD序列）。
第二轮反应（PCRⅡ）以TR2为特异性引物与AD配对，进行12个TAIL-PCR 循环，特异性序列再次被优先扩增，非特异性序列Ⅰ也大大降低，此时已没有明显的背景片段。
第三轮反应（PCRⅢ）是真正意义上的PCR，用TR3为特异性引物与AD配对，共20个循环，进一步扩增特异性序列。
7.说说从总RNA的提取到分离出非编码RNA的主要过程。
答：总RNA的提取常用异硫氰酸胍-苯酚抽提法。
提取过程：首先用液氮研磨材料，匀浆，加入Trizol试剂，进一步破碎细胞并溶解细胞成分。
然后加入氯仿抽提，离心，分离水相和有机相，收集含有RNA的水相，通过异丙醇沉淀，获得比较纯的总RNA，用于下一步mRNA的纯化。
检测RNA质量后，依据非编码RNA的大小和形态结构，可通过以下几种方式分离：○1对于较短的，如miRNA、siRNA、piRNA等常常小于50nt的非编码RNA 的分离。
提取总RNA后，用聚丙烯酰胺电泳分离出小于50nt的RNA，割胶回收并用乙醇将RNA沉淀出来，一般加入糖原和乙酸钠做助沉剂，也可用专一性吸附小片段RNA的硅胶膜柱子纯化。
○2也可以从总RNA样品中去除rRNA和tRNA，再分离其他非编码RNA。
该方法首先合成rRNA和tRNA特异性生物素标记的寡核苷酸探针，这些探针与各种rRNA及tRNA杂交，杂合链因为带有生物素标记而被偶联了链霉亲和素的磁珠高效捕获，链霉亲和素与生物素之间稳定的非共价结合使得生物素标记的双链分子紧密结合在磁珠上。
用磁铁将磁珠从样品中分离，就排除了这两种组成型RNA的干扰。
○3cirRNA中具有闭合环状的结构，利用它的这一特殊结构可单独将其分离出来。
将rRNA和tRNA从总RNA中除去后，使用具有3′端核糖核酸外切酶活性的RNaseR专一性降解单链线性RNA分子，即可将mRNA和其他线性非编码RNA一并除去，留下环状的RNA分子。
8.已知一个cDNA3′端的部分序列，请设计实验流程得到该基因的全长cDNA。
答：○1提取RNA，以RNA为模板，oligo（dT）做引物，在反转录酶催化下形成cDNA。
由末端转移酶在已合成的cDNA链的3′端连续加入dCTP，形成oligo（dC）尾巴；○25′RACE，以连有oligo（dC）的锚定引物AP和基因片段内部特异引物进行巢式PCR扩增，得到目的基因5′端片段；○3将获得的5′端扩增片段通过T4 DNA连接法或者恒温一步法连接到克隆载体；○4将重组克隆载体转入大肠杆菌感受态细胞，经过PCR筛选鉴定后进行测序，获得全长序列。
9.试分析RACE技术与RAMPAGE技术的相同点和不同点。
答：RACE技术是一项在已知cDNA序列的基础上克隆5′端或3′端缺失序列的技术，在很大程度上依赖于RNA连接酶连接和寡聚帽子的快速扩增。
也可用于研究转录起始位点的不均一性和启动子区的保守性。
主要操作步骤如下：○1在反转录酶的作用下，用特异性引物启始cDNA第一条链的合成，并纯化；○2由末端转移酶在已合成的cDNA链的3′端连续加入dCTP，形成oligo（dC）尾巴；○3以连有oligo（dC）的锚定引物和基因片段内部特异引物进行巢式PCR扩增，以期得到目的基因5′端片段；○4用锚定引物AP和基因片段内部特异引物进行PCR扩增，以期得到目的基因3′端片段。
○5将纯化后PCR产物克隆到载体DNA中，进行序列分析。
RAMPAG技术是一种在全基因组范围内鉴定所有蛋白质编码基因和部分非编码RNA基因的转录起始位点，确定启动子的具体位置，并且能够高通量检测基因表达水平的方法。
主要操作步骤如下：○1以mRNA样本为模板，添加引物接头，利用反转录酶催化cDNA第一链的合成；○2mRNA末端标记生物素；○3RNaseⅠ消化单链RNA；○4偶联了链霉亲和素的磁珠筛RNA-cDNA杂合链；○5RNaseH消化单链RNA；○6PCR 扩增cDNA，磁珠对cDNA片段进行尺寸筛选。
10.简述Gateway大规模克隆技术原理及基本操作流程。
答：原理：利用λ噬菌体进行位点特异性DNA片段重组，实现不需要传统的酶切联接过程的基因快速克隆和载体间平行转移。
基本操作流程：主要包括TOPO反应和LR反应两步。
TOPO反应将目的基因PCR产物连入Entry载体，该载体上的CCCTT能被拓扑异构酶所识别，切开后通过该酶274位上的酪氨酸与切口处的磷酸基团形成共价键，被偶联在载体上。
加入PCR产物后，载体上3′突出端GTGG与PCR产物的互补性末端接头序列CACC配对，使PCR产物以正确方向连入Entry载体。
LR反应将目的片段从Entry载体中重组入表达载体。
Entry载体上基因两端具有attL1和attL2位点，目的载体上含有attR1和attR2位点，在重组蛋白的作用下发生定向重组，形成新的位点attB1和attB2，最终将目的基因转移到表达载体中。
11.说说基因图位克隆法的原理和过程。
答：基因的图位克隆法是分离未知性状目的基因的一种方法，从理论上说，所有具有某种表型的基因都可以通过该方法克隆得到。
其原理和过程：首先，通过构建遗传连锁图，将目的基因定位到某个染色体的特定位点，并在其两侧确定紧密连锁的RFLP或RAPD分子标记。
其次，通过对许多不同生态型个体的大量限制性内切酶和杂交探针的分析，找出与目的基因距离最近的分子标记，通过染色体步移技术将位于这两个标记之间的基因片段分离并克隆出来，再根据基因功能互补原理鉴定目的基因。
12.比较基因组与蛋白质组的主要差别。
答：基因组是确定的，组成某个体的所有细胞共同享有固定的基因组，而各个基因的表达调控及表达程度却会根据时间、空间和环境条件发生显著的变化，所以，不同器官、组织或细胞拥有不同的蛋白质组，同一器官、组织或细胞在不同时空环境条件下也有不同的蛋白质组。
13.说出蛋白质质谱技术的主要原理。
答：现行的质谱仪可分为3个连续的组成部分，即离子源、离子分离区和检测器。
目前常用的是基质辅助的激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF）和电喷雾质谱（ESI-MS）。
MALDI-TOF的工作原理是将从2-D胶中分离得到的或其他来源的蛋白质酶解成小肽段后与基质（主要是有机酸）混合，将样品混合物点到金属靶表面上并使之干燥结晶，然后用激光轰击，将呈离子化气体状态的待分析物从靶表面喷射出去。
离子化的气体中每个分子带有一个或更多的正电荷，这些气体肽段在电场中被加速后到达检测器的时间由肽段的质量和其所带电荷数的比值（m/z）决定。