CQ11逆转多药耐药人胃癌细胞株对多柔比星的耐药
CQ11逆转多药耐药人胃癌细胞株对多柔比
星的耐药
作者：吴达龙睢凤英张成文吕焕章
【摘要】目的: 探讨氯喹衍生物CQ11对耐长春新碱(vincristine, VCR)人胃癌多药耐药(multidrug resistance, MDR) 细胞株SGC7901/VCR的耐药逆转作用。方法：将SGC7901和SGC7901/VCR细胞分别与各种浓度的多柔比星(doxorubicin, DOX)和/或CQ11在体外共同培养，采用MTT法检测其细胞毒作用；采用荧光分光光度计测定细胞内DOX蓄积量。结果：SGC7901/VCR细胞对DOX的耐药程度是SGC7901细胞的37.5倍。1.0、2.5 和 5.0 mol/L的CQ11分别使DOX对SGC7901/VCR细胞的敏感性分别增加到 2.2倍(P<0.01)、5.5倍(P<0.01) 和14倍(P< 0.01)。DOX蓄积实验表明，CQ11能显著增加SGC7901/VCR细胞内DOX蓄积，而对SGC7901细胞内DOX蓄积无明显影响。结论：通过增加细胞内DOX蓄积量，CQ11在体外能有效逆转SGC7901/VCR细胞对DOX的耐药性
【关键词】多药耐药; 氯喹; 胃癌; 逆转剂
肿瘤多药耐药(multidrug resistance, MDR)指肿瘤细胞一旦对某种化疗药物产生耐药性，同时对其它结构上无关、作用机理各异的抗肿瘤药物也产生交叉耐药性［1］。MDR是一种独特的广谱耐药现象，
是导致化疗失败的重要原因，许多天然来源的抗肿瘤药物如长春新碱(vincristine, VCR)、紫杉醇等及蒽环类抗癌抗生素如多柔比星(doxorubicin, DOX)、柔红霉素都极易发生MDR［1~3］。MDR主要的耐药机理为多药耐药基因mdr1扩增及其蛋白产物P-糖蛋白(permeability glycoprotein, Pgp)过表达。作为一个ATP依赖性的药物转运泵，Pgp能主动将疏水性抗肿瘤药物泵出胞外, 从而减少细胞内药物蓄积, 增加药物外排［3］。MDR逆转剂，如维拉帕米和环孢菌素A，能与Pgp结合，抑制Pgp的药物外排功能，增加耐药细胞内抗肿瘤药蓄积，从而恢复细胞对抗肿瘤药的敏感性。然而，大量的临床研究结果表明，上述肿瘤MDR逆转剂由于体内毒性大，体内难以达到有效逆转浓度［3］。因此积极寻找高效低毒的新型MDR逆转剂，已成为肿瘤MDR研究的热点。
氯喹 CQ11
图1 氯喹和氯喹衍生物CQ11的化学结构
CQ11是以抗疟药氯喹的结构母核为基础, 经侧链改造而获得的新化合物(化学结构见图1)，由本课题组合成。本研究以耐VCR人胃癌MDR细胞株SGC7901/VCR为体外模型，研究CQ11对SGC7901/VCR 细胞的体外MDR逆转效应。
1 材料与方法
1.1 药物和试剂
CQ11由本课题组自行合成, 以二甲亚砜(dimethylsulfoxide , DMSO) 溶解。MTT和DOX购自Sigma公司。
1.2 细胞培养
SGC7901细胞和SGC7901/VCR细胞（将SGC7901细胞在含浓度不断递增的VCR的培养基中连续培养所获得的耐药细胞株）均由本室保存［4］，细胞均用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基，在37℃、5% CO2孵箱中培养。 SGC7901/VCR在含0.80 mol/L VCR培养液中稳定生长, 在正式实验前2周撤去VCR。
1.3 细胞存活率测定
采用MTT法测定细胞毒作用［4］。取生长旺盛SGC7901和SGC7901/VCR细胞，稀释后接种于96孔平底培养板中（每孔含4.0×103 细胞），置CO2培养箱中培养。接种24 h 后分别加入不同浓度的DOX 和/或 CQ11，使液体总量达到每孔200μL; 继续培养72 h，弃去培养液，每孔加MTT10μL (5.0 g/L in PBS), 培养4 h, 弃去
胃癌的免疫治疗方法有哪些
胃癌的免疫治疗方法有哪些 1.非特异性主动免疫制剂这类药物能够非特异性地刺激机体的免疫系统，增强免疫功能，达到杀伤、抑制肿瘤细胞的目的。(1)卡介苗(BCG)为非特异性免疫增强剂，能增强自然杀伤细胞的活力，促进淋巴因子释放。 (2)OK432可加强自然杀伤细胞、自身肿瘤杀伤细胞和粒细胞的活性，促进淋巴因子释放。(3)－K与化疗药物合用可提高疗效。(4)香菇多糖能促进免疫细胞的活性和淋巴因子分泌，与化疗药物合并应用时可提高疗效。 (5)N－CWS是一种低毒性免疫佐剂，能刺激T细胞和巨噬细胞产生多种毒素。 2.生物反应调节剂(BRM)生物反应调节剂是指来自生物体自身的一些分子和细胞，它们既是机体对内、外环境刺激应答的效应机制介质，也是维持机体内环境稳定的重要因素。目前BRM作为肿瘤治疗的第4模式(前3个模式指手术治疗、化疗、放疗)，已受到医学界广泛重视，并有较深入的、广泛的临床应用。(1)干扰素(IFN)干扰素可增加免疫活性细胞活力，活化蛋白激酶、磷酸二酯酶等，从而直接抑制肿瘤细胞。(2)白介素－2(IL－2)白介素－2可增加自然杀伤细胞的活力，诱导人脾或外周血淋巴细胞形成针对自身肿瘤的杀伤细胞。 (3)肿瘤坏死因子(TNF)肿瘤坏死因子可促进淋巴因子分泌、组织分解代谢和组织释放炎性介质，使白细胞趋化自然杀伤细胞的能力提高，从而使肿瘤出血坏死。 (4)淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)淋巴因子激活的杀伤细胞是人的脾或外周血淋巴细胞经白介素?2诱导形成的杀伤细胞，可以杀伤自身肿瘤细胞。 抗胃癌新利器——人参皂苷Rh2 在世界范围内，胃癌为常见的恶性肿瘤，全球每年新发胃癌876000例，仅次于肺癌、乳腺癌、肠癌。每年约有647000人死于胃癌，死亡率居所有恶性肿瘤第二位。中国为胃癌高发地区，死亡率占恶性肿瘤的第一位，平均患病年龄较低。 胃癌是指发生在胃上皮组织的恶性肿瘤，早期胃癌不易发现，大部分患者诊断时即属于进展期胃癌，最常出现上腹不适、纳差、消瘦等表现，严重者可出现进食梗阻、呃逆、黑便等症状。有时可于腹部扪及肿块、左锁骨上有肿大淋巴结或发现腹水，肝广泛转移时会出现肝大、黄疸。胃癌溃烂而引起上腹部疼
过表达CCR3的人胃癌细胞株的建立
过表达CCR3的人胃癌细胞株的建立 目的建立过表达CCR3人SGC7901胃癌细胞细胞株，为后续CCR3在胃癌转移的研究奠定基础。方法分离正常人外周血单个核细胞，提取总RNA，PCR 扩增CCR3基因CDS序列，连接至质粒pEFP-N1，进行CCR3基因的克隆，构建含有CCR3基因的pEFP-N1-CCR3重组质粒。重组质粒通过脂质体转染法对人SGC7901胃癌细胞进行转染。结果Realtime-PCR及Westernblot证实CCR3基因能够在人SGC7901胃癌细胞中正确表达。结论成功建立稳定表达CCR3基因的SGC7901胃癌细胞株，为研究CCR3在胃癌细胞株转移中的机制奠定了基础。 标签：CCR3；SGC7901细胞；胃癌转移 趋化因子受体（Chemokine receptor）是表达在一些特定的细胞表面的G蛋白偶连的七跨膜域受体[1]。这些受体与细胞外的配体趋化因子结合。与特异的趋化因子结合后，趋化因子受体引发钙离子内流而产生细胞趋化反应，从而诱导细胞到生物体的特定部位。CCR3在胃癌远端迁移上到底扮演什么样的角色也未完全清楚。目前，将外源性CCR3基因转入人胃癌细胞使其过度表达未见报道。本实验尝试构建含有CCR3的重组质粒pEFP-N1-CCR3并转染至人SGC7901胃癌细胞，并检测转染后SGC7901细胞CCR3的表达情况。 1资料与方法 1.1一般资料 1.1.1质粒菌株和慢病毒包装细胞pEFP-N1慢病毒穿梭载体，psPAX2和pMD2G包装质粒，大肠杆菌DH5。人SGC7901胃癌细胞，生长培养基为高糖DMEM培养基，含10%胎牛血清。 1.1.2 主要试剂及引物Lipofectine2000转染试剂盒；T4连接酶；质粒抽提试剂盒；限制性内切酶EcoRI和BamHI；胎牛血清；CCR3一抗；辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG。 1.2人SGC7901胃癌细胞的培养人SGC7901胃癌细胞常规培养于含10%胎牛血清的DMEM高糖的完全培养基中，置于37℃，5%CO2孵育箱中贴壁培养， 0.25%胰酶3d传代换液一次。 1.3 pEFP-N1-CCR3的构建及鉴定 1.3.1 CCR3的CDS序列扩增取健康人外周血，淋巴细胞分离液分离单个核细胞并抽提总总RNA，在Pubmed中的nucleotide上查询CCR3的CDS编码区并设计克隆引物，并在克隆引物中加入BglII和EcoRI酶切位点，用taq聚合酶扩增CCR3的CDS序列，
URI促进胃癌细胞阿霉素耐药性和细胞迁移
江苏大学硕士学位论文 目录 第一章绪论 (1) 1.1URI基因 (1) 1.2URI与多种恶性肿瘤之间的关系 (2) 1.2.1URI与肝癌 (2) 1.2.2URI与卵巢癌 (3) 1.2.3URI与多发性骨髓瘤 (4) 1.2.4URI与宫颈癌 (4) 1.3胃癌复发转移与预后 (5) 1.4结语 (7) 第二章URI干预胃癌细胞的构建 (8) 2.1实验材料和仪器 (8) 2.1.1实验试剂 (8) 2.1.2实验耗材 (9) 2.1.3实验仪器 (10) 2.1.4相关试剂的配制 (11) 2.2方法 (12) 2.2.1细胞复苏 (12) 2.2.2细胞传代 (13) 2.2.3细胞转染 (13) 2.2.4荧光定量PCR分析 (15) 2.2.5蛋白印记法检测相关蛋白的表达 (18) 2.2.6统计学分析 (21) 2.3结果 (21) 2.3.1Western blotting分析四株胃癌细胞URI的表达 (21) 2.3.2qRT-PCR检测干预胃癌细胞URI在mRNA水平的表达 (21) 2.3.3Western Blotting检测干预胃癌细胞URI的蛋白水平 (23) 2.4讨论 (25) 第三章过表达或敲低URI影响胃癌细胞增殖以及对阿霉素的抵抗 (26) 3.1实验材料和相关仪器 (26) XI
URI促进胃癌细胞阿霉素耐药性和细胞迁移 XII 3.1.1实验试剂 (26) 3.1.2实验耗材和仪器 (26) 3.1.3阿霉素储存浓度的制备 (26) 3.2方法 (27) 3.2.1CCK-8试剂盒检测细胞活力 (27) 3.2.2检测干预后MGC-803和HGC-27细胞对阿霉素的抵抗 (27) 3.2.3统计学分析 (28) 3.3实验结果 (28) 3.3.1过表达和敲低URI对MGC-803和HGC-27细胞增殖的影响 (28) 3.3.2干预URI影响胃癌细胞对阿霉素的耐药性 (29) 3.4讨论 (32) 第四章阿霉素处理下URI对胃癌细胞凋亡的作用及机制 (34) 4.1实验材料和仪器 (34) 4.1.1实验试剂 (34) 4.1.2主要耗材 (34) 4.1.3实验仪器 (34) 4.2实验方法 (35) 4.2.1免疫印迹法 (35) 4.2.2流式细胞仪检测细胞凋亡 (35) 4.2.3统计学分析 (35) 4.3实验结果 (35) 4.3.1URI调控阿霉素作用后细胞凋亡相关蛋白的表达 (35) 4.3.2URI调控阿霉素诱导的细胞凋亡 (37) 第五章URI对胃癌细胞迁移的影响及机制 (40) 5.1实验材料和仪器 (40) 5.1.1实验试剂 (40) 5.1.2实验耗材 (40) 5.1.3实验仪器 (40) 5.2实验方法 (40) 5.2.1Transwell小室实验 (40)
胃癌的发病机制及预防
胃癌的发病机制及预防 姓名：孟慧佳学号：2011013281 班级：生物工程111 正文： 胃界于食道和十二指肠之间，是消化道最宽大的部分，它的形状和位置随内容物的多寡和体位变化而改变。胃分4个部分，靠近食道的部分是贲门部，胃上部膨大部分是胃底部，自胃底部往下是胃体部，靠近十二指肠的部分叫幽门部。 在胃内壁上覆盖着一层厚约0.3-1.5毫米的胃黏膜，胃黏膜上生长着三种腺体：即贲门腺、胃底腺和幽门腺。三种腺体加起来的数量是惊人的，每天分泌的胃液的数量约有1500-2500毫升，贲门腺和幽门腺主要分泌黏液，起到保护胃黏膜的作用。胃酸的强刺激和胃蛋白酶的强消化力，都不能破坏胃黏膜，主要就是因为黏液总是先于胃酸和胃蛋白酶分泌出来，并均匀地布散到胃壁上的缘故。胃黏膜的这种巧妙的自我保护功能，是令人叹为观止的大自然的杰作之一。 胃的功能有：1．存放食物。液体食物在胃里停留时间很短，油脂性食物在胃里停留时间较长，混合性食物在胃里停留时间约4-6个小时。 2．胃蛋白酶可消化食物中的蛋白质。 3．制造内因子及吸收维生素B2。 4．胃酸可杀灭随食物进到胃里的细菌。 胃内有食物时，胃的蠕动方向是由贲门向幽门进行，当胃内容物排空后、血糖也消耗到较低水平时，胃会由幽门向贲门方向逆性蠕动，这叫饥饿蠕动，使人产生饥饿感。 胃癌介绍： 恶性肿瘤胃癌起源于胃壁最表层的粘膜上皮细胞，可发生于胃的各个部位（胃窦幽门区最多、胃底贲门区次之、胃体部略少），可侵犯胃壁的不同深度和广度。癌灶局限在粘膜内或粘膜下层的称为早期胃癌，侵犯肌层以深或有转移到胃以外区域者称为进展期胃癌。肉眼或胃镜观察胃癌有多种形态，如表浅型、肿块型、溃疡型、浸润型、溃疡癌（为慢性胃溃疡癌变）。显微镜放大观察癌细胞有多种类型（组织学分类），如腺癌（占约90%，包括乳头状腺癌、管状腺癌、粘液腺癌、印戒细胞癌）、腺鳞癌、鳞状细胞癌、未分化癌、类癌。更细微的癌细胞内部的分子结构也有很多差异，因此，虽都称为胃癌，即使肉眼和显微镜下所见类型是相同的，但个性仍有很大差异，目前并不知晓究竟有多少个性独特的胃癌。 胃癌的发病机制： 正常胃粘膜上皮细胞是由原始新生细胞（干细胞）不断分裂生长分化而来，何时生长何时死亡都是受机体控制的，不会疯狂失控生长。干细胞都有各种原癌基因和抑癌基因，绝大多数情况下原癌基因的特性不表达出来，不会形成致癌物质，因此也就不能发育成胃癌细胞。 有胃癌家族史者原癌基因可能更容易表达出来，这就是遗传的因素。除了遗传等内在因素外，还有很多外在的致癌因素，如上述高危人群面临的各种非遗传因素，也可直接诱发或长期破坏胃粘膜屏障使促癌物质更易诱发干细胞癌基因表达或基因突 变而产生致癌物，使新生不成熟的原始细胞不能分化成具有正常功能的胃粘膜上皮细胞，而是变成各种分化程度不良且生长失控的非正常细胞。 若机体的免疫监测功能正常，往往可以清除少量的异常细胞，但当长期心里状态不佳引起内分泌系统异常及免疫功能长期低下、或异常细胞由于某种未知原因逃逸了机体的免疫监测，则异常细胞最终发展成机体无法控制其生长的胃癌细胞，完成癌变过程。
化疗和免疫治疗对胃癌患者淋巴细胞免疫功能的影响
化疗和免疫治疗对胃癌患者淋巴细胞免疫功能的影响 【摘要】目的：探讨化疗和免疫治疗对胃癌患者淋巴细胞免疫功能的影响和疗效。方法：将52例进展期胃癌术后患者分成单纯化疗组26例和化免组（化疗联合自体树突状细胞(DC)疫苗）26例，观察治疗前后患者淋巴细胞的免疫功能。以健康的外周血T细胞亚群作为对照组（20例）。结果：DC组和化疗组的淋巴细胞免疫功能(CD3、CD4和CD4/ CD8比值和NK计数)要明显低于对照组(P<0.01)，而且DC组的淋巴细胞免疫功能(CD3、CD4和CD4/CD8比值和NK计数)要高于化免组(P<0.05)；化疗组和DC组有效病例(CR+PR)的CD3、CD4和CD4/CD8比值和NK计数呈现上升的趋势，两者相比差异具有显著意义(P<0.0 5)，但都要低于对照组；化疗组和DC组SD病例细胞免疫变化不明显(P>0.0 5)，PD病例的细胞免疫各项指标检测要低于治疗前(P<0.05)；两组病例的CD8计数在治疗前后均无明显变化(均P>0.05)，仍显著高于对照组(均P<0.0 5)。结论：化疗联合自体树突状细胞DC疫苗治疗进展期胃癌术后患者效果要好于单纯的化疗，对于改善患者免疫功能具有很好的作用，但是对于改善SD 和PD病例免疫功能效果不明显。 关键词胃癌；化疗；免疫治疗；细胞免疫功能 Effect of chemotherapy and immunotherapy on lymphocyte immunofunction in patients with gastric cancer Abstract:Objective:To investigate the chemotherapy and immunotherapy for patients with gastric lymphocyte immune function and efficacy. Methods: 52 cases of advanced gastric cancer patients after chemotherapy group is divided into 26 cases and 26 cases of free group (chemotherapy combined with autologous dendritic cells (DC) vaccine) were observed before and after treatment in patients with lymphocyte immune function. Healthy peripheral blood T cell subsets as a control group (20cases).Results: DC group and lymphocyte immune function chemotherapy group (CD3, CD4 and CD4/CD8 ratio and NK count) was significantly lower than the control group (P<0.01), and lymphocyte immune function DC group (CD3, CD4 and CD4/CD8 ratio and NK count) than of the free group (P<0.05); chemotherapy group and DC group effective cases (CR+PR) of CD3, CD4 and CD4/CD8 ratio and NK counts upward trend, two who has a significant difference compared (P<0.0 5), but lower than the control group should be; chemotherapy group and DC group, cases of immune cells SD obvious change (P>0.0 5), the immune cells of the indicators PD cases detection is lower than before treatment (P<0.05); two cases CD8 counts before and after treatment did not change significantly (P>0.05), still significantly higher (P<0.0 5). Conclusion:chemotherapy combined with autologous dendritic cells DC vaccine treatment of advanced gastric cancer patients is better than chemotherapy alone
CQ11逆转多药耐药人胃癌细胞株对多柔比星的耐药
CQ11逆转多药耐药人胃癌细胞株对多柔比 星的耐药 作者：吴达龙睢凤英张成文吕焕章 【摘要】目的: 探讨氯喹衍生物CQ11对耐长春新碱(vincristine, VCR)人胃癌多药耐药(multidrug resistance, MDR) 细胞株SGC7901/VCR的耐药逆转作用。方法：将SGC7901和SGC7901/VCR细胞分别与各种浓度的多柔比星(doxorubicin, DOX)和/或CQ11在体外共同培养，采用MTT法检测其细胞毒作用；采用荧光分光光度计测定细胞内DOX蓄积量。结果：SGC7901/VCR细胞对DOX的耐药程度是SGC7901细胞的37.5倍。1.0、2.5 和 5.0 mol/L的CQ11分别使DOX对SGC7901/VCR细胞的敏感性分别增加到 2.2倍(P<0.01)、5.5倍(P<0.01) 和14倍(P< 0.01)。DOX蓄积实验表明，CQ11能显著增加SGC7901/VCR细胞内DOX蓄积，而对SGC7901细胞内DOX蓄积无明显影响。结论：通过增加细胞内DOX蓄积量，CQ11在体外能有效逆转SGC7901/VCR细胞对DOX的耐药性 【关键词】多药耐药; 氯喹; 胃癌; 逆转剂 肿瘤多药耐药(multidrug resistance, MDR)指肿瘤细胞一旦对某种化疗药物产生耐药性，同时对其它结构上无关、作用机理各异的抗肿瘤药物也产生交叉耐药性［1］。MDR是一种独特的广谱耐药现象，
是导致化疗失败的重要原因，许多天然来源的抗肿瘤药物如长春新碱(vincristine, VCR)、紫杉醇等及蒽环类抗癌抗生素如多柔比星(doxorubicin, DOX)、柔红霉素都极易发生MDR［1~3］。MDR主要的耐药机理为多药耐药基因mdr1扩增及其蛋白产物P-糖蛋白(permeability glycoprotein, Pgp)过表达。作为一个ATP依赖性的药物转运泵，Pgp能主动将疏水性抗肿瘤药物泵出胞外, 从而减少细胞内药物蓄积, 增加药物外排［3］。MDR逆转剂，如维拉帕米和环孢菌素A，能与Pgp结合，抑制Pgp的药物外排功能，增加耐药细胞内抗肿瘤药蓄积，从而恢复细胞对抗肿瘤药的敏感性。然而，大量的临床研究结果表明，上述肿瘤MDR逆转剂由于体内毒性大，体内难以达到有效逆转浓度［3］。因此积极寻找高效低毒的新型MDR逆转剂，已成为肿瘤MDR研究的热点。 氯喹 CQ11 图1 氯喹和氯喹衍生物CQ11的化学结构 CQ11是以抗疟药氯喹的结构母核为基础, 经侧链改造而获得的新化合物(化学结构见图1)，由本课题组合成。本研究以耐VCR人胃癌MDR细胞株SGC7901/VCR为体外模型，研究CQ11对SGC7901/VCR 细胞的体外MDR逆转效应。
胃癌干细胞
润文宝 | 日期：2011-06-25 胃癌干细胞的研究进展 恶性肿瘤的克隆性增殖生长、维持及转移潜能取决于一群数量稀少、具有自我更新(self-renewal)潜力的细胞群体——肿瘤干细胞(Cancer stern cell，CSC)。目前肿瘤的放射和化学治疗对细胞周期活跃的肿瘤细胞具有较强的杀伤作用，但不能根除细胞周期相对沉默的肿瘤干细胞，这可能是肿瘤复发的主要原因。胃癌对人类健康危害极大。研究胃干细胞及胃癌干细胞发生、发展的分子和细胞学机制，发现相关的特异分子靶点和针对这些靶点的药物，将为胃癌相关基础研究及临床靶向治疗提供新的切人点。 一、肿瘤干细胞学说的提出 肿瘤组织与胚胎组织间具有相似性，肿瘤可能起源于胚胎样组织。肿瘤细胞与胚胎干细胞及成体干细胞间存在许多相似性。近年来提出的肿瘤干细胞学说认为，肿瘤组织中存在极少量细胞，具有无限自我更新和高度增殖能力以及多种分化潜能，能产生不同表型的肿瘤细胞，使肿瘤在体内不断扩大或转移形成新的肿瘤。1994年分离获得的人髓系白血病干细胞证明了肿瘤干细胞的客观存在，之后又相继从乳腺癌、脑肿瘤和前列腺癌组织中分离并培养出各种肿瘤干细胞，证实了实体肿瘤干细胞的存在。 二、胃干细胞、炎性反应与胃癌的发生 胃干细胞是具有自我更新和复制能力的原始细胞，属于成体干细胞，通过向祖细胞分化。进一步分化形成胃的各种腺体细胞，维持胃黏膜更新及组织内环境稳定。由于缺乏特异性标志和理想的分离纯化技术，故目前对胃干细胞的研究较少。有研究证实G蛋白偶联受体(Lgr5)表达于胃腺体底部细胞中，通过分化细胞学示踪实验发现，胃腺体细胞均来自于Lgr5阳性的细胞。另有研究通过结合转基因技术和绿色荧光蛋白示踪技术，成功示踪了数量极少的胃祖细胞，这些细胞正常情况下呈静息状态，当受到炎性刺激时，祖细胞发生对称分裂，进行数量扩增，同时还可进行不对称分裂分化为各种腺体细胞。胃干细胞受到持续的炎性刺激、自身抗体或其他因素作用时可发生肠上皮化生，此过程可能是组织细胞干细胞水平分化异常所致。胃干细胞可产生胃型和肠型细胞，胃癌表型表达的异质化反映了胃祖细胞向这两个方向分化的内在潜能。已有研究证实幽门螺杆菌通过对胃上皮干细胞的影响和作用，在慢性萎缩性胃炎向胃腺癌的转化过程中起关键作用。小鼠胃上皮祖细胞系(mGEP)能支持胃癌相关幽门螺杆菌的吸附。对感染后的mGEP进行基因芯片表达谱分析显示。mGEP代谢和信号传导路径发生改变，氨基酸代谢的免疫过氧化物酶抗体路径(IPA)表达上调，多胺合成相关的限速酶鸟氨酸脱羧酶1(Odel)表达明显上调，该酶与胃肠型化生及慢性胃炎到胃癌的转化相关；抗酶抑制剂(Azinl)的表达亦显著上调。该蛋自在人胃癌组织中高表达，并与Odcl的表达量和活性相关。慢性炎性刺激使得胃上皮干细胞发生转化进展，促进肿瘤形成和进展。有研究称肿瘤为“不可治愈的炎性反应。慢性炎性反应能
胃癌靶向治疗的研究进展(2020完整版)
胃癌靶向治疗的研究进展（2020完整版） 摘要 胃癌在全球的发病率及致死率仍位居前列，针对胃癌的靶向治疗是研究热点，但让患者获益的治疗仍占少数。目前被批准用于晚期胃癌靶向治疗的药物仅有曲妥珠单抗、雷莫芦单抗、阿帕替尼、帕博丽珠单抗及Nivolumab，且靶向药物的临床应用面临诸多问题。靶向药物的耐药、患者个体化的药物选择、靶向药物的合理使用等问题仍有待于进一步探究。本文就胃癌靶向治疗的研究成果及面临的挑战进行综述。 胃癌一直是威胁人类生命的主要恶性肿瘤之一，且基于我国的饮食特点、筛查意识的缺乏等原因，许多胃癌患者在发现时已进展至晚期。既往以化疗为基础的治疗仅能使晚期胃癌患者的中位生存期（mOS）延长7~11个月[1]。近年来，从基因水平寻找影响胃癌发生发展及预后的指标并开展靶向治疗，已成为晚期胃癌治疗研究的热点。目前针对人表皮生长因子受体-2（HER-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子受体-1（EGFR）、肝细胞生长因子（HGF）/酪氨酸蛋白激酶Met（c-MET）信号通路、免疫检查点等相关通路和靶点的药物和研究较多。现就近年来胃癌靶向治疗的新突破进行综述。 一、抗HER-2的靶向药物 HER-2属于表皮生长因子家族成员，通过激活RAS-RAF-MRK-MAPK通
路、PI3K-AKT等通路，最终加速肿瘤细胞增殖、生长及侵袭。 1．曲妥珠单抗（trastuzumab）： 曲妥珠单抗是一种抗HER-2的单克隆抗体。ToGA试验证实，曲妥珠单抗联合以顺铂为基础的化疗可以改善晚期胃癌患者mOS约1.2个月，亚组分析显示，患者生存期获益仅限于免疫组化（IHC）"3+"及"2+"及荧光原位杂交技术（FISH）"+"者（IHC"2+"~"3+"或FISH"+"者与IHC"-"~"+"或FISH"-"者比较，mOS 16.0个月比11.8个月）[2]。2011年美国国家综合癌症网络（NCCN）指南已明确推荐，胃癌患者在确诊时或接受曲妥珠单抗治疗前接受HER-2的检测（图1），对于符合条件的患者，推荐一线使用曲妥珠单抗联合以铂类为基础的化疗。JFMC45-1102等Ⅱ期临床试验证实，对于既往未使用过抗HER-2治疗的晚期胃癌患者，二线或超二线使用曲妥珠单抗也可获益[3]。HER-FLOT[4]、NEOHX[3]等临床试验显示，曲妥珠单抗在术前转化治疗及新辅助治疗中也起到了一定的作用。曲妥珠单抗的主要不良反应包括中性粒细胞减少、厌食、贫血、周围神经病变、腹部绞痛，极少患者出现左心射血分数下降，也有患者出现治疗相关性肺炎或呼吸衰竭。因此，对于应用曲妥珠单抗的晚期胃癌患者应定期检测血常规、血生化、心脏的射血分数及胸部CT等，若有异常应及时暂停或停止治疗。曲妥珠单抗可以改善HER-2阳性患者的生存期，且不良反应发生率较低，目前已被批准用于指定患者的一线治疗，但即使是HER-2阳性的患者仍只有50%的患者有效，耐药问题仍待解决。
胃癌循环肿瘤细胞检测研究进展
中国中西医结合外科杂志2019年8月第25卷第4期 640 [28] 阴健, 郭力弓,主编.中药药理现代研究与临床应用[M].北京: 学苑出版社, 1996: 328-430. [29] 李平,胡建燃,铁军.柴胡总皂苷通过Akt/NF-κB 信号通路 抑制胃癌细胞MGC80-3的增殖和迁移[J].中国细胞生物学学报,2018,40(10):1727-1735. [30] 黄靓, 李国庆, 毛振江, 等. 人参多糖注射液对胃癌细胞 SGC-7901 凋亡的诱导作用及机制 [J]. 世界华人消化杂志, 2014, 22(33): 5114-5117. [31] 桂壮,邵治国,金笛.黄芪多糖抑制人胃癌MKN45、MGC-803细胞生长的作用机制[J].中医学报,2018,33(4):525-528.[32] 王利,魏品康,许玲,等.葛根素对胃癌多药耐药作用的实验 研究[J].中国中西医结合杂志,2005,13(1):389-392. [33] 李靖,郑旭薇,贾建光,等.人参皂苷Rh2对低浓度的奥沙利 铂诱导人胃癌SGC-7901侧群细胞凋亡的增敏作用[J].蚌埠 医学院学报,2018,43(5):561-566，572. [34] 鲍舒洁,张丹,张红,等.白芍总苷脂质体诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的实验研究[J].中国药学杂志,2016,51(24):2109-2113. [35] 唐燕,张丹,孟祥林,等.白芍总苷脂质体对荷瘤小鼠肿瘤 生长及免疫功能的影响[J].中国新药杂志,2014,23(21):2547-2551. [36] 吴昊,李薇,葛红梅,等.芍药苷抑制NF-κB 的活性促进人胃 癌细胞凋亡[J].南京医科大学学报(自然科学版),2008(2):161-165. [37] 王谦,张玲,毛海婷,等.中药淫羊藿苷抑制肝癌HepG2.2.15 细 胞 增 殖 和 免 疫 逃 逸 作 用 研 究 . 中 国 免 疫 学 杂 志 , 2017,23(10):908-911. （收稿： 2019-01-23 发表：2019-07-31） 基金项目：山东省重点研发计划（2017GSF19104）；山东省中医药科技发展计划（2017-061） 1.山东中医药大学附属医院普外科 （济南 250014） 2.山东中医药大学（济南 250000） 通信作者：周永坤，E-mail:zhouyongkun@https://www.360docs.net/doc/7b13272504.html, 胃癌循环肿瘤细胞检测研究进展 王 猛1，李 晨1，顾萍萍2，谭 琳2，刘 霞2，周永坤1 摘要：循环肿瘤细胞（CTCs ）检测已成为“液体活检”。CTCs 被认为是致肿瘤远处转移的主要原因，对于发现肿瘤、监测肿瘤动态，评估疗效、预后等都具有较好作用。检测外周血中的CTCs 方便无创、敏感度高，具有可重复检测性。但是目前CTCs 的检测方法在特异性和敏感性方面面临着严峻的挑战，迫切需要开发一种新的平台，以低成本，大规模高性能实现CTCs 检测。CTCs 检测在胃癌的早期诊断、评估胃癌术后预后、预测转移性胃癌的化疗反应、评估晚期胃癌的治疗反应和预后、筛选胃癌靶向治疗可能获益的患者方面，具有重要的作用。 关键词： 循环肿瘤细胞；胃癌；检测 中图分类号：R 735.2 文献标识码：A 文章编号：1007-6948(2019)04-0640-04doi ：10.3969/j.issn.1007-6948.2019.04.053 循环肿瘤细胞（circulating tumor cells ，CTCs ）被认为是从肿瘤原发部位和转移部位进入血液循环的各种类型的肿瘤细胞。早在1869年，澳大利亚医生Ashwonh 等在癌症患者外周血中发现并首次提到了CTCs 的概念[1]。CTCs 具有癌症干细胞（cancer stem cell ，CSC ）的特征，有很强的自我更新、分化能力，并且有致瘤能力和转移能力等特征。早期的观念认为，当肿瘤恶化或进展时会发生转移，但越来越多的证据表明肿瘤的扩散可能在早期发生。在原发肿瘤形成之前甚至可能发生远处转移[2]。CTCs 被认为是致肿瘤远处转移的主要原因。检测外周血中的CTCs 方便无 创、敏感度高，具有可重复检测性，美国 FDA 认证该检测为目前最可观的检测手段之一。CTCs 可以比影像诊断更早地预测肿瘤细胞的微转移，然后指导肿瘤的早期诊断。随着科学技术的进步，CTCs 的研究越来越深入，已成为目前研究的热门内容。胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，CTCs 检测技术对胃癌的早期诊断和早期治疗具有重要的意义。本文将总结近年来CTCs 的检测技术，探讨其在胃癌诊治中的应用价值。1?CTCs 的检测? CTCs 检测被称为“液体活检”，能够减少侵入组织取样需求的机会。在肿瘤治疗的基础研究和临床应用方面具有很大的潜力；在肿瘤复发和预后的作用受到越来越多的关注。由于肿瘤患者外周血中CTCs 的数量非常少，浓度通常仅为1~10个/10 mL [3]，这要求检测人员在短时间内采用高灵敏度和特异性的检测方法。目前CTCs 富集方法 综?述
胃癌细胞凋亡相关基因
胃癌细胞凋亡基因 西安国医肿瘤医院研究人员通过大量的研究分析发现，胃癌细胞凋亡是有相关基因控制的，目前发现的有以下三个基因：bcl-2基因、Bax和Fas/FasL。下面来详细介绍： 1.bcl-2基因 bcl-2基因编码26kD的膜蛋白，是第一个被确认有抑制凋亡作用的基因。bcl-2基因激活、过表达可抑制细胞凋亡，从而使细胞增殖和凋亡不平衡，而且会使具有遗传改变又得不到修复的细胞免于死亡而进入细胞循环，多种遗传成分改变可导致肿瘤的发生。因此，bcl-2在肿瘤发生发展中起着重要的作用。 乳腺癌中，高表达的Bcl-2与乳腺癌细胞凋亡指数呈负相关，而且与有丝分裂指数呈正相关，提示在细胞增殖活跃期，Hcl-2阳性细胞凋亡减少，即Bcl-2过表达影响了细胞凋亡。Nakamum检测了肠型胃癌、胃腺瘤、肠化生及非化生胃黏膜，发现在肠化生中Bcl-2蛋白表达量最高(77.1%)，胃腺瘤(37.5%)和肠型胃癌(10.8%)中较低。 因而认为，Bcl-2蛋白的过表达主要是在胃癌的早期阶段起作用，使转化细胞逃避凋亡，以进一步积累其他基因的异常。Lauwers采用单克隆抗体124检测正常、伴有肠化生的萎缩性胃炎及异型增生胃黏膜，发现正常胃黏膜仅在胃小凹与腺体交接处增生的干细胞中有Bcl-2蛋白的微表达，而在肠化生黏膜的过增生区域及胃小凹表面分化不良的细胞中均可检测到Bcl-2，这些分化不良的细胞正是胃癌癌前病变的一个特征。 因此推测，胃黏膜受损后增生加快，导致一些分化不良的细胞出现，这些分化不良的细胞又因Bcl-2蛋白的过表达而逃避凋亡，呈现生长优势，细胞寿命延长，基因变异积累的机会增加，为进一步向恶性细胞转化提供了条件。 2.Bax Bax是第一个被分离到的Bcl-2家族成员之一，与Bcl-2的同源区主要集中在BH1和BH2区。Bax的功能与Bcl-2相对，可促进细胞的凋亡。Bax与Bcl-2在体内的表达呈部位互补形式。Bcl-2倾向于分布在生长细胞、增殖细胞，而Bax倾向于分布在终末分化细胞、退化细胞，在凋亡旺盛的细胞中表达更强。 国外Komatauin报道，在胃黏膜癌变的早期阶段，即已发生Bax的表达异常。
胃癌细胞表面-唾液酸糖链的表达与其侵袭、
胃癌细胞表面,唾液酸糖链的表达与其与侵染、转移相关 性的研究
摘要 本设计为了研究唾液酸在胃癌发病过程中的相关作用，探讨,唾液酸糖链结构在胃癌发生中所造成的影响。设计内容主要分为两部分：,唾液酸糖链结构在不同分化程度的胃癌细胞表面的表达对胃癌细胞侵染能力相关性的研究；,唾液酸糖链结构对胃癌细胞的转移能力相关性的研究；第一部分分为两个实验设计用MAL细胞化学染色法选出阳性细胞计算出MAL胃癌细胞的阳性率和体外细胞粘附试验测得吸光度测试唾液酸跟细胞粘度的关系；第二部分通过重组基底膜实验来计数胃癌细胞的穿膜细胞数，确定,唾液酸对胃癌细胞的侵染、转移的影响。为胃癌疾病的研究和治疗提供一定的理论及实验基础。 关键词：,唾液酸；表达；胃癌细胞；侵染；转移
第一部分：文献综述 1 唾液酸 0 1.1简介 0 1.2唾液酸的生物学功能 0 2 胃癌 (1) 2.1胃癌发生的过程 (1) 2.2胃癌的侵染、转移 (1) 3 唾液酸与肿瘤作用 (2) 3.1唾液酸与恶性肿瘤 (2) 3.2唾液酸与胃癌 (3) 4凝集素 (4) 4.1简介 (4) 4.2 MAL简介 (4) 4.3 MAL对胃癌细胞表面糖链的标记 (5) 第二部分课程设计部分 1材料 (7) 1.1细胞株及细胞培养 (7) 1.2试剂 (7) 1.3试剂配制 (7) 1.4仪器设备 (8) 2方法 (9) 2.1 MAL细胞化学染色 (9) 2.2 体外细胞粘附试验 (10) 2.3 重组基底膜侵袭实验 (10) 3 设计 (11) 3.1 胃癌细胞表面,唾液酸糖链结构与其转移能力的相关性 (11) 3.2 胃癌细胞表面,唾液酸糖链结构与其侵染能力的相关性 (11)
胃癌有几种什么最严重
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/7b13272504.html, 胃癌有几种什么最严重 作者：郭伦星 来源：《大健康》2019年第04期 胃癌为临床常见恶性肿瘤，以胃黏膜上皮为病症起源处，高发于50岁以上人群，根据其扩散范围，可分为早、中、晚三期。胃癌不具有特异性症状，以食欲下降、疼痛、体质量下降等为主要表现，容易误诊，从而造成病程延长，在发现时已为胃癌晚期，增加治疗难度。于世界胃癌发病率相比，我国属于前列，其中晚期胃癌的发病率占很大比重，这主要由于胃癌无特异性症状，极易导致病程延长而引发，而我国晚期治疗发展较为缓慢，近年来，人们的膳食结构与生活方式不断发生变化，胃癌发病率呈上升趋势。胃癌类型与分期对疾病的治疗具有重要意义。笔者将结合多年临床经验，总结胃癌的临床分型，为临床研究提供理论依据。 1、胃癌分类方法 对于早期胃癌，不管是否存在淋巴结转移，只要癌组织存在于粘膜下层、胃粘膜层，均为早期胃癌，分为凹陷型、浅表型与隆起型。其中凹陷性是指癌组织仅仅存在于粘膜层，而粘膜下层有溃疡甚大，包括溃疡癌变、其他型早期胃癌。浅表型又称胃炎型、平坦型，癌肿无明显隆起或者凹陷，肿瘤直径小于4cm，且较为局限，且境界清除，此为浅表局限型;肿瘤致敬为 4cm以上者，境界不清楚，即为浅表广泛型。隆起型是指癌肿呈息肉样隆起，超过胃粘膜 5mm以上。 进展期胃癌是指肿瘤组织在浆膜层、肌层中浸润，一般情况下，肿瘤组织在肌层浸润被称为中期为爱，超过肌层被视为晚期胃癌。以Borrman分型进行分类，可分为息肉型（隆起型）、局限溃疡型、弥散性浸润型、浸润溃疡型四种。其中息肉型表示肿瘤局限，向腔内生长，且呈现息肉状、结节状，表浅糜烂充血、污秽苔覆盖、溃疡。局限溃疡型是指局限性溃疡，其溃疡底的边缘隆起，呈现火山口状或者堤状。肿瘤局限，表现为中央坏死，盘状，向深层浸润，伴随穿孔、出血等症状。浸润溃疡型表示癌肿明显向深部与周围浸润的肿块，在生长过程中，因速度过快，导致癌肿中央出现坏死，最终形成溃疡。弥漫浸润型表示癌组织扩散与胃粘膜下，在各层浸入，具有较广的病变范围，胃腔逐渐表笑，胃壁增厚且僵硬，最终形成皮革胃。 以癌肿的分化程度、细胞状态、组织结构等组织学特点进行分类，胃癌包括普通类型与特殊类型。其中普通类型包括低分化腺癌、管状腺癌、乳头状腺癌、粘液腺癌、印戒细胞癌。特殊类型包含未分化癌、类癌、鳞癌、腺鳞癌、胃溃疡癌变等。 以Larurens分型进行分类，主要是根据组织化学、细胞形态可将胃癌分为弥散型、肠型。其中弥漫型具有较高的恶性程度，且预后效果差，高发于中青年。肠型具有较低的恶性程度，预后效果良好，高发于老年人。
术后镇痛对胃癌患者细胞免疫的影响
丁丙诺啡术后镇痛对胃癌患者细胞免疫的影响 杨少勇张广华李锦成 摘要目的：外科手术应激（包括疼痛）可抑制细胞免疫甚至促进恶性肿瘤术后转移复发。本研究比较丁丙诺啡与芬太尼术后镇痛对胃癌手术患者围术期细胞介导免疫功能的影响。方法：选取天津医科大学附属肿瘤医院2009年3月至2010年5月间40例胃癌切除术患者，随机分为丁丙诺啡组（A组20例）和芬太尼组（B组20例）。A组使用丁丙诺啡背景输注剂量为0.3μg/（kg·h）行术后镇痛，追加剂量为0.3μg/kg；B组使用芬太尼0.3μg/（kg·h）行术后镇痛，追加剂量0.3μg/kg。分别在术前、术后24h、术后72h取血进行T细胞亚群、NK细胞及血浆细胞因子γ-INF、IL-10测定。结果：两组手术过程、镇痛效果相似。手术后存在T细胞、NK细胞减少、炎性细胞因子增加等免疫紊乱，与芬太尼组相比丁丙诺啡组更利于免疫指标的恢复。结论：胃癌患者术后存在细 胞介导免疫抑制，选择丁丙诺啡术后镇痛对免疫恢复较芬太尼更有利。 关键词丁丙诺啡术后镇痛胃癌免疫 doi:10.3969/j.issn.1000-8179.2011.11.012 Effects of Postoperative Analgesia with Buprenorphine on Cell Immunity in Patients with Gastric Cancer Shaoyong YANG,Guanghua ZHANG,Jincheng LI Correspondence to:Shaoyong YANG,E-mail:shaoyongy@https://www.360docs.net/doc/7b13272504.html, Department of Anethesiology,Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital,Tianjin300060,China Abstract Objective:Surgical stress,including pain,may induce cell immunodepression and can even affect postoperative recur-rence of cancer.The influence of the postoperative analgesic buprenorphine and fentanyl on the perioperative cell immunity of gastric cancer patients was compared.Methods:A total of40patients undergoing surgery for gastric cancer were randomly divided into group B(n=20)with postoperative buprenorphine0.3μg·kg-1·h-1as the experiment group and group F(n=20)with fentanyl0.3μg·kg-1·h-1 as the controls.Blood samples were collected before the surgery and at one day and three days after the surgery.T-cell subgroups CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+,and NK cell were analyzed by flow cytometry,and the levels of cytokines INF-γand IL-10were de-termined using ELISA.Results:The surgical procedure and analgesic effects were similar between the two groups.There were reduc-tions in the number of T cells and NK cells,and increased immunologic derangement,such as inflammatory cytokines,after the https://www.360docs.net/doc/7b13272504.html,pared with fentany l,buprenorphine was beneficial to the recovery of immune indices.Conclusion:Surgical stress can in-duce changes in T lymphocyte subsets,NK cells,and cytokines.Buprenorphine is more beneficial to immune recovery than fentanyl when used as a postoperative analgesic. Keywords Buprenorphine;Postoperative analgesia;Gastric cancer;Immunity 手术是治疗恶性肿瘤的重要手段，但手术应激及术后疼痛导致的细胞介导免疫功能抑制被认为是发生术后肿瘤复发、转移的主要原因［1］。术后疼痛及阿片类镇痛药物的使用均影响抗肿瘤免疫，从而影响恶性肿瘤的长期预后，丁丙诺啡属于阿片受体部分激动剂，广泛用于治疗中、重度疼痛［2］。本研究采用随机对照研究静脉应用丁丙诺啡与芬太尼控制恶性肿瘤患者术后急性疼痛，观察对宿主细胞介导免疫的影响。 1材料与方法 1.1研究对象 选取天津医科大学附属肿瘤医院2009年3月至2010年5月间TNMⅢa期前患者40例，择期行胃癌切除术，纳入病例术前无内分泌及免疫系统疾病史，未接受过免疫抑制剂、激素治疗，放化疗、围术期均未输血。其中男35例，女15例，年龄40至65岁，ASA Ⅰ～Ⅱ级。应用随机数字表将患者分为丁丙诺啡组（A组20例）和芬太尼组（B组20例）。 1.2麻醉方法 患者均采用静脉快速诱导气管插管，阿曲库铵维持肌松下机械通气，异丙酚、舒芬太尼靶控输注全凭静脉麻醉，常规监测呼吸循环及体温保持平稳，麻 作者单位：天津医科大学附属肿瘤医院麻醉科，天津市肿瘤防治重点实验室（天津市300060）通信作者：杨少勇shaoyongy@https://www.360docs.net/doc/7b13272504.html,
细胞免疫治疗对中晚期胃癌患者免疫状态的影响及其影响因素
细胞免疫治疗对中晚期胃癌患者免疫状态的影响及其影响因素 发表时间：2019-07-16T11:32:04.947Z 来源：《航空军医》2019年第05期作者：田立强 [导读] 探讨细胞免疫治疗对中晚期胃癌患者免疫状态的影响及其影响因素。 岳阳市中医医院 414000 【摘要】：目的探讨细胞免疫治疗对中晚期胃癌患者免疫状态的影响及其影响因素。方法从我院2017年1月至2019年1月期间收治的胃癌患者中随机抽取120例为临床研究对象，将其随机分为两组，分别予以不同类型的治疗方式，对照组患者接受常规治疗方式，观察组接受自体CIK免疫治疗方式，通过观察两组患者临床治疗效果、生存率及细胞免疫功能之间的差异，继而探讨细胞免疫治疗对中晚期胃癌患者免疫状态的影响及其影响因素。结果观察组患者治疗有效率及存货率显著高于对照组，细胞免疫功能显著优于对照组， P＜0.05，有统计学意义。结论细胞免疫治疗中晚期胃癌效果显著，能够有效提升患者免疫状态，延长患者生存时间，优化机体免疫力，改善生活质量，安全性高，值得推广。 【关键词】：细胞免疫；中晚期胃癌；免疫状态；影响因素； 目前临床上主要通过化疗+药物干预的方式治疗胃癌，其虽然针对早期胃癌效果显著，但针对中晚期胃癌的临床效果并不理想，为进一步探讨其病症机理，研究中晚期胃癌的治疗方向，本次研究选择120例患者予以对照分析研究，调查细胞免疫治疗的临床应用价值，现将具体内容汇报如下。 1资料与方法 1.1一般资料 从我院2017年1月至2019年1月期间收治的胃癌患者中随机抽取120例为临床研究对象，将其随机分为两组，分别予以不同类型的治疗方式，对照组患者接受常规治疗方式，共60例，其中男性38例，女性22例，中期40例，晚期20例，年龄35~72岁，平均（43.5±3.5）岁，病程1~10年，平均病程（5.3±0.5）年；观察组接受自体CIK免疫治疗方式，共60例，其中男性39例，女性21例，中期40例，晚期20例，年龄 36~73岁，平均（44.5±3.5）岁，病程1~11年，平均病程（5.8±0.5）年；参照《中国卫生行业标准》中对胃癌的判定标准确诊疾病，所有患者均存在一定程度的消瘦、乏力、食欲不振、呕吐、便秘等症状，且上腹部存在肿块，直肠前房存在肿物，所有患者均无诊断禁忌，排除其他器官功能性障碍及感染性疾病，且自愿接受本次研究，其一般资料对比未见明显差异，P>0.05，临床资料完整，可对比。 1.2方法 对照组患者接受常规治疗方式，视患者病情与临床诊断结果，给予相应的治疗措施，包括药物干预、手术、化疗等类型。观察组接受自体CIK免疫治疗方式，于患者入院后给予常规检测，术后采集其静脉血，共计50mL，予以肝素抗凝，选择Ficoll淋巴细胞分离液，将单个核细胞分离出，随后选择生理盐水进行洗涤，可重复洗涤2~3次；选择核细胞1640培养液进行培养，首日添加2000IU/mL的重组干扰素-γ，并于孵育箱内进行培养，持续时间24h，孵育常规参数：5%co2，温度36.5℃，次日添加IL-2持续至浓度为100IU/mL时，添加抗CD3单抗 5g/mL即可[1]。在培养过程中需定期更换培养液，3d/次；同时追加100IU/mL的IL-2，培养持续15d后进行CIK细胞收集，并将其制作为悬液，予以患者静脉滴注，静脉滴注时间不超过60min，次日再次执行静脉滴注，随后1次/d，5次/疗程，持续治疗6个月。药物追加情况：于CIK静脉滴注前需给予患者吲哚美辛（25mg，国药准字：31020148，上海信宜黄河制药有限公司出品），共计25mg，执行塞肛。 1.3观察指标 观察两组患者临床治疗有效率，其中包括显效、有效与无效，显效：患者症状改善明显，生命体征稳定，食欲恢复正常，无便秘、腹痛等不良反应。有效：患者临床症状得到一定程度改善，食欲恢复明显，无明显不良反应。无效：治疗前后患者临床症状未见明显改善，胃肠功能持续恶化。随后开展院后随访，持续1年，观察患者存活率情况。同时观察两组患者治疗前后免疫功能状况，其中包括CD3+、CD4+及CD4/CD8+之间的差异。 1.4统计学方法 本研究数据均采用SPSS18.0软件进行统计学分析，以百分比（x±s）进行描述数据，x2检验计数资料，t检验计量资料，P＜0.05，有统计学意义。 2结果 2.1两组患者疗效对比 观察组患者综合有效率为96.7%；对照组患者综合有效率为80.0%；组间对比，观察组综合有效率显著高于对照组，P＜0.05，有统计学意义，详见表1。