MGC-803 人胃癌细胞系动物种别: 人形态:上皮细胞样生长方式:贴壁

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芪竹方中单体及配伍对人胃癌细胞MGC-803抑制作用研究

芪竹方中单体及配伍对人胃癌细胞MGC-803抑制作用研究

芪竹方中单体及配伍对人胃癌细胞MGC-803抑制作用研究王卯;叶丽红【摘要】目的:观察芪竹方单体成分薯蓣皂苷、莪术醇及两者配伍对人胃癌细胞MGC - 803的增殖抑制作用,初步探讨芪竹方复方在抗肿瘤治疗中的有效成分及作用机制.方法:选用5个剂量的薯蓣皂苷、莪术醇单药组,及2个剂量的两药配伍组在24h、48h 2个不同时间点作用人胃癌细胞MGC - 803,采用MTT法检测药物对MGC - 803的增殖抑制率.结果:一定浓度范围内,薯蓣皂苷及莪术醇均对MGC -803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用,且两药配伍使用较单药能产生更好的抑制作用.结论:薯蓣皂苷及莪术醇可能为芪竹方抑制人胃癌细胞MGC - 803增殖的有效成分.%Objective;To observe the inhibition of curcumol and dioscin and their combination from Qizhu decoction to the proliferation of human gastric cancer cell MGC - 803, and to investigate the active principles and anti - tumor mechanisms of Qizhu decoction. Methods; MGC - 803 was treated with five dosages of curcumol and dioscin single and two dosages of the combination of curcumol and dioscin for two times at the points of 24h and 48h, and the inhibitory rate of the drugs on MGC - 803 proliferation was detected by MTT assay. Results: Within a certain concentration range, both curcumol dioscin have the time - and - dose - dependent inhibitional effect on the proliferation of MGC - 803, and using the combination of curcumol and dioscin has a better effect than using single of the two drugs. Conclusions; Curcumol and dioscin from the Qizhu decoction might be the active principles in inhibiting the proliferation of MGC -803.【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2012(040)004【总页数】3页(P26-28)【关键词】胃癌;芪竹方;薯蓣皂苷;莪术醇【作者】王卯;叶丽红【作者单位】南京中医药大学,江苏南京210029;南京中医药大学,江苏南京210029【正文语种】中文【中图分类】R285.15;R735.2芪竹方是江苏省中医院单兆伟教授根据40余年经验,创研出的治疗胃肠道肿瘤的临床经验方。

丹参酮I和二氢丹参酮I对人胃癌细胞MGC-803、乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤

丹参酮I和二氢丹参酮I对人胃癌细胞MGC-803、乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤
宋 烨
( 武汉 市 中医 医 院药 学部

武汉 4 3 0 0 1 4 )
要: 目的: 比较 研 究 丹 参 酮 I 和二氢丹参酮 I 对 人 胃癌 细胞 MG C 一 8 0 3 、 乳 腺 癌 细 胞 MC F - 7的抗 肿瘤 活 性 。 方 法 : 从 白 花 丹
参 中分 离 、 纯 化 丹 参 酮 I和二 氢 丹参 酮 I 成分 , 采用 MT T法测定对肿瘤 细胞的生长抑制作用 , 同 时 采 用 流 式 细 胞 仪 检 测 细 胞 周 期 的 改 变 以及 凋 亡 情 况 。结 果 : 丹参酮 I 、 二氢丹参酮 I 对 MC F - 7几 乎 没 有 生 长 抑 制 作 用 , 对 MGC 一 8 0 3有很 明 显 的 生 长 抑 制 作 用 , 同 时 可
1 1 0 0系列 高效 液相 色 谱 仪 ( 安 捷伦 ) ; 高 分 辨 率 飞 行 时 间
质谱仪 ( 布鲁 克) ; Nu - 5 5 I O E型 二 氧化 碳 培 养 箱 ( 美 国 N U一

AI RE公 司 ) ; X D - 1 0 1型 倒 置 显 微 镜 ( 江 南有 限公 司) ; 酶 标 仪
MC F _ 7的 抗 肿 瘤 活 性 , 同 时 采 用 流 式 细 胞 仪 检 测 细 胞 周 期 的 改 变 以及 凋 亡 情 况 。为 丹 参 酮类 成 分 抗 肿 瘤 的 药 用 价 值 开 发 和 利 用 提 供 了坚 实 的理 论 基 础 。
1 材 料
按 说 明 书要 求 预 先 处 理 , 冻 干粉 与 大 孔 树 脂 按 质 量 比 1 : 1 O进 行层析 分离 , 分别依次用双蒸 水 , 6 O 乙醇 , 1 0 0 乙 醇 将 溶 液 洗 脱 至 近无 色 , 收集各组分 , 减压浓 缩 , 冷 冻干燥成 冻干粉 , 置 于 一8 O ℃ 冰 箱 中 保存 备 用 。丹 参 酮 I 、 二氢丹 参酮 I 均 存 在 于 1 0 0 乙醇部位 , 该 部 位 经 串联 层 析 液 质 联 用 ( L c _ MS / MS ) 技

白藜芦醇对人胃癌MGC803细胞形态影响和相关增生因素的变化

白藜芦醇对人胃癌MGC803细胞形态影响和相关增生因素的变化
年,n J g等 …在 S i c a ce e上 发 表 的研 究 结 果 指 出 R S n E
4 .透 射 电镜 观 察 : 蛋 白 酶 消 化 细胞 , 集 1×1 个 细 胰 收 0
胞 , 2 5 的戊 二 醛 固 定 , 续 脱 水 、 埋 、 片 和染 色按 常 规 处 理 , 射 电 镜 ( E —E 观 察 包 切 透 JM X) 拍照 。 5 MT . T法 检 测 MG 8 3细 胞 生 长 抑 制 : Mos a 法 C0 按 sm n
性; 镜、 光 电镜 、 T法 活 细 胞 计 数 、 MT 流式 细胞 仪 观 察 其 生 物 学 特 征 。 结 果 期 , 藜 芦 醇 能 抑制 MG 8 3细胞 生 长 增 生 , 呈 浓 度 依 赖 性 。 结 论 自 C0 并
生。
关 键 词 胃癌 白藜 芦 醇 细胞 周 期
Efe t fRe v r t o n CelM o p lg n l td Fa tr fGati nc rCeli ir W a g Ru , iHo xn, o Zh h n e f cso s e ar lo l r hoo y a d Reae co so srcCa e l n vto. n i Fe ng i Gu i o g, t
白藜 芦 醇 (evrt l E ) 一 种 在 葡 萄 和 蓼 rsea o,R S 是 r 科植 物 的根部 提 取 出来 的植 物 抗 毒 素 ,是 中 医药 的

细胞 。
3 .普 通 光 镜 观 察 : 5×1 个/ 单 细胞 悬 液 接 种 于 内 将 0 ml
种 有效 成 分 。有 证 据 表 明 ,随 着 葡 萄 酒 销 量 的增
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常见肿瘤常用细胞系(株)和动物模型

常见肿瘤常用细胞系(株)和动物模型

常见肿瘤常用细胞系(株)和动物模型第一节胃癌常用细胞系(株):MKN-45,SGC-7901,AGS,NCI-N87,SNU-16,MGC-803 常用动物模型:胃癌腹膜转移小鼠模型(本质上还是一个移植瘤模型)第二节肺癌常用细胞系(株):A549,H460,H146,A-427,SPC-A1,H838,HCC827常用动物模型:非小细胞肺癌原位移植瘤小鼠模型原发肺癌小鼠模型(A/He,C3H/He)第三节乳腺癌常用细胞系(株):ER阳性:MCF7,T-47D ,ZR-75-1ER阴性:MDA-MB-231,SK-BR-3,MDA-MB-453,HCC1954常用动物模型:小鼠人乳腺癌移植瘤模型原发乳腺癌小鼠模型(A系小鼠,C3H,CBA)原发乳腺癌大鼠模型(Wistar)转HER2/neu小鼠模型转MMTV-PyMT小鼠模型第四节肝癌常用细胞系(株):HepG2,SMMC-7721,Hep3B,J5常用动物模型:小鼠人肝癌移植瘤模型转HBX小鼠模型原发肝癌小鼠模型(C3H/He/Ola)第五节宫颈癌常用细胞系(株):HeLaHCC-94,MEG-01,MS751,HCE-1常用动物模型:小鼠人宫颈癌移植瘤模型第六节结肠癌常用细胞系(株):CT26,HCT-8常用动物模型:结肠癌全身转移动物模型第七节淋巴癌淋巴癌按照大类分成霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤霍奇金淋巴瘤常用细胞系(株):L-428,L1326非霍奇金淋巴瘤常用细胞系(株):伯基特淋巴瘤(Raji,Daudi)滤泡型淋巴瘤(WSU-FSCCL)GCB型弥漫大B细胞淋巴瘤(SUDHL4,Farage)ABC型弥漫大B细胞淋巴瘤(TOLEDO,Karpas422)皮肤T细胞淋巴瘤(HuT-78)T淋巴细胞白血病(Jurkat)套细胞淋巴瘤(Jeko-1)NK/T细胞淋巴瘤(SNK-6)常用动物模型:异种原位移植瘤小鼠模型 P53-/-小鼠模型第八节卵巢癌常用细胞系(株):Caov-3,PA-1,Skov-3常用动物模型:卵巢癌移植瘤小鼠模型第九节甲状腺癌常用细胞系(株):BC-PAP,TPC-1常用动物模型:甲状腺癌移植瘤小鼠模型第十节鼻咽癌常用细胞系(株):人鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系(CNE-1)人鼻咽癌低分化鳞状细胞癌细胞系(CNE-2,HNE1-3,HONE-1,SUNE-1)常用动物模型:鼻咽癌移植瘤小鼠模型第十一节头颈癌常用细胞系(株):HN-5,UMSCC常用动物模型:头颈癌移植瘤小鼠模型第十二节食道癌常用细胞系(株):TE-1,Eca109,EC109常用动物模型:食道癌移植瘤小鼠模型第十三节肾癌常用细胞系(株):HRC-A498,786-0,Caki-1,ACHN,OS-RC-2常用动物模型:肾癌移植瘤小鼠模型第十四节胆管癌常用细胞系(株):HUCCT1,RBE,HCCC-9810,CCLP-1常用动物模型:胆管癌移植瘤小鼠模型第十五节胰腺癌常用细胞系(株):AsPC-1,BxPC-3,Capan-1,Capan-2,CFPAC-1,HPAC,HPAF-2,Hs-766T,MIA-Paca2,PANC-1,SU.86.86常用动物模型:胰腺癌移植瘤小鼠模型转Ras小鼠模型第十六节神经肿瘤常用细胞系(株):人神经母细胞瘤细胞(SK-N-AS,SH-SY5Y)人脑胶质瘤细胞(BT325,SHG-44)人神经胶质瘤细胞(U87,U373,H4)脑干胶质瘤细胞(LN229)常用动物模型:移植瘤模型第十七节骨肉瘤常用细胞系(株):143B,SW1353,SaOS-2,U2OS,MG-63常用动物模型:p53+/-小鼠模型骨肉瘤移植瘤模型第十八节皮肤癌常用细胞系(株):黑色素瘤(B16F10,B16BL6,B78D4,SK-MEL-5,SK-MEL-28,SK-MEL-31,MeWo,WM3734)非黑色素瘤(SCC细胞株:SCC-13,HSQ-89,HSC-2,SCL-1;BCC细胞株:A431,TE-354-T)常用动物模型:移植瘤模型第十九节膀胱癌常用细胞系(株):5637、T24常用动物模型:原位移植瘤小鼠模型第二十节前列腺癌常用细胞系(株):LNCaP、PC-3、DU145常用动物模型:前列腺癌异体移植瘤小鼠模型。

阿魏酸对人胃癌MGC—803细胞增殖的影响-

阿魏酸对人胃癌MGC—803细胞增殖的影响-

阿魏酸对人胃癌MGC—803细胞增殖的影响?目的觀察阿魏酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。

方法不同浓度阿魏酸干预体外培养人胃癌MGC-803细胞,作用24、48、72 h后,MTT法检测细胞增殖;不同浓度(0、5、7.5、10 mg/mL)阿魏酸作用MGC-803细胞48 h,Annexin V-FITC/PI法和流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-qPCR和Western-blot检测Capase-3、Capase-9、Bax、Bcl-2和Xiap的mRNA和蛋白表达。

结果与对照组比较,5、7.5、10、12.5 mg/mL阿魏酸作用MGC-803细胞的OD值明显降低,阿魏酸抑瘤作用明显,阿魏酸作用MGC-803细胞24、48、72 h的IC50分别为12.93、9.73、5.52 mg/mL;5、7.5、10 mg/mL 阿魏酸作用MGC-803细胞48 h后均能诱导MGC-803细胞凋亡,5、7.5、10 mg/mL 阿魏酸均能上调Capase-3、Capase-9和Bax的mRNA和蛋白表达,下调Bcl-2和Xiap的mRNA和蛋白表达。

结论阿魏酸能有效抑制MGC-803细胞增殖,并能诱导MGC-803细胞凋亡,其作用机制与内源性线粒体凋亡途径和下调Xiap 的表达有关。

Abstract:Objective To explore the effects of ferulic acid on gastric cancer cell line MGC-803 proliferation;To discuss the mechanism of apoptosis induced by ferulic acid. Methods Ferulic acid with a variety of concentrations was used to treat gastric cancer cell line MGC-803 for 24,48,72 h;MTT experiment was used to detect the growth of gastric cancer cells. After gastric cancer cell line MGC-803 were treated with ferulic acid with a variety of concentrations (0,5,7.5,10 mg/mL)for 48 h,all gastric cancer cells were collected and stained by Annexin V-FITC/PI for the detection of apoptosis by flow cytometry. RT-qPCR and Western-blot methods were used to detect mRNA and protein levels of Caspase-3,Caspase-9,Bax,Bcl-2 and Xiap. Results Compared with the control group,the OD value of cell line MGC-803 treated by ferulic acid with a variety of concentrations (5,7.5,10,12.5 mg/mL)decreased significantly;the anti-tumor effect of ferulic acid was obvious;IC50 of 24,48,and 72 hours after treated by ferulic acid was 12.93,9.73 and 5.52 mg/mL respectively. Cell lineMGC-803 treated by ferulic acid with a variety of concentrations (5,7.5,10 mg/mL)after 48 h could induce the apoptosis of MGC-803 cells,up-regulate mRNA and protein levels of Caspase-3,Caspase-9,and Bax,down-regulate mRNA and protein levels of Bcl-2 and Xiap. Conclusion Ferulic acid can inhibit the proliferation of MGC-803 cells effectively and induce the apoptosis of MGC-803 cells,which mechanism is related to mitochondria apoptosis pathway and the down-regulation of Xiap expression.Key words:ferulic acid;gastric cancer;cell proliferation;cell apoptosis阿魏酸是多种中药如川芎、当归、升麻、木贼、蒲公英、酸枣仁等的有效成分之一,现代药理研究表明,阿魏酸具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、抗炎、抗凝、解毒、保肝、调节免疫等功效[1]。

黄连解毒汤对人胃癌SGC-803细胞株作用的实验研究

黄连解毒汤对人胃癌SGC-803细胞株作用的实验研究

黄连解毒汤对人胃癌SGC-803细胞株作用的实验研究作者:高东霞盖广东张士刚李加庆孙付军桑晓光殷晓敏孙通华来源:《中国民族民间医药·下半月》2020年第09期【摘要】目的:觀察黄连解毒汤对人胃癌细胞株SGC-803的作用及其机制。

方法:体外培养胃癌细胞株SGC-803,应用黄连解毒汤干预胃癌SGC-803细胞。

运用CCK-8实验检测SGC-803细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;qRT-PCR法检测细胞相关基因mRNA的表达水平。

结果:CCK-8实验结果表明,黄连解毒汤可有效抑制胃癌MGC-803细胞株的增殖,且呈现出药物浓度依赖性及时间依赖性。

划痕实验结果表明,黄连解毒汤干预的实验组细胞迁移率的增长明显慢于对照组,具有统计学差异(P【关键词】黄连解毒汤;SGC-803;细胞凋亡【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2020)18-0017-04Experimental Study on the Effect of Huanglianjiedu Decoction on SGC-803GAO Dongxia1 GAI Guangdong1 ZHANG Shigang2 LI Jiaqing3 SUN Fujun4 SANG Xiaoguang5* YIN Xiaomin5 SUN Tonghua51.Yinan Maternal and Child Health Hospital,Shandong Province,Yinan 276300,China;2.Taian traditional Chinese Medicine Hospital, Shandong Province, Taian 271000,China;3.Yinan peoples Hospital, Shandong Province, Yinan 2763004,China;Shandong Institute of traditional Chinese Medicine, Shandong Province, Jinan 250014,China;5.Shouguang peoples Hospital, Shandong Province, Shouguang 262700,ChinaAbstract:Objective To observe the effect of Huanglianjiedu Decoction on SGC-803 and its mechanism. Methods SGC-803 was cultured in vitro, and SGC-803 were interfered with Huanglianjiedu Decoction with different concentrations. CCK-8 experiment was used to detect the proliferation of SGC-803; scratch test was used to detect the cell migration ability; flow cytometry was used to detect the apoptosis level; qRT-PCR method was used to detect the cell-related gene mRNA expression level. Results The results of the CCK-8 experiment showed that Huanglianjiedu Decoction can effectively inhibit the proliferation of MGC-803, and showed drug concentration and time dependence. The results of scratch experiments showed that Huanglianjiedu Decoction interfered with the cells in the experimental group. The increase of migration rate was significantly slower than that of the control group, with a statistical difference (P<0.05). Apoptosis detected by flow cytometry showed that Huanglian jiedu Decoction can effectively promote the apoptosis of gastric cancer cells. Compared with the control group, the apoptosis rate was significantly different(P<0.05); qRT-PCR results showed that with the intervention of Huanglianjiedu Decoction, the mRNA expression of Bax and Caspase3 was up-regulated, and the mRNA expression of Bcl-2 was down-regulated. Conclusion Huanglianjiedu Decoction can inhibit the proliferation of MGC-803 by inducing SGC-803 and inhibit the migration ability of gastric cancer cells. It is speculated that the mechanism may be to exert anti-tumor effects by affecting the expression of apoptosis-related proteins Bcl-2 and Bax.Keywords:Huanglianjiedu Decoction;SGC-803;Apoptosis胃癌(Gastric Carcinoma, GC)是最常见的消化道系统肿瘤,目前仍是影响全球的一大健康问题,其发病率在肿瘤中高居第五,死亡率高居第三[1]。

龙葵多糖对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响

龙葵多糖对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响

龙葵多糖对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响常乐;刘艺【期刊名称】《牡丹江医学院学报》【年(卷),期】2012(033)004【摘要】目的:研究龙葵多糖(Solanum nigrum polysaccharide,SNPS)粗提物对人胃癌MGC-803细胞株生长的移植,对其细胞周期的影响,探讨龙葵多糖对人胃癌细胞增值的影响.方法:MTT法检测SNPS对胃癌细胞MGC-803增殖作用;使用流式细胞仪检测1.6mg/mL SNPS作用72 h,MGC-803细胞的周期分布的影响.结果:结果表明SNPS对MGC-803细胞的增殖具有抑制作用,并具有时间及浓度依赖性.龙葵多糖1.6mg/mL组作用72 h,人胃癌MGC-803细胞被阻滞于G0/G1期(60.01±1.04),S(29.79±1.01)期和G2/M期(10.20±0.99)细胞数量减少,与细胞对照组比较有显著差异,具有统计学意义(P<0.05).结论:SNPS能显著抑制MGC-803细胞的增殖,阻止胃癌细胞由G1期进入S期、阻滞细胞周期进程.【总页数】3页(P24-26)【作者】常乐;刘艺【作者单位】牡丹江医学院药学院,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院药学院,黑龙江,牡丹江,157011【正文语种】中文【相关文献】1.龙葵碱对人胃癌MGC-803荷瘤小鼠癌细胞钙粘蛋白表达的影响 [J], 张卫东;孙睿;李莉;张丽敏;薛春梅;罗志文2.树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增殖及对酪氨酸激酶活性的影响 [J], 李荣辉;潘洪明;于彩洁;邹宇;周丽3.红花多糖对胃癌MGC-803细胞增殖和侵袭的影响 [J], 刘超; 姬乐; 白铁成4.膜联蛋白A7过表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响 [J], 王小杰;柏友兰;刘明伟;王新杰;李宏伟;李欣5.树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增殖及对EGFR表达的影响 [J], 李荣辉;王玉;郑丽红;张春晶;许惠玉;张英博;潘洪明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

胃安宁颗粒对人胃癌MGC-803细胞bcl-2基因表达的影响

胃安宁颗粒对人胃癌MGC-803细胞bcl-2基因表达的影响

胃安宁颗粒对人胃癌MGC-803细胞bcl-2基因表达的影响颜延凤;许立;胡佳;许尤琪【摘要】目的:通过体外实验,观察胃安宁颗粒含药血清对MGC-803细胞中Bcl-2蛋白表达量的影响,初步探讨其可能的抗癌分子生物学机制。

方法:采用免疫印迹法检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达情况。

结果:与空白血清对照组比较,胃安宁含药血清干预MGC-803细胞24h后,大、中剂量含药血清组中Bcl-2蛋白表达量明显降低;48h后3个剂量含药血清组中Bcl-2蛋白表达量均明显降低。

结论:胃安宁颗粒治疗胃癌的机制可能与同时抑制MGC-803细胞中Bcl-2蛋白表达相关。

【期刊名称】《江苏中医药》【年(卷),期】2012(000)010【总页数】2页(P73-74)【关键词】胃安宁颗粒;含药血清;人胃癌细胞株MGC-803;Bcl-2【作者】颜延凤;许立;胡佳;许尤琪【作者单位】南京市中西医结合医院,江苏南京210014;南京中医药大学,江苏南京210046;南京市中西医结合医院,江苏南京210014;南京中医药大学第二附属医院,江苏南京210017【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃安宁颗粒是针对胃癌术后转移脾胃虚弱、气血亏损、瘀毒内结这一病机,在长期临床实践中,不断精炼而成的中药抗癌复方颗粒剂,主要具有健脾活血解毒功效,能有效提高胃癌患者术后及化疗后的生存质量,延长患者的生存期。

本实验旨在从细胞凋亡的角度出发,通过体外实验,观察胃安宁颗粒含药血清对人胃癌MGC-803细胞凋亡相关基因Bcl-2表达的影响,初步探讨其可能的抗癌分子生物学机制。

1 实验材料1.1 实验动物及细胞株SD大鼠40只,清洁级,体重180~220g,雌雄各半,浙江实验动物合格证号SCXK(浙)2008-0033。

实验动物使用许可证号SYXK(苏)2007-0030。

人胃癌MGC-803细胞株由南京凯基生物有限公司提供。

1.2 药品和试剂胃安宁颗粒组成:黄芪、白花蛇舌草、苦参、薏苡仁、仙鹤草、玄参,南京市中西医结合医院制剂室制,批号:20090513;PBS,福州迈新恒武技术开发有限公司,批号:11030202Y;1640培养液,Thermo,批号:NWE04009;胰酶,Gibco,批号2011/04;胎牛血清,杭州四季青,批号:110311;双抗,Gibco,批号:15140;细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒,碧云天生物技术研究所;AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒,南京凯基生物科技发展有限公司,KGA106。

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MGC-803 人胃癌细胞系
动物种别:人
形态:上皮细胞样
生长方式:贴壁
培养条件:
完全培养基:RMPI 1640 90% + 胎牛血清10%。

培养条件:37.0℃,carbon dioxide(CO2),5%
传代方法:如果细胞已长满,即可进行传代培养。

具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。

1:3~1:6传代;2~3天1次。

冻存方法:
冻存液:基础培养基+10%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存。

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