间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的相互关系
ｃａｓｅｓ（２５．０２％）ｗｅｒｅ ＩＩＦ—ＡＮＡ一／ＵＡ—ＡＮＡｓ—ａｎｄ ２０６ ｃａｓｅｓ（１０．１７％）ｗｅｒｅ ＩＩＦ－
ｒａｔｅ
ＡＮＡ一／ＵＡ．ＡＮＡｓ＋．Ｔｈｅ ｏｖｅｒａｌｌ ｃｏｍｐｌｉａｎｃｅ
ｒａｔｅ
ｏｆ ＩＩＦ—ＡＮＡ ａｎｄ ＵＡ—ＡＮＡ ｗ踮６８．５６％，ｔ｝ｌｅ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙ
例；男４２５例，年龄范围ｌ一９０岁，平均年龄（４４±
１８）岁，女ｌ ６０ｌ例，年龄７～９３岁，平均年龄
全自动化、标准化，因此国内外很多实验室直接采用
对象和方法
对象
收集２００９年５月至２０１０年５月北京协和医院门 诊和住院申请ＡＮＡ谱检测的标本２ ０２６份（已排除重 复送检标本），其中住院患者５２７例，门诊患者ｌ
４９９
自动化程度较高的ＡＮＡｓ特异性抗检测来取代ＡＮＡ 的ＩＩＦ检测。在临床工作中，笔者发现ＩＩＦ检测ＡＮＡ
２ ０２６份标本分为自身免疫性疾病（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ
ｉ咖ｕ∞ａｓ融ｙ，ｕＡ）检测ＡＮＡｓ特异性抗体，将
ｄｉｓｅａ靶８，ＡｌＤ）组、疑似ＡＩＤ组、非ＡＩＤ组，分析检测结果的相互关系和临
床意义。结果２ ０２６份标本中，ｌｌＦ阳性／ＵＡ阳性８８２份，占４３．５３％；ＩＩＦ阳性／ＵＡ阴性２６６份，占１３．１３％；ＩＩＦ阴性／
（Ｄｅｐ叫ｍ朋￡ｏｆ
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Ｍｅｄｉ浏ＣｏｌＩｅ鲈Ｈ佣Ｐｉｔ且Ｉ，Ｃｈｉｎ雠Ａ蒯ｅｍｙ ｏｆ
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ｏｔｈｅｒ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｍｃｔｉｃｅ．
△基金项目：国家自然科学基金（３０６４００８４、３∞７２３３Ｉ、８１０７２４８６）．国家十一五科技支撑计划（２００８ＢＡ巧９脱、２００８ＢＡｌ５９∞３），北京协和医院青
年基金（１１０１４３０）．威海市科技发展计划（２００８０９３．８）；・浙江省台州医院检验科．浙江台州３１７０００；・・山东省威海市文登中心医院检验科．山东
ｌｉｎｅ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａＹ（ＬＩＡ）ｆ－ｏｒ ｔｌｌｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＡＮＡ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ａｌｌ ｔＩＩｅ
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意义的ＡＮＡ特异性抗体漏检，而ＡＮＡ特异性抗体检测因其测定的抗体数量有限也容易导致ＡｌＤ患者的ＡＮＡ漏检。ＩｌＦ－ ＡＮＡ筛查和ＵＡ．ＡＮＡ８特异性抗体检测不能相互代替，对需要通过检测ＡＮＡ来排除ＡｌＤ的患者标本应同时进行ＩＩＦ－ＡＮＡ筛
查和ＡＮＡｓ特异性抗体的检测，以避免仅采用１种方法进行检测时导致的ＡＩＤ患者漏诊。 关键词：间接免疫荧光法；抗核抗体；免疫印迹法；敏感性；特异性 中图分类号：Ｒ４４６．６；Ｒ５９３．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７３｛７０５（２０１１）０３旬１７９Ｊ０ｒ７
ＲｅＩａｔｉｏＩ珏ｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ Ａｎｔｉ－ｎｕｃｌｅａｒ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｐｅｃｉｎｃ Ａｎｔｉ－ｎｕｃｌｅａｒ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ△
ＨＵ Ｃｈａｏ．ｊｕｎ，Ｕ Ｊｕｎ‘，ＺＨＡＮＧ Ｄａ０一ｑｉａｎｇ“，ＺＨＡＮＧ Ｓｈｕ—ｌ肌，Ｕ Ｌｉ－ｊｕｎ， ＤＯＮＧ Ｘｉａｏ＿ｊｕ蛐，ＺＨＡＮＧ Ｆｅｎｇ－ｃｈｕｎ，Ｕ Ｙｏｎｇ－ｚｌＩｅ。
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ＡＩＤ，ｈｉｇｈｅｒ ｔｈ锄ｔ｝ｌｅ
ｈｉｇｈｅｒ ｔｈ粕ｎｏｎ—ＡＩＤ ｉｎ ｅａｃｈ昱，ｏｕｐ
ａＪｌｄ≥１：６４０（ｒ＝２６．９６，７．８９，１９．４２，Ｐ＜ｏ．０１）．
ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｗｈｉｃｈ ｈａｓ
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ＡＮＡ ａｎｄ ＵＡ．ＡＮＡ（疋２＝４１６．２１，Ｐ＜Ｏ．０１）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ａｎｔｉｇｅｎ
摘要：目的分析以间接免疫荧光法（ｉｎｄｉｎｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｎｕｏ陀８ｃｅ眦ｅ，ｌＩＦ）筛查的大样本抗核抗体（蚰ｔｉｎｕｃｌｅ盯蚰ｔｉｂｏｄｙ，
ＡＮＡ）结果与特异性抗体检测结果的相互关系，以确定其临床意义及临床实践中二者是否能够相互代替。方法采用ＩＩＦ 筛查２ ０２６份临床连续送检血清标本的ＡＮＡ，采用线性免疫印迹法（１ｉｎｅ
ｗｏｒｄｓ：ｉＩＩｄｉｌ．ｅｃ“衄帅ｏｎｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ；锄ｔｉ－ｎｕｃｌｅ盯明ｔｉｂｏｄｙ；ＩｉｌＩｅ ｉ咖岫∞ｓ钮ｙ；辩璐ｉｔｉｖｉｔｙ；叩ｅｃｉｆｉｃ畸
踟ｌ
抗核抗体（卸ｔｉ．ｎｕｃｌｅａｒ粕ｔｉｂｏｄｙ，ＡＮＡ）检测在自 身免疫性疾病（粕ｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ，ＡＩＤ）诊疗过程 中的地位无可替代…。间接免疫荧光法（ｉｎｄｉｒｅｃｔ
ｓｉｇｎｉ６ｃ蚰ｃｅ ｗｈｅｎ ＡＮＡ ｗ酗ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｏｎｌｙ ｂｙ ＩＩＦ，ｗｈｅｒｅ酗ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＡＮＡ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｒＩｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｓ ｖｅｒｙ
ｌｉｍｉｔｅｄ，ｉｔ ｉｓ ａｌｓｏ ｖｅｒｙ ｅａｓｙ
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ｕＡ阴性５０７份。占２５．０２％，ＩＩＦ阴性／ｕＡ阳性２０６份，占１０．１７％。ＩｌＦ与ｕＡ检测ＡＮＡ的结果总体符合率为６８．５６％（Ｋ ＝ｏ．４７２，Ｐ＜ｏ．０１），２种方法检测结果的差异有统计学意义（，＝４１６．２ｌ，Ｐ＜ｏ．０１）。ＩＩＦ阴性／ｕＡ非阴性组中，抗Ｒｏ． ５２、抗干燥综合征抗原Ａ（ｓｓ．Ａ）、抗双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、抗线粒体抗体Ｍ２亚型（ＡＭＡ—Ｍ２）、抗史密斯抗原（ｓｍ）、抗干 燥综合征抗原Ｂ（ｓＳ．Ｂ）、抗核糖核蛋白／史密斯抗原（ｎＲＮＰ／ｓｍ）和抗组氨酰ｔＲＮＡ合成酶抗原（Ｊｏ・１）抗体的阳性率分别 为６．００％一３４．９４％；ＩＩＦ阴性／ｕＡ非阴性的３１２例患者中，ＡＩＤ患者１１６例，占３７．１８％，高于非ＡＩＤ患者（２２．１１％），且
ｉｍＩｎｕｎｏｎｕｏｒｅｓｃ明ｃｅ，ｌＩＦ）是检测ＡＮＡ最重要的方法，
Ｊ删哪｝ｙ Ｃ矗ｎ，ｍ舢越，２０１ｌ，５（３）：１７９．１８５
结果与ＡＮＡｓ的特异性抗体检测结果并不完全符合。 因此，本研究探讨ＡＮＡ的ＩＩＦ检测结果与ＡＮＡｓ特异 性抗体检测结果问的相互关系及２种检测方法是否可 以相互代替，以明确ＩＩＦ检测ＡＮＡ和ＡＮＡｓ特异性抗 体检测在ｌ临床诊疗工作中的实际意义。
ｔ１１ｅｉｒ
ＡＩＤ ｇｒｏｕｐ
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ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ，８８２ ｃ鹊ｅｓ（４３．５３％）ｗｅｒｅ ＩＩＦ—ＡＮＡ＋／ＵＡ．ＡＮＡｓ＋，２６６ ｃａｓｅｓ（１３．１３％）ｗｅｒｅ ＩＩＦ—ＡＮＡ＋／ ＵＡ．ＡＮＡｓ一。５０７
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ＡＮＡ ｂｙ ＩＩＦ ａｎｄ ｃｂｅ ｄｅ￡ｅｃ￡ｉｏｎ ｏｆ ＡＮＡ ｓｐｅｃｊｆｉｃ ａｎｔｊｂｏｄｉｅｓ ｂｙ ＵＡ ｃ叫ｌｄ
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ｏｆ ＩＩＦ—ＡＮＡ＋／ＵＡ－ＡＮＡｓ－／’ｇｒｏｕｐ，４８．Ｏ％ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ（１５６ ｃａｓｅｓ）ｗｅｒｅ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ｎｏｎ—ＡＩＤ ｇｒｏｕｐ（２２．１５％），ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＡＩＤ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｍ ＩＩＦ．ＡＮＡ ｔｉｔｅｒ １：８０，１：１６０一１：３２０ Ｃｏｎｃｈ晦ｉＯｎｓ
抗核抗体复筛查试验阴性与特异性抗体确认试验阳性的关联
抗核抗体复筛查试验阴性与特异性抗体确认试验阳性的关联作者：肖静杨元好梁燕刘文毅来源：《中国现代医生》2013年第20期[摘要] 目的探讨抗核抗体（ANA）复筛查试验阴性与特异性抗体确认试验阳性的关联。
方法对2065例间接免疫荧光法（IIF）检测阴性结果的样本进行免疫印迹法（LIA）检测，并使用ELISA进行辅助检测。
观察IIF阴性结果下LIA、ELISA检测结果，并对样本稀释度对结果的影响进行深入研究。
结果 165例IIF阴性样本经LIA确认为阳性，其中以SS-A最多，达到29.76%。
通过ELISA检测SS-A，发现与LIA符合率达到88.0%；而通过降低样本稀释度，可以发现50%的样本是因为特异性抗体的浓度较低才漏检的。
结论对于高度怀疑为AID的患者，不管IIF检测是否为阳性，都应该进行LIA的复检，以提高检测的准确性。
[关键词] 抗核抗体；特异性抗体；间接免疫荧光法；免疫印迹法[中图分类号] R446.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）20-0070-03抗核抗体（ANA）检测是目前临床上诊断自身免疫性疾病（AID）最重要、可靠的一种实验室诊断手段，其中间接免疫荧光法（IIF）的使用最为广泛[1，2]。
随着实验技术的进一步发展，目前其他针对特异性抗体（ANAs）的新型检查手段也不断出现，如ELISA、免疫扩散及免疫印迹等[3，4]。
临床工作中，IIF常常作为初步检测存在，对检测结果呈现阳性的样本进行特异性抗体确认试验[5]。
但临床工作中发现，有时IIF与特异性抗体确认试验结果差异较大。
我科对2 065份IIF检测阴性样本进行免疫印迹法（LIA）检查，共发现15种特异性抗体。
本研究试图阐述IIF阴性样本与LIA检查的关系与意义，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料本研究共纳入受试者2 065例，均为我院2010年1月～2012年12月各科室申请ANA检测的患者，ANA检测均采用IIF，检测结果均为阴性。
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体的检测方法主要包括间接免疫荧光法、放射免疫法、ELISA测定法和免疫印迹测定法。
以下是这些方法的简要介绍和原理：
1.间接免疫荧光法：此方法是检测抗核抗体的常用方法之一。
原理是将待测标本与细胞底物片（如HEp-2细胞）的相应抗原进行反应，然后加入
荧光素标记的抗人免疫球蛋白抗体（通常为抗IgG抗体），形成抗原-抗体-荧光二抗的复合物。
通过荧光显微镜观察，可以判断待测标本中是否存在针对细胞相关抗原的自身抗体。
2.放射免疫法：此方法常用于检测抗DNA抗体。
原理是用同位素标记DNA，与被检血清中的抗DNA抗体结合，然后通过沉淀和对比沉淀物与上
清液中的放射活性，得到DNA的结合活性。
结合率高于一定值（通常为20%）则判断为阳性。
3.ELISA测定法：即酶联免疫吸附法，是一种常用的固相酶免疫测定方法。
原理是将抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在
固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗去，最后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。
4.免疫印迹测定法：此方法是将混合的抗原作为凝胶电泳分离，然后转印到硝酸纤维素的薄膜上，再用标记抗体进行检测和分析。
以上各种方法都有其特点和适用范围，可以根据实验需求和条件选择合适的方法进行检测。
三种抗核抗体检测方法的比较
三种抗核抗体检测方法的比较吴秀风;陈惠娟;曾勇彬;陈添彬;陈静;詹富国【摘要】Objective To compare the characteristics of three assay methodsof antinuclear antibody (ANA) and to evaluate their clinical use.Methods 445 sera specimens were detected by Enzyme-Linked Immunosorbent Assays(ELISA),Indirect Immunofluorescence (IIF)and Line Immumoassay (LIA), then consistency of the three methods were analyzed.Results There were some differences of the consistency of the three methods(Kappa0.573、0.725、0.566,P<0.05)respectively.ConclusionELISA was suitable for the screening of the ANA specimens,which could not replace IIF or LIA completely. The assay methods should be adopted according to the disease of the patients.%目的：比较三种不同原理抗核抗体（Antinuclear antibody，ANA）检测方法的性能特点，评估其临床应用价值。
方法445例血清样本分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接免疫荧光法（IIF）和免疫印迹法（LIA）三种方法进行检测，比较三者检验结果的一致性。
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体（ANA）是一种特殊的抗体，它们是人体免疫系统产生
的一类抗体，主要针对自身细胞核中的蛋白质和核酸成分。
抗核抗
体的检测方法主要用于自身免疫性疾病的诊断，如系统性红斑狼疮（SLE）和类风湿性关节炎（RA）等。
目前常用的抗核抗体检测方法包括间接免疫荧光法（IFA）和酶
联免疫吸附试验（ELISA）。
1. 间接免疫荧光法（IFA）：
该方法主要通过观察抗核抗体与细胞核结构的结合情况来确定
是否存在抗核抗体。
具体步骤如下：
- 取一份患者血清，将其与细胞核结构进行反应。
- 通过荧光显微镜观察，如果血清中存在抗核抗体，它们会与
细胞核结构结合形成荧光标记的复合物。
- 根据荧光标记的情况，可以确定抗核抗体的存在及其荧光模式，进而进行疾病的诊断。
2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：
该方法通过测定抗核抗体与特定抗原的结合情况来确定是否存
在抗核抗体。
具体步骤如下：
- 取一份患者血清，将其与特定抗原进行反应。
- 加入特定抗核抗体的检测试剂，使其与抗核抗体结合。
- 加入酶标记的抗人免疫球蛋白抗体，使其与抗核抗体结合形
成复合物。
- 加入底物，使酶标记的抗体与底物发生反应，产生颜色反应。
- 通过测定反应产生的颜色强度，可以确定抗核抗体的存在及
其浓度水平。
以上是两种常用的抗核抗体检测方法。
这些方法的原理基于抗体与特定抗原的结合反应，并通过不同的检测手段来确定抗核抗体的存在及其水平。
这些检测方法在临床上被广泛应用于自身免疫性疾病的早期诊断和疾病活动性的监测。
间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的相互关系
间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的相互关系【摘要】目的：对间接免疫荧光法（iif）筛查抗核抗体与特异性抗体检测之间的相互关系进行研究分析。
对其临床意义予以确定。
方法：抽取1894份临床连续送检血清标本的抗核抗体，将这1894例标本随机分成三组，分别作为自身免疫性疾病组、疑似自身免疫性疾病组和非自身免疫性疾病组，采用间接免疫荧光法对这些标本进行筛查，采用线性免疫印迹法(lia)对抗核抗体进行检测，对检测结果的相互关系进行分析与总结。
结果：在所调查的结果中，两种方法均阳性的有833份，约占43.98%；iif检查结果表现出阳性而lia检查结果为阴性的有246份，约占12.99%；iif检查结果表现出阴性而lia检查结果为阳性的有189份，约占9.98%；两种方法均呈阴性的有626份，约占33.05%。
两种方法的总体符合率为77.03%，以上同级的数据均具有明显的统计学差异（p<0.05）。
结论：采用间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的结果显示出，两种方法具有很高的符合率，这对临床来说具有重要意义。
【关键词】间接免疫荧光法；抗核抗体；特异性抗体检测；线性免疫【中图分类号】r446.6 【文献标识码】a 文章编号：1004-7484（2012）-04-0357-02目前在临床上在对自身免疫性疾病进行诊疗的过程中对抗核抗体进行检测具有无法取代的位置。
对抗核抗体进行检测的方法中最为重要的一种就是间接免疫荧光法，被认为是检测抗核抗体的金标准。
尽管间接免疫荧光法对抗核抗体进行检测无疾病特异性，但是因该方法进行测定主要目标是细胞成分的总抗体，具有较高的检测敏感度，由此而被广泛应用与国内外的众多实验室。
研究发现间接免疫荧光法对抗核抗体的检测结果并不完全与特异性抗体检测结果相符合［1］。
在本次研究中对1894份间接免疫荧光法阴性的抗核抗体标本采用免疫印记法对15种特异性抗体进行检测，对间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测之间的相互关系进行研究分析，以下为本次研究的结果报告。
抗核抗体诊断标准
抗核抗体诊断标准
抗核抗体（ANA）是一种检测自身免疫性疾病的重要指标，
常用于诊断系统性红斑狼疮（SLE）和其他结缔组织病。
抗核
抗体的诊断标准通常包括以下几个方面：
1. 实验室检测结果：抗核抗体通常通过间接免疫荧光法（IIF）进行检测。
阳性结果表示存在抗核抗体，但不能确定具体的抗核抗体种类。
通常需要进一步进行特异性抗核抗体检测，如抗双链DNA抗体、抗Sm抗体等，以确定疾病的类型和严重程度。
2. 异质性：抗核抗体的阳性结果需要在不同时间点进行重复检测，以排除偶发阳性和暂时感染等非自身免疫因素。
3. 结合临床表现：抗核抗体的阳性结果应结合患者的临床表现进行综合分析。
一般来说，阳性结果结合相关症状和体征，如关节痛、皮疹、发热等，可以认为是系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的可能。
需要注意的是，抗核抗体作为一项检测指标，并非仅凭阳性结果就可以诊断某一疾病，还需结合其他相关指标和临床表现进行全面判断。
此外，不同类型的抗核抗体与不同的自身免疫性疾病之间存在一定的关联性，具体的诊断标准可能会根据具体疾病而有所不同。
因此，建议在临床实践中，医生应根据患者的具体情况进行综合分析和判断。
间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的相关性分析
・202・黑龙江医药科学244年4月第42卷第2期间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的相关性分析①陈戊才（郑州大学第二附属+隐检验科,河南郑州456009）摘要：目2:探讨间接免疫荧光法（（A）筛查抗核抗体（ANA）与特异性抗体检测的相关性，并进行相应的分析。
方法:抽取904份临床连续送检的血清标本抗核抗体，分成A组（自身免疫性疾病组）、B组（疑似自身免疫性疾病组）、C自身免疫性疾病组）。
各组利用IIL法筛查ANA,利用免疫印迹法（I BT）检测特异性ANA,分析IIL法筛查ANA与特异性抗体检测的相关性。
结果:检测后2阳性标本率为77.07%,阴性标本率为56.06%,总符合率为74.55%。
IA检测结果为阴性者且IBT 检测结果为非阴性者中，A组比例略高于B组（P> 4.45）；但A组比例明显高于C组，比较具有统计学意义（P<4.45）。
A 组的IA+/IBT+比例明显高于IA-/IBT-的比例，但B组、C组的IIL+/IBT+比例明显低于IIL-/IBT-的比例，比较均有统计学意义（P<4.45）。
结论：用IA法筛查抗核抗体易导致特异性抗体漏诊，用IBT法检测特异性抗体，易导致抗核抗体漏诊，应进行联合检测，避免出现漏检。
关键词：间接免疫荧光法；筛查；抗核抗体;线性免疫印迹法;特异性抗体中图分类号:R446.60文献标识码:B文章编号：903-4144（2216）40-4220-40ANA是抗细胞内非特异性自身抗体的总称，其可作为自身免疫病（AID）的诊断指标4］。
IIC法是ANA检测的金标准，虽然IIC法检测ANA不存在疾病特异性，但IA法测定的细胞成分总抗体,对其检测具有较高的敏感度，因此广泛在临床上应用4］。
目前，特异性抗体检测也不断应用到临床中，因此,采取合理的抗体检测方法来降低漏诊率已为重点研究内容。
研究显示/A法检测ANA的检测不完全与IBT法检测特异性抗体的结果相符4］。
间接免疫荧光法筛查抗核抗体与特异性抗体检测的临床意义分析
３ 讨
论
Ａ Ｉ Ｄ是指机体 对 自身抗 原发生 免疫反 应而 导致 自身组 织损 害所 引起 的一种 疾病 。早 期 发现 是诊治 Ａ Ｉ Ｄ的关 键 。
许多 Ａ Ｉ Ｄ患 者都 可 出现 Ａ Ｎ Ａ阳性 ， Ａ Ｎ Ａ在ｆ ｌ 缶 床 症 状 出现 前
・
１ ８ ０・
白求 恩 军 医 学 院学 报 ２ ０ １ ３年 ４月 第 １ １ 卷 第 ２期
Ｊ ｏ ｕ ｍ￣ ｏ ｆ Ｂ ｅ ｔ ｈ ｕ ｎ ｅ Ｍｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ￣Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｖ ｏ １ ． １ １ ， Ｎ ｏ ． ２ ． Ａ ｐ ｉ ｒ ｌ ， ２ ０ １ ３
１ ． ２ 检 测 方 法
１ ． ２ ． １ Ｉ Ｉ Ｆ检测
１ ： １ ０ ０为 阳性 。
试剂 盒购 于北京 Ｈ Ｏ Ｂ公 司 ， 具体 步骤按
注： Ｉ Ｔ将 ｎ ＲＮ Ｐ和 Ｓ ｍ 抗 原 标记 于 ｌ 司一 处 ，书操作 。荧光显微镜 下判 读结果 ， 以抗体滴度 ≥
１ 资 料 与 方 法
１ ． １ 一般资料
选取 ２ ０ １ １ 年 １ ０月 一 ２ ０ １ ２年 ９月 在我院诊
为疑似 Ａ Ｉ Ｄ患 者 ３ ８ ９例 ， 其 中男 ７ ｌ 例， 女３ １ ８例 ， 年龄 １ ８～
８ ２ （ ５ ５±１ ２ ） 岁。所有患者均 收集清晨空腹血清标本 后 ， 同时 采用 Ｉ Ｉ Ｆ 、 Ｉ Ｄ Ｔ 、 Ｉ Ｂ Ｔ检测 自身抗体。
１ ０年左右就可检查 到， 无论 患者有无典型 临床表现都应长期 随访 、 密切观察 ， 以免漏诊 。 Ｉ Ｉ Ｆ是检测细胞成分 的总抗体 ， 不具有疾病特异性 ， 敏 感 度较高 ， 作为Ａ Ｉ Ｄ的筛查项 目早 已得 到公认 。Ｉ Ｉ Ｆ受 主观检 测标准 、 荧光 片洗涤 、 荧光 二抗浓度 、 荧光显微镜 光强和分辨 率 的影响 。 目前 Ｉ Ｂ Ｔ不能检测所有 的 Ａ Ｎ Ａ， 血清处理不 当引 起非特异 吸附还可 出现假 阳性结果 。本文 中 Ｉ Ｉ Ｆ检测 的阳性
抗核抗体复筛查试验阴性与特异性抗体确认试验阳性的关联
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【 关键 词１ 抗核 抗体 ； 特异 性抗 体 ； 间接免 疫 荧光 法 ； 免 疫 印 迹 法
【 中图分 类 号】Ｒ ４ ４ ６ ． ６
【 文 献标 识码】Ｂ
【 文章 编 号】１ ６ ７ ３ — ９ ７ ０ １ （ ２ ０ １ ３） ２ ０ — ０ ０ ７ ０ — ０ ３
Ｔｈ ｅ ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｉｏ ｔ ｎ ｂ ｅ ｔ ｗｅ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｉ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ａ ｒ ａ ｎ ｉ ｔ ｂ ｏ ｄ ｙ ｃ ｏ ｍｐ ｌ ｅ ｘ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ｔ ｅ ｓ ｔ ｎ ｅ ｇ － ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ａ ｎ ｄ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｔ ｏ ｃ ｏ ｎ ｉ ｆ ｒ ｍ ｔ ｅ ｓ ｔ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ
抗核抗体检测原理
抗核抗体检测原理抗核抗体是指针对细胞核内物质（包括核糖体、线粒体等）的自身免疫抗体。
抗核抗体检测在临床上广泛应用于风湿免疫系统疾病的诊断和鉴别诊断。
抗核抗体检测原理主要是通过ELISA或间接免疫荧光法等技术，检测患者血清中的自身免疫抗体与核抗原结合的情况，来判断是否存在自身免疫反应。
抗核抗体检测的方法有多种，本文将重点介绍ELISA和间接免疫荧光法。
一、ELISA法检测原理ELISA法是酶联免疫吸附试验，又称酶标法。
其检测原理基于抗原与特异性抗体的反应，在一个特定的底物上标记酶使其可定量测定。
ELISA法的具体操作步骤如下：1. 将核抗原制备成微孔板的包被抗原，加入标准物、阳性及阴性对照和待检血清。
2. 洗涤掉未结合物，加入人抗IgG酶标记物，形成抗体-抗原-酶复合物。
3. 清洗掉未结合的抗体，加入底物与显色剂，使酶与底物反应所生成的色素可量化。
4. 通过光密度计测定每个孔的发光程度，根据标准曲线计算出各样本抗体的浓度。
二、间接免疫荧光法检测原理间接免疫荧光法又称间接荧光抗体法，其检测原理是使用荧光标记的细胞核物质（如正常人淋巴细胞的核）作为抗原，检测待测血清中的自身抗体结合情况。
具体操作步骤如下：1. 将正常人淋巴细胞制成薄片，用甲醛固定，形成抗原。
2. 加入待检血清，其中若存在抗核抗体，会与抗原结合形成复合物。
3. 再加入荧光标记的抗人IgG抗体，以荧光染色，并进行显微镜观察。
4. 观察样本的荧光染色程度、荧光颗粒的类型和形态、分布情况等，以判断是否存在抗核抗体的阳性反应或抗核抗体水平的高低。
三、应用抗核抗体检测可以用于如系统性红斑狼疮、硬皮病、混合型结缔组织病等自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断。
对于一些具有高度特异性的抗核抗体或特定细胞核抗原，如抗ds-DNA（双链DNA）抗体，根据抗体阳性水平还可以预测某一个病人的病情的严重程度和治疗效果。
高滴度抗核抗体可预示病情活动度高，反之即预示病情不活跃，治疗效果好等。