2019-2020最新高中生物专题4酶的研究与应用第12课时酵母细胞的固定化同步备课教学案新人教版选修1(1)

一题多变
(1)题中图①和②方法是否适于固定化酵母细胞？为什么？
答案 不适合。因为细胞体积大，难以被吸附或结合。
(2)题中图③方法用于固定化酶时有何缺点？
答案 酶分子很小，容易从包埋材料中漏出。
方法链接 选择固定化酶与固定化细胞的方法
(1)根据固定方法选择
①固定化酶技术：由于酶分子较小，可以采用物理吸附法和化学结合法进行固定，它催化的是单一的化学反应。
答案 都需要适宜的温度和pH等影响酶活性的条件，但固定化细胞还需要提供溶解氧和营养物质。
归纳总结 固定化酶和固定化细胞的两个区别
1固定方法的区别
①在实际应用中，酶更适用化学结合法和物理吸附法固定，原因是酶分子小，容易被多孔性物质吸附，更适合与化学物质结合，但容易从包埋材料中漏出。
②细胞体积大难以吸附或结合，因而多采用包埋法固定。
↓
配制海藻酸钠溶液
↓
海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
↓
固定化酵母细胞
2.用固定化酵母细胞发酵
将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2～3次
↓
将150 mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到锥形瓶中
↓
加入固定好的酵母细胞(凝胶珠)
↓
置于25 ℃下发酵24 h
↓
观察是否有气泡产生，闻闻是否有酒味
1.实验过程分析
2催化作用的区别
固定化细胞操作更容易，对酶活性的影响更小，可以催化一系列反应，但是，由于大分子物质难以自由通过细胞膜，因此固定化细胞的应用也受到限制。所以，催化的反应物为大分子物质时，最好选用固定化酶技术。
1.下列关于固定化酶和固定化细胞的说法，不正确的是( )
A.固定化酶和固定化细胞的技术方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法
(5)过少 海藻酸钠浓度偏高，制作失败
(6)用于海藻酸钠聚沉
解析 (1)酵母细胞在缺水的状态下休眠。活化是加入水使酵母细胞恢复到生活状态。酵母细胞活化后体积会增大。(2)固定化酶常用化学结合法和物理吸附法固定化。(3)实验的关键是配制海藻酸钠溶液，得到凝胶珠。(4)海藻酸钠溶化过程要小火加热(小火间断加热)并不断搅拌，使海藻酸钠完全溶化，又不会焦糊。(5)海藻酸钠浓度过低，包埋的酵母细胞就过少；海藻酸钠浓度过高，不易与酵母细胞混合均匀。(6)氯化钙溶液能使海藻酸钠聚沉。
。
与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是 。
(2)填写下列三种固定化酶的方法：①是 ，②是 ，③是 。
(3)制备固定化酵母细胞时，常用的包埋材料是 ，该载体的特点是 。
答案 (1)固定化酶能被反复利用 多酶系统(或一系列酶或多种酶)
(2)化学结合法 物理吸附法 包埋法 (3)海藻酸钠 不溶于水、多孔
B.固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法
C.由于细胞体积大，而酶分子很小，因此细胞多采用物理吸附法固定化
D.反应物是大分子物质应采用固定化酶
答案 C
解析 由于细胞体积大，酶分子很小，体积大的细胞难以被吸附或结合，而较小的酶容易从包埋材料中漏出。因此，细胞多采用包埋法固定化，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化。
[重难点击] 1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。2.尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。
一、固定化酶和固定化细胞技术
1.固定化酶的应用实例——生产高果糖浆
(1)反应原理：葡萄糖果糖。
(2)生产过程
将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上
↓
放入底端装有分布着许多小孔的筛板的反应柱内(酶颗粒不能通过，反应液能通过)
酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞
(1)在 状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复 状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时 。
(2)固定化细胞技术一般采用包埋法，而固定化酶常用 和 。
(3)影响实验成败的关键步骤是 。
3.关于固定化酵母细胞制备过程的叙述，正确的是( )
A.为使酵母菌活化，应让干酵母与自来水混合并搅拌
B.用小火或间断加热可防止海藻酸钠溶液焦糊
C.向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀
D.将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液倒入CaCl2溶液中，会观察到CaCl2溶液中有球形或椭球形的凝胶珠形成
——教学资料参考参考范本——
2019-2020最新高中生物专题4酶的研究与应用第12课时酵母细胞的固定化同步备课教学案新人教版选修1(1)
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[学习导航] 1.阅读教材P49“课题背景”，认识在应用酶的过程中，存在的实际问题及解决办法。2.通过阅读教材P49“(一)”，了解高果糖浆及生产高果糖浆的固定化酶技术。3.结合教材P50“(二)”，掌握固定化技术的方法及适合不同固定方法的材料。4.阅读教材P50“实验操作”，掌握固定化酵母细胞的实验操作过程，达到能够进行实际操作的目的。
2.固定化酶和固定化细胞的特点分析
(1)一种酶只能催化一种或一类化学反应，而在实际生产中很多产物的形成都需要通过一系列的酶促反应才能进行，怎样解决这一问题？
答案 可采用固定化细胞技术。因为固定化细胞固定的是活细胞，而细胞中有多种酶，因此可以催化一系列反应。
(2)固定化细胞与固定化酶所固定的酶种类有何区别？
(3)根据反应的特点选择
①固定化酶可以催化的反应物是小分子或大分子。
②固定化细胞则只能催化小分子反应物。
二、实验操作
1.制备固定化酵母细胞
(1)固定方法：包埋法。
(2)常用载体：一些不溶于水的多孔性载体，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。
(3)实验操作
酵母细胞的活化
↓
配制物质的量浓度为0.05 mol/L的CaCl2溶液
解析 (1)将酶固定化后，能使酶在催化反应之后与产物分离，可反复使用；将细胞固定化后，即可以将一种细胞内的多种酶同时进行固定。(2)图示①将酶相互连接起来，是化学结合法；②将酶吸附在载体表面上，是物理吸附法；③将酶包埋在细微网格里，是包埋法。(3)海藻酸钠不溶于水，容易与发酵液分离，在高温时容易熔化，温度降低时又可以形成多孔性固体颗粒，是包埋酵母菌的好材料。
答案 如果酵母细胞没有活化，则仍处于休眠状态；如果溶化好的海藻酸钠溶液没有冷却就加入了酵母细胞，则酵母细胞会被高温杀死。以上两种情况都会导致酒精发酵失败，而最终无酒精产生。
1.下列属于固定化酶应用特点的是( )
①可以被反复利用 ②有利于酶与产物分离 ③能自由出入载体 ④一种固定化酶只催化一种酶促反应 ⑤酶多用包埋法固定化
答案 固定化细胞中含有多种酶，能催化一系列生化反应，而固定化酶中只含有一种酶，只能催化一种生化反应。
(3)如果反应物是大分子，能否采用固定化细胞技术？为什么？
答案 不能。因为大分子难以通过细胞膜进入细胞，不能与细胞内的酶接触而发生反应，因此不能用固定化细胞技术，应该用固定化酶技术。
(4)固定化酶和固定化细胞活性的维持需要的条件有何异同？
(4)海藻酸钠溶化过程中的注意事项是
。
(5)如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目 。如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明 。
(6)该实验中CaCl2溶液的作用是
。
答案 (1)缺水 正常的生活 体积增大
(2)化学结合法 物理吸附法
(3)配制海藻酸钠溶液
(4)要用小火或间断加热，避免海藻酸钠发生焦糊
(1)用于固定酵母细胞的载体是什么？载体的浓度越高固定效果越好吗？
答案 海藻酸钠。海藻酸钠浓度过高不易形成凝胶珠；浓度过低形成的凝胶珠内包埋的细胞过少。
(2)配制海藻酸钠时小火或间断加热并不断搅拌的目的是什么？
答案 海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要通过加热促进其溶解，用小火或间断加热并不断搅拌的目的是防止加热过程中海藻酸钠焦糊。
↓
葡萄糖溶液从反应柱的上端注入
↓
流过反应柱
↓
与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖
↓
果糖从反应柱的下端流出
2.固定化酶和固定化细胞技术
(1)概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。
(2)方法及适用范围
(3)优点
①固定化酶：酶既能与反应物接触，又能与产物分离，可以反复利用。
②固定化细胞：与固定化酶技术相比，固定化细胞制备的成本更低，操作更容易。
②固定化细胞技术：细胞一般体积较大，适合应用包埋法固定，而且细胞能够产生多种酶，因此固定化细胞可以催化一系列化学反应。
(2)根据反应液中加入物质选择
①在固定化酶应用过程中，反应溶液中只需要加入酶的底物。
②固定化细胞在应用过程中，要保持细胞的正常生命活动，反应溶液中除需要加入反应的底物外，还应加入满足细胞生命活动所需要的营养物质等。
一题多变
果汁的生产需要果胶酶，用酶固定法可以提高果胶酶的利用率(如下图)。图中果胶酶的固定化适合采用哪种方法？
答案 酶分子较小，不适合采用包埋法固定化，可采用化学结合法和物理吸附法固定化。
2.如今，固定化酶与固定化细胞技术已经大规模地应用于各个生产领域。
(1)在实际生产中，固定化酶技术能节约成本的原因是
一题多变
(1)固定酵母细胞的过程中三次使用到蒸馏水，请说出是哪三个环节？
答案 酵母细胞的活化、配制CaCl2溶液以及配制海藻酸钠溶液定容时需要使用蒸馏水。
(2)本题中固定酵母细胞使用了海藻酸钠，固定化细胞还可以使用哪些固定化材料？
答案 明胶、琼脂糖、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。
(3)制备好的固定化酵母细胞可以用于酒精发酵，如果酵母细胞没有活化或溶化好的海藻酸钠溶液没有冷却就加入了酵母细胞，则对酒精发酵会产生怎样的影响？