促甲状腺激素、雌二醇、催乳素对不同碘营养水平哺乳期小鼠乳腺细胞钠碘转运体mRNA表达的影响解析
稳定表达牛催乳素基因的小鼠乳腺上皮细胞系的建立

稳定表达牛催乳素基因的小鼠乳腺上皮细胞系的建立方彧聃;何佳平;张斯敏;王娟;任晓叶;张金脉;张敬之【期刊名称】《生命科学研究》【年(卷),期】2013(017)002【摘要】在乳腺上皮细胞体外培养时,为了使其状态接近泌乳期,需要在培养基中添加催乳素.由于催乳素价格昂贵,使得乳腺上皮细胞的体外培养成本颇高.建立在体外培养过程中不需要添加催乳素蛋白的乳腺上皮细胞系,能为在细胞水平研究乳腺细胞相关基因提供诸多方便.利用慢病毒载体的整合特性,建立稳定整合了牛催乳素cDNA (bPRL)表达盒的小鼠乳腺上皮细胞系(HC11细胞系).经10代次以上的传代以后,通过定量PCR检测,证明平均每个细胞中含有2.6个外源的bPRL基因,其表达量为HC11细胞中管家基因β-肌动蛋白(β-actin)表达量的14%左右.另外,先前的研究结果表明催乳素能在HC11和泌乳期的小鼠乳腺上皮组织中有效促进山羊β-酪蛋白启动子启动外源基因的表达.之后的实验证实整合了催乳素基因的HC11细胞(bPRL-HC11细胞系)也有此功能.因此,bPRL-HC 11细胞系可以为体外研究乳腺生物反应器提供良好的细胞模型.【总页数】6页(P100-105)【作者】方彧聃;何佳平;张斯敏;王娟;任晓叶;张金脉;张敬之【作者单位】上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖工程重点实验室,中国上海200040;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖工程重点实验室,中国上海200040;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;上海市儿童医院,上海交通大学附属儿童医院,上海交通大学医学遗传研究所,中国上海200040;卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖工程重点实验室,中国上海200040【正文语种】中文【中图分类】Q291【相关文献】1.稳定表达人MAGE-1基因小鼠黑色素瘤细胞系的建立 [J], 李侠;隋延仿;胡沛臻;司少艳;张秀敏;黄杨;马斌;葛伟2.小鼠重组釉蛋白基因稳定表达细胞系的建立 [J], 娄雅莉;孙樱林;赵铁强;刘国庆;冯海兰3.shRNA稳定干扰Raptor基因表达的小鼠胸腺上皮细胞系的建立 [J], 闵玉娇;吴皓杰;王荟;潘子辉;邵启祥4.稳定转染HSP72奶牛乳腺上皮细胞系建立与表达鉴定 [J],5.近交系高表达HBV转基因小鼠的建立及表达传代稳定性 [J], 刘光泽;熊一力;王洪敏;贾彦征;周军辉;潘菲;张宜俊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
蛋白质对低碘小鼠甲状腺激素影响的研究

蛋白质对低碘小鼠甲状腺激素影响的研究张秀丽;熊传龙;孟献亚;蔡生花;唐艳萍;喇翠玲;胡兰盛;曹慧萍;唐喜群【期刊名称】《青海医药杂志》【年(卷),期】2006(36)8【摘要】目的:研究缺碘状态下补充蛋白质对小鼠甲状腺激素的影响。
方法:用碘缺乏病区粮食配制蛋白质含量不同的低碘饲料饲养ICR初断乳小鼠,观察小鼠尿碘及甲状腺激素水平。
结果:蛋白质摄入量相同、严重缺碘组小鼠甲状腺激素明显降低(P<0.05),高蛋白质、低碘组小鼠仅子代T4水平稍有降低,但无统计学意义(P>0.05)。
结论:碘的摄入量对小鼠甲状腺激素起主要作用,但补充足够的蛋白质能有效预防甲肿的发生与发展。
【总页数】3页(P12-14)【关键词】蛋白质;动物实验;碘缺乏病;尿碘;甲状腺激素【作者】张秀丽;熊传龙;孟献亚;蔡生花;唐艳萍;喇翠玲;胡兰盛;曹慧萍;唐喜群【作者单位】青海省地方病预防控制所【正文语种】中文【中图分类】R151.2【相关文献】1.促甲状腺激素、雌二醇、催乳素对不同碘营养水平哺乳期小鼠乳腺细胞钠碘转运体mRNA表达的影响 [J], 刘丽香;王时南;禹雪;申红梅;2.促甲状腺激素、雌二醇、催乳素对不同碘营养水平哺乳期小鼠乳腺细胞钠碘转运体mRNA表达的影响 [J], 刘丽香;王时南;禹雪;申红梅3.高碘对哺乳期甲状腺疾病患者外周血促甲状腺激素受体和蛋白激酶A及钠碘同向转运体mRNA表达的影响 [J], 薛靓;刘丽香;文达;申红梅;孟凡刚;张晓晔4.高碘对哺乳期甲状腺疾病患者外周血促甲状腺激素受体和蛋白激酶A及钠碘同向转运体mRNA表达的影响 [J], 薛靓;刘丽香;文达;申红梅;孟凡刚;张晓晔;5.甲巯咪唑联合地黄总苷对毒性弥漫性甲状腺肿模型小鼠甲状腺激素水平和脱碘酶的影响 [J], 李彬;黄琳;赵建国;阮剑因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
雌激素对去卵巢鼠OPG,RANKL和ApoE的影响

雌激素对去卵巢鼠OPG,RANKL和ApoE的影响贾少杰;贾晓静【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2008(012)002【摘要】目的观察雌激素对去卵巢C57BL/6J小鼠股骨内OPG、RANKL和ApoE的影响方法采用双侧卵巢切除术制备骨质疏松的动物模型,1W后雌激素替代组开始每周腹腔注射苯甲酸雌二醇(EB)2次,假手术对照组和模型组均注射同等量的橄榄油,至第6周末.6W后应用HE染色和原位杂交法观察各组小鼠股骨内OPG、RANKL、ApoE的变化.结果去卵巢组股骨内OPG、RANKL和ApoE表达与对照组相比明显下降,而补充雌激素后OPG、RANKL和ApoE的表达明显上升.结论说明雌激素可通过增加股骨中OPG、RANKL和ApoE的表达,抗骨质疏松.【总页数】3页(P193-195)【作者】贾少杰;贾晓静【作者单位】北华大学附属医院,骨外二科,吉林,吉林,132001;北华大学附属医院,骨外二科,吉林,吉林,132001【正文语种】中文【中图分类】R681【相关文献】1.雌激素对去卵巢ApoE-Ko鼠行为学与组织学的影响 [J], 贾晓静;贾少杰2.雌激素抗骨质疏松的OPG/RANKL和ApoE作用机制的实验研究 [J], 贾少杰;贾晓静3.雌激素对D-半乳糖去卵巢小鼠及其apoE基因敲除鼠认知能力的影响 [J], 贾晓静;赵珩;石广斌;贾少杰;张昱4.雌激素调节大鼠去卵巢后骨髓细胞OPG、RANKL、RANK基因表达 [J], 曾天舒;潘世秀;陈璐璐;夏文芳5.雌激素对去卵巢大鼠骨组织Wnt16、β-catenin 、 OPG 、RANKL表达的影响[J], 魏双双;张治芬;黄哲人;何轶然;吴红艳;刘文华;汤珊珊;黄坚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高碘对小鼠脑发育的及血清游离甲状腺激素水平的影响

高碘对小鼠脑发育的及血清游离甲状腺激素水平的影响
周秀霞;尹桂山
【期刊名称】《河北省科学院学报》
【年(卷),期】1997(014)003
【摘要】为了解高碘对机体脑发育及代谢的影响,本实验用高碘水喂养小鼠复制
出高碘甲状腺肿动物模型。
结果发现,用高碘水喂养小鼠210天后,高碘组小鼠体重减轻,甲状腺重量明显增加,血清FT3及FT4水平均显著高于适碘组。
两组比较脑重、脑DNA、蛋白质含量均无显著差异。
揭示高碘不影脑发展但可使代谢率增加.
【总页数】3页(P46-48)
【作者】周秀霞;尹桂山
【作者单位】河北医科大学生物化学教研室;河北医科大学生物化学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】Q581
【相关文献】
1.大鼠孕期补碘性高碘对仔鼠脑发育的影响 [J], 周明;雷方;张富昌;王振林
2.高碘对脑发育和智力影响的研究进展 [J], 李英华;王彦娜;朱惠民
3.年龄、性别对封闭群小鼠脑内Munc18-1含量及血清甲状腺激素水平的影响 [J], 曹磊;陈贵海
4.高碘对多代仔鼠脑发育和智力影响的实验研究 [J], 李英华;朱惠民;郭影;董少霞;
刘福英;刘勖;张建军
5.高碘对仔鼠脑发育和智力的影响 [J], 李英华;朱惠民;董少霞;张建军
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催乳素对神经母细胞瘤细胞系Neuro2a增殖的调节作用

催乳素对神经母细胞瘤细胞系Neuro2a增殖的调节作用郝咏梅;张皓峰;张松筠;王立群【期刊名称】《脑与神经疾病杂志》【年(卷),期】2008(16)4【摘要】目的:探讨催乳素(Prolactin,PRL)对小鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro2a 细胞增殖的影响.方法:用不同浓度PRL作用于无血清培养的各Neuro2a细胞实验组,通过细胞计数,观察PRL对细胞增殖的影响.采用RT-PCR方法检测PRL受体基因在Neuro2a细胞的表达.结果:与对照组比较,10-7mol/L PRL对Neuro2a细胞的增殖具有明确的时间依赖性调节作用.应用PRL第一天可见Neuro2a细胞数明显增加(P<0.01),第三天时Neuro2a细胞增殖达最大峰值,较对照组增高228%(P<0.001).第四天时实验组与对照组细胞数无明显差异.PRL受体基因在Neuro2a细胞中有明确的表达.结论:PRL能够促进Neuro2a细胞的增殖.提示PRL 可能在神经母细胞瘤的发生和发展中发挥了一定作用.【总页数】3页(P282-284)【作者】郝咏梅;张皓峰;张松筠;王立群【作者单位】050000,石家庄,河北医科大学第二医院内分泌科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院神经外科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院内分泌科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】R730.231+4【相关文献】1.催乳素及生长因子对体外培养的鸡卵泡膜细胞增殖的调节作用 [J], 李莹辉2.环境雌激素双酚AF诱导神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系增殖与侵袭的体外实验[J], 王常丽;贾辉;王涛;梁尔光;王一仁;马宏达;赵庆春;王莉莉;叶棋浓3.环境雌激素双酚AF诱导神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系增殖与侵袭的体外实验[J], 王常丽;贾辉;王涛;梁尔光;王一仁;马宏达;赵庆春;王莉莉;叶棋浓;侯明晓;冯帆;4.IL-6、LPS激活巨噬细胞所得上清液对神经母细胞瘤细胞株Neuro2a增殖、凋亡及突起生长和Sez6基因表达的影响 [J], 徐武凤; 杨静; 郝俊楠; 杨堃; 孙立荣5.IL-6、LPS激活巨噬细胞所得上清液对神经母细胞瘤细胞株Neuro2a增殖、凋亡及突起生长和Sez 6基因表达的影响 [J], 徐武凤;杨静;郝俊楠;杨堃;孙立荣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
雌激素与孕激素联合应用对老龄小鼠乳腺的影响

KK’$!%年第("卷第)期!!&!K收稿日期%’$!%>$(>’!基金项目%国家自然科学基金面上项目#%!()’)&$$作者简介%宋K 暮#!""!*$+女+湖南娄底人+硕士+研究方向为乳腺干细胞毒理学+B >5S R Y %%*’%""’$$1‘‘@345.通信作者%董巧香+B>5S R Y %U‘0U4-T 1!#&@345.文献著录格式%宋暮+高慧+董巧香2雌激素与孕激素联合应用对老龄小鼠乳腺的影响/C 02浙江农业科学+’$!%+("#)$%!!&!>!!&*+!!&)2]F ;!!$@!#!)%9,@R Z Z -@$(’%>"$!)@’$!%$)!(雌激素与孕激素联合应用对老龄小鼠乳腺的影响宋K 暮S !高K 慧c !董巧香S "#温州医科大学S 检验医学院生命科学学院+c 公共卫生与管理学院+浙江温州K&’($&($KK 摘K 要#以!#月龄?()>_L 小鼠为研究对象+研究雌激素与孕激素联合应用对老龄小鼠乳腺的影响+并分析了雌(孕激素联合与乳腺癌发生的关系及相应机制.将实验动物随机分为对照组(短期处理组(长期处理组+应用雌二醇联合孕酮灌胃法构建短期和长期模型+对乳腺的形态(乳腺上皮细胞比例及组织学改变进行研究+并通过分析乳腺中雌激素受基因B a #及增殖相关标志物H R #)的表达进行进一步的验证及机制探索.结果表明+雌(孕激素联合应用长期可增加乳腺导管分支及密度+管腔细胞与基底细胞比例下降+增加乳腺导管良性增生比例+促进非典型性增生形成+且导致B a #及H R #)表达上升+具有统计学意义.本研究结果将为老年乳腺癌的预防和治疗提供依据.关键词#雌激素1孕激素1小鼠1乳腺中图分类号#<%(%1a!!*KKK 文献标志码#D KKK 文章编号#$(’%>"$!)#’$!%$$)>!!&!>$*KK 雌激素及孕激素是雌性动物体内重要的内分泌激素+围绝经期及绝经期女性因体内缺乏雌激素+将导致一系列生理及心理症状+如抑郁潮热(泌尿生殖系统萎缩(骨质疏松等.故而+临床常用补充外源性雌激素来改善上述症状.目前研究对于激素替代疗法增加乳腺癌(子宫内膜癌及卵巢癌等的风险处于争议阶段/!0.相关乳腺癌的统计学资料表示+乳腺癌的发生发展与年龄密切相关+乳腺癌的发病人群主要为($岁以上的老龄女性+衰老能在某些程度上促进乳腺癌的发生和发展/’0.激素替代疗法又名6a L +狭义的6a L 即为雌激素替代疗法+目前常用的雌激素替代疗法包括单用雌激素(雌激素及孕激素序贯应用(雌激素及孕激素连续应用/&0等.因单用雌激素增加了子宫内膜癌的风险/*0+故此疗法仅用于无子宫的老年女性.雌(孕激素序贯疗法模拟正常生理周期+具有激素撤退性子宫出血等特点.而雌(孕激素连续应用因避免了子宫周期性出血而被广泛应用+临床调研表明+该法较其他疗法增加了乳腺癌的发病风险.研究表明+长期联合应用雌(孕激素增大了乳腺癌的发病风险+且服药时间越长+风险越高/(0.与此同时+也有研究表明+激素替代疗法对乳腺癌的发病风险被高估/(0.目前已有许多体内及体外模型研究激素替代疗法对雌性动物乳腺上皮组织及乳腺癌细胞系的影响.雌激素及孕激素能够促进人乳腺组织增殖+其表达相关标志物HR #)及增殖细胞核抗原#8W4Y R V Q W S 7R -T 3Q Y Y -X3Y Q S W S -7R T Q -+O ?=D $增加/#0.切除成年小鼠双侧卵巢构建绝经期动物模型+经雌激素疗法后+其乳腺上皮增殖能力及导管末端芽比例上升/)0.同时+激素替代疗法增加绝经期女性的乳腺上皮密度.应用孕激素增加了小鼠乳腺基底上皮群的比率且激活了aD =H b 及_-7等相关通路.衰老为生物体的增龄性功能下降+有基因组失稳+端粒耗损+干细胞衰竭等特征/%0.研究发现+衰老细胞积累及其释放某些细胞因子和各种蛋白酶+能够为敏感细胞群提供癌变环境.细胞损伤的增龄性累积是衰老的总原因/"0+同时+细胞损伤又为特定细胞发生癌变提供有利条件+并最终导致肿瘤的发生.目前针对激素替代疗法与乳腺癌的研究主要着力于大范围的临床调研统计分析及应用去势的成年雌性小鼠模拟体内低激素水平研究激素替代疗法与乳腺组织学及相关通路+而摘除卵巢构建的绝经期小鼠模型不能完全模拟绝经期衰老及正常的内分泌环境+且切除卵巢会产生一定的创伤应激反应.本!!&’K KK’$!%年第("卷第)期研究利用无动情周期的老龄小鼠+进行激素替代疗法+研究雌激素与孕激素联合应用对小鼠乳腺的影响+以期为激素替代疗法的临床用药及相关乳腺癌风险提供相应的依据及指导.!K材料与方法)2)3材料!@!@!K试验动物?()>_L母本小鼠购自南京医科大学+本实验所用小鼠为母本小鼠在<O d级动物房自然繁殖的子代小鼠.!@!@’K仪器与试剂流式细胞仪+美国e]1石蜡切片机+德国b Q R3S1光学显微镜及解剖显微镜+日本尼康.雌二醇(孕酮粉剂(_N染液(苏木精及伊红染液+美国<R T5S1免疫组化抗体B a#及H R#)+美国<7Q53Q Y Y.)2’3方法!@’@!K分组与处理取!#月龄小鼠+随机分为&组+每组*只.对照组以芝麻油灌胃’个月+短期处理组以雌二醇联合孕酮灌胃!*U后改芝麻油灌胃至’个月+长期处理组以雌二醇联合孕酮灌胃’个月.根据临床用药指南/!$0+雌孕激素联合应用基本疗法为雌二醇$@(h!5T)U i!结合孕酮!$$5T)U i!+根据人与动物药物换算公式及结合相关文献/!!0+本实验所用雌二醇的剂量为!($%T)/T i!+孕酮剂量为!(5T)/T i!.雌二醇和孕酮粉剂按灌胃浓度置于芝麻油中并以超声助溶.!@’@’K乳腺_N染色取小鼠一侧腹股沟处乳腺+置于_N固定液中固定!$P+以)$g(($g酒精及超纯水梯度处理后+置于_N染色液中过夜染色+染色后再以)$g("(g及!$$g酒精梯度脱水+最后置于水杨酸甲酯中进行透化处理.导管分支点为随机选择一段二级导管+测量出长度#S$及计数出其上分支点的数目#-$+-9S的比值即为单位长度二级导管上的分支点数目.!@’@&K乳腺6B染色含有样本的切片经烘片+二甲苯(!$$g酒精( "$g酒精(%$g酒精(超纯水等处理后以苏木精染液染色*$Z+分化后以伊红染色’5R-+再经脱水处理后以中性树脂封片.6B染色后对乳腺导管进行分类统计+并对良性增生的导管比例进行统计分析.!@’@*K乳腺;6?染色含有样本的切片经烘片+二甲苯(!$$g酒精( "$g酒精(%$g酒精(超纯水一系列复水的过程后以柠檬酸钠或B]L D进行抗原修复+再经氧化氢处理+然后以$@&g O e<L进行破膜+洗涤后以!$g 山羊血清进行封闭&$5R-.封闭后的切片去除血清+敷上合适浓度的一抗+*m过夜后取出+合适浓度的含6a O的二抗孵育!P后+去除二抗+洗涤后避光加入]D e染液避光孵育(5R-+切片泛黄即可+再经超纯水(浓度梯度的酒精(二甲苯等进行脱水+最后以中性树脂进行封片.;6?染色结果为导管内阳性细胞与总导管细胞数目之比+记为染色阳性率.阳性细胞为染色为棕色的细胞.!@’@(K统计分析采用E W S8P8S U O W R Z5#软件对数据进行单因素方差分析及/检验+测定结果以平均值t标准差表示+-n$@$(时判定为差异显著.各组间差异显著性用"表示#-n$@$(为"+-n$@$!为""+-n $@$$!为"""$.’K结果与分析’2)3对小鼠乳腺导管分支的影响如图!所示+雌(孕激素长期联合处理后+小鼠乳腺导管密度增加+且乳腺导管三级分支增加+主要表现为单位长度乳腺二级导管上分支点的显著增多.雌孕激素短期处理后+其导管密度及单位长度乳腺二级导管上分支点无显著性改变.’2’3对小鼠乳腺导管增生的影响如图’所示+正常乳腺导管为外层基底上皮(内层管腔上皮细胞的双层结构.良性增生导管表现为导管内细胞增生呈多层结构+核染色质清晰+仍可见管腔.非典型增生表现为导管腔内大量不规则上皮细胞增生+细胞增生互相联结+弥漫成片+充塞管腔+形成实性+且核仁增大+形态不一+排列紊乱.结果表明+雌(孕激素长期联合处理后+乳腺导管良性增生比例增加+并出现非典型增生.雌孕激素联合短期处理后+乳腺导管组织学无显著改变.’2U3对小鼠乳腺上皮细胞的影响如图&所示+雌(孕激素长期联合应用后+小鼠乳腺上皮细胞中B a#阳性细胞核的比例上升+且增殖相关标志物H R#)的表达也上升.雌孕激素短期处理后+B a#及H R#)的表达无显著变化.图!K_N染色结果图’K6B染色结果&K讨论雌激素(孕激素是乳腺导管发育及产生功能性作用的重要内分泌激素+目前对这两者的功能性作用及相互作用机制尚未阐明.雌孕激素替代疗法用于改善围绝经期及绝经期症状而在临床上广泛应用+对于其增加乳腺癌风险的相关性褒贬不一.目前部分研究表明+雌孕激素长期联合应用是乳腺癌发病风险增加的重要因素之一+但也有研究认为高估了激素替代疗法对乳腺癌发病风险增加的可能性.同时+一系列组织学检查及动物体内实验表明+雌(孕激素联合应用使人及小鼠乳腺组织呈高度增殖状态+而细胞过度分裂及增殖也可能在一定程度上增加如]=D损伤及基因编码异常的可能性/!’>!&0.本实验对实验用老龄小鼠进行阴道分泌物涂片染色+其阴道图片所见细胞稀疏或无正常细胞+不符合正常阴道图片染色结果+且实验处理后解剖发现+其卵巢均表现为萎缩状或者形成囊肿+不具备正常卵巢分泌相关激素功能+因而+本实验用小鼠符合围绝经期或绝经期低雌激素及衰老的内环境.研究结果表明+经雌(孕激素长期处理后+乳腺导!!&*K KK’$!%年第("卷第)期图&K;6?染色结果管的密度及分支点增加+表明乳腺处于动态性的增殖状态+且乳腺导管良性增生的比例增加+并出现非典型增生结构+而乳腺导管的非典型性增生是乳腺癌发病风险增加的重要表征之一/!*>!(0+表明雌二醇联合孕酮长期应用可增大乳腺癌的发病风险.H R#)作为细胞增殖的标志物被广泛应用+它作为细胞增殖相关的核抗原+在正常乳腺细胞和未病变的乳腺细胞中也有所表达+但是阳性率低于&g/!#0.研究结果表明+对照组的H R#)阳性率低于&g+表明对照组小鼠乳腺组织具有正常的增殖状态.B a#为雌激素受体成员之一+是雌激素发挥作用的重要枢纽.已有研究表明+雌激素可作用于B a#+通过<7S7(S及E S7S&等旁分泌机制作用于临近细胞+促进周边细胞群大量增殖及干细胞分化等/!)0.免疫组化结果表明+雌(孕激素联合处理后B a#的比例上升+H R#)比例上升+结合_N染色和6B染色结果+我们推测这可能是在雌激素与孕激素的联合作用下+激活了B a#旁分泌系统+促进乳腺导管分支及类腺泡状导管芽形成+使乳腺组织呈增殖状态.本研究采用了具备天然的无动情周期的老龄小鼠+对雌激素与孕激素联合应用对小鼠乳腺的影响做了一系列研究.本研究所用的实验对象很大程度上模拟了围绝经期及绝经期的低雌激素及衰老内环境的特征+填补了目前研究的不足.雌激素与孕激素联合应用短期对乳腺导管各项特征无显著影响+不增加乳腺癌的发病风险+而长期应用在一定程度上促进了乳腺的组织学改变及上皮细胞比例构成改变+同时促进乳腺组织的增殖.参考文献%/!0KG J I+A6F J<+_D=E C+Q7S Y264W54-Q W Q8Y S3Q5Q-7 7PQ W S8.S-U cW Q S Z73S-3Q WZ XW\R\S Y%SZ.Z7Q5S7R3W Q\R Q:S-U5Q7S>S-S Y.Z R Z4V4cZ Q W\S7R4-S YZ7XUR Q Z/C02e W Q S Z7?S-3Q W+’$!)+’*#($%!>!(2/’0Kd D=b+<L a D<<B a>_B;O O bH+b;C C+Q7S Y2e W Q S Z73S-3Q W R-?PR-S/C02b S-3Q7F-34Y4T.+’$!*+!(#)$%’)">’%"2/&0K6D<b D N<A2D3‘XR Z R7R4-4V 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Z5+!"""+%*#!’$%*(("2#下转第!!&)页$*@!@’K繁殖选择水田建立留种田+在元胡开花期选定标记小叶(有花的典型植株+或多次去除无花植株+收获后单独贮藏.V2’3栽培*@’@!K选择田块!合理轮作选择无污染源+空气(土壤(灌溉水清洁的田块种植+田块应排水畅通(土质疏松(有机质含量高.推广应用元胡>稻>席草>稻等耕作制度+实行合理轮作.*@’@’K整地播种播种适期为!$月中旬至!!月上旬.翻耕深度’$h’(35+打碎泥土+平整后作畦+畦宽!@$h !@’5+沟宽$@&5+在畦面按行株距!$35l !$35+种茎芽朝上摆放+盖土’h&35.稻板直播先掘翻稻桩+铺平脚印+畦宽!@$h!@!5+沟宽$@&5+在畦面按!$h!’35l!$35密度摆放种茎+播种施肥后挖沟泥打碎盖土.*@’@&K肥水管理基肥用碳酸氢铵)($/T)P5i’+过磷酸钙&$/T)P5i’+拌匀后撒施翻耕+然后底施钙镁磷肥($/T)P5i’+厩肥!(7)P5i’+播种后清沟盖土.冬季施复合肥)($h"$$/T)P5i’+覆盖有机肥+再次清沟覆土.追肥’月底至&月上旬看苗施用+施复合肥!($h’’(/T)P5i’.春季多雨季节及时清沟排水.V2U3病虫草害防治&月中下旬发现菌核病病团及时铲除+并用石灰撒施病区+同时用($g多菌灵可湿性粉剂#$$倍液全田喷雾.&月中下旬至*月中旬选用乙磷铝(甲霜灵喷雾以防治霜霉病+轮换用药+间隔期)h!$U.及时除草.V2V3采收加工*月底至(月+植株完全枯萎(h)U后选晴天采收.将块茎大小分级(清洗(沥干.用大锅加水煮开+将块茎倒入锅中浸没为度+边煮边搅动+大块茎煮*h(5R-+小块茎煮&h*5R-+时间把握以捞起块茎切开+横切面呈黄色+中无小白点时为宜.经摊晒(回潮(摊晒+收获干品+包装容器应干燥清洁.参考文献%/!0K国家药典委员会2中华人民共和国药典%一部/<02北京%中国医药科技出版社+’$!(2/’0K张新勇+张兴德+刘幸平2醋炙对延胡索中&种生物碱含量的影响/C02南京中医药大学学报+’$$%+’*##$%*!$>*!!2#责任编辑#吴益伟#################################################$ #上接第!!&*页$/)0Ka D D d D LD N+b;<+e B==B L L CN+Q7S Y2B Z7W4T Q-S-U Q Z7W4T Q-8Y XZ8W4T Q Z7R-S37UR W Q37Y.4-7PQ5S55S W.T Y S-U74R-3W Q S Z Q8W4Y R V Q W S7R4-R-S84Z75Q-48S XZ S Y54XZ Q54UQ Y/C02C4XW-S Y4V?Q Y Y XY S W O P.Z R4Y4T.+’$!(+!%)#!$%%!>%"2/%0Kb u O B A F L v=?+e b D<?F N D+O D a L a;]E B b+Q7S Y2L PQ PS Y Y5S W/Z4V S T R-T/C02?Q Y Y+’$!&+!(&##$%!!"*>!’!)2 /"0K6S-S PS-]+_Q R-cQ W Ta D2L PQPS Y Y5S W/Z4V3S-3Q W/C02 ?Q Y Y+’$$$+!$$#!$%()>)$2/!$0K中华医学会妇产科学分会绝经学组2绝经过渡期和绝经后期激素补充治疗临床应用指南#’$$"版$/C02柳州医学+’$!!+*(#&$%#&(>#&%2/!!0K_;L L>B=]B a e GOD+<b D L B a C O+C F6=<F==D+Q7S Y2B V V Q37Z4-c4-Qc.7PQY R T P79US W/3.3Y QS-U3PW4-R37W Q S75Q-7:R7P5Q Y S74-R-S-U94WP4W54-QW Q8Y S3Q5Q-77PQ W S8.R-R-7S37V Q5S Y Q5R3Q/C02C4XW-S Y4V O R-Q S Y a Q Z Q S W3P+’$!’+(&#*$%&)*2/!’0K黄凌曦2激素替代治疗与乳腺癌发病风险的关系/C02中华乳腺病杂志#电子版$+’$!!+(#!$%*(>*)2/!&0K]D;C+C;D=C+e F<b D=]N+Q7S Y2a4Y Q Z4VP4W54-QW Q8Y S3Q5Q-77PQ W S8.S-U R W4-R-8W4Y R V Q W S7R4-4V cW Q S Z7Q8R7PQ Y R S Y3Q Y Y Z:R7P UR V V Q W Q-7Q Z7W4T Q-S-U8W4T Q Z7Q W4-QW Q3Q874WZ7S7XZ/C02e W Q S Z7+’$$%+!)#’$%!)’2/!*0KB N B a G b D+L a;O D L6;D+H;=E?+Q7S Y2B S W Y.U.Z W Q T XY S7R4-4V3Q Y Y S UPQ Z R4-S-U Q07W S3Q Y Y XY S W5S7W R08S7P:S.ZR-cW Q S Z73S-3Q W8W4T W Q Z Z R4-/C02D5Q W R3S-C4XW-S Y4VO S7P4Y4T.+’$$"+!)(#&$%!’"’>!&$’2/!(0K荣玮2定量分析在乳腺非典型增生与乳腺癌鉴别中的应用/C02中国基层医药+’$$&+!$#)$%#%&>#%&2/!#0K6F=B L6E+b F N e D a];<+E;=B<L;B a?+Q7S Y2D Y UQ P.UQ UQ P.UW4T Q-S Z Q S-U Q Z7W4T Q-W Q3Q874W UQ V R-Q S PR Q W S W3P.4V3Q Y Y XY S W UR V V Q W Q-7R S7R4-R-7PQ-4W5S Y PX5S-5S55S W.Q8R7PQ Y R X5/C02e W Q S Z7?S-3Q W a Q Z Q S W3P+’$!*+!##&$%a(’2/!)0KD a B=]LbN+H J O B a_D<<B a?2d4W5S-U V X-37R4-%P4: Q Z7W4T Q-S-U8W4T Q Z7Q W4-Q W Q T XY S7Q7PQ5S55S W.Q8R7PQ Y R S YPR Q W S W3P./C02C4XW-S Y4V N S55S W.E Y S-U e R4Y4T.[=Q48Y S Z R S+’$!(+’$#!9’$%">’(2#责任编辑#万K晶$。
不同碘营养水平对哺乳期大鼠乳腺摄碘能力影响的机制研究的开题报告

不同碘营养水平对哺乳期大鼠乳腺摄碘能力影响的机制研
究的开题报告
一、研究背景和意义
碘是人体必需的微量元素,是甲状腺激素合成的基本原料,对人体生长、发育和代谢有着重要的作用。
碘缺乏会导致甲状腺功能减退和甲减症等疾病。
哺乳期是婴儿生长发育期,乳腺摄碘能力的变化会影响母乳中碘的含量,进而影响新生儿的碘营养状况。
因此,研究不同碘营养水平对哺乳期大鼠乳腺摄碘能力的影响具有重要意义。
二、研究内容和方法
本研究将采用大鼠模型,根据摄入碘量将哺乳期大鼠分为低碘组、正常碘组和高碘组,分别给予不同碘含量的饮水。
在哺乳期结束后,测定各组大鼠乳腺中碘的含量和甲状腺激素的水平,并进行组织学检查。
同时,将使用原代培养的哺乳期大鼠乳腺上皮细胞进行体外实验,研究不同碘营养水平对乳腺上皮细胞甲状腺激素受体(TSHR)表达及对碘的摄取能力的影响。
三、预期结果与意义
预计低碘组乳腺中碘的含量较低,甲状腺激素水平降低,同时乳腺上皮细胞TSHR表达量下降,碘的摄取能力降低;高碘组乳腺中碘的含量较高,甲状腺激素水平升高,同时乳腺上皮细胞TSHR表达量上升,碘的摄取能力增强。
这些结果将有助于深入了解不同碘营养水平对哺乳期大鼠乳腺摄碘能力的影响机制,为人类碘营养状况改善提供科学依据。
碘对小鼠CNSⅡ型脱碘酶活性及mRNA表达的影响的开题报告

碘对小鼠CNSⅡ型脱碘酶活性及mRNA表达的影响的开题报告题目:碘对小鼠CNSⅡ型脱碘酶活性及mRNA表达的影响研究背景和意义:碘是人体必需的微量元素之一,它在人体内参与了甲状腺激素的合成,对人体的发育和代谢起着至关重要的作用。
但是,过量的碘摄入也会对甲状腺和神经系统造成损害,如自身免疫性甲状腺疾病和神经系统发育异常等。
脱碘酶在甲状腺激素合成过程中起着关键作用,可以降解甲状腺激素前体,破坏碘-碘键,从而产生活性甲状腺激素。
因此,研究碘对脱碘酶的影响,有助于探究甲状腺激素合成过程的机制,进一步了解碘的作用和影响。
本研究将针对小鼠CNSⅡ型脱碘酶,探究碘对其活性和mRNA表达的影响,为进一步研究碘在甲状腺激素合成的机制中的作用,提供有益的参考。
研究方法:1.实验动物:选取健康的成年雄性小鼠,随机分为不同的碘摄入组和对照组。
2.实验设计:采用不同浓度的碘溶液,将小鼠分为高碘组、中碘组、低碘组和对照组,并观察其脱碘酶活性的变化。
同时采用RT-PCR技术检测CNSⅡ型脱碘酶的mRNA表达水平,探究碘对其表达的影响。
3.数据处理:统计各组小鼠脱碘酶活性和CNSⅡ型脱碘酶mRNA表达的平均值和标准差,采用SPSS软件进行方差分析和t检验。
预期结果:通过以上实验设计和方法,我们预期可以得到如下结果:1.随着碘摄入剂量的增加,小鼠体内CNSⅡ型脱碘酶活性降低。
2.随着碘摄入剂量的增加,小鼠体内CNSⅡ型脱碘酶mRNA表达水平下降。
3.通过实验结果,可以探究碘在甲状腺激素合成中的作用和影响。
研究意义:本研究的开展,不仅有助于进一步了解碘的作用和影响,也可以为深入探究甲状腺激素合成过程的机制,提供重要的实验数据和理论基础。
研究结果还可以为人类碘营养缺乏和补充提供有益的参考,同时也可以为预防和治疗某些甲状腺疾病提供一定的理论参考和实践指导。
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2)明显高于相应碘水平的单纯碘组(O.016
5±0.00l 6、0.01l 9±0.001 0、0.009 8±0.001 0,P均<0.05)。结
论在重度碘缺乏时TSH对乳腺细胞NIS mRNA表达有上调作用;在不同碘营养水平时E2、PRL对乳腺细胞
NIS
mRNA表达同样有上调作用。 【关键词】 碘; 钠碘转运体; 促甲状腺激素;
for
Iodine
Deficiency
Disorder Control,Centre
for
Endemic Disease
Control,Chinese Centre for Disease
LX。Shen
and Prevention,Harbin Medwd University,Harbin Disease Control,Linyi Center
PRL(100 IXg/L),24 h后收集细胞。采用实时荧光定量PCR法检测各组乳腺细胞NIS mRNA表达。结果单纯 碘(0、5 ixg/L)组乳腺细胞NIS mRNA表达(0.016 5±0.00l 6、0.015 8±0.002 7)明显高于单纯碘(50 IXg/L)组 (0.011 9±0.001
iodine(0.016
0,all
5±0.001 6,0.015 8±O.002
7)were
significantly higher than that of
(o.01
l 9土0.001
P<0.01).Under
6±0.002
the iodine concentration of 0斗g/L,the NIS mRNA
150081,China(Liu
HM).Department of
Infectious
for
Disease
Control and
Prevention,Linyi
276000.China(Wang sNl;
Department
ofImmunization Planning Programs,Harbin Centerfor
mRNA expression.
【Key words】
Iodine;
Sodium/iodide
symporter;,Thyroid stimulating
hormone;Estradiol;Prolactin
Fund program:National Natural Science Foundation of China(81273012)
NIS mRNA expression in mouse lactating mammary gland
ceHs.Methods iodine(0,
Mouse lactating mammary gland ceHs were cultured in vitro and stimulated with different concentrations of 5,50,3 000,10 000斗g/L;50斗g/L was the control medium,iodine plus
雌二醇;
催乳素
基金项目:国家自然科学基金(81273012)
The effects of thyroid-stimulating hormone,estradiol
and
prolactin
on
sodium/iodide symporter mRNA
Liu Lixiong,Wang Shinan,
expression in mouse lactating mammary gland cells under different iodine levels Yu Xue,Shen Hongmei Institute Control
symporter
mRNA expression in
lactating mammary gland cells under different iodine
levels and the effects of thyroid—stimulating hormone
(.rSH),estradiol(E2)and prolaetin(PRL)on
素(TSH)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)对哺乳期小鼠乳腺细胞NIS mRNA表达的影响。方法将体外培养哺乳
期小鼠乳腺细胞分为5组,分别用含0、5、50(对照)、3 000、10 000斗g/L碘水平的培养液(碘酸钾配制)刺激24 h。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
每组细胞在原有碘水平条件下,进行4种方式培养:单纯碘、碘+TSH(10斗g/L)、碘+E2(100斗s/L)、碘+
团移至烧杯内,加入胰蛋白酶,置37℃消化30
min。
加入含5%血清的DMEM/F12液漂洗1次.倒掉洗 液。加入胶原酶液,置37℃消化60 min。用移液管 将消化的乳腺组织轻柔地吹散,尼龙网过滤,移至 离心管中,加PBS液混匀,离心(1
000 r/min,10 min,
半径是10 am),洗涤细胞,重复1次。加含5%血清的 DMEM/F12液混匀,离心(1
5组,分别用含O、5、50(对照)、3
000、10 000¨g/L
(髑H)、雌二醇(E2)、PRL,观察乳腺细胞NIS
表达的变化。 1材料与方法
1.1
mRNA
碘水平的培养液(碘酸钾配制)培养24 h,每组细胞 在原有碘水平条件下,进行4种方式培养:单纯碘、
碘+r11sH(10斗以)、碘+E2(100
group)for
24 h,and the followings were added to the culture iodine plus
TSH(10卜g几),iodine
plus
E2(100斗g删and
PRL(100.eeL).After
cultured for
another 24 h,total RNA was extracted,the expression of NIS mRNA in mouse lactating mammary gland cells were
severe
TSH has up-regulated the NIS mRNA expression in
mammary gland
ceHs under the
condition of
iodine deficiency.At different levels of iodine nutrition,E2 and PRL have stimulated the NIS
Disease Control and Prevention,Harbin 150056,
ChinaOIuXl
Corresponding author:Shen Hongmei,Email:shenhml 19@126.com
【Abstract】
mouse
Objective
The present study investigated the sodium/iodide
0,0.009 8±0.001 0,0.010 6±0.000 7,all
P<0.05).The
expression of NIS mRNA in the
iodine(0,50,3
000
斗g,L)plus
PRL
groups(0.019
0±0.001 2,0.014 7±O.001 3,0.01 l 8±0.001
2)were
higher than that of
iodine
alone group under 0,50,3 000斗g/L iodine 0.all
concentrations(0.016
5±0.001 6,0.01 1 9±O.001 0,0.009 8±0.001
P<0.05).Conclusions
钠碘转运体(NIS)是一种跨膜糖蛋白,具有主 动运输碘的功能.在甲状腺及甲状腺外组织中均有 表达[1-2]。哺乳期乳腺细胞表达的NIS是母体将碘转 运到乳汁的途径。其表达和功能受到细胞因子、雌 激素、孕激素等各种因素的调节[¨]。在这些调节因 素的共同作用下.母体可以向新生儿稳定供碘.保 证其正常的生长发育。目前,多数研究都集中在机 体碘水平适宜的状态下,雌激素、催产素、催乳素 (PRL)都可以有效地诱导乳腺NIS mRNA表达增加, 从而达到利用放射线碘治疗乳腺癌的目的㈨]。而机 体在低碘、高碘状态下。雌激素和PRL对哺乳期乳 腺细胞摄碘能力的影响尚少见报道。因此,作者采 用体外试验的方法.在不同碘营养水平时对哺乳期 小鼠乳腺细胞施加一定生理剂量的促甲状腺激素
生堡丝友痘堂苤查2Q!鱼生!!旦2Q旦笠3』鲞墓!!塑£h地』星!d!迦!!,盟业!世塑2Q:2Q!垒,y尘:35,盟Q:!!
・781・
・论著・
促甲状腺激素、雌二醇、催乳素对不同碘营养 水平哺乳期小鼠乳腺细胞钠碘转运体 mRNA表达的影响
刘丽香
王时南
禹雪
申红梅
15008l哈尔滨,哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心碘缺乏病防治研究所 (刘丽香、申红梅);276000临沂,山东省临沂市疾病预防控制中心传染病防制科(王时南);
expression level in the
iodine plus
TSH
group(0.021
4)was
significantly higher than that of the ceHs with
iodine alone(0.016 5±0.001 6'P<0.01).The NIS mRNA expression in the iodine(0,5,50,3 000,10 000斗s/L)plus