高效液相色谱法分析人血清中硫唑嘌呤和巯嘌呤的浓度
反相高效液相色谱法测定硫唑嘌呤及其中间体的含量
反相高效液相色谱法测定硫唑嘌呤及其中间体的含量
潘富友
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】1998(026)005
【摘要】在Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱上，研究了硫唑嘌呤及其中间体（６－巯基嘌呤、１－甲基－４－硝基－５－氯咪唑）的反相高效液相色谱分检测的最适宜条件，
【总页数】3页(P528-530)
【作者】潘富友
【作者单位】台州师范专科学校化学系
【正文语种】中文
【中图分类】TQ463.53
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法测定农药中间体功夫酸的含量 [J], 冒玉娟;陈琴
2.反相高效液相色谱法测定农药中间体苯唑醇含量 [J], 张舜祥
3.反相高效液相色谱法测定烟碱中间体制品的含量 [J], 彭秀英;芦冬涛;牛学丽;张丽娜
4.反相高效液相色谱法测定农药中间体苯唑醇含量 [J],
5.反相高效液相色谱法结合计时波长切换紫外检测法测定苯妥英及其中间体的含量[J], 朱爱龄; 倪貌貌; 宋亚萍; 谭志文; 俞超; 汪财生; 张凯龙
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高效液相色谱法测定人血清中异环磷酰胺的血药浓度
高效液相色谱法测定人血清中异环磷酰胺的血药浓度王巨存;冯亦颖;朱铁梁【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2002(014)004【摘要】目的:建立人血清中异环磷酰胺的HPLC测定法.方法:取血清1.0 ml,以环磷酰胺为内标,用氯仿提取,在60 ℃水浴条件下氮气挥干,残渣用100 μl流动相复溶,进样25 μl.在Hypersil-C4色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-水( 35∶65,v/v) 为流动相,流速为1.0 ml/min;检测波长200 nm.结果:本方法在10～200 μg/ml 范围内线性良好,相关系数r=0.999 4 ( n=5).检测限为5 μg/ml .高、中、低三种浓度的绝对和相对回收率分别为 84.32%～88.14% , 95.00%～98.10%,日内和日间RSD分别为0.74%～2.21%, 1.60%～2.40%.结论: 本方法灵敏、特异、简便,可用于临床异环磷酰胺血药浓度检测.【总页数】3页(P58-60)【作者】王巨存;冯亦颖;朱铁梁【作者单位】天津市天津医院,天津,300211;天津市南开医院,天津,300100;武警医学院附属医院,天津,300162【正文语种】中文【中图分类】R927.1【相关文献】1.高效液相色谱法测定人血清中地西泮血药浓度及临床监测 [J], 曹银;梁俊;夏清荣;单锋;柳杨;王金亮;戴彪2.反相高效液相色谱法测定人血清中艾司唑仑血药浓度 [J], 周莉红;胡艳;余汉华3.高效液相色谱法测定人血清中异环磷酰胺浓度 [J], 邢俊家;张伟;周晖4.高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪血药浓度的方法及拉莫三嗪个体化用药分析 [J], 李萌; 庄星星; 倪受东; 何勇5.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用 [J], 王石健;夏修远因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定人血清中5-氟尿嘧啶的浓度
高效液相色谱法测定人血清中5-氟尿嘧啶的浓度姚水宝;杨水新【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2001(012)004【摘要】目的：测定5-氟尿嘧啶在人血清中的浓度。
方法：三氯乙酸沉淀血清中蛋白质，高效液相色谱法测定含量。
色谱柱为Shimpack CLCC18柱，加YWG预柱；流动相为0.25％磷酸二氢钾-乙腈(98：2)，pH7.0；流速为1ml/min；紫外检测波长265nm。
分别在低浓度范围(0.195～6.250μg/ml)和高浓度范围(6.250～200.00μg/ml)制作标准曲线以用于定量。
结果：5-氟尿嘧啶在0.195～200μg/ml浓度范围呈良好的线性关系，0.8、4、20和100μg/ml 4个浓度点的日内平均回收率和RSD分别为104.88％、1.95％，104.58％、1.38％，101.40％、0.39％，99.14％、0.37％；日间平均回收率和RSD分别为105.12％、2.02％，106.30％、0.78％，100.60％、0.65％，99.38％、0.92％。
结论：本文建立的方法快速、准确，适合于5-氟尿嘧啶的药代动力学研究和常规血药浓度监测。
%OBJECTIVE: To determine the content of 5-Fu in humanserum.METHODS: Serum protein was precipitated with trichloroaceticacid .HPLC was used for determination of 5-Fu .The column was Shimpack CLC C18(150 × 6mm, 5μm)with YWG for protection.The mobile phase was 0.25% KH2PO4-acetonitrile(98: 2, pH7.0) .The flow rate was 1ml/min.The detection wavelength was 265nm.Two standard curves were made in the concentrations of 0.195～6.250μg/ ml and 6.25～200.00μg/ml, respectively.RESULTS: The calibration curves revealed linearity in the rangeof 0.195～200μg/ml.The with-in-day recoveries and RSDs of 5-Fu at 0.8, 4, 20 and 100μg/ ml concentration points were 104. 88%, 1.95%;104.58%,1.38%; 101.40%, 0.39%and 99.14%, 0.37%, and the between-day recoveries and RSDs of 5-Fu were 105.12%, 2.02%;106.30 %, 0.78 %; 100.60 %, 0.65 % and 99.38 %, 0.92 % respectively. CONCLUSION: This method is rapid, accurate and suitable for pharmacokinetical study and conventional monitoring of 5-Fu.【总页数】2页(P227-228)【作者】姚水宝;杨水新【作者单位】浙江省湖州市中心医院,;浙江省湖州市中心医院,【正文语种】中文【中图分类】R979.1+2【相关文献】1.HPLC法测定人血清中5-氟尿嘧啶浓度 [J], 陈碧2.高效液相色谱法测定人体5-氟尿嘧啶血药浓度 [J], 邓斌;任斌;黎曙霞;唐蕾;彭惠霞;洪晓丹3.高效液相色谱法测定人血清中5-氟尿嘧啶浓度 [J], 王冬梅;谢景文4.高效液相色谱法同时测定人血清中5-氟尿嘧啶及其代谢物5-脱氧尿苷 [J], 刘会臣;朱光文;肖大伟5.反相高效液相色谱法测定兔血清中5-氟尿嘧啶的浓度 [J], 张选红;吴珏珩;汤丽芬;林广云;陈红英;许志威;陆立鹤;吴伟康因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定人血中羟氯喹浓度方法学优化及应用性分析
高效液相色谱法测定人血中羟氯喹浓度方法学优化及应用性分析刘思鲁;胡蕾;刘博宇;陶依然;赵海艳;孙博洋;黄琳;封宇飞【期刊名称】《中国医药导刊》【年(卷),期】2022(24)1【摘要】目的:建立一种新的高效液相色谱法测定人全血中羟氯喹的浓度,并对方法进行优化。
方法:取300μL全血样本,加入25μg·mL^(-1)甲硝唑溶液10μL作为内标,用900μL乙酸乙酯进行液液萃取,氮气吹干后用流动相200μL复溶,取20μL上清液进样。
使用Symmetry C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以20 mmol·L^(-1)磷酸二氢钾-乙腈(85∶15,v/v,磷酸调pH=3.0)为流动相,流速:0.8 mL·min^(-1),柱温:35℃,检测波长:254 nm。
考察该方法的特异性、标准曲线、精密度、准确度、稳定性和提取回收率。
结果:羟氯喹在100~5000 ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,标准曲线方程为f=0.03×10^(-1)C-0.12×10^(-1)(r=0.9996);日内、日间精密度RSD均小于4.0%,准确度高于85%,全血样品提取回收率为(78.08±5.32)%(n=5)。
结论:本方法灵敏度高、选择性高、操作简洁、检测时间短、结果准确可靠,能够满足检测人血中羟氯喹浓度的需求,经优化后缩短了检测时间,提升了检测效率,适合于临床诊疗监测及药效学研究。
【总页数】5页(P76-80)【作者】刘思鲁;胡蕾;刘博宇;陶依然;赵海艳;孙博洋;黄琳;封宇飞【作者单位】北京大学人民医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定人血中血小板活化因子方法学的研究及其临床意义2.高效液相色谱法测定人血浆中头孢羟氨苄的浓度3.高效液相色谱法测定人体血中氯喹含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定人血浆中5_Fu浓度
administration［J］． J Ethnopharmacol，2013，150（1） ：175 － 180． ［3］ Zaugg J，Eickmeier E，Ｒueda DC，et al． HPLC － based activity pro-
2． 5 空白血浆处理方法 沉淀蛋白：取血浆样品 0． 50 mL，置 10 mL 具塞试管中，加水 0． 20 mL，涡旋 混匀，加入硫酸铵 0． 2 g，密塞，涡旋混匀。提取：加 入乙酸乙酯 4 mL，密塞，涡旋 5 min，离心（ 3 000 r ·min － 1 ） 10 min，分取上清液，置氮吹仪下吹干；在 上述残 留 血 浆 中，再 加 入 乙 酸 乙 酯 4 mL，涡 旋 5 min，离心（3 000 r·min － 1 ）10 min，分取上清液，并 入上述离心管中； 浓缩：再将离心管置氮吹仪下吹 干，向离心管中加入乙酸乙酯 1 mL，密封膜封口，涡 旋 3 min，洗涤上部管壁，去掉封口膜，再将离心管 置氮吹仪下吹干；重组：向离心管中精密加入流动 相 100 μL，密封膜封口，涡旋 5 min，超声 10 min，溶 液经 0． 22 μm 微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶 液。取供试品溶液 20 μL 注入液相色谱仪，记录色 谱图。 2． 6 血浆样品处理方法 取血浆样品 0． 50 mL，置 10 mL 具塞试管中，加入水 0． 10 mL，内标物 5-Bru 溶液（ 约 50 mg·L － 1 ） 100 μL，涡旋混匀，加入硫酸 铵 0． 2 g，密塞，涡旋混匀。其他同 2． 5 提取、浓缩及 重组项下依法操作。 2． 7 专属性考察 取空白血浆 0． 50 mL 按“2． 5” 项下操作，取滤液 20 μL 注入液相色谱仪，得空白血 浆色谱图，判断空白血浆色谱图干扰情况；取 5-Fu 对照品和 5-Bru 内标液混合，取 20 μL 注入色谱仪， 得 5-Fu 对照品 + 5-Bru 内标液色谱图；将空白血浆 和 5-Fu 对照品及 5-Bru 内标液混合，按“2． 6［将加 入水 100 μL 改为加 5-Fu 对照溶液（2 mg·L － 1 ）100 μL］”项下方法操作，取滤液 20 μL 注入液相色谱 仪，得空白血浆 + 5-Fu 对照品 + 5-Bru 内标液色谱 图。高效液相色谱图见图 1。 2． 8 线性关系考察 分别精密量取氟尿嘧啶对照 品溶液 5、10、20、30、40、50、60 μL，分别置 10 mL 具 塞试管中，各精密加入溴尿嘧啶内标溶液 30 μL，再 分别精密加水使成 100 μL（65、60、50、40、30、20、10 μL），各管中再分别精密加入空白血浆 0． 50 mL，涡 旋混匀，静置 10 min，再分别加硫酸铵 0． 2 g，密塞， 涡旋混匀。将上述内容列表，见表 1。 2． 9 精 密 度 与 准 确 度 试 验 配 制 低、中、高 （0． 021、0． 124、0． 206 mg·L － 1 ） 三种含 5-Fu 浓度不 同的血浆样，每种浓度 6 份，按“2． 5 ”项下方法处 理，与同日内和连续 5 日分别处理测定。将测得的 5-Fu 峰高 /5-Bru 峰高的比值代入当日的标准曲线， 得相应浓度，计算 ＲSD；将计算浓度与理论浓度相 比，求得方法回收率，详见表 2。 2． 10 样品稳定性试验 （1） 室温保存：在室温（25
高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶的活性
高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶的活性吴珏珩;黄民;张建萍;吴燕飞;汤丽芬;张选红【期刊名称】《中国卫生检验杂志》【年(卷),期】2005(15)8【摘要】目的:建立一种改良的高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶(thiopurinemethyltransferase,TPMT)的活性。
方法:采用反相高效液相色谱法直接测定酶促反应的产物6-甲基巯基嘌呤的浓度,从而计算红细胞中TPMT的活性。
以6-巯基嘌呤为底物,S-腺苷-L-甲硫氨酸作为甲基供体,红细胞裂解液在一定的条件下进行孵化,然后经乙酸乙酯萃取处理后,用HPLC分析。
色谱柱为hypersilBDSC18,流动相为水-甲醇-三乙胺(磷酸调至pH3.5)(76.8∶23∶0.2),紫外检测波长为290nm。
结果:6-甲基巯基嘌呤在10～200μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9994,最低检测限为3μg/L(S/N=3),平均回收率为86%～94%。
我们运用该法测定了273例健康中国成年人红细胞中TPMT的活性,其平均活性为(11.96±3.27)nmol/h·mlPackedRBC,男性和女性的平均TPMT活性分别为(12.08±3.38)nmol/h·mlPackedRBC和(11.73±3.07)nmol/h·mlPackedRBC,两者无显著性差异。
结论:本分析方法具有灵敏准确,重复性好,安全可靠,易于推广等特点,能满足巯基嘌呤类药物药代动力学研究和临床用药监测的要求。
【总页数】4页(P897-899)【关键词】反相高效液相色谱法;巯基嘌呤甲基转移酶;6-巯基嘌呤;6-甲基巯基嘌呤;红细胞裂解液【作者】吴珏珩;黄民;张建萍;吴燕飞;汤丽芬;张选红【作者单位】中山大学基础医学院分析测试中心;中山大学药学院临床药理教研室;广东省佛山市中心血站【正文语种】中文【中图分类】O657.72【相关文献】1.高效液相色谱法测定小儿急性淋巴细胞白血病红细胞中硫嘌呤甲基转移酶活性的研究 [J], 邹亚伟;王昭霞;牟德海;喻凌寒;关镜明;卫凤桂;陈福雄;叶铁真;吴梓梁2.高效液相色谱法测定人体红细胞中儿茶酚氧位甲基转移酶的活性 [J], 闫小华;邓小敏;吴怀安3.HPLC法测定人血红细胞巯基嘌呤甲基转移酶的活性 [J], 毛晨梅;吕文莉;万舒欣;薛丰;平其能因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超高效液相色谱-串联质谱法测定6-巯基嘌呤血浆药物浓度方法的建立与评价
超高效液相色谱-串联质谱法测定6-巯基嘌呤血浆药物浓度方法的建立与评价苗强;邹远高;白杨娟;唐江涛;刘婕;王兰兰【期刊名称】《成都医学院学报》【年(卷),期】2018(013)002【摘要】目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测人血浆中6-巯基嘌呤(6-MP)的浓度,为临床制定个体化给药方案提供基础.方法使用 Waters公司超高效液相色谱(I-Class)-质谱(TQ-S)联用仪,以Waters ACQUITY BEH HILIC (2.1 mm×50 mm,1.7μm)为色谱柱,pH 3.0,0.02 mol/L 醋酸铵缓冲液(含0.3%HCOOH)-乙腈(20:80)为流动相,流速0.4 mL/min,以6-硫鸟嘌呤(6-TG)为内标,乙腈沉淀蛋白,取4 μL上清液进样分析.采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 153.03→119.1(6-MP)和m/z 168.06→134.13(6-TG).结果 6-MP 血浆浓度在0.5~2000 ng/mL 内线性关系良好(r=0.9989),定量下限为0.125 ng/mL.日内、日间 RSD<6%,方法回收率89%~104%(RSD<6%),提取回收率>95 %(RSD<8%).血浆中6-MP 在室温避光保存6 h,冻融3次和-20 ℃保存15 d 的 RSD 分别为<4.66%、4.74%和5.11%.结论该方法操作简单、快速、灵敏度高、稳定性强,适用于血浆中6-MP 药物浓度监测.%Objective To establish a high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS)method to determine the concentration of 6-mercaptopurine (6-MP)in human plasma and provide a basis for clinical individualized dosage regimen.Methods The protein was precipitated with acetonitrile and 4μl of supernatant was taken for analysisby using Waters Ultra-High Performance Liquid Chromatography(I-Class)-Mass Spectrometer(TQ-S), Waters ACQUITY BEH HILIC(2.1×50mm,1.7μm)as a column,pH 3.0,0.02mol/L ammonium acetate buffer (containing 0.3%HCOOH)-acetonitrile(20:80)as the mobile phase with the flow rate of 0.4ml/min,and 6-Thioguanine (6-TG)as the internal standard.The electrospray ion source is used for positive ion scanning by multi reaction monitoring, and the ion pairs used for quantitative analysis were m/z 153.03→119.1 and m/z 168.06→134.13 respectively.Results The 6-MP concentration in plasma had a good linear relationship between 0.5 and 2000 ng/mL(r=0.9989)and the lower limit of quantification was 0.125 ng/ml.The levels of inter-day and intra-day RSD were all lower than 6%,the method recovery rate was 89%~104% (RSD<6%),and the extraction recovery was over 95% (RSD<8%).The RSD levels were less than 4.66% after 6-MP in plasma was preserved at room temperature from light for 6 hours,less than 4.74% after 6-MP in plasma was freeze-thawed three times,and less than 5.11% after 6-MP in plasma was preserved at-20℃ for 15 days. Conclusion The method was simple,rapid,sensitive and stable,so it was suitable for the concentration monitoring of 6-MP in plasma.【总页数】5页(P119-123)【作者】苗强;邹远高;白杨娟;唐江涛;刘婕;王兰兰【作者单位】四川大学华西医院实验医学科成都610041;四川大学华西医院实验医学科成都610041;四川大学华西医院实验医学科成都610041;四川大学华西医院实验医学科成都610041;四川大学华西医院实验医学科成都610041;四川大学华西医院实验医学科成都610041【正文语种】中文【中图分类】R969.1【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定硫唑嘌呤代谢产物6-巯基嘌呤血浆药物浓度 [J], 朱妍妍;柏智能;唐丽琴2.高效液相色谱串联质谱法测定豆芽中4-氯苯氧乙酸、6-苄基腺嘌呤残留量的不确定度评定 [J], 唐韵熙3.双嘧达莫对胰腺癌细胞内抗肿瘤药物6-巯基嘌呤浓度的影响及6-巯基嘌呤的荧光分光光度法测定 [J], 郑洪;鞠火晃先;朱广华4.6-巯基嘌呤-H_2O_2-Cu^(2+)-NaOH体系荧光分光光度法测定6-巯基嘌呤的研究 [J], 卢琴;赵成安;刘春;徐洪伟;王伦;周运友5.EMR固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定虾肉中性激素残留的方法建立[J], 辛丽娜;莫东淑;蒋定之;曾坚;梁飞燕;蒙初曦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定人血浆中喹硫平浓度
高效液相色谱法测定人血浆中喹硫平浓度赵敖;陈清霞;朱军;刘伟忠【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2010(022)002【摘要】目的建立测定人血浆中喹硫平浓度的高效液相色谱法.方法以DiamonsilTMC18反相柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.03mol·L-1醋酸铵-甲醇(21:79);流速:0.8 mL·min-1;柱温:40℃;检测波长:254nm.以乙酸乙酯与二氯甲烷(80:20)为提取剂.结果喹硫平的高、中、低(1000.0,400.0,10.0 ng·mL-1)3种浓度平均回收率分别为97.78%,98.63%,102.62%,日内、日间差RSD均低于7%(n=5);分析方法的检测限为5.0ng·mL-1;线性范围为10.0-1000.0 ng·mL-1.曲线方程:Y=103.57X+2.06,r=0.9997(n=10).结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.【总页数】3页(P168-170)【作者】赵敖;陈清霞;朱军;刘伟忠【作者单位】广东顺德伍仲佩纪念医院检验科,广东,528333;中山大学附属第二医院药学部,广州,510120;中山大学附属第二医院药学部,广州,510120;广州市脑科医院国家药品临床研究基地,广州,510370【正文语种】中文【中图分类】R927.1【相关文献】1.高效液相色谱法同时测定人血浆中氟西汀和喹硫平浓度 [J], 张岳春;凌卫明;仇雅雯2.高效液相色谱法同时测定人血浆中富马酸喹硫平与度洛西汀浓度 [J], 石红梅;陈清霞;王丽霞;黄伟侨;刘伟忠3.反相高效液相色谱法测定人血中富马酸喹硫平浓度及其在临床药学中的应用 [J], 张巧真;宋伟明;吴柳松4.反相高效液相色谱法测定人血浆中富马酸喹硫平浓度 [J], 马武翔;黄立萍5.UFLC法测定人血浆中喹硫平及氯氮平的浓度 [J], 颜学方;杨春花;杨东琼因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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∆ ε αρτ εντ οφ Χλινιχαλ Πηαρ αχολογ ψ Ξ ινθιαο Η οσ ιταλ Τ ηιρδ Μ ιλιταρψ Μ εδ ιχαλ Υ νιϖερσιτψ Χηονγ θινγ
Α βστραχτ
Ε ξ α ινατιον ∆ ε αρτ εντ Τ ηιρδ Μ ιλιταρψ Μ εδ ιχαλ Υ νιϖερσιτψ Χηονγ θινγ
∗ 汤建林 周世文 翁鹭娜等 药学学报
∗ ∗
袁 成 孙成春 曹晓芝等 中国医院药学杂志
∗
期
汤建林等 高效液相色谱法分析人血清中硫唑嘌呤和巯嘌呤的浓度
∆ ετερ ινατιον οφ Αζατηιο υρινε ανδ -Μ ερχα το υρινε ιν Σερυ βψ Ρ εϖερσεδ -Πηασε Η ιγ η Περφορ ανχε Λιθυιδ Χηρο ατογ ρα ηψ
第 卷第 期 年月
色
谱
高效液相色谱法分析人血清中硫唑嘌呤和巯嘌呤的浓度Ξ
汤建林 周世文 黄林清 黄永平
张惠静
第三军医大学新桥医院临床药理基地 重庆
第三军医大学检验系分析化学教研室 重庆
提 要 建立了用
同时测定人血清中硫唑嘌呤
和 巯基嘌呤 浓度的方法∀ 血清样品经乙
腈除蛋白后在常压和 ε 下用氮气吹干 残余物用 Λ 洗脱液溶解 离心后上清液直接进样∀ 以
的特点 是一种良好的临床治疗药物质量浓度监测
方法∀
实验部分
仪器和试药
高效液相色谱仪
≅
不锈钢柱 大连依利特公司
标
准对照品
标准对照品
甲硝
唑
为 级 乙腈 磷酸二氢
钾为 级 水为重蒸水 乙腈和水经 Λ 微孔
滤膜过滤脱气∀
标准溶液配制
储备液 精确称取
对照品
置于
烧杯中 用
Ù
溶解并定容于
量瓶中 质量浓度为
∀ ΛÙ和
∗
Λ Ù∀
结果
回收率试验
取正常人血清
加入 种不同量
和 标准液及 Λ
按 节步骤制备不
同浓度的溶液 各测定 次 结果见表 ∀
精密度试验
取
和 标准液各一份 质量浓度均为
Λ Ù 加入内标后 分别于一天内测定 次
干扰试验
临床上常与
合并应用的药物有环孢素
强的松 甲基强的松龙和维生素 等 分别取它们的
固定相 采用梯度洗脱 从 ς 乙腈 Β ς
Ù 磷酸二氢钾 Β 经
时变为 Β
后
再变为 Β 检测波长开始为
后为
甲硝唑
为内标∀ 和 平均回收率
分别为
和
最低检出质量浓度均为 Λ Ù ∀ 所建方法简便 灵敏 准确∀
关键词 高效液相色谱法 硫唑嘌呤 巯嘌呤 血药浓度
分类号
Ù
前言
硫唑嘌呤
作为免疫抑制剂
重要意义∀ 目前 国内外对体液中
和 质
量浓度分别检测的方法较多 ∗ 但要同时检测却
由于二者性质上的较大差异而存在一定的难度∀ 国
外
等人 采用 Ν 乙基顺丁烯二酰亚胺衍
生 使其与
一同被乙酸乙脂提取后在
处检测 虽可同时检测
和 灵敏
度也较高 但每次洗脱需
以上和前处理需
的衍生过程∀ 国内袁成等人 采用三氯醋酸沉淀蛋
固定相 脱 ς 乙腈 Β ς
Λ 流动相 梯度洗
Ù
Β开
始
时为 Β
时为 Β 至
Ξ 本文收稿日期
修回日期
色
谱
卷
流速
Ù 检测波长开始为
后为
柱温 ∗ ε ∀
样品处理
取服药者上肢静脉血
离心 取血清
置于
离心试管中∀加
Λ 和乙腈
Λ 混旋
离心
Ù
将上
清液移至另一离心试管中∀ 对残余物再加乙腈
Λ 混旋离心 合并上清液 常压和 ε 下用氮气吹
干∀ 残渣加 Λ 的 ς 乙腈 Β ς
Ù磷
酸二 氢 钾
Β 混旋
离心
Ù
∀用上清液直接进样 进样量 Λ 色谱
图见图 ∀
以确定日内重复性 另一份于冰箱中 ε 下保存 每
日测定一次 连续测定 天 以确定日间重复性∀ 实
验结果显示 和
和 日 内 Ρ Σ∆ 分 别 为 日 间 Ρ Σ∆ 分 别 为 和
Ù 冰箱浓度的
标准溶液∀
储备液 精确称取 对照品
置
于
烧杯中 用
Ù
溶解并定容
于
量瓶中 质量浓度为
Ù 冰箱中
ε 下保存∀测定时以此为母液配制各种质量浓度的
标准溶液∀
内标液 精确称取
置于
烧杯中 用重蒸水溶解并定容于
量瓶中 质
量浓度为
Ù∀
色谱条件
白 上清液直接进样 在
处同时检测 虽前处
理过程简单 洗脱时间短 但
和 的检测
灵敏度分别仅为 Λ Ù 和 Λ Ù ∀本文采用乙
腈除蛋白梯度洗脱 使样品和内标在
内有效
的分离 且不存在干扰∀ 同时 由于采用变波长 使
和 均在最大吸收波长处测定 提高了分
析的灵敏度 从而使本法具有简便 快速 灵敏 准确
Ù Κ εψ ωορδσ
ε
Λ
Λ
对照品加入正常人血清中 按 节方法处理后进
样 它们的 τ 值分别为
和
均不干扰
和 的测定∀
最低检出质量浓度
按 倍信噪比计算
和 最低检出质
量浓度均为 Λ Ù ∀
参考文献
徐叔云主编 临床药理学 北京 人民卫生出版社 ∗
安登魁主编 药物分析 济南 济南出版社
Ρ Σ∆
Ρ Σ∆
图 色谱图
Φιγ Χηρο ατογ ρα σ
混合标准溶液 空白血清中加
入
∀
标准曲线的制作
取健康人血清
分别加入
和
标准液
Ù
Λ及
Λ 按 节操作∀ 以
和
与内标峰面积比 Ρ 对其浓度 Χ 和 Χ 回归 得标准
曲线方程分别为 Χ
Ρ
ρ
Χ
Ρ
ρ
和 的线性范围分别为 ∗
其中
的质量浓度从第 天开始逐渐下
降 至第 天共下降了 ∀
表 ΑΖΠ 和 -Μ Π 回收率和精密度实验结果 Ταβλε Πρεχισιονσ ανδ ρεχοϖεριεσ οφ ΑΖ Π ανδ -Μ Π ιν ηυ αν σερυ βψ Η ΠΛΧ ροχεδυρε Ξ Σ∆ ν
ΛÙ
ΛÙ
Ρ Σ∆
广泛用于器官移植 组织存活和自身免疫性疾病的
治 疗∀
的免疫抑制机理目前虽然还未完全清
楚但
在体内降解为 巯基嘌呤
而起作用 ∀
毒副作用的个体差
异较大 若血液浓度过低而降低其抗免疫和抗炎作
用 则治疗剂量通常为 ∗
Ù
∀ 所以
建立同时快速准确检测
和 血药浓度 对
于了解
在体内的代谢 指导临床合理用药具有