血液显微镜复检规则建立与验证程序文件
血液分析仪复检规则
血液分析仪检测结果复检规则
编
号
参数
复检条件次序：①→②→③
采取措施次序：①→②→③
1
新生儿
①首次标本
①涂片复查
2
WBC RBC HGB
PLT Ret
①超出仪器线性范围
①稀释标本上机再测
3
WBC PLT
①低于检验室确认的仪器线性范围
①按标准操作规程进行复核
4
WBC RBC
HGB PLT
①仪器无法检测结果
①检查标本有无凝块
②再上机测试
③仍异常，换替代计数方法
5
WBC(×10′9/L)
1小于<4.0或>30.0
2首次检测
3测定差值超出预设值
43d内
①涂片复查
6
PLT(×10′9/L)
1小于<100或>1000
2首次检测
3与前次比，PLT测定值超出限值
①涂片复查
7
HGB（g/L）
①<70g/L或>年龄性别参考值上限20g/L
②首次检测
①涂片复查
8
MCV(fl)
1小于75fl或>105fl
2首次检测和<24h标本
1涂片复查大红细胞相关变化
2如未发现变化，取新鲜血再检查
9
MCHC
①<300
②MCV正常或增高
①检查有无脂血、溶血、红细胞凝集、球形红细胞
10
RDW-CV(%)
①>22
②首次检测
①涂片复查
临床应用血细胞分析仪样本性状筛查、显微镜涂片复检规则和问题、重复和复查及图像法设备的辅助复等复检要点
临床应用血细胞分析仪样本性状筛查、显微镜涂片复检规则和解决问题、重复和复查及图像法设备的辅助复等复检要点血细胞分析仪具有快速、准确和便捷等优势，血细胞分析仪各种新技术使用，使其检测性能越来越强大，检测参数也越来越多，特别是具有白细胞五分类技术的仪器的普及应用及全自动流水线化的血细胞分析系统的使用，使得实验室越来越依赖这样的设备来完成大量的血常规检验工作。
在应用各种血液细胞自动化分析设备时，复查和复检很重要。
重视样本性状的筛查进行血细胞分析复检时，首先应该关注标本的性状非常重要。
明显影响检测结果的问题包括：标本采集量是否符合要求，血液标本凝集或有凝块，乳糜血或脂血，冷凝集现象或冷球蛋白，溶血，高白细胞血症，高胆红素血症等。
1、标本采集量：如果使用真空采血管，采用真空采血模式，一般不会出血采集量差异太大的情况。
但遇到抽血困难，或许有采集量不足问题，此时应与临床沟通，确认检验结果是否受到影响，如果没有受到影响，采用让步检验模式发放报告，并备注说明采集量问题。
如果用注射器采集后注入采血管内，会发生采集量不准，过少或者过多。
过多时可能造成抗凝剂与血液比例不适，导致抗凝不充分，从而影响血小板及其他指标的检测结果，应做不合格标本处理。
2、凝血标本：通过肉眼观察可以发现标本已经凝血；摇动试管可以发现试管内有大小不同的凝块；打开试管帽可见管帽内存有凝块；用长竹签或施工搅动标本或吸取，用于发现肉眼没有发现的凝块或纤维蛋白凝丝。
此类标本可判定为不合格，应予拒收退回。
3、乳糜血或脂血：通过自然沉淀或离心沉淀，可发现乳糜血，乳糜血会导致光学法检测的HGB测定结果不正确，进而影响MCH，MCHC 计算结果，此时需采用离心置换血浆的模式排除干扰后再行测定HGB，或者采用光学法原理的仪器或功能测定HGB结果，并重新评估和计算MCH，MCHC。
高脂血症肉眼不可发现，可通过LIS系统查询生化检测结果，再查看WBC分类散点图，评估分类结果是否正确，必要时应采用显微镜分类法纠正白细胞分类结果。
血常规显微镜复检规则
血常规手工复检及镜检标准1 目的规范检验科血常规显微镜镜复检的操作流程，以便更好的服务于临床、服务于患者，提高检验科血常规项目的准确性。
2 适用范围检验科全体工作人员3 职责本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出并报告，经科主任签字批准4手工复片镜检标准4.1单一标准4.1.1 血液病初诊病人；4.1.2 临床医生要求分类者；4.1.3 WBC总数超过25×109/L者或WBC总数低于3.0 ×109/L者；4.1.4中性粒细胞总数＜0.5×109/L或百分比＜10%者；4.1.5中性粒细胞总数＞20×109/L或百分比＞90%者；4.1.6成人淋巴细胞高于60％者；4.1.7儿童（≤7岁）白细胞总数高于20×109/L，淋巴细胞高于80％者。
4.1.8嗜酸性粒细胞高于15％者；嗜碱性粒细胞高于3％者；4.1.9 单核细胞高于15％( 确诊的肿瘤病人除外) 者；4.1.10贫血患者HGB＜70g/L者；4.1.11血小板＜60×109/L或＞500×109/L者4.2复合标准4.2.1机器未分类，WBC散点图异常的；并伴随IP信息提示需要分类者；4.2.2 WBC高于25×109/L，并且伴随血红蛋白降低者；4.2.3 贫血，并且伴随血小板降低者；5. 血常规检测项目仪器复检（复查）标准5.1检测项目结果处于危急值。
5.2本次结果与上次近期结果差别较大。
5.3血细胞分析仪提示需复查，如白细胞、血小板计数结果超出参考范围。
5.4血常规白细胞未分类或其它不完整项目，复检后的化验报告“备注栏”注明“已复查”。
6.血常规复片镜检的方法必须保证良好的制片及染色效果，首先进行对血细胞数量的评估，选择在红细胞排列很少有重叠的部位进行镜检。
评估的方法：（经验）6.1白细胞计数为4.0～7.0×109/L时，每个高倍镜视应见到2～4个白细胞；6.2白细胞计数为7.0～10.0×109/L时，每个高应见到4～6个白细胞；6.3白细胞计数为10.0～13.0×109/L时，每个野应见到6～lO个白细胞；6.4白细胞计数为13.0～18.01×109/L时，每个高倍镜野应见到10～12个白细胞；6.5油镜下每视野见到1个血小板相当于血小板计数10×109／L：6.6如果镜检评估的白细胞数量与仪器计数结果相差很大时，需重复进行计数测定。
XE-2100血细胞分析仪显微镜复检规则的建立与应用评价
XE-2100血细胞分析仪显微镜复检规则的建立与应用评价宋军;王丽芳;何旭;高羽高;刘晓;汪冉【摘要】目的：建立适合本实验室Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪的复检规则，并进行验证评价。
方法参照国际血液学标准化委员会（ ICSH）推荐的41条血细胞复检规则和国内XE-2100血液分析仪复检标准制定协作组推荐的23条复检规则，制定适用于本实验室的复检规则，并在规则指导下通过对1531份标本检测结果和显微镜复检结果进行数据分析，即收集仪器无报警信息和有报警信息的标本1531例，进行涂片、瑞吉氏染色并显微镜检，分析仪器与镜检一致性、准确度、特异性。
评价应用复检规则的假阴性率。
结果阳性符合率为98~．7％，阴性符合率为99．5％，敏感度为98．0％，特异度为99．7％，准确度为97．7％。
假阴性率为2．0％。
该规则的复检率为19．8％。
结论建立的复检规则敏感度高、特异性强，假阴性率＜5％，能有效地筛选异常标本，提高工作效率，为临床医生的诊断治疗提供有价值的信息。
【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2016(038)009【总页数】3页(P1372-1373,1377)【关键词】血细胞分析仪;复检规则;镜检【作者】宋军;王丽芳;何旭;高羽高;刘晓;汪冉【作者单位】050000 石家庄市，河北医科大学第二医院检验科;050000 石家庄市，河北医科大学第二医院检验科;050000 石家庄市，河北医科大学第二医院检验科;050000 石家庄市，河北医科大学第二医院检验科;050000 石家庄市，河北医科大学第二医院检验科;050000 石家庄市，河北医科大学第二医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R115目前，全自动血细胞分析仪在医院中广泛应用，但血常规的仪器检测不能完全取代显微镜检测，只能作为临床中的筛选工具。
国际血液学复检专家组推荐了41条自动CBC和DC复检规则，但在临床实际应用中复检率太高。
血液分析的复检和质量保证与“规则”有关的文档
（三）规(Gui)则的统计与分+假(Jia)阳性% 假阴性低于5%并确认恶性疾病不漏诊的前提下，降低假阳性，则降低推片率
第十七页，共四十四页。
（三(San)）规则的统计与分析
❖ 规则(Ze)调整---界定初诊、复诊
第十八页，共四十四页。
（三）规(Gui)则的统计与分析
态，每份样本按照统一镜检内容的要求进行双盲检测，结果取均值。报告方式参考《全国 临床检验操作规程》
第八页，共四十四页。
涂片镜(Jing)检阳性标准
第九页，共四十四页。
❖ 镜检项目的设置（LABOMAN4.2.44中镜检项目已基本覆盖）
字典—检验项目—新增—基本资料填全(Quan)—保存
第十页，共四十四页。
Sysmex系列可参照血液分析仪复检规则使用中华医学检验杂志《Sysmex XE 2100自动血
细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨》中的第九套筛选方案进行验证。300例左右(You)，方便 快捷。 ❖ 原则 ❖ 1、 筛选范围要涵盖所有人工镜检范围。
❖ 2、 在低假阴性率前提下,调整标准降低假阳性率；实验室一般假阴性控制≤5%以内。 ❖ 3、 白血病患者不能漏
• 规则调整(Zheng)---初诊、复诊设定
第十九页，共四十四页。
（三）规则的统(Tong)计与分析
规(Gui)则调整—适用科
室
第二十页，共四十四页。
（三）规(Gui)则的统计与分析
❖ 规则调整—项目(Mu)规则
❖ 复检规则—选中需要修改的规则—项目规则—修改后保 存—规则设置—修改名称、科室、选择初、复诊—修改 后保存
第二十三页，共四十四页。
第七页，共四十四页。
实验(Yan)方法
❖ 血液分析仪常规分析：每日随机抽取50至60份新鲜血常规样本（尽量包含全部临床科室）， 全部推片并使用瑞氏染色，将检测原始报告备份存档。连续检测5天（约300份样本）
血液分析仪检测结果显微镜涂片41条复检规则
血液分析仪检测结果显微镜涂片复检规则2002年，国际著名血液检验专家Berend Houwen发起研究关于血液分析仪全血细胞计数和白细胞分类的显微镜复检规则。
2005年，国际血液学组织提出了显微镜复检的41条建议性标准，得到中国血液检验学界的密切关注。
表3-7、表3-8、表3-9、表3-10是复检规则的细节。
表3-7 国际血液分析仪检测结果以手工涂片复查真阳性标准表3-8 国际血液分析仪检测结果显微镜复检规则（全血细胞计数）编号参数复检条件次序：①-②-③采取措施次序：①-②-③1 新生儿①首次标本①涂片复查2 WBC、RBC、HGB、PLT 、RET①超出仪器线性范围①稀释标本上机再测3 WBC、PLT ①低于检验室确认的仪器线性范围①按标准操作程序进行复核4 WBC、RBC、HGB、PLT ①仪器无检测结果①检查标本有无凝块。
②再上机检测。
③仍异常，换用替代计数方法5 WBC（×109/L）①＜4.0或＞30.0-和-②首次检测①涂片复查6 WBC（×109/L）①＜4.0或＞30.0-和-②测定差值超出预设值-和-③3d内①涂片复查7 PLT（×109/L）①＜100或＞1000-和-②首次检测①涂片复查8 PLT（×109/L）①任何测定值-和-②与前次比，PLT数差值超出限值①涂片复查9 HGB（g/L）①＜70或＞超过年龄性别参考值上限20-和-②首次检测①涂片复查。
②如有提示，确认标本完整性10 MCV（fl）①（成人）＜75或＞105-和-②首次检测-和-③＜24h标本①涂片复查11 MCV（fl）①＞105-和-②成人-和-③＞24h标本①涂片复查大红细胞相关变化。
②如未见大红细胞相关变化，取新鲜血再检查。
③如无新鲜标本，则在报告中注明12 MCV（fl）①任何测值-和-②与前次比，差值超出限值-和-③＜24h 标本①验证标本的完整性/标本的身份13 MCHC（g/L）①≥参考值上限20①检查有无脂血、溶血、红细胞凝集、球形红细胞14 MCHC（g/L）①＜300-和-②MCV正常或增高①检查可能静脉输液污染或其他特殊原因15 RDW-CV（%）①＞22-和-②首次检测①涂片复查表3-9 国际血液分析仪检测结果显微镜复检规则（白细胞分类和网织红细胞）编号参数第1个复检条件和/或第2个复检条件采取措施16 无分类结果或分类不完全涂片分类、复查17 中性粒细胞计数（×109/L）＜1.0或>20.0 和首次检测涂片复查18 淋巴细胞计数（×109/L）＞5.0（成人）＞7.0（＜12岁）和首次检测涂片复查19 单核细胞计数（×109/L）＞1.5（成人）＞3.0（＜12岁）和首次检测涂片复查20 嗜酸性粒细胞计数（×109/L）＞2.0 和首次检测涂片复查21 嗜碱性粒细胞计数（×109/L）＞0.5和首次检测涂片复查22 有核红细胞计数任何值和首次检测涂片复查23 网织红细胞绝对值（×109/L）＞0.100 和首次检测涂片复查表3-10 国际血液分析仪检测结果的显微镜复检规则（可疑报警）编号参数复检条件次序：①-②-③-④采取措施次序：①-②-③24 可疑报警（除IG/杆状核细胞外）①阳性报警-和-②首次检测-和-③成人①涂片复查25 可疑报警①阳性报警-和-②首次检查-和-③儿童①涂片复查26 WBC不可信报警①阳性报警（任何报警）①验证标本完整性再上机检测。
全自动血细胞分析显微镜复检规则解读及复检方法
复检规则及复检方法
1. HGB: ≥200g/L或≤60g/L，涂片镜检。 2. RBC:RBC直方图出现双峰或多峰，涂片镜检。 3. WBC: WBC≥30.0×109/L或≤2.5×109/L的初诊患者， 涂片镜检。
WBC数量的估计方法: 2-4/HP 4-7×109/L; 4-6/HP 7-9×109/L; 6-10/HP 10-12×109/L; 10-12/HP 13-18×109/L
复检规则及复检方法
4. PLT: 首次 PLT≥500×109/L或≤50×109/L，PLT直方 图异常（齿状波明显、尾部抬高大于峰值的20%）涂片镜 检，如结果不符，应人工计数。 PLT数量的估计方法： 如PLT数为80×109/L，RBC数为4.00×1012/L，油镜观 察5-10个视野每400个RBC可见8个左右的PLT。 提示PLT聚集，必需镜检。 即使未提示PLT聚集，但PLT较低，特别注意观察片尾。
全自动血细胞分析显微镜复检规则
及复检方法解读
一、复检规则制定的原则
二、复检规则制定的依据及验证结果
三、复检规则及复检方法 四、复检后报告方式
复检规则制定的原则
1. 根据该仪器对细胞形态的识别能力。 2. 复检规则涉及的参数该仪器均能提供。 3. 复检范围应涵盖仪器的所有参数及形态学特征。 4. 在确保病理细胞不漏检、保证筛选质量的基础上尽量 降低复检率，使患者能在较短的时间内获得正确的检验报 告。 5. 假阴性是制定复检规则的关键参数，具有诊断意义的 重要参数不能出现假阴性，其他参数的假阴性率应<5%。 6. 在较低假阴性率的前提下降低假阳性率，假阳性率过 高会增加工作量，延迟报告发放时间。 7. 白血病患者及临床医生提出阅片需求的样本必须镜检 。
血涂片复检规则及应用
2020/3/17
21
复检规则制定的原则
1 根据仪器对细胞形态识别能力，决定筛选标 准的宽严程度。识别越差，标准越严。
2 筛选范围要涵盖所有人工镜检范围。 3 在保证筛选质量基础上，尽量使复检率低。
4 假阴性率是关键参数，具有诊断意义的重要 参数不能出现假阴性。其它参数假阴性率也要 尽可能最低。
2 血涂片制备和检验的书面程序/过程
3 对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验的标准及程序
CAP认可：
HEM34200 实验室要建立标准以确保当分类计数仪标记出临床异常 结果时，必须对白细胞分类数据、直方图、和/或血涂片进行检查 和复检。
HEM34350 所有的血涂片必须有唯一的标识号，如病人的序列号， 姓名等。
2020/3/17
13
ISLH推荐的41条复检规则（8）
27.RBC碎片：阳性报警；涂片镜检。
28.双形RBC：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。
29.难溶性RBC：阳性报警；①检查WBC直方/散点图， ②根据实验室SOP证实Ret计数是否正确，③涂片镜 检是否有异常形态的红细胞。
30.PLT聚集报警：任何计数结果；①检查标本是否有 凝块，②涂片镜检估计PLT数，③如PLT仍聚集，按 实验室SOP进行。
嗜酸性粒细胞（成熟）
2020/3/17
29
嗜碱性粒细胞（成熟）
2020/3/17
30
单核细胞
2020/3/17
31
中毒颗粒
2020/3/17
32
复检内容—红细胞形态观察
大小 形状 血红蛋白含量 细胞内包涵体 红细胞异形性
2020/3/17
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1、目的：对本实验室血常规样本进行复检规则的建立与验证（包括显微镜复检及样本状态复核等），以保证检验质量。
2、适用范围：以下方案适用于SYSMEX五分类血液分析仪复检规则的建立与验证。
3、评价要求：血液分析仪复检规则验证通过的要求：假阴性率控制在5%以内，原幼白细胞不漏检。
4、评价方案：
4.1 实验器材：
4.1.1 SYSMEX五分类血液分析仪（X-系列）及其配套试剂（校准品、试纸条、质控品）
4.1.2 已安装Laboman 4.2软件
4.1.3 瑞氏染液（手工制片或SP制片）
4.1.4 光学显微镜
4.2 评价内容：根据血液分析仪的检测数据、IP报警、历史数据，建立本实验室合适的复检规则。
4.3 实验方法
4.3.1血液分析仪常规分析：每日随机抽取50至60份新鲜血常规样本（血液科、肿瘤科为主），全部推
片并使用瑞氏染色，将检测原始报告备份存档。
连续检测5天（约250-300份样本）。
4.3.2显微镜检查：每份样本经仪器检测后，全部制片染色，显微镜检查由2名有经验的专业技师完成，
油镜下观察白细胞、红细胞、血小板形态，每份样本按照统一镜检内容的要求进行双盲检测，结果取均值。
报告方式参考《全国临床检验操作规程》【2】。
4.3.3 血液分析仪复检规则使用中华医学检验杂志《Sysmex XE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复
检规则探讨》【1】中的第九套，具体如下：
1.WBC、RBC、HGB、PLT:超过检测线性或无结果；
2.WBC<
3.0或>30.0；
3.PLT<70 或>1000；
4.HGB:<70或>参考范围上限20；
5.MCV:<75fl或>105(成人)；
6.MCHC: 380；
7.MCHC:<300，且MCV 80；
8.RDW-CV首次结果>22% ；
9.无DC结果或DC结果不全；
10.Neut#:<1.0或>20.0；
11.Lym#:>5.0；
12.Mono#:>1.5；
13.Eos#:>2.0；
14.Baso#:>0.5；
15.NRBC:首次出现任何结果;
16.红系IP信息出现怀疑性报警；
17.WBC结果不可靠阳性报警；
18.双形RBC:出现阳性报警;
19.任何计数结果伴PLT聚集报警;
20.除PLT聚集外的PLT和MPV报警;
21.出现IG阳性报警；
22.核左移阳性报警；
23.不典型和/或变异Lym；首次结果出现阳性报警；
24.出现Blasts阳性报警；
25.出现NRBC阳性报警；
4.3.4 镜检阳性判断标准【1】: 所有镜检结果均输入Laboman软件中。
4.4 结果统计
4.4.1 将已制定好的25条复检规则导入Laboman Ver4.2统计软件，对上述样本结果进行复检规则验证。
4.4.2 以显微镜镜检结果为标准，统计验证结果符合率、真阳性率、假阳性率、真阴性率及假阴性（漏
诊率）并记录结果。
4.4.3 对结果的分析：假阴性率应小于5%，对出现的假阴性率应作分析，应不包含原幼白细胞。
4.4.4 如假阴性中出现原幼白细胞漏检或假阴性率大于5%，应查找原因并分析，规则修改后应重新统计，
直至符合要求。
5、注意事项
5.1 以上复检筛选规则不适用样本信息有误或不合格样本的标本，此类样本应重新采集、要求临床重新
送检或换方法检测。
5.2 规则建立后，应定期对阴性样本作抽查验证（3-6月），如假阴性率不符要求，应及时调整。
6、参考文献
【1】XE-2100血细胞分析复检标准制定协作组，《Sysmex XE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨》中华医学检验杂志2008年7月第31卷第7期 Chin J Lab Med，June 2008，Vol 31，No 7 【2】叶应妩、王毓三、申子瑜等《全国临床检验操作规程（第三版）》。