动物细胞融合单克隆抗体

1.3动物细胞融合技术的意义和应用
2020/6/9
2.1单克隆抗体的概念
问题：抗体由什么 细胞产生？其化学 本质是什么？与抗 原作用的特点？主 要分布在哪里？
2020/6/9
一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。教材中所
说的抗原分子刺激淋巴细胞，说的也就是抗原决定簇刺
激B淋巴细胞，使其分裂分化出特异性的效应B细胞，分 泌特异性抗体。
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
2020/6/9
1.1动物细胞融合过程、原理与诱导方法
2020/6/9
1.2动物细胞融合的概念
鼠B淋巴细胞 鼠骨髓瘤细胞
人工诱导
动物细胞融合（技术）：是指 （在一定的条件下）两个或多个细 胞融合形成一个单核细胞的过程。
2020/6/9 杂交瘤细胞
2020/6/9
设计方案：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 抗体
动物细胞培养技术
杂交瘤细胞动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体，
又能大量繁殖的细胞
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1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验
• 实验目的:制备单克隆抗体. • 实验原理： • 实验过程：
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STS
“太空婚礼”
2002年１２月３０日， 两场筹备了10年的 “太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物 细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细 胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细 胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”— 电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批” 太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明， 细胞202融0/6/9 合率大大提高。
选择性培养基 筛选1
专一抗 克隆化 体检测
多种杂 交细胞
有限稀释法培养 筛选2
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单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
融合
4.第一次筛选出的杂交瘤
细胞为何需进行克隆化培
选择性培养基 筛选1
养和专一抗体检测？
多种杂
专一抗 克隆化
交细胞
体检测
有限稀释法培养 筛选2
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单克隆 抗体
课后作业
通过报刊、杂志、互联网或其他媒体搜集资料， 了解细胞融合技术与单克隆抗体的新进展，就自己感兴 趣的领域，自定选题，写一篇综述报告。 参考选题：
1、1984年诺贝尔生理学或医学奖 2、单克隆抗体的种类； 3、单克隆抗体与疾病诊断； 4、生物导弹；
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物理法 的融合效率较 高,且对细胞（原生质 体）的伤害小,易操作、 控制和观察。
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请同学们阅读课本P52动物细胞融合内容
问题：什么是动物细胞融合？它相当 于植物体细胞杂交过程的哪一步？它 们的过程、基本原理、诱导融合方法 和意义是否相同？
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1.1动物细胞融合过程、原理与诱导方法
神舟放飞强国梦
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挑战自我
你能主持“太空婚礼”中的
科研项目吗？
“太空婚礼”科研项目一：
植物体细胞杂交技术
“太空婚礼”科研项目二：
动物细胞融合技术
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植物体细胞杂交过程示意图
(1) (1)
2020/6/9
(2)
(3)
(4) (5)
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人工诱导
同核体
同核体
异核体（杂交细胞）
多种杂
专一抗 克隆化
交细胞
体检测
有限稀释法培养 筛选2
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单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞
融合
骨髓瘤细胞
2.诱导细胞融合的
选择性培养基 筛选1
手段有哪些？
多种杂
专一抗 克隆化
交细胞
体检测
有限稀释法培养 筛选2
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单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
融合
3.若细胞两两融合后， 有几种融合情况？
克隆单个杂交瘤细胞，可制备抗一种抗原 决定簇的特异单克隆抗体。
问题：单克隆抗体的突出优点是什么？
特异性强、灵敏度高
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2.3单克隆抗体的应用
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
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治疗疾病 运载药物 (“生物导弹” —单抗导向，药物为弹头)
2020/6/9
2020/6/9
还有3个3个以上细胞的融合-------
2020/6/9
元贝驾考 yuanbeijiakao 元贝驾考2016科目一 科目四 金手指考试 jszksw 金手指驾驶员考试
2020/6/9
为什么在太空中细胞 （原生质体）融合率会 大大上升？为什么选用 物理法诱导？
太空中处于失重状态， 不同种细胞（原生质体） 更容易亲近；
2.2单克隆抗体的制备
看书上53页图，分组讨论，单抗制备过程分哪几步？ 请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的 字母按正确顺序连接起来。顺序是？
2020/6/9
描述单克隆 抗体制备过 程步骤
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注射抗原
B淋巴细胞融合Fra bibliotek骨髓瘤细胞
1.注射抗原的目的
选择性培养基 筛选1
是什么？
• 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 • 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一
特异性强的抗体
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2.2单克隆抗体的制备
问题：如何大量生产单克隆抗体？
提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：从诱变育种、基因工程、细胞工程等 角度有哪些可能的设计思路？
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抗体的传统生产方法
抗 原
多 动种 物效 体应 内B
细 胞
多 种 抗 体
从 血 清 中 分 离 抗 体
该法制备抗体的特点：
产量低、纯度低，且抗 体的特异性差、灵敏度低。
2020/6/9
2.1单克隆抗体的概念
读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念
人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞 可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只 分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的 单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。