转Bt基因棉田间筛选技术研究初报
转基因技术在棉花育种上的应用
主要内容
抗虫基因工程 抗病基因工程 抗除草剂基因工程 抗逆境基因工程 纤维品质改良基因工程
转基因技术
转基因技术在棉花遗传改良中的 应用,包括棉花抗病、抗虫、抗除草 剂、抗逆以及品质改良等方面。
常规杂交育种技术在提高棉花 产量、抗病和纤维品质等方面取得 了一些进展,并获得了可观的经济效 益,但由于棉花产量与品质之间为遗 传负相关,单纯依靠常规育种技术在 较短时间内大幅度同步改良棉花纤 维品质与产量相当困难。
4 抗逆境基因工程
近年来,国内外围绕棉花抗盐性、抗 早衰等方面开展了一些研究,并取得了一 定进展。研究发现,抗氧化酶如谷胱甘肽 还原酶和超氧化物歧化酶的活性与逆境 胁迫关系密切。
虽然棉花抗逆基因工程获得了 一些进展,然而由于缺乏高抗的陆地 棉种质,再加上受诸多外界因素的影 响,其进展比较缓慢,还不能满足生 产的需求。
尽管转基因棉花育种已取得很大的成就, 仍存在着一些问题。主要表现在: 1)周期长。 2)转化效率低。 3)缺乏有重要应用价值的目的基因 4)抗黄萎病育种进展缓。 5)转基棉的安全性。
总 结
目前,科学工作者正在努力开发各种 切实可行的安全性转基因途径,主要内 容包括不使用标记基因的转基因体系、 标记基因的敲除、外源目的基因的组织 特异性表达和诱导性表达、转基因漂移 的防止等。此外,也应重视棉花抗逆(如 抗寒、抗旱、抗盐等)基因工程的研究。
蛋白酶抑制剂(PI)是自然界最为丰富 的蛋白之一,是一种天然的杀虫物质,与Bt 基因相比,由于其具有抗虫谱广,安全性高 和害虫不易产生抗性等优点而广泛用于抗 虫基因工程。 目前应用于棉花的PI基因主要是豇 豆胰蛋白酶抑制剂(Cp-Ti基因)和慈菇蛋 白质酶抑制剂(API基因)。
转基因抗虫棉花基因类型及原理研究进展
转基因抗虫棉花基因类型及原理研究进展孙璇;马燕斌;张树伟;段超;王新胜;李燕娥【摘要】评述了苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因、苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、植物外源凝集素类基因、RNA干扰技术涉及到的一些昆虫来源基因等几类抗虫基因的抗虫机理及其在转基因棉花中的应用,并分析了抗虫转基因棉花研究目前存在的问题和发展趋势.通过回顾总结我国转基因抗虫棉已取得的成果,以了解我国现阶段转基因抗虫棉研究的进展程度,为进一步研究转基因抗虫棉提供方向.【期刊名称】《山西农业科学》【年(卷),期】2016(044)001【总页数】4页(P115-118)【关键词】棉花;转基因;抗虫基因【作者】孙璇;马燕斌;张树伟;段超;王新胜;李燕娥【作者单位】山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000【正文语种】中文【中图分类】S562棉花（Gossypium hirsutum L.）隶属于锦葵科（Malvaceae）棉属（Gossypium），是世界上最主要的经济作物之一，同时，其也是我国重要的经济作物之一。
随着基因工程技术的快速发展，转基因抗虫棉得到了迅猛的发展。
转基因抗虫棉基因类型主要有：苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白（Insecticidal Crystal Proteins，ICPs）基因；苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白（Vegetative Insectidal Proteins，VIPs）基因；蛋白酶抑制剂（Proteinase Inhibitors，PIS）基因；植物外源凝集素（Lectins）类基因以及RNA干扰技术（RNAi）所涉及到的一些昆虫来源基因等。
高品质转基因抗虫棉的选育与利用初报
近 年来随 着转 基 因抗虫 棉在 棉花 生产 上 的广泛应 用 ，既减 少 了对环 境 的污 染 ，又大 大提高 了植 棉效 益 ，深 受 棉农 的欢迎 。然 而 ，目前 生产 上使 用 的绝大 多数抗 虫棉 品种 和杂 交种 ，纤维 品质 还有 待进一 步提 高 。 本研 究试 图通 过高 品质 棉与转 基 因抗 虫棉杂 交 ，以选育 出转基 因高 品 质抗虫 棉新 品 系 ，并探 索 新育 成品 系 在 杂种 优势上 的利 用前 景 ，为高 品质 转基 因杂交 棉 的选育 提供 参考 。
１ 材 料 和 方 法
２０ 年以 自 的高品质棉蜀棉 ２ ００ 育 号作母本 ，引进的转基 因抗＿ 棉抗 Ｂ 虫 、抗 Ｇ 、抗 Ｆ 作父本 ，分别组配为：
蜀棉 ２号 ×抗 Ｂ 、蜀棉 ２号 Ｘ抗 Ｇ和蜀棉 ２号 Ｘ Ｆ 抗 。结 合海 南 冬繁 加代 。从 Ｆ 起连 续进 行卡那 霉素检 测与 田 ２ 间抗 虫性筛 选 ；苗床 人工 接种枯 、黄萎 病菌 筛选抗 病性 。 田间单 株选 择 ，株 行 、株 系鉴定 比较 、纤维 品质检 测 等 。纤维 品质 由农业 部纤 维 品质测 试 中心测 定 。对育 成 的 高 品 质转 基 因 抗 虫 品 系与 自育 的 双 隐性 核不 育 系 杂 交 ，组配 部分 杂优 组合 ，进行 优势 比较 ，以测定 Ｆ纤 维 品质及 丰产 性 的优 势 表现 。 。
ｐ ｏ ｒｓ － ｒ ｇ ｅ ｓ
Ｋｅ ｒ ｓ： ｃ ｔ ｎ； ｔ ｐ ｑ ａｉ ｙ ｗｏ ｄ ｏｔ ｏ ｏ ｕ ｌ ｙ； ｖ ｒｉｉｌ ｍ ｌ ｒ ｓｓ ； ｎ ｗ ｅ ｌｓ ； ｃ ｅ ｔ ｔ ｅｔｃｌ ｕ ｗｉ ｅ ｉｔ ｉ ｔ ｅ ｇ ｒ ｐａ ｍ ｍ ｒａｅ．
・
１ ・ ４
新的抗草甘膦转基因棉花获得的初报
（ １ ． Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｃ ｏ ｔ ｔ ｏ ｎ ， Ｓ ｈ ａ ｎ ｘ ｉ Ａ ｃ ａ ｄ ｅ ｍ ｙ ｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ， Ｙ ｕ ｎ ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ０ ４ ４ ０ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ；
３ ． 浙江大学农业与生物技术学院 ， 浙江 杭卅Ｉ ３ １ ０ ０ ２ ９ ）
摘
要： 抗除草剂棉花的培育具有重要 的农业生产利用价值 。以常规 棉花材料为受体 ， 对转化受体的愈伤和幼苗
进行草甘膦抗性浓度梯度 的筛选试验 ； 在此基础上 ， 利用 自主知识 产权 的草甘 膦基 因进行 多抗草甘膦转化试 验 ， 获得 了具有草甘膦抗性 的棉花再生植株。Ｐ Ｃ Ｒ检测结结 果可为后续抗 草甘膦棉花 的选育研究提供必要的新 种质 资源 。 关键词 ： 棉花 ； 草甘膦 ； Ｅ Ｐ Ｓ Ｐ Ｓ ； 种质资源
ＭＡ Ｙａ ｎ － ｂ ｉ ｎ ， Ｗ ＡＮＧ Ｘｉ ａ 一 ， Ｗ Ｕ Ｘｉ ａ ‘ ， Ｓ ＨＥＮ Ｚ ｈ ｉ － ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ￣ ， Ｌ Ｉ Ｎ Ｃ ｈ ａ ｏ － ｙ ａ ｎ ｇ ，
ＬＩ Ｐｅ ｎｇ — ｂ ｏ ， ＹＡＮＧ Ｌｉ ｕ —ｌ ｉ ｕ Ｉ ， ＣＡＯ Ｍｅ ｉ — ｌ ｉ ａ ｎ ， ＬＩ Ｙａ ｎ —ｅ
２ ． Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｌ ｉ ｆ ｅ Ｓｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ， Ｙｕｎ ｃ ｈｅ ｎ ｇ Ｕｎｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ， Ｙｕｎ ｃ ｈ ｅ ｎｇ ０ ４４ ００ ０， Ｃｈ ｉ ｎ ａ；
３ ． Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ａ ｇ ｉ ｒ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ＆Ｂ ｉ ｏ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｈ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ３ １ ０ ０ ２ ９ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
转基因抗虫棉的培育过程
转基因抗虫棉的培育过程随着全球人口的增长和农业需求的增加，农作物病虫害问题日益突出，传统农药防治手段面临着限制和挑战。
为了解决这一问题，科学家们研究出了转基因技术，通过转基因技术培育出抗虫棉，从而提高棉花产量和质量，降低农药使用量，减少环境污染。
转基因抗虫棉的培育过程主要包括以下几个步骤：1.选取抗虫基因：选择具有抗虫特性的基因作为转基因抗虫棉的材料。
这些基因可以通过自然产生的抗虫物质，在转基因抗虫棉中发挥相同的功能。
常用的抗虫基因包括Bt基因、Cry基因等。
2.构建转基因质粒：将选取的抗虫基因与转基因质粒载体进行连接。
转基因质粒是一种具有特定功能的DNA分子，可以将选取的基因导入到棉花细胞中。
常用的转基因质粒载体有pBI121、pCAMBIA1300等。
3.转化棉花胚性培养：将转基因质粒导入到棉花胚性组织中。
首先，通过切割幼嫩的棉花胚珠，得到碎片组织。
然后，将转基因质粒通过基因枪等手段导入到棉花胚性组织内。
转基因质粒会与棉花细胞的染色体融合，形成转基因组织。
4.再生植株培养：将转基因组织培养在含有适宜营养物质的培养基上进行培养。
转基因组织经过分裂和分化，最终发育为幼苗。
经过再生培养，可以得到许多转基因植株。
5.筛选抗虫转基因植株：通过PCR等分子生物学技术，筛选出带有抗虫基因的转基因棉花植株。
这些植株具有抗虫特性，可以抵抗常见的棉铃虫等害虫的攻击。
6.比较试验：将抗虫转基因植株与常规棉花品种进行比较试验。
比较试验包括生长特性、产量、纤维品质等方面的比较。
通过比较试验，可以评估抗虫转基因棉花的效果和优势。
7.田间试验：在田间条件下进行转基因抗虫棉的试验种植。
通过观察和分析抗虫转基因棉花在实际生长环境下的表现，可以更全面地评估其抗虫效果和农艺特性。
8.安全评估：进行对抗虫转基因棉花的安全评估，包括食品安全、环境影响等方面。
确保转基因抗虫棉花对人体和环境的影响符合安全标准。
9.市场推广：在安全评估通过后，将转基因抗虫棉花推广到市场。
转基因筛选实验报告
转基因筛选实验报告1. 实验目的本实验旨在通过转基因技术筛选出具有目标基因的转基因植物，并验证其功能表达。
同时，对转基因技术的应用进行探究与分析。
2. 实验方法2.1. 材料准备- 野生型植物种子- 目标基因载体- 转化载体（包含选择标记基因）- 催化剂（如乙酰丙酮）- 局部细菌感染试剂2.2. 实验步骤1. 制备植物组织培养基，包括必需的无机盐、营养物质以及植物激素。
2. 将野生型植物种子在无菌条件下在培养基上培养，保持温湿度合适。
3. 将目标基因载体和转化载体分别在乙酰丙酮的催化作用下加入植物组织培养基中。
4. 收取转基因植株，将其转移到相应的培养基中继续培养。
5. 利用PCR等方法对转基因植株进行基因分析，验证是否成功转化目标基因。
6. 进行型和酶解析实验，验证目标基因的功能表达情况。
3. 实验结果经过一段时间的培养和筛选，我们成功获得了若干转基因植株。
通过PCR实验验证，其中的部分植株确实成功转化了目标基因。
进一步的酶解析实验结果显示，这些转基因植株中的目标基因被成功表达，产生了相应的功能酶。
4. 实验分析通过转基因技术的应用，我们成功地筛选出了具有目标基因的转基因植物。
这为进一步研究和应用提供了重要的基础。
转基因技术的应用不仅可以用于改良作物品种，提高农作物的抗病虫能力和产量，还可以用于生物医学研究，产生用于疾病治疗的蛋白质等。
然而，转基因技术也面临一些争议和风险。
一方面，转基因植物可能对环境产生不可逆转的影响，对生态系统造成潜在风险。
另一方面，转基因植物可能引发食品安全问题，对人体健康构成潜在威胁。
因此，在推广应用转基因技术的过程中，需要更加严格的监管和安全评估。
5. 结论通过转基因筛选实验，我们成功获得了具有目标基因的转基因植物，并验证了目标基因的功能表达。
这为转基因技术的应用提供了实验依据和理论基础。
转基因技术具有广阔的应用前景，但也需要高度重视风险评估和监管措施，确保其安全使用。
转抗病基因棉花的培育研究初报
目前 ， 国 棉 花 主 产 区 相 当一 部 分 为 重 茬 地 ， 我
棉花 黄萎 病不 断蔓延 和 增 长 ， 对棉 花 生 产造 成 了很
大 的威胁 ， 分 重 病 棉 田因 病 产 量 损 失 严 重 ， 维 部 纤 品质 下 降 ， 济 损 失 大 ， 接 制 约农 村 经 济 的 发 展 经 直 和农 民的收入 。如何解 决 抗 病性 ， 了棉 花基 因工 成
程研 究 的新课 题 。 １材 料 来 源
２ １转抗 病 基 因材 料 病 圃抗 病性 检 测 ２ ０ 、０ ４ ． ０ ３ ２ ０ 年 将 田问选 育 的 纯 合转 抗 病 基 因棉 花 品 系在 山西 省 农业科 学 院 棉 花研 究 所植 保 室病 圃 进行 抗 病性 检 测 （ １ 。从 总 的检测结 果看 ， ３ Ｈ１ 表 ） Ｈ１ 、 ８两 个材 料 较好 ， 抗病 性 为 高 抗 枯 萎 病 耐 黄 萎 病 ； 枯 萎 病 抗 耐黄萎 病 的 材 料 为 Ｈ７ Ｈ８ Ｈ４ 、 、 。这 些 检测 结 果说 明， 转化 外源 抗病 基 因在一 定程 度上 对枯萎病 的抗
大 ， ０ ０ ～６ ０ ％ ； 期病 害发 病率 变 幅较 大 ， 为 ．０ ．８ 蕾 为 １ １ ～２ ． ３ 。总 体 调 查 结 果 ： 萎 病 发 病 ．１ Ｏ ８ 枯 率在 １ ％以下 的 材料 有 ６个 为 Ｈ７ Ｈ１ 、 、 、 Ｏ 、 ３ Ｈ８ Ｈ４
Ｈ１ 、 １ ２ Ｈ１ 。Ｈ １ 病 圃抗 病 性 检 测 较 好 ， 田间 调 ６在 在
维普资讯
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圆拥 哟 商 骄 窕 报
抗病 性筛 选 ， 获得性 状优 良的 抗病 转 基 因棉 花 品 系
材料 １ ５个 。 ２结 果 与 分 析
实验报告分析及评论(3篇)
第1篇一、实验背景随着科技的不断发展，实验在科学研究中的地位日益重要。
实验报告作为实验过程的记录和总结，对实验结果的分析和评论至关重要。
本文以某实验为例，对实验报告进行分析及评论，以期为实验报告的撰写提供参考。
二、实验目的本次实验旨在验证某一理论或方法，探究某一现象，或解决某一实际问题。
三、实验方法实验方法主要包括实验原理、实验仪器、实验步骤、实验数据等。
1. 实验原理：简要介绍实验的理论依据，说明实验目的。
2. 实验仪器：列出实验过程中使用的仪器名称、型号、规格等。
3. 实验步骤：详细描述实验操作过程，包括实验前准备、实验操作、实验后处理等。
4. 实验数据：记录实验过程中得到的数据，包括实验参数、测量值、计算结果等。
四、实验结果与分析1. 实验结果：展示实验过程中得到的数据，包括图表、表格等形式。
2. 结果分析：对实验结果进行解释和分析，说明实验现象、实验结果与理论预期之间的关系，探讨实验结果的可能原因。
五、实验结论根据实验结果和分析，得出实验结论，回答实验目的。
六、实验讨论1. 分析实验过程中存在的问题，如实验误差、实验条件控制等。
2. 对实验结果进行讨论，提出改进实验方法、优化实验条件等建议。
3. 结合实验结果，探讨理论或方法的适用范围和局限性。
七、实验评论1. 实验报告的完整性：本次实验报告包含了实验目的、方法、结果、结论、讨论等部分，结构完整。
2. 实验方法的科学性：实验方法符合科学原理，实验步骤合理，实验仪器选择恰当。
3. 实验结果的真实性：实验结果数据准确，图表清晰，分析合理。
4. 实验结论的可靠性：实验结论与实验结果相符，具有说服力。
5. 实验讨论的深度：实验讨论内容丰富，分析深入，具有一定的参考价值。
6. 实验报告的规范性：实验报告格式规范，语言表达准确，符合学术规范。
总体评价：本次实验报告分析及评论表明，该实验报告在完整性、科学性、真实性、可靠性、深度和规范性等方面均表现良好。
转Bt基因抗虫棉后期病虫发生新特点及防治技术
转Ｂｔ基因抗虫棉后期病虫发生新特点及防治技术摘要介绍了转Bt基因抗虫棉后期病虫发生的新特点及防治技术。
关键词转Bt基因抗虫棉；特点；防治大丰市是江苏沿海主要产棉区，棉花种植历史长，植棉水平高，常年种植面积在1.5万hm2左右。
为了扼制棉铃虫的肆虐，20世纪末该市开始引进试种转Bt基因抗虫棉，由于其良好的抗虫性，以及简便的栽培手段和较好的丰产性，种植面积逐年扩大。
但近年来逐步暴露出种植转Bt基因抗虫棉病虫发生出现了一些新的特点，给防治上提出了新的要求。
为此，笔者对近年来转Bt基因抗虫棉后期病虫发生特点进行了总结分析，并对后期病虫防治技术提出了意见。
1Bt抗虫棉后期病虫发生特点1.1棉盲蝽上升为棉花后期的重点防控对象大面积种植转Bt基因抗虫棉后，棉盲蝽已急剧上升为棉田第一大害虫。
2001～2007年有5年棉盲蝽达偏重以上发生水平，后期重发田百株残虫数在100头以上，小铃被害率高达40％，对产量影响明显。
其原因是种植转基因抗虫棉后棉铃虫等鳞翅目害虫发生程度急剧下降，棉田内针对棉铃虫用药量大幅度降低，从而对棉盲蝽的兼治效果削弱；寄主增多，食源充足。
近年来，随着产业结构调整，盲蝽喜食作物如苜蓿、棉花、蔬菜、果树等种植面积不断扩大，为棉盲蝽提供了充足的食源和越冬场所；忽视对棉田外寄主的治，导致虫源增殖系数高。
1.2棉铃虫、玉米螟、红铃虫等鳞翅目害虫为害明显减轻四代棉铃虫、三代玉米螟过去一直是大丰市棉花后期主要害虫，发生期从8月中下旬持续到9月上中旬，此时正值棉花结铃期，为害性极大，造成棉花蛀杆、蛀铃，盖顶桃很难安全成铃，以1997年为例，四代棉铃虫百株累计卵1758.7粒，百株蛾量4550头，高峰期百株虫230头，铃害率24.5％；玉米螟百株卵量20.2块，蛀杆率5.3％，铃害率8.2％，仅这2种害虫对棉花的为害，平均每株棉花有3.2个棉铃被蛀食。
2000年以来，转基因抗虫棉在大丰市种植面积不断扩大，对控制后期棉铃虫、玉米螟等鳞翅目害虫的作用十分明显，红铃虫几乎绝迹。
转Bt基因玉米(瑞丰125、DBN9936、DBN9978)对亚洲玉米螟的抗虫效果研究
转Bt基因玉米(瑞丰125、DBN9936、DBN9978)对亚洲玉米螟的抗虫效果研究作者：孙丹丹全玉东王月琴王振营何康来来源：《植物保护》2021年第03期摘要：評价转Bt基因玉米对靶标生物亚洲玉米螟的杀虫作用是转基因玉米研发的重要一环。
本文采用室内生测法对3种转Bt基因抗虫玉米‘瑞丰125’（表达Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白），‘DBN9936’‘DBN9978’（表达Cry1Ab杀虫蛋白）对亚洲玉米螟敏感品系ACB-S及抗Cry1Ab品系ACB-AbR、抗Cry1Ac品系ACB-AcR、抗Cry1F品系ACB-FR、抗Cry1Ah品系ACB-AhR、抗Cry1Ie品系ACB-IeR的杀虫活性进行测定，同时采用心叶期和抽丝期人工接虫法进行田间抗虫效果鉴定。
结果表明，取食3种Bt玉米的ACB-S幼虫， 3 d死亡率100%，而取食对照常规玉米3 d存活率100%。
取食3种Bt玉米的5个抗性品系幼虫除ACB-AbR和ACB-AcR有2%～6%的个体存活4～5 d， 6 d死亡率也达到了100%，其余品系均在3 d全部死亡，而取食对照玉米5～6 d的死亡率仅为4%～14%，差异显著。
田间心叶期食叶级别及穗期活虫数、雌穗被害和茎秆被蛀等为害等级说明3种Bt玉米高抗亚洲玉米螟。
明确了‘瑞丰125’‘DBN9936’和‘DBN9978’对亚洲玉米螟有很高的杀虫活性和田间防治效果。
5个Bt蛋白抗性亚洲玉米螟品系幼虫在常规玉米上显示一定的适合度劣势。
关键词：转基因玉米; Bt杀虫蛋白; 亚洲玉米螟; 寄主抗性中图分类号：S 435.132文献标识码： ADOI： 10.16688/j.zwbh.2020008Resistance of transgenic Bt maize （Ruifeng 125， DBN9936 & DBN9978） toAsian corn borerSUN Dandan， QUAN Yudong， WANG Yueqin， WANG Zhenying， HE Kanglai*（State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests， Institute of Plant Protection，Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100193， China）AbstractEvaluation for resistance to the targets such as Asian corn borer （ACB）， Ostrinia furnacalis， is an important step of research and development novel insect resistant transgenic Bt maize. In present research， three kinds of insect resistant transgenic Bt maize，i.e. ‘Ruifeng 125’ expressing Cry1Ab/Cry2Aj protein，‘DBN9936’ and ‘DBN9978’ expressing Cry1Ab protein， were evaluated in the laboratory and field. Laboratory bioassays were conducted by exposing neonates of ACB susceptible strain （ACB-S）， Cry1Ab resistant strain （ACB-AbR）， Cry1Ac resistant strain （ACB-AcR）， Cry1F resistant strain （ACB-FR）， Cry1Ah resistant strain （ACB-AhR）， and Cry1Ie resistant strain （ACB-IeR） to fresh whorl leaves， respectively. Field trials were conducted by artificial infestation of ACB at whorl and silking stages. Mortalities were 100% within 3 days when ACB-S larvae fed on three Bt maize leaf tissues， whereas all larvae survived when they fed on the control of conventional maize leaf tissues. When ACB-AbR and ACB-AcR larvae fed on three Bt maize leaf tissues， 2%-6% of larvae could survival for 4-5 days， but not longer than six days. In contrast， there were 4%-14% of larval mortalities when these larvae fed on control within six days. Leaf feeding ratings from whorl stage infestation， larval survivals and ear and stalk bored and tunnels indicated that three Bt maize varieties were highly resistant to ACB. In conclusion，Bt maize ‘Ruifeng 125’ ‘DBN9936’ and ‘DBN9978’ are highly toxic to ACB and could provide season-long protection against ACB. Laboratory selected Cry1Ab， Cry1Ac， Cry1Ah，Cry1F， and Cry1Ie resistant strains demonstrate certain fitness cost.Key wordstransgenic maize; Bt insecticidal protein; Ostrinia furnacalis; host plant resistance转Bt基因玉米因具有特定且高效的目标性状而受到种植者的欢迎[13]。
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转 Ｂ 基 因棉 田 问 筛 选 技 术 研 究 初 报 ｔ
胡 丽 华 王 肖鲸
摘 要 从 苗 期 至 花 铃 期 用 ４ ０ ０ ｒ ／ 的 ０ ｒｇ Ｌ Ｉ
夏 绍 南
选 ， 得 肯 定 的效 果 ， 他 们 报 道 所 使 用 的卡 那 取 但
卡 那 霉 素 液 涂 抹 子 叶 或 倒 ２叶 ， 表 现 抗 虫棉 均 叶 片 叶 色 正 常 ， 常 规 棉 叶 片 出现 黄 斑 ， 技 术 而 此 准确 可行 。 而 以 苗床 上 用 卡 那 霉 素 （ ｉ 喷 雾 Ｋｎ） 或 涂 抹 方 法 简 便 、 捷 ， 及 早 去 杂 ， 少损 失 。 快 可 减 关 键 词 转 Ｂ 基 因棉 ； 那 霉 素 ； 间 筛 选 ｔ 卡 田 棉 铃 虫 是 世 界 性 的 重 要 致 灾 害 虫 ， ０代 ９ 初， 在我 国 黄 河 流 域 棉 区 连 年 大 发 生 ， 失 惨 损 重 ，９ ６年 以 来 ， 长 江 流 域 棉 区 的 危 害 一 年 １９ 对 比一 年 重 。去 年 ， 省棉 铃 虫 大 发 生 ， 治 很 困 我 防 难 ， 的 棉 区 减 产 近 三 成 以上 ， 少 棉 农 因 棉 铃 有 不 虫无法 防治丧失 了种棉 的积极性 。 目前 ， 过 生 物 技 术 把 抗 虫 基 因 导 人 棉 花 通 培 育 抗 虫 棉 新 品 种 ， 综 合 治 理 棉 花 害 虫 的 重 是 要 手 段 之 一 ， 虫 棉 在 我 国 黄 河 流 域 棉 区 已 普 抗 及 ． 江 流 域 棉 区 发 展 迅 速 ， 省 彭 泽 、 修 等 长 我 永 县 去 年 已从 外 地 引 进 ， 年 全 省 抗 虫 棉 面 积 已 今 达 １％ ， 计 明 年将 成 倍 增 长 。但 在 科 研 、 ０ 预 生
渡 等 人 在 此 基 础 上 ， 接 在 田 间 对 己进 行 基 因 直 转 化 或 转 育 的 棉 花 叶 片 进 行 卡 那 霉 素 抗 性 筛
胡 丽 华 ， 究 员 ， 西 省 拂 花 研 究 所 ．３ １５． 西 省 九 江 县 港 研 江 ３２０ 江
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片 对 卡 那 霉 素 处 理 后 的 反 应 完 全 相 同 ， 理 部 处 位 的 叶 片 叶色 先 由绿 变 黄 ， 由黄 变 白 ， 白变 再 由
１２ ２ 使 用 方 法 试 验 ，， １２ ３ 时 期 试 验 ．．
（ ） 毛笔 沾液涂 抹 ； １用
（ ） 小型 喷雾器喷雾 。 ２用 （ ） 床 子 叶 期 ； ２ 苗 期 １苗 （）
涂 抹 倒 ２叶 ；３ 盛 营 期 涂 抹 倒 ２叶 ； ４ 花 铃 （） （） 期 涂 抹 倒 ２叶 。
洋 监 狱 局农 科 所 ） Ｇ ２ （ 通 创 世 纪 转 基 因 种 ，Ｋ２ 南
业 公 司 ） ；
对 照 品 种 （ ） 苏 棉 ｌ 泗 棉 ３号 ， 棉 系 为 ２， 赣
１ ，７ 系 。 １４
１２ ． 试 验 设计
产 和 销 售 领 域 中 ， 们 迫 切 想 要 了 解 抗 虫 棉 种 人 子 的 纯 度 ， 有 抗 虫 育 种 材 料 后 代 抗 虫 性 鉴 定 还
生产 和育种 。 １ 材料 和 方 法
１ １ 供 试 材 料
卡 那 霉 素 （ ｍ）由 丰 原 集 团 蚌 埠 涂 山 制 药 Ｋ
厂 生 产 ， 号 ２ ０ ４ ９ ， 支 ２ ，， ｇ 批 ００ １２每 ｍｌ０ ５ 。 供 试 品 种 ： 虫 棉 品 种 为 中 ２ 中 棉 所 ） 抗 ９（ ， ３ 合 肥 丰 乐 种 业 有 限 公 司 ），０ ７（ 北 沙 ２ Ｂ（ ９０ 湖
以及 抗 虫 棉 种 子 繁 育 田 去 杂 去 劣 ， 需 要 尽 陕 都 研 究 ， 及 快 捷 、 确 、 便 的 转 Ｂ 基 因 棉 的 检 普 准 简 ｔ 测 方 法 目前 在 转 基 因 植 株 的 鉴 定 筛选 方 面 的 工 作 通 常 是 在 实 验 室 内进 行 ， 种 是 生 物 测定 ， 是 一 一 对 棉 株 体 内 Ｂ 毒 蛋 白的 检 测 ， 要 相 当 完 备 的 ｔ 需 实 验 条 件 进 行 较 复 杂 的 试 验 ， 一 般 育 种 单 位 是
揭 ， 后 变 焦 破 损 称 为 黄 斑 ， 转 基 因抗 虫 棉 的 最 而
电话 ：０９ ６４ ３８ （ ７ ２） ８ ０ ０
王 肖鲸 ． 龆 南 ， 讯 ， 址 同 第 １作 者 夏 通
２ 试 验 结 果
无 法 进 行 。李 燕 娥 等 人 采 用 组 织 培 养 技 术 ， 在 有 卡 那 霉 素 的 培 养 基 上 对 转 基 因 棉 苗 进 行 培
养 ， 难 以在 生 产 上 推 广 应 用 。祝 建 波 和 王 坤 但
２ １ 棉 叶 对 卡 那 霉 素 处 理 的反 应 效 果 ． 对 未 转 人 Ｂ 基 因的 棉 花 品 种 ， ４个 对 照 ｔ 即 种 ， 供 试 材 料 ， 验 结 果 表 明 ： 有 品 种 的 叶 作 试 所
１ ２ １ 浓 度 试 验 将 卡 那 霉 素 用 蒸 留 水 配 制 ． ． 成 ２ ０ ｍｇ Ｌ，０ ０ ／ 、 ０ ０ ／ ８ ０ ｍｇ Ｌ ５ ０ ／ ４ ０ ｍｇ Ｌ ６ ０ ｍｇ Ｌ、 ０ ０ ／ ４种 叶 ， 用 达
湿润 。
霉 素 的 浓 度 和方 法 上 相 差 较 大 ， 的认 为 不 宜 有 超 过 ２０ ０ Ｌ 有 的 则 要 ５０ ０～７ ５ ０ ／ 。 ０ ｍ ， ０ ０ ｍｇ Ｌ
为 验 证 该 方 法 的准 确 性 及 探 索 适 宜 的 浓 度 和 快 捷 的 方 法 ， 所 进 行 了一 系 列 的试 验 ， 应 用 于 我 并