铁皮石斛 组织培养 栽培 试验 实验
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.
铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。
罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d 种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。
2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用，但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L为最佳。
1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。
1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 ％蔗糖。
曾宋君等在改良N6＋NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。
铁皮石斛实验策划书3篇
铁皮石斛实验策划书3篇篇一《铁皮石斛实验策划书》一、实验背景铁皮石斛是一种珍贵的中药材，具有多种药用价值。
为了深入研究铁皮石斛的生长特性、药用成分以及开发其潜在的药用价值，我们计划进行一系列实验。
二、实验目的1. 了解铁皮石斛的生长环境和生长条件。
2. 研究铁皮石斛的药用成分及其含量。
3. 探索铁皮石斛的药用价值和应用前景。
三、实验材料1. 铁皮石斛种苗。
2. 实验所需的培养基、营养液等。
3. 实验所需的仪器设备，如显微镜、离心机、高效液相色谱仪等。
四、实验内容1. 铁皮石斛的生长环境研究（1）设置不同的光照、温度、湿度等条件，观察铁皮石斛的生长情况。
（2）研究铁皮石斛在不同土壤条件下的生长情况。
2. 铁皮石斛的药用成分研究（1）采用高效液相色谱法等分析方法，测定铁皮石斛中多糖、生物碱等药用成分的含量。
（2）研究不同生长阶段、不同部位铁皮石斛中药用成分的含量变化。
3. 铁皮石斛的药用价值研究（1）进行动物实验，研究铁皮石斛对免疫系统、心血管系统等的影响。
（2）探索铁皮石斛在治疗疾病方面的应用前景。
五、实验步骤1. 铁皮石斛的培养（1）选取健康的铁皮石斛种苗，进行消毒处理。
（2）将种苗接种到培养基中，进行培养。
2. 生长环境研究（1）设置不同的光照、温度、湿度等条件，观察铁皮石斛的生长情况。
（2）定期测量铁皮石斛的生长指标，如株高、茎粗等。
3. 药用成分研究（1）采集不同生长阶段、不同部位的铁皮石斛样本。
（2）采用高效液相色谱法等分析方法，测定样本中多糖、生物碱等药用成分的含量。
4. 药用价值研究（1）选取实验动物，进行分组。
（2）给予不同剂量的铁皮石斛提取物，观察动物的生理指标变化。
（3）分析实验数据，评估铁皮石斛的药用价值。
六、实验时间安排实验时间：[具体时间]实验进度安排：1. [时间区间 1]：完成铁皮石斛的培养和生长环境研究。
2. [时间区间 2]：完成铁皮石斛的药用成分研究。
3. [时间区间 3]：完成铁皮石斛的药用价值研究。
铁皮石斛组培快繁技术实例分享 · 附配方
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），属微子目，兰科多年生附生草本植物，是名贵的中药材。
本文在前人研究的基础上，以铁皮石斛的未成熟种子为外植体材料，研究了铁皮石斛的再生体系，其研究结果可为铁皮石斛的工厂化育苗提供技术支撑。
1 材料与方法1.1 外植体材料及培养条件1.1.1 外植体选择实验材料为八成熟的铁皮石斛蒴果。
1.1.2 材料预处理及消毒将铁皮石斛的蒴果先用自来水冲洗干净，再置于洗洁精溶液中摇洗3次，每次摇洗5分钟；取出蒴果用自来水洗净，沥干水后。
在超净工作台上先用75%浓度的酒精消毒3分钟，倒去酒精；再用0.15%的升汞消毒15分钟；倒去升汞消毒液，用无菌水冲洗4-5次，沥干备用。
接种时，将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾约0.5厘米部分并弃去，然后将蒴果中段沿纵轴切开，取出种子，均匀地接种到培养基表面。
1.1.3 培养条件培养室温度为(25±2)℃，以日光灯为光源，光照强度为2000-2500lx，照光10小时/天。
2 结果与分析2.1 初代培养：种子的萌发与无菌材料的建立将铁皮石斛的未成熟种子接种在初代培养基（配方见文末，下同）上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒(直径0.5-1.5毫米)。
这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为少数原球茎体已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。
再经过20-25天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具1-2片真叶的幼苗，同时也产生了一些新增殖的原球茎体。
这些幼苗和原球茎体相互堆挤在一起，占满了初代培养基整个表层及表层上约1.5厘米厚的空间。
此时，铁皮石斛无菌材料的建立即告完成，应该及时将无菌实生小苗或原球茎体转接到新配制的增殖培养基或者生根壮苗培养基上进行培养。
2.2 继代增殖培养建立了铁皮石斛的无菌材料后，将原球茎转接到增殖培养基，培养90天，增殖系数非常高。
铁皮石斛组培方案样本
铁皮石斛组织培养方案报告一、实验目二、理解铁皮石斛培养办法和环节, 纯熟掌握外植体取材、消毒、接种、初代培养操作过程。
三、实验器材超净工作台、高压灭菌锅、电磁炉、长镊子、培养皿、酒精灯、接种工具、烧杯、玻璃棒、移液管、培养箱、剪刀、培养瓶等。
四、实验环节配方：依照不同阶段, 培养基配方有所差别。
如表1表1 各种培养基配方配制（以1000ml幼株生根壮苗培养基为例）10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+0.8%琼脂（w/w）+2.0mg/L NAA1）量取800ml蒸馏水于干净大烧杯中, 加热至沸腾；2）精确称量100g香蕉果肉, 切成碎片状, 并倒入上述烧杯中, 加热煮沸5min, 其间搅拌使之充分溶解；3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序, 量取MS各种母液于盛有50ml蒸馏水烧杯, 混合均匀；4）将2）和3）溶液混合, 然后加入30g蔗糖, 并移取2ml NAA（0.1mg/ml）, 混合均匀；5）加热至沸腾, 加入8g琼脂并煮沸5min, 其间不断搅拌使之充分溶解；6）冷却至50±5℃时, 调pH至5.4—5.6。
分装于培养瓶内, 33.3ml/瓶。
注意事项:①溶解香蕉蒸馏水尽量多, 以保证香蕉各种成分完全溶解；②各种母液混合时, 要按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序；③煮沸时, 小心溶液溢出；④分装时不要污染培养瓶瓶口。
灭菌：1）检查灭菌锅水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表, 保证灭菌锅各指标和功能正常, 以防事故发生；2）把带灭菌培养基装入锅内, 盖上锅盖, 对称而均匀地扭紧螺丝；3）打开电源和排气阀, 调节电压至220V；4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后, 关闭排气阀；5）当温度上升到121℃后, 调节电压至135V, 保持20min；6）关闭电源, 使之自动降温至0℃。
10min后, 打开排气阀和锅盖；7）5—10min后, 取出培养基放于实验台上冷却, 待用。
铁皮石斛茎段的培养
实验五铁皮石斛茎段的培养
一、实验目的
本实验以铁皮石斛为材料，学习和掌握以茎段为外植体的植物组织培养方法，熟练掌握灭菌和接种技术。
二、实验原理
铁皮石斛（学名：Dendrobium officinale Kimura et Migo）为兰科石斛兰属多年生草本植物，喜在温暖、潮湿、半阴半阳的环境中生长。
分布于福建、浙江、广西、云南、贵州等地。
铁皮石斛含有多种铁皮石斛素，具有滋阴养血、益胃生津，清热明目的作用。
茎段培养是植物组织培养的常用外植体选择之一，诱导率高，繁殖性强。
以带芽的茎段进行组织培养，易诱导出无菌芽。
三、实验仪器
接种盘，剪刀，接种镊子，三角瓶，培养瓶，超净工作台。
四、实验材料
多年生铁皮石斛茎段
五、实验步骤
1、预处理
取铁皮石斛茎段，去掉叶鞘，剪刀把带腋芽的节剪成1.5cm左右的茎段，放入瓶子中，加入高锰酸钾溶液，浸泡15min。
后用流水冲洗10min。
2、灭菌与接种
预处理后的外植体置于超净工作台上，用75% 酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，后用0.1%升汞浸泡12~17min，然后用无菌水冲洗5次后，备用。
在无菌条件下，芽体朝上接种于诱导培养基上。
3、培养
培养基为MS+2.0mg/L6-BA。
接种结束后，将培养瓶放置培养室进行光照培养。
六、实验结果记录
3~5天后观察接种的外植体，做好污染数据的记录。
铁皮石斛组织培养实验流程
铁皮石斛组织培养实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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铁皮石斛的组织培养与快速繁殖研究
Final buds 765
Increase rate/ % 354. 74B**
Physical status* +++
B5
168
975
498. 90A
+++
MS
163
638
296. 02C
++
KC
136
388
181. 80D
+
* + ( 细弱) , + + ( 生长一般) , + + + ( 饱满, 健壮) , 下表同. * The physical status of buds were indicated as, + , tiny and thin; + + , or dinary; + + + , plump and vigorous. The same as below. ** 同一列不同字母者表示相互间比较差异达到极 显著水平, 下表同. ** The different capital letter in the same column indicated very significant difference. The same as below.
pH 至 518. 在超净工作台上, 将铁皮石斛试管苗切成 1~ 2 cm 的茎段, 在以上培养基上接种进行芽诱导. 每 组各接种 25 瓶, 随机抽取其中 20 瓶进行生长性状观测. 培养时间均为 1 个月, 培养温度( 25 ? 1) e , 光照强 度1 500~ 2000 1x, 每天光照 12 h, 下同.
2 结果与分析
211 不同基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的影响 4 种基本培养基对铁皮石斛芽诱导效果, 相互之间的比较差异极显著( 表 1) , 其中以 B5 的增殖效果最
铁皮石斛的组织培养
铁皮石斛的组织培养作者：黄子聪来源：《农家科技下旬刊》2014年第09期摘要：铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物，为传统名贵中药。
由于对生境要求十分苛刻，加之人为过分采收，现已濒临灭绝，已被列为“濒危珍稀植物”。
对铁皮石斛的组织培养及人工栽培进行研究，实现保护野生铁皮石斛资源的同时满足人们的消费需求，具有重要的现实意义。
关键词：铁皮石斛；组培快繁一、铁皮石斛组培培养（一）材料与方法1.供试材料供试材料：果荚：从浙江省购买回来的组培苗，栽种于温室大棚中，选择品质纯正的、生长健壮的铁皮石斛单株进行授粉，获得果荚。
茎段：从浙江省购买回来的组培苗，栽种于温室大棚中，选择品质纯正的、生长健壮的、二年生的、具有20厘米以上的铁皮石斛，自上而下剪下15厘米左右，带回实验室，备用。
2.方法（1）消毒方法果荚的消毒方法：将生长了5个月的果荚用消毒的剪刀从植株上剪下，带到超净工作台下，用75%的酒精浸泡2分钟，然后用灭菌去离子水清洗两次，放在灭菌的空瓶中。
播种前，将要切开的部位及花朵着生位置在酒精灯下稍微过火，然后再将基切开，播种。
（2）种子无菌播种将灭菌的果荚在果荚蒂附近的位置上用灭菌的手术刀切开一个约1.5厘米的切口，然后直接将种子均匀地撒在培养基上。
放在培养架上进行光照培养。
培养基配方：Z0：MS+NAA0.1mg/L+土豆汁100g/L（3）原球茎的增殖及分化将转绿的原球茎转接到增殖分化培养基上，每瓶接种6个点，每个点5个原球茎，5瓶一个重复，设3次重复。
茎段的消毒方法：选取茎段特征明显的铁皮石斛单株，用消毒的剪刀从节间靠下的位置将优选单株剪下，然后将叶片摘除，在自来水下将表面的灰尘洗去。
接下来将茎段上的叶鞘撕掉，特别是底部与节相连接的位置要去干净，同时注意不要伤到休眠芽，再用洗洁精进行表面清洗，在自来水下将洗洁精清洗干净，带到超净工作台下，用75%酒精浸泡两分钟，期间不断地搅拌，再用灭菌去离子水清洗2两，切成每段3-5节，用0.1%升汞（加吐温20 2滴）浸泡9分钟，期间不断地搅拌，倒去升汞溶液，再用灭菌去离子水清洗6次，每次2分钟。
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铁皮石斛茎段组织培养与栽培摘要: 为试验铁皮石斛茎段组织培养与栽培，以铁皮石斛茎段为外植体，结合铁皮石斛的生物学特性，综述铁皮石斛组织培养与栽培的过程技术。
观察研究基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛生长的影响。
验证和探究铁皮石斛茎段组织培养技术并对铁皮石斛的组织培养与栽培管理技术进行了思考与展望。
关键词: 铁皮石斛; 组织培养; 茎段; 移栽; 驯化0.引言铁皮石斛( Dendrobium officinale Kimura et Migo) 是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw．)多年生草本植物，又名黑节草，俗称铁皮枫斗，分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东和广西等地，是我国传统名贵珍稀中药材，其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等，其中石斛多糖的含量高达21.7%，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。
现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。
铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。
由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝。
铁皮石斛是2005版《中华人民共和国药典》收载的3种石斛属植物之一，为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。
铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低，是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物.。
铁皮石斛自然繁殖力极低, 常规繁殖又较困难, 且多年来对铁皮石斛的采集量远大于其生长量, 野生铁皮石斛自然繁殖已濒临绝迹。
由于药用价值高，人为的过度开采与生态破坏，野生铁皮石斛已濒临灭绝，1987年国务院将其列为国家重点保护植物。
1 材料与方法1. 1 试验材料野生云南铁皮石斛，取材于浙江农林大学组培实验室，取其茎段作为外植体进行组织培养。
1. 2 试验方法1. 2. 1 外植体消毒取铁皮石斛的茎，去除多余叶片后用解剖刀将茎切成含 3 ～ 4 个节点的茎段，保留节点。
依次用中性洗涤剂清洗，自来水冲洗20min，用70% 的乙醇浸泡10 ～60 s，再转入0. 1% 的氯化汞中，灭菌 5 ～11 min 后倒去氯化汞溶液，用无菌水反复漂洗材料3-5 次。
用无菌纸吸去茎段上多余水分，将其切成1 ～2 cm 带一个芽点的茎段，接种到培养瓶中培养。
1. 2. 2 培养基制备铁皮石斛培养基均添加3% 蔗糖，0. 7% 琼脂，pH 值为5. 8。
按不同目的在基本培养基中加入6-BA、NAA、IBA，每个培养瓶分装50 m 培养基，密封。
经过121 ℃高温灭菌25 min。
不定芽的诱导培养基是在基本培养基MS 中加入细胞分裂素和生长素，采用不用浓度水平的NAA 和6-BA。
组培苗的壮苗与生根，将生长状态稳定的试管苗接种于添加不同激素组合的1/2 MS 培养基上。
(1)诱导培养基: ①MS+6-BA0.5mg／I。
+NAA 0.05mg／L+AC(活性炭)29／L；②MS+6-BAl．0mg／L+NAA0．1mg／L+AC29／L。
(2)增殖培养基: 花宝3号39／L+6一BA2．5mg／L+NAA0．25mg ／I。
+AC29／L。
(3)生根培养基:1／2 MS+IBA0．5mg／L+AC29／L。
培养基中添加蔗糖209／L，pH5．2～5．41. 2. 3 培养条件接种铁皮石斛培养材料的组培苗在组织培养室中培养，培养温度为( 26 ±2) ℃，光照14 h/d，光强1 500 ～2 000 lx。
1. 2. 4诱导培养用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下，接种在诱导培养基①中进行培养。
15～20天后，外植体开始萌动，茎段膨大，切面及顶部组织形成疏松组织。
继续培养20天后，转入培养基②中，切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物，随着培养时间的延长，颗粒物长大形成直径1～2mm的类原球茎颗粒物。
1. 2. 5增殖培养将诱导形成的原球茎转入到增殖培养基中，原球茎增殖速度很快，增殖倍数可达3～4倍，同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1～2片小叶，原球茎的增殖与芽分化同时进行。
1. 2. 6 生根培养取诱导形成的不定芽，要求芽高2 ～3 cm，带3 ～5片叶的不定芽，将其接种到不同处理的生根培养基上，进行培养。
培养30天左右，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到90％以上。
2.移栽与驯化2.1移栽前的准备2.1.1炼苗当苗高3cm以上、具3～4片叶时，便可炼苗。
移栽前先将瓶苗至炼苗房进行2~3周的炼苗，让瓶苗从封闭稳定的环境向开放变化的环境过渡，慢慢适应自然环境，等瓶苗生长健壮、叶色正常，根长3cm以上，肉质茎有3~4个节间、长有4~5片叶，叶色正常，根长3cm以上，有4~5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异。
炼苗目的：炼苗的主要目的是使组培苗适应外界的环境——温差，湿度差以及微生物环境。
炼苗方法：1）将待炼苗的材料放置于欲移栽的环境，不开盖保持4-5天；2）半开盖保持1-2天后，全开盖再炼苗2-3天2.1.2出瓶组培苗出瓶时，打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出，整齐放置于盆中待清洗，污染苗、裸根苗或少根苗分别放置。
正常组培苗先在自来水中洗净培养基，特别要洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，再换自来水清洗一次。
裸根或少根组培苗经过上述清洗后，还需将小苗根部置于100mg/L的ABT生根粉中浸泡15分钟，以进行生根诱导。
污染苗经过清洗后，用1000倍多菌灵浸泡整株小苗10分钟。
后期管理得当可有效控制污染的发生。
栽种于已灭菌的基质中(移栽前浇透水)，放置在遮光度50％～60％、湿度达80％以上的温室中，2个月后，成活率达90％以上。
2.1.3基质的准备移栽铁皮石斛组培苗要选择适宜的基质。
铁皮石斛的根是气生根，有明显的好气性和浅根性，因此，要求基质以疏松透气、排水良好、不易发霉、无病菌和害虫潜藏者为宜。
可以选择水苔、石灰石、碎砖、树皮、刨花、蕨根、板边、菌糠、木糠等为移栽基质。
铁皮石斛不宜深植，种植时根系向四周均匀展开，将基质填充根部、基部必须露出，否则易造成烂根。
移栽后隔5天再浇水效果较好。
30天内每隔1天喷雾1次，水量不宜过多，期间勿施肥，待小苗恢复正常生长后才开始常规的水肥管理。
2.1.4栽培场地的选择铁皮石斛喜温暖、多雾、微风、清洁、散射光环境，忌阳光直射和曝晒。
在移栽过程中要创造条件，为铁皮石斛创造最佳的生长环境。
铁皮石斛原产区大多处于温带和亚热带，全年气候温暖、湿润，冬季气温在0℃以上。
根据铁皮石斛的生长习性，要考虑场地的光照、温度、湿度、通风等自然因素。
笔者认为最好选择在大棚内移栽，而且要移栽在高架畦，这样容易满足铁皮石斛生长的最佳环境要求，而且很多自然因素容易控制。
在建造育苗大棚时要满足以下三个条件：（1）育苗大棚要通电、通水、通路，要求棚宽6m、长30m、棚肩高107m以上、棚顶高2.8m以上，棚顶覆盖塑料无滴薄膜和70%遮荫度的遮荫网，棚内安装有自来水管，大棚四周和入口装有40目的防虫网。
有条件的，棚内还要装有自动或手动控制的喷雾系统（最好既能喷雾，又能喷肥、喷药），这样可以防晒、防雨、防虫、保温、保湿、透气，还能大大减少劳动量。
（2）棚内搭建畦底架空的高架种植畦。
可用角钢、砖头、木条或方条等材料作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3~0.5cm的塑料平板作为栽培基质的支撑面，要求畦宽1~1.2m，畦长度可自定，畦底架空高度30~50cm。
种植畦上方装有可随时喷雾的喷头，喷雾饿时间最好能控制。
没有条件的，也可以用喷雾器来代替。
搭建高架种植畦的目的是为了使水分和透气容易控制，从而为组培苗生长提供最佳水分，保证通风透气，又能同时喷肥喷药，移栽成活率高，大面积移栽时能大大节省劳动力。
（3）在种植畦上铺5~8cm厚的基质，摊平。
移栽前用0.3%高锰酸钾或1000倍多菌灵药液对基质喷洒消毒。
2.2移栽2.2.1移栽时间移栽最佳季节应为日平均气温在15~30℃时，气温过低或过高均不宜出瓶移栽。
一般来说，在铁皮石斛主产地，除了最冷的1-2月以及最热的7-8月外均可栽培。
部分高海拔地区，除了12月至次年3月，其余时间均可栽培。
2.2.2移栽方法用镊子将组培苗小心取出，洗去培养基后，即可移植到种植畦上。
移栽时用手指在基质挖2~3cm深的小洞，轻轻把石斛根部放入小洞，注意不要弄断石斛的肉质根，然后用基质盖好。
裸根苗或少根苗最好分开种，以便于管理。
移栽密度为500株/m2，株行距为4cm×5cm。
2.3移栽后的管理2.3.1温度管理人工移栽铁皮石斛组培苗要满足其冬暖夏凉的要求。
组培苗生长适宜温度为20~30℃。
夏季温度高时，大棚内须通风散热，并常喷雾来降温保湿，每天喷雾3~5次，每次喷雾2~5分钟；冬季气温低时，大棚四周要密封好，以防冻伤组培苗。
2.3.2湿度管理刚移栽的组培苗对水分很敏感，缺水则生长缓慢、干枯、成活率低。
而喷雾过多则渍水烂根，温度高、湿度大时还易引发软腐病大规模发生。
移栽后一周内（幼苗尚未发新根）空气湿度宜保持在90%左右，一周后，植株开始发新根，空气湿度可保持在70%~80%。
种植畦干湿交潜有利于发根长芽。
2.3.3肥水管理大棚移栽期间的施肥以叶面肥为主。
由于石斛为气生根，因此要喷施适宜的叶面肥作为营养液，以供给植株充足的养分，利早发根长芽。
叶面肥可以选择硝酸钾、磷酸二氢钾、腐植酸类等，以及进口三元复合肥和稀释的MS培养基等。
一般移栽后一周，植株新根发生后开始喷施千分之一的硝酸钾或磷酸二氢钾，7~10天喷一次，连续喷3次。
长出新芽后每隔10-15天喷3‰的三元复合肥等。
一般情况下，施肥后两天停止浇水。
若空气对流太大，则视基质干湿度适当喷雾补水。
3.病虫害防治铁皮石斛的主要病害有软腐病、黑斑病、炭疽病等。
软腐病发病快，严重时整株腐烂解体呈湿腐状；黑斑病危害叶片，使叶片枯萎；石斛炭疽病危害叶片及肉质茎，受害叶片出现黑色或褐色病斑。
针对这些常见病害要加强棚内管理、注意通风透光、适当降低棚内湿度，及时施药并拔出病株带离。
铁皮石斛的主要虫害有蜗牛、菲盾蚧、红蜘蛛等。
其中，蜗牛是常见害虫，危害幼茎、嫩叶、花蕾和幼果。
可用诱杀、人工捕杀或撒石灰、茶麸防治；石斛菲盾蚧寄生于植株叶片边缘或背面吸食汁液，可将集中有菲盾蚧的老枝烧毁或用40％乐果乳油1 000 倍等喷雾杀灭；红蜘蛛可通过除周边环境的杂草或喷低毒杀螨剂800～1 000 倍防治。
铁皮石斛为珍贵药材，因此铁皮石斛的病虫害防治应尽可能以预防、物理防治和生物防治为主，不用或采用低毒农药；一旦发现有病虫害应及时采取相应措施，避免病虫害情的加重。
4.思考与展望有效地控制污染是植物离体培养成功的关键。