肉制品中发色剂亚硝酸盐含量的测定
肉制品中发色剂亚硝酸盐含量的测定
一、实验目的
1.掌握测定亚硝酸钠含量的盐酸萘乙二胺比色法的基本原理与操作方法；
2.了解可见光分光光度计的结构及使用方法；
3.了解肉制品中发色剂亚硝酸钠的含量。
二、实验原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化生成重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合生成紫红色的重氮染料(λmax =550nm )，其颜色深浅与亚硝酸盐含量成正比，故可以比色法测定吸光度并与标准比较定量。
反应式如下：
酸化：
重氮化：
偶合：
紫红色偶氮染料(λmax =540nm )
三、主要试剂和仪器
1.试剂—
①蛋白质沉淀剂：
乙酸锌溶液
亚铁氰化钾溶液
饱和硼砂溶液
②0.4％对氨基苯磺酸溶液
③0.2％盐酸萘乙二胺溶液
④亚硝酸钠标准溶液(200 μg/ml)
⑤亚硝酸钠标准使用液(5 μg/ml)
2.仪器—
①可见光分光度计，722型
②小型绞肉机 2HCl +NaNO 22NaCl +HNO 2HNO 2+SO 3H N H 2NaCl SO 3H N N C l +H 2O N H C H 2C H 2
N H 2偶合显色SO 3H N N C l +N H C H 2C H 2N H 2SO 3H N N
③具塞比色管，50ml
四、测定方法—
1.样品处理
①称取5.0g 经绞碎混匀的肉类样品(如火腿肠)，置于50ml 烧杯中，加入12.5ml 饱和硼砂溶液，用玻璃棒搅拌均匀。
②以70℃左右的蒸馏水(热水)约300ml 将样品全部洗入500ml 容量瓶中，置沸水浴中加热15min 。
③取出冷却至室温，然后一面转动一面加入5ml 亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5ml 乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，加蒸馏水定容至刻度，混匀，静置30min 。
④撇去上层脂肪，清液用滤纸过滤(弃去初始滤液25ml)，滤液备用。
2.标准曲线制备
①精确吸取NaNO 2标液(5μg/ml)0.0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0, 2.4ml(含NaNO 2 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12μg)分别置于7支50ml 比色管中。
②各加入2ml0.4％对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3~5min 。
③再各加入1ml0.2％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min 。
④用2cm 比色皿，在可见光分光度计中于波长540nm 处测吸光度A(以0号管调零)并记录。
⑤以亚硝酸钠量(μg)为横坐标，吸光度A 为纵坐标绘制A~c 标准曲线。
3.样品测定
吸取40ml 样品溶液于50ml 比色管中，同上加入显色剂并测定样液吸光度A ，在A~c 标准曲线上查出相应亚硝酸钠浓度c ，计算出肉制品中亚硝酸盐含量(mg/kg )。
五、计算
式中 c —从标准曲线上查得的样液中NaNO 2质量, μg V 0—样品处理液总体积，500 ml
V —测定用样液体积，40 ml
m —样品质量，g
注意：实验室里准备的是某一品牌的火腿肠。
但此实验同学们可以自带样品，譬如从家里带来的烟熏肉类，或者自己常吃的香肠之类的肉制品。
与此同时，请同学们注意安全，切勿在实验室内饮食。
()V V m c mg/kg NaNO 2010001000⨯⨯⨯=含量样品中。
肉制品中亚硝酸盐的测定
急性中毒原因多为： 急性中毒原因多为： 1.将亚硝酸盐误作食盐、面碱等使用和食用。2.投毒。 将亚硝酸盐误作食盐、 投毒。 将亚硝酸盐误作食盐 面碱等使用和食用。 投毒 3.食用了含有大量亚硝酸盐的蔬菜，尤其是不新鲜的 食用了含有大量亚硝酸盐的蔬菜， 食用了含有大量亚硝酸盐的蔬菜 绿叶蔬菜。刚腌不久的蔬菜(暴腌菜 暴腌菜)含有大量亚硝酸 绿叶蔬菜。刚腌不久的蔬菜 暴腌菜 含有大量亚硝酸 温度过高食盐用量不足10％，腌制时间短， ％，腌制时间短 盐，温度过高食盐用量不足 ％，腌制时间短，易造 成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般腌制10天 成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般腌制 天 后亚硝酸盐开始下降，腌后20天消失 天消失。 后亚硝酸盐开始下降，腌后 天消失。
5、0.2％盐酸萘乙二胺溶液：称取 克盐酸萘乙二 、 ％盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二 溶于100毫升水中，避光保存。 毫升水中， 胺，溶于 毫升水中 避光保存。 6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取 、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克于硅胶 克于硅胶 干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠 加水溶解移入500 小时的亚硝酸钠， 干燥器中干燥 小时的亚硝酸钠，加水溶解移入 毫升容量瓶中，并稀释至刻度。 毫升容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 200微克亚硝酸钠。 微克亚硝酸钠。 微克亚硝酸钠 7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠 、亚硝酸钠标准使用液：临用前， 标准溶液5.00毫升，置于 毫升， 毫升容量瓶中， 标准溶液 毫升 置于200毫升容量瓶中，加水稀 毫升容量瓶中 释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠 微克亚硝酸钠。 释至刻度，此溶液每毫升相当于 微克亚硝酸钠。 8、分光光度计。 、分光光度计。
盐酸萘乙二胺分光光度法测定肉制品中的亚硝酸盐
盐酸萘乙二胺分光光度法测定肉制品中的亚硝酸盐姓名：班级：食物科学学号：一目的要求1 通过实验强化对紫外—可见分光光度法定量分析原理的明白得；2 了解以紫外—可见分光光度法为基础的检测方式的成立思路；3 直观了解紫外—可见分光光度计的结构；4 把握紫外－可见吸收光谱的测定方式；5 把握利用标准曲线法进行定量分析的方式。
二实验原理亚硝酸盐在食物生产顶用作发色剂和防腐剂，许诺用于肉及肉制品的生产加工中，使得肉与肉制品呈现良好的色泽。
其呈色机理是，亚硝酸盐与肌肉中的乳酸作用产生亚硝酸，而亚硝酸不稳固易分解产生一氧化氮，然后一氧化氮与肌红蛋白结合产生红色的亚硝基肌红蛋白，使肉制品产生稳固的红色。
可是过量的亚硝酸盐能够引发高铁血红蛋白症，致使组织缺氧，还可使血管扩张、血压降低。
在酸性条件下，亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸通过重氮化反映定量生成重氮盐，该重氮盐可进一步与盐酸萘乙二胺通过偶联反映生成紫红色偶氮染料，在特定波优势产生较强吸收：；通过测定该偶氮染料在特定波长下的吸光度，利用朗伯-比尔定律（A=KLc）可确信样品中亚硝酸盐的质量浓度。
采纳标准曲线法进行定量分析时，可对亚硝酸盐标准溶液系列进行上述反映，通过测定该系列的吸光度，利用excel回归标准曲线，取得浓度和吸光度的关系，再将样品中亚硝酸盐测得的吸光值带到方程中算出其中亚硝酸盐的浓度。
三仪器与试剂1 仪器Cary Eclipse型紫外-可见分光光度计；BS 124S电子分析天平。
2 试剂亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]、乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]、硼砂 [Na2B4O7·10H2O]、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺，均为分析纯试剂。
四实验步骤1 试剂配制亚铁氰化钾溶液：称取106.0 g 亚铁氰化钾，溶解于水后稀释至1000mL。
乙酸锌溶液：称取220.0 g 乙酸锌，加30 mL冰乙酸溶于水，稀释至1000mL。
肉制品中亚硝酸盐的测定
所需仪器
分析天平 、水浴锅、比色管、比色皿、722分光光度计
三、操作步骤：
1.亚硝酸钠标准曲线的绘制
加入2mL 发色剂1 （对氨基 苯磺酸溶 液） 摇匀， 静置 3min 加入2mL 发色剂2 （盐酸萘 乙二胺） 摇匀 呈紫 红色
移取标准液至比 加水 色管（0.0mL 稀释 0.2mL 0.4mL 至 0.6mL 0.8mL 1.0mL 六支一组） 10mL
肉制品中亚硝酸盐含量的测定
1331214 张瀚文
一、实验原理：
亚硝酸盐在盐酸溶液中，与芳香族胺，如对氨 基苯磺酸 (H2N—C6H4一SO3H)发生重氮化反 应产生重氮盐，此重氮盐与偶合试剂，盐酸奈 乙二胺生成紫红色偶氮染料。此染料的颜色随 亚硝酸盐的浓度增长而加深，或称与样品中亚 硝酸盐的浓度成正比。因此，可采用分光光度 闭塞测定。
取10mL的滤 液于25mL的 比色管中
摇匀， 静置 3min
静置 用水稀释 至25mL标 10min 线，摇匀， 待测
重复操作测定吸 光度并记录，对 比标准曲线图， 并计算亚硝酸亚 的含量
四、计算
绘出标准曲线图
计算样品中亚硝酸盐的含量
静置 用水稀释 至25mL标 10min 线，摇匀， 待测
用分光光度 计540nm波 长处钠含量，作 出曲线
2、样品中亚硝酸盐的提取
2g切碎红 肠于50mL 烧杯
加入饱和 硼砂溶液 6.5mL 置沸水中水 浴，从水沸 时计时15min
玻棒 搅拌
每次20mL的 70℃左右的 水倒入烧杯 一边转动一边 滴加1.5mL硫 酸锌溶液，使 蛋白质沉淀
洗3、 4次
转入 100mL容 量瓶中
熏肉制品中亚硝酸盐含量的测定实验报告剖析
熏肉制品中亚硝酸盐含量的测定华南师范大学09化一摘要：肉制品是一类深受人民群众喜爱的食品，在其生产过程中多采用亚硝酸盐作为发色剂，它不仅能使肉制品保持良好的色泽，还能抑制肉毒梭状芽孢杆菌，保证肉制品的后熟风味。
但近年来由于亚硝酸盐摄入量过多引起的食物时中毒时有发生，且加硝处理过的肉制品中的亚硝酸盐可与胺类生成强致癌物亚硝胺，对人体健康产生潜在的危害。
本实验用紫外分光光度法测定熏肉制品中亚硝酸盐的含量。
关键字：熏肉制品亚硝酸盐紫外分光光度法标准曲线法盐酸-萘乙胺引言盐的性质:亚硝酸和硝酸的钠盐和钾盐常被加入用于腌肉的混合物中，用来产生和保持色泽、抑制微生物和产生特殊的风味。
此外，亚硝酸盐（150-200mg/kg）可抑制罐装碎肉和腌肉中的梭状芽孢杆菌。
亚硝酸盐的抗微生物作用为它使用于可能生成长肉毒梭状芽孢杆菌的腌肉中提供了正当的理由。
亚硝酸盐含量只要控制在安全范围内使用不会对人体造成危害。
肉制品中，亚硝酸盐含量不得超过30mg/kg，这是因为亚硝酸盐的中毒剂量是200毫克以上，而正常膳食中的亚硝酸盐即使是大量用亚硝酸盐做食品添加剂的肉类，也不会超过50毫克。
中毒后症状：亚硝酸盐是不会蓄积在体内的，膳食中绝大部分亚硝酸盐随尿排出，不会对人体造成危害。
过量亚硝酸盐进入人体，会氧化血液中的血红蛋白为高铁血红蛋白，后者无携氧功能，导致组织缺氧，引起肠原性青紫症，皮肤青小时后，3分钟至10紫是本病的特征，尤以口唇青紫最为普遍。
口服亚硝酸盐．可出现头晕、恶心、呕吐等症状。
严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭，甚至死亡。
亚硝酸盐作用机理NHHN22发色机理NCOOH(CH) HOOC(CH)2222（亚铁）当血红蛋白中的铁处于+2CHCH33NN部位时，6并且缺乏配体键合所需的第FeN N CH3HC它被称为肌红蛋白，是由珠蛋白和血红CH CH HC22CH素组成的络合物，位居血红蛋白中央的3)HO(O22图血红蛋白结构图1. 4吡咯环上的氮原子占据，个分别被6具有个配位部位，其中4第铁原子(d2sp3)5个配位部位与珠蛋白的组氨酸残基键合，剩余的第6个配位部位可与各种配基提供的电负性原子络合。
食品工程毕业论文-加速氧化比色法测定肉制品中亚硝酸盐含量
毕业论文论文题目：加速氧化比色法测定肉制品中亚硝酸盐含量所在学院：食品工程分院专业班级：学生：指导教师：二0一六年四月目录题目 (1)摘要及关键词 (1)1前言 (2)加速氧化比色法测定肉制品中亚硝酸盐含量1.1亚硝酸钠的性质与用途 (2)1.2 食物中亚硝酸盐的来源 (2)1.3中毒原理 (2)2 实验方法 (3)2.1化学发光法 (3)2.2催化动力学法 (3)2.3紫外分光光度法 (3)2.4荧光光度法 (3)2.5可见分光光度法 (3)3实验内容 (3)3.1实验原理 (3)3.2实验仪器与药品 (3)3.2.1 实验仪器 (3)3.2.2实验药品 (4)3.3样品处理 (4)3.4 结果与分析 (4)3.4.1最大吸收波长的测定 (4)3.4.2酸度对体系的影响 (5)3.4.3碘酸钾用量对体系的影响 (6)3.4.4甲基橙用量对体系的影响 (6)3.4.5 反应温度对体系的影响 (7)3.4.6 水浴加热时间对体系的影响 (7)3.4.8标准曲线测定 (8)参考文献................................................................................................. 错误！未定义书签。
致谢 (10)加速氧化比色法测定肉制品中亚硝酸盐含量摘要:探讨了加速氧化比色法的最适显色、反应条件。
结果表明：NaNO2浓度在0~1.8mg/L范围内遵守比耳定律，线性回归方程为y=0.123x+0.0029，相关系数R为0.999，相对标准偏差小于4.8%,加标回收率范围为94.27%-100.8%。
关键词：加速氧化比色法亚硝酸盐肉制品Accelerating oxidation colorimetric method to determine nitritecontent of meat productsAbstract：Accelerating oxidation colorimetric method is discussed that the optimal color and reaction conditions. The results show that the NaNO2 concentration in 0 ~ 1.8 mg/L range than abide by the laws of ear, linear regression equation for the 0.123 x + y = 0. 0029, the correlation coefficient R of 0. 9, 99, relative standard deviation less than 4.8%, standard addition recovery range of 94.27% ~ 94.27%.Keywords：Accelerating oxidation colorimetric method Nitrite meat1前言亚硝酸盐广泛存在于土壤，天然水和食品中[1]，是国家列入允许使用的食品添加剂、有发色、防腐双重功效。
熏肉制品中亚硝酸盐含量的测定实验报告
熏肉制品中亚硝酸盐含量的测定华南师范大学09化一摘要：肉制品是一类深受人民群众喜爱的食品，在其生产过程中多采用亚硝酸盐作为发色剂，它不仅能使肉制品保持良好的色泽，还能抑制肉毒梭状芽孢杆菌，保证肉制品的后熟风味。
但近年来由于亚硝酸盐摄入量过多引起的食物时中毒时有发生，且加硝处理过的肉制品中的亚硝酸盐可与胺类生成强致癌物亚硝胺，对人体健康产生潜在的危害。
本实验用紫外分光光度法测定熏肉制品中亚硝酸盐的含量。
关键字：熏肉制品亚硝酸盐紫外分光光度法标准曲线法盐酸-萘乙胺引言盐的性质:亚硝酸和硝酸的钠盐和钾盐常被加入用于腌肉的混合物中，用来产生和保持色泽、抑制微生物和产生特殊的风味。
此外，亚硝酸盐（150-200mg/kg）可抑制罐装碎肉和腌肉中的梭状芽孢杆菌。
亚硝酸盐的抗微生物作用为它使用于可能生成长肉毒梭状芽孢杆菌的腌肉中提供了正当的理由。
亚硝酸盐含量只要控制在安全范围内使用不会对人体造成危害。
肉制品中，亚硝酸盐含量不得超过30mg/kg，这是因为亚硝酸盐的中毒剂量是200毫克以上，而正常膳食中的亚硝酸盐即使是大量用亚硝酸盐做食品添加剂的肉类，也不会超过50毫克。
中毒后症状：亚硝酸盐是不会蓄积在体内的，膳食中绝大部分亚硝酸盐随尿排出，不会对人体造成危害。
过量亚硝酸盐进入人体，会氧化血液中的血红蛋白为高铁血红蛋白，后者无携氧功能，导致组织缺氧，引起肠原性青紫症，皮肤青紫是本病的特征，尤以口唇青紫最为普遍。
口服亚硝酸盐10分钟至3小时后，可出现头晕、恶心、呕吐等症状。
严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭，甚至死亡。
亚硝酸盐作用机理发色机理当血红蛋白中的铁处于+2（亚铁）并且缺乏配体键合所需的第6部位时，它被称为肌红蛋白，是由珠蛋白和血红素组成的络合物，位居血红蛋白中央的铁原子(d2sp3)具有6个配位部位，其中45个配位部位与珠蛋白的组氨酸残基键合，剩余的第6个配位部位可与各种配基提供的电负性原子络合。
亚硝酸盐为强氧化剂，进人人体后，可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，失去运氧的功能，导致组织缺氧。
实验十六肉制品中亚硝酸盐的测定
实验十六肉制品中亚硝酸盐的测定1、目的亚硝酸盐用于肉类制品做发色剂，肉制品由于使用亚硝酸盐而呈鲜红色，亚硝酸盐也是一种防腐剂，它可抑制微生物的繁殖。
但它作为一种食品添加剂，在食品中的使用有一定的限值，通过实验，掌握亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在肉制品中的使用情况。
2、原理肉制品中的亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮反应，生成重氮化合物，再与盐酸苯己二胺偶联成紫红色的偶氮染料，颜色的深浅与亚硝酸根含量呈正比关系，可直接比色测定。
3、实验材料与仪器3.1材料火腿（1）亚硝酸钠标准溶液（5ug/ml）：精确称取0.1000g亚硝酸钠（优级纯）以重蒸水定容到500ml。
再吸取此溶液25ml，以重蒸水定容到1000ml。
（2）发色试剂：0.4%对氨基苯磺酸溶液：溶解0.4g对氨基苯磺酸于20%盐酸中，并定容到100ml。
0.2%萘基盐酸二氨基乙烯：溶解0.2g萘基盐酸二氨基乙烯于100ml重蒸水中。
蛋白质沉淀剂：（3）硼砂饱和溶液：溶解25g硼砂于500ml热的重蒸水中（4）硫酸锌溶液：溶解150g硫酸锌于500ml重蒸水中3.2仪器721分光光度计，50ml容量瓶、烧杯、玻璃棒、500ml容量瓶、电炉、水浴锅。
4、操作步骤（1）亚硝酸钠标准曲线的绘制：用移液管分别吸取亚硝酸钠标准溶液（5ug/ml）0.2、0.4、0.60、0.8、1.0、1.0、2.0（各含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10g亚硝酸钠）于一组50ml容量瓶中，加入0.4%对氨基苯磺酸溶液2ml摇匀，静置3-5min后，用分光光度计在540nm处测定光密度，以蒸馏水为空白，测定。
（2）肉制品中亚硝酸盐的抽提：称取经搅碎混匀的试样2g于50ml烧杯中，加入硼砂饱和溶液10ml，用玻璃棒搅和，继以70℃左右的重蒸水约40ml将其冲入100ml的容量瓶中，置沸水浴中加热15分钟，取出，一面转动，一面滴加2.5ml硫酸锌溶液，摇匀，放置片刻，撇去上层脂肪，清液用滤纸过滤，滤液必须清澈，待用。
催化动力学光度法测定肉制品中痕量亚硝酸盐
催化动力学光度法测定肉制品中痕量亚硝酸盐摘要：在酸性介质中，高碘酸钠能氧化结晶紫，亚硝酸根离子能催化该反应。
据此建立了一个线性范围为4.0×10-3～3.5×10-1 mg/L，线性回归方程为△A=0.634 9C+0.102 8，相关系数为0.999 1，检测限为1.3×10-3 mg/L的亚硝酸根离子催化动力学分析方法，该方法用于检测肉制品中痕量亚硝酸盐的含量，结果十分满意。
关键词：催化动力学；亚硝酸盐；肉制品；测定Determination of Trace Nitrite in Product of Meat by Catalytic Kinetic SpectrophotometryAbstract：Sodium periodate can oxidize crystal violet in acidic media，and nitrite ion can catalyze this reaction，which provides a method for determining content of nitrite ion. The linear equation △A=0.634 9 C+0.102 8（R2=0.999 1）was achieved with the linear range of nitrite ion of 4.0×10-3～3.5×10-1 mg/L，and the limit of determination was 1.3×10-3 mg/L. The method was applied to the determination of trace nitrite ion in meat products with satisfactory results.Key words：catalytic kinetic；nitrite；meat product；determination亚硝酸盐是肉类食品加工中常用发色剂，肉制品由于使用亚硝酸盐呈鲜艳的亮红色。
分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析
分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析目的：探讨肉制品中亚硝酸盐的测试方法。
方法：采用分光光度法，对肉制品中亚硝酸盐进行测试。
结果：检出限其检测限为 3.68x10-3g/ml。
结论：测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一，分光光度法是其测定的行之有效的方法。
标签：分光光度法；亚硝酸盐；肉制品；分析亚硝酸盐(N023作为食品防腐剂和发色剂，能改善食品的色泽和口感，有发色、防腐双重功效，是国家列入允许使用的食品添加剂之一。
但亚硝酸盐能与胺类化合物作用生成致癌性很强的N-亚硝基化合物，长期摄入可导致消化道癌症，影响人体健康。
还可使血红蛋白变性，使其失去携氧功能。
尽管亚硝酸盐对人体不利，但目前无更好的物质所替代，所以仍在使用。
作为防范亚硝酸盐危害，向消费者提供安全食品的最后屏障，测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一。
目前关于亚硝酸盐测量较好的方法有导数紫外光度法，离子色谱紫外光度法，气体分子吸收光度法等。
利用重氮化反应测定NO，由于测定时多使用如Ot-萘胺和N-(1一萘基)乙二胺等毒性很大的试剂，且线性范围窄(0-0.2 mg／L)，所用试剂较复杂，不宜用于肉制品的测定；氧化还原光度法也因干扰因素较多不常被使用。
为此，尝试探索一种既不会对测定人员身体造成伤害，又保证较高灵敏度且适用于此样品的简易快速测定的方法，十分必要。
本法采用分光光度法来测定肉制品中亚硝酸盐含量，收到良好效果，现将结果报道如下：1材料与方法1.1材料试验仪器为WFZ800-D分光光度计，分析天平、组织捣碎机。
试验药剂为亚硝酸钠标准溶液(0.5g／L)、依文思蓝但vansBlue，Fluka试剂，进口分装)溶液0.1 mol／L、磷酸1.0mol／L、氯化钠溶液l mol／L、蒸馏水(二蒸液)。
试验药品均为分析纯。
1.2方法1.2.1样品制备①亚硝酸钠标准溶液(0.5g/L)：准确称取亚硝酸钠粉末0500 0 g于烧杯中，加少量水溶解后，转入1000 ml容量瓶中，用水稀释至刻度定容，瓶身用黑纸包裹。
实验七肉制品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定
实验八肉制品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定一、亚硝酸盐测定（一）原理 : 样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下与对氨基苯磺酸重氮化以后，再与 N-1- 萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。
（二）试剂1. 氯化铵缓冲液：在 1L 玻璃烧杯中，加入 500ml 水，准确加入 20ml 盐酸，混匀，准确加入 50ml 氨水，必要时用稀盐酸和稀氨水调试至 pH9.6-9.7 。
2. 硫酸锌溶液（ 0.42mol/L ）：称取 120g 硫酸锌用水溶解，并稀释至 1000ml 。
3. 氢氧化钠溶液（ 20g/L ） : 称取 20g 氢氧化钠用水溶解，稀释至 1000ml 。
4. 对氨基苯磺酸溶液：称取 1g 对氨基苯磺酸，溶于 70ml 水和 30ml 醋酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。
5. N-1- 萘基乙二胺溶液：称取 0.1gN-1- 萘基乙二胺，加 60% 醋酸溶解，并稀释至100ml ，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。
6. 显色剂：临用前将 N-1- 萘基乙二胺和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。
7. 亚硝酸钠标准溶液：准确称取 0.2500g 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠，加水溶解移入 500ml 容量瓶中，加 100ml 氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在 4 ℃避光保存，此溶液每亳升相当于 500ug 的亚硝酸钠，作准备液。
8. 亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液 1.0ml 置于 100ml 容量瓶中，加水稀至刻度，此溶液每毫升相当于 5.0ug 亚硝酸钠。
（三）仪器：小型绞肉机，匀浆器，分光光度计。
（四）操作方法1. 样品处理：称取约 10.0g （粮食取 5g ）经绞碎混匀的样品，置于匀浆器中，加 70ml 水和 12ml 的氢氧化钠溶液，混匀，用氢氧化钠溶液调样品 pH=8 ，定量转移至 250ml 容量瓶中，加 10ml 硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加 2-5ml 氢氧化钠，混匀，置 60 ℃水浴中加热 10min ，取出后冷至室温，加水至刻度，混匀。