马铃薯组织培养论文
马铃薯植物组培
马铃薯的块茎组织培养的研究生命科学学院生物工程132班组长：林伟平组员：温楚婷凌琦雯刘钰荧一,实验目的(1)以马铃薯的块茎为材料，研究经过器官分化或愈伤组织增殖与再分化途径，获得较多的试管苗，掌握植物快速繁殖的基本方法和过程。
(2)观察和分析不同糖类对外植体愈伤组织诱导，增殖和器官分化的影响。
二,实验原理在植物组织培养体系中，从外植体形成再生植株有不同的再分化途径，会受到培养基中不同浓度的糖的影响。
植物的快速无性繁殖是指以合适的外植体为起始材料，在无菌条件下，通过合适的培养技术，在有限的空间，短时间内快速生产大量植株的技术。
三,实验材料，试剂与器具(1)实验材料：马铃薯块茎(2)试剂：实验十一配制的各种培养基母液，蔗糖，葡萄糖，琼脂，蒸馏水，1mol/LHCl,1mol/LNaOH,HgCl或次氯酸钠，吐温20，75%乙醇或20g/L新洁尔灭，无菌水等。
(3)器具：高压灭菌锅，分析天平，酸度计，光照培养箱，微波炉，冰箱，培养架，果酱瓶，烧杯（1000mL,500mL,100mL,50mL）,移液管，量筒，不锈钢镊子，剪刀，解剖刀，脱脂棉，培养皿，称量纸，记号笔，标签纸，药匙，玻璃棒，洗耳球，洗瓶，电炉，酒精灯四,实验内容1,确定培养基配方，MS+2，4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+8g/L琼脂+不同浓度的葡萄糖/不同浓度的蔗糖（分别为1%，2%，3%，4%的葡萄糖或蔗糖）3,移液与溶化：将所需的各储存母液按顺序摆放好，将洁净的量筒，烧杯，移液管，玻璃棒，漏斗等放在指定的位置，准备好蒸馏水及瓶盖，包装纸等，取100mL小烧杯一只，用50mL 量筒量取大量元素，用各母液专用移液管分别吸取微量元素母液，铁盐母液，有机附加物母液，2，4-D母液，6-BA母液。
取1000ml烧杯一只，先用量筒取1000mL蒸馏水倒入烧杯中，用记号笔画好液位线，将蒸馏水倒出一半，准确称取8g琼脂倒入烧杯中，置于电炉煮沸，待琼脂完全溶化后，加入10g葡萄糖，充分溶解后，将准备好的含大量元素，微量元素，铁盐，有机附加物和植物生长调节物质的母液混合物倒入烧杯中，用蒸馏水将盛过母液混合物的小烧杯洗三次，一并倒入1000mL烧杯中，加热至沸腾，将烧杯远离火源，并加蒸馏水定容至设定的液位线。
马铃薯组培中污染原因及解决对策
马铃薯组培中污染原因及解决对策摘要：脱毒苗生产过程中，控制污染是提高马铃薯产业经济效益的有效途径之一，对马铃薯组培苗污染原因及解决对策进行研究，以降低污染，提高成活率，有效快捷地完成各品种脱毒任务，为我县马铃薯脱毒苗工厂化生产提供参考。
关键词：马铃薯；组培；污染；对策在马铃薯脱毒苗生产过程中我们发现，从材料选择、组织分离、脱毒苗培养等各个环节都要严格执行技术规范，否则极易造成污染：1 污染原因在马铃薯组织培养中，造成污染的原因有很多：由于操作不当、外植体消毒不充分、培养基及工具消毒不过关、无菌操作室消毒时间过短、无菌操作程序不严格等，这些都可能是造成马铃薯组织培养中组培苗污染的主要原因。
1.1 细菌性污染如果培养基在使用前发现，培养基长有细菌菌斑，有的是培养基高压灭菌不彻底引起的；部分是培养瓶口处理不净，带有抗逆性很强的杂菌引起；在植入茎尖组织后以后，组织周围有细菌污染，就有可能是操作工具消毒不到位或是操作失误引发的，部分是马铃薯组织自身带菌引起的；也有部分是在植入茎尖组织过程中由于交叉感染造成的。
1.2 真菌性污染若在植入茎尖组织前，大量真菌污染出现在培养基表面，是由于存放培养基的环境中真菌孢子浓度过大或是培养基瓶口密封不严造成的；如果在培养基里面发现大量真菌污染，极有可能是配制培养基的母液受到了严重的真菌污染。
植入茎尖组织后真菌污染出现在培养基表面，并且污染部位不一样，开始是由于无菌操作台消毒不彻底或是接种室的真菌孢子含量过高；如果是在植入茎尖组织后发现真菌污染，主要是马铃薯组织培养培养材料本身就携带有内生菌或是因为培养瓶封口不严；在组织培养过程中在马铃薯组织周围发现真菌污染，是因为马铃薯组织材料自身带有真菌，只是数量太少，进行组织分离操作时肉眼无法识别，接苗以后，由于条件适宜，真菌继续生长造成真菌污染；如果真菌只是毫无规律地零星分布在培养基中，主要原因是接种用具灭菌不彻底，或者是由于培养基灭菌不到位等原因造成的。
马铃薯组织培养综述
马铃薯组织培养技术综述摘要：马铃薯是我国重要粮食作物之一，其组织培养技术日益成熟，目前已大量应用于生产实践和科学研究。
掌握马铃薯组织培养的基本原理与方法，了解影响培养结果的因素，有利于完善培养技术，解决马铃薯组织培养过程中的常见问题如污染、褐变和玻璃化等。
目前国内专述马铃薯组织培养技术的文献不多，本文参考相关研究，就上述方面对马铃薯组织培养技术进行综述。
关键词：马铃薯；组织培养；影响因素；常见问题。
1 前言植物组织培养是指从植物体内取出组织或细胞，在离体的条件下模拟体内的生理环境，使其生存、生长、繁殖，近年来在生产实践上显示出广泛的应用前景。
马铃薯属茄科茄属植物，是粮菜兼用作物，产量仅次于水稻、小麦、玉米，居世界第四位，我国是种植面积最大的国家【1】。
马铃薯生产中多采用块茎进行无性繁殖，在其繁殖过程中，易受病毒和细菌侵染导致产量下降，经数代积累可使种性退化【2】。
通过植物组织培养技术，可以生产马铃薯的脱毒苗，缩短其生长周期，进行批量快速繁殖。
除了满足生产实践的需要，在科学研究上马铃薯是细胞培养和农杆菌介导转化的模式植物之一。
因此，马铃薯组织培养是植物组织培养技术的重要应用领域。
2 植物组织培养概述植物细胞具有全能性。
细胞全能性是指植物体任何一个细胞都携带者一套发育成完整植株的全部遗传信息，在离体培养情况下，这些信息可以表达产生出完整的植株。
根据这一理论，植物组织培养技术在20世纪初建立起来，至今发展已比较成熟，而且随着研究的深入不断涌现新的技术。
植物组织培养需要经过脱分化和再分化的过程。
分化了的植物根、茎、叶细胞，通过脱分化培养可以产生愈伤组织。
愈伤组织是一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团。
愈伤组织经过进一步的分化培养，提供不同的营养和激素成分，又可再生出完整的小植株。
植物组织培养常见应用领域包括脱毒和快速繁殖、育种研究、低温储存及种质库的建立、药物及其他生物制剂的工业化生产等【3】。
3 马铃薯组织培养技术3.1基本方法3.1.1表面灭菌由于在培养基上，真菌和细菌的生长远远快于植物试材，导致过盛生长而杀死植株。
马铃薯组织培养简化脱毒技术
马铃薯组织培养简化脱毒技术
马铃薯是我国重要的蔬菜作物之一，具有高蛋白、高淀粉、高营养价值，是人们必不
可少的食品之一。
然而，在种植和生产过程中，马铃薯会遭受各种病害和虫害的侵害，如
果不进行科学有效的防治，将会严重影响马铃薯的生产和收成。
其中，病毒病是马铃薯种
植中主要的一种病害，如果不及时控制，将对马铃薯产生较大的危害。
为了解决这个问题，科学家们开发了一种名为“组织培养简化脱毒技术”的方法，该
技术可以有效地使马铃薯保持无病毒状态，同时提高其种植质量和产量。
组织培养简化脱毒技术是一种采用组织培养和简化脱毒技术相结合的马铃薯繁殖方法。
该方法要先从健康的母株中取出组织，再将其在营养剂和生长抑制剂的作用下进行培养，
使其形成小植株，再进行脱毒处理，最后将其移栽到田间进行种植，达到规模化繁殖的目的。
这种技术的主要优点在于其快速、高效、节约的特点。
与传统的马铃薯种植方法相比，组织培养简化脱毒技术可以迅速获得种植质量稳定、无病毒、高产的马铃薯，并且可以大
大降低种植成本。
但是，组织培养简化脱毒技术也具有一定的局限性。
首先，它需要高水平的技术人员
操作，普通农民应用难度较大；其次，它的操作过程需要比较严格的环境和设备控制，对
研究条件提出了较高的要求；再者，该技术的成功率也与所选用的材料有关，在选材上也
需要有比较严格的要求。
总之，组织培养简化脱毒技术是一种非常有效的马铃薯繁殖方法。
它可以为农民提供
更为优质的马铃薯种苗，并且可以大大提高马铃薯的种植效益，但是该技术在操作和选材
上都存在一定的难度，需要科学家们进一步研究和优化。
不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响
不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响马铃薯是世界上最重要的食用作物之一，其栽培面积和产量在全球范围内都居于前列。
在马铃薯的种植中，组培技术可以大大提高其繁殖速度和生产效率，因此备受农业科研和生产部门的重视。
而在组培技术中，培养基浓度的选择对植物生长发育也有一定的影响。
本文旨在探讨不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响，为马铃薯组培生产提供科学依据和技术指导。
1.马铃薯组培苗生长特点马铃薯组培苗是通过离体培养技术制备的组培苗，其具有生长迅速、无土栽培、病虫害少等优点。
在组培苗培养过程中，培养基的成分和浓度对组培苗的生长发育有重要影响。
2.培养基浓度对组培苗生长的影响培养基中的植物激素、无机盐和碳源等成分的浓度比例，直接影响着组培苗的生长发育。
一般来说，适当的植物激素浓度和无机盐浓度能够促进组培苗的生长，而过高或过低的浓度则会抑制组培苗的正常生长发育。
科学合理地调配培养基的成分和浓度是保证组培苗生长健康的关键。
不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响主要表现在组培苗的株高、茎粗、叶片数目、根系生长和鲜重等方面。
一般来说，低浓度的培养基有利于组培苗的长势生长，但如果浓度过低，也会导致组培苗生长缓慢，叶片发黄、畸形等现象。
而高浓度的培养基则会加快组培苗的生长速度，但过高的浓度也可能引起植株内生理代谢紊乱，导致生长势受到抑制。
4.培养基浓度比久的优化在马铃薯组培苗生产中，科学合理地选择培养基的成分和浓度比例是非常重要的。
根据马铃薯不同生长阶段的需求，可以对培养基浓度进行优化调整，以促进组培苗的正常生长发育。
在实际生产中，还可以通过控制培养基中植物激素的浓度比例或添加一些生长调节剂等手段来调控组培苗的生长。
二、结论不同浓度比久对马铃薯组培苗生长具有显著的影响。
在实际生产中，我们需要根据马铃薯组培苗的生长特点和营养需求，科学合理地选择培养基的成分和浓度比例，以确保马铃薯组培苗的健康生长。
还需要不断开展相关研究，深入探讨培养基浓度比久对组培苗生长的影响机制，为马铃薯组培生产提供更多的科学依据和技术支持。
马铃薯种质资源组培苗耐盐性评价与耐盐种质筛选
马铃薯种质资源组培苗耐盐性评价与耐盐种质筛选随着气候变化和土地资源的不断减少，盐碱地已经成为了世界上一种广泛存在的耕地贫瘠类型。
而作为重要的农作物之一的马铃薯，如何在盐碱地上生长和生产出高产量的作物，是一个亟待解决的问题。
马铃薯对盐碱地的适应性很强，在盐碱地上种植马铃薯是一种有效的治理盐碱地的方式之一。
研究马铃薯耐盐性的种质资源，培育出耐盐性强的马铃薯品种，对于解决盐碱地的开发利用具有重要的意义。
随着生物技术的不断发展和进步，组织培养技术已成为改良作物品种和培育新品种的一种重要途径。
组织培养技术可以加速繁育速度，提高品种的选择性和生成新的遗传变异体。
通过组织培养技术，对马铃薯的耐盐性进行评价和筛选，有望加快耐盐性强的优良种质资源的获取和利用。
本文将对马铃薯种质资源组织培养苗的耐盐性评价及耐盐性种质筛选进行综述，以期为马铃薯耐盐性种质资源的有效利用和耐盐性品种的培育提供一定的参考和借鉴。
1.1马铃薯种质资源的筛选在进行马铃薯种质资源的耐盐性评价之前，首先需要进行种质资源的筛选。
马铃薯种质资源具有种类繁多、地理分布广泛和遗传多样性等特点，因此种质资源的筛选显得尤为重要。
一般来说，可以通过生理生化指标、生长发育指标和产量等指标进行初步的筛选。
对于生理生化指标的初步筛选可以通过盐碱胁迫下的测定，包括叶片电解质渗漏率、膜脂过氧化物含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性等指标。
对于生长发育指标的初步筛选可以通过叶片相对含水量、叶绿素含量、叶面积指数等指标进行初步筛选。
通过这些指标的初步筛选，可以初步确定具有一定耐盐性的种质资源，从而为后续的耐盐性评价奠定基础。
（1）盐胁迫处理马铃薯种质资源耐盐性评价的主要方法之一是盐胁迫处理。
盐胁迫处理是指将不同种质资源分别施加不同浓度的盐溶液，使得植株在盐胁迫下生长。
通过观察植株在盐胁迫下的生理生化变化和生长状况，可以初步评价种质资源的耐盐性。
（2）形态指标观察形态指标包括株高、株冠大小、叶片颜色、根系发育等指标。
马铃薯大西洋品种的茎尖组织培养技术
马铃薯大西洋品种的茎尖组织培养技术摘要马铃薯品种大西洋是国内外广泛种植的品种，青海省在大西洋品种的组织培养中试管苗出现了生长势减弱、茎叶嫩黄、繁殖系数减小退化等问题，通过对其茎尖剥离、病毒检测及组织培养管理技术总结，为解决生产中的实际问题、生产优质的脱毒组培苗提供参考依据。
关键词马铃薯；茎尖剥离；组织培养马铃薯品种大西洋是目前国内外广泛种植的炸片型、加工型品种，但该品种易感晚疫病，适合在我国北方晚疫病发生较轻的地区种植或繁种。
青海省由于气候寒冷、隔离条件好、晚疫病和病毒病发生危害轻等优势已成为马铃薯种薯繁育的理想基地。
近年来，随着脱毒技术和组织培养技术的应用，青海种植大西洋种薯的规模在不断扩大，但是在大西洋组培快繁过程中，随着继代次数的增加、继代时间的延长和外源生长延缓剂在植物体内的累积，其试管苗也发生了严重退化，表现为苗的生长势减弱、茎叶嫩黄、繁殖系数减小，影响移栽成活率和降低微型薯的生产潜力，甚至产生变异苗，因此每过一段时间就要对其进行茎尖剥离，以达到脱毒复壮及保证脱毒种薯质量的目的。
本文对马铃薯大西洋品种的脱毒及组培管理技术进行总结，以期为生产优质脱毒苗，保证种薯源头质量提供参考依据。
1茎尖剥离1.1材料的选择和处理在大田选择生长健壮、没有病虫危害且大西洋品种特性表现典型的植株，小心挖出其薯块后进行常规窖藏；待薯块通过自然休眠期后置于网袋中，在室内进行自然光催芽或用5~8mg/kg的赤霉素浸种0.5~1.0h进行催芽处理；待芽长到4~5cm未充分展开叶时，将芽从薯块取下，剥去外面多层的叶片并将底部剪去2cm左右后进行消毒处理。
1.2外植体消毒及茎尖剥离剪取的芽用纱布包好放入烧杯中，用自来水流水冲洗20~30min去除表面杂质，在无菌条件下先用无水乙醇浸润3s左右去除表面张力，放入盛有0.1%升汞的无菌培养瓶中灭菌6~8min，期间轻轻晃动培养瓶使灭菌完全，然后用无菌水冲洗4次。
解剖镜下在灭过菌的培养皿中进行茎尖剥离，小心剥取带1~2个叶原基的茎尖0.1~0.3mm，迅速接种到分化培养基中，防止茎尖风干死亡。
马铃薯脱毒苗组培快繁技术
马铃薯脱毒苗组培快繁技术(酒泉职业技术学院秦晓萍甘肃?酒泉 730500) 摘要本论文主要从培养基的制作、脱毒苗的制取、继代培养、培养条件、瓶装苗污染控制等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁技术，为马铃薯快繁生产提供参考。
关键词马铃薯脱毒苗快繁技术马铃薯是我国主要的粮食、蔬菜及工业原料作物，其国民经济意义十分重要，在保证粮食安全生产方面发挥了重大作用。
随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加。
但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，从而导致马铃薯种性变劣，长势逐步减弱，产量逐年降低。
马铃薯快繁是在短时间内利用组织培养技术获得大量高质量的试管苗，应用种薯脱毒技术，[1]培养无毒组培苗，在提高产量、保证品质、耐贮藏方面体现出了独特的优势。
1 培养基的制作1.1培养基的配方利用提供的母液和材料MS+0.01mg/L NAA+3%蔗糖+0.56%的琼脂，PH为5.8，配置培养基1000ml,并均匀分装到24个培养瓶，进行灭菌。
母液浓度/扩大倍数配置体积(ml) 母液吸取量(ml) 称取量(g) 大量元素 20 50 —钙盐母液 20 50 —磷酸盐溶液 20 50 —铁盐 100 10 —微量元素 100 10 — 1000有机物 100 10 —萘乙酸(NAA) 0.1mg/L 0.1 —蔗糖 3% — 30琼脂粉 0.56% — 5.6 1.2 培养基的配制1.2.1仪器、用具与试剂(1)仪器:PH试纸、电磁炉、高压灭菌锅(2)用具:移液抢、移液管、量筒、容量瓶、培养瓶、玻璃棒、洗瓶、烧杯、搪瓷缸、镊子、钥匙、称量纸、胶头滴管、抹布、卷纸、标签纸、(3)试剂:配置MS培养基的各种母液、激素母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、0.1mol/LHCL、0.1mol/LNaOH1.2.2 培养基制作(1)准备工作将配置好的MS培养基母液从冰箱中取出，检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。
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生命科学技术学院植物组织培养与繁殖技术课程论文论文题目马铃薯的组织培养学生姓名学号专业生物科学授课教师成绩二〇一二年月日0 引言马铃薯茎尖组织脱毒培养,愈伤组织解除分化形成新个体时,体细胞有丝分裂的异染色质延迟复制行为较正常活体植株更严重,后代变异较自然群体变异高出500倍,若在培养过程添加辐射和化学诱变试剂变异率会更高。
因此,组织培养环境不只是现代生物技术辅助育种的一个重要条件,更是诱变育种的一个有效途径,对于以营养体繁殖的马铃薯作物效果更好。
本文介绍了马铃薯茎尖培养的意义和方法，综述了植物激素在马铃薯生长中的作用。
1马铃薯组织培养的意义1.1马铃薯的生态习性和种类马铃薯生长对土壤的适应性很强，但对气候要求凉、冷、燥，在湿热地区虽然也能生长，不过一代以后品种就会演化，需要经常从寒冷地区引进新的种。
种薯在土温5～8℃的条件下即可萌发生长，最适温度为15～20℃。
适于植株茎叶生长和开花的气温为16～22℃。
夜间最适于块茎形成的气温为10～13℃（土温16～18℃），高于20℃时则形成缓慢。
出土和幼苗期在气温降至-2℃即遭冻害。
开花和块茎形成期为全生育期中需水量最大的时期。
马铃薯在原产地就有几百个品种，在世界各地又不断地培养新品种，目前全世界有几千个品种，有含淀粉比例较高，适合作为主食的，也有适合作为蔬菜食用的。
人们根据不同的用途培养出很多新品种，花色有白色、红色、紫色等品种，地下块茎有圆形、卵形和椭圆形，其皮色有红色、黄色、白色和紫色的不同品种。
一般用块茎上的“芽眼”切下播种，如果用种子种植，很快就会产生变异，因此非常容易出现新品种。
1.2马铃薯的市场效益分析马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物。
就单位面积出产的干物质而言，它高于小麦、大麦和玉米，就单位面积出产的蛋白质而言，分别为小麦、水稻和玉米的2.02、1.33和1.20倍。
目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右，鲜薯年总产量5500万吨，居世界第一位。
种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。
但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢，基本上以鲜食为主，少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉，深加工产品很少，而且加工生产规模小，工艺落后。
20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期，然而产品与国外同类产品相比，无论是在色泽、口味、品质，还是在包装上均存在一定差距[1]。
马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低，所含的维生素C是苹果的10倍，B族维生素是苹果的4倍，各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等，土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病[2]。
近年来随着人民群众生活水平的日益提高，我国的食品结构出现了一些新的变化，中西方的饮食文化开始相互渗透和融合，马铃薯加工食品在我国同样备受欢迎。
随着麦当劳、肯德基等洋快餐在我国落户，其中必有一款的炸薯条、薯泥等马铃薯食品很受国内中层消费者的喜爱，尤其是儿童对其情有独钟，成为未来我国马铃薯食品潜在的庞大的消费群体。
2 马铃薯茎尖的组织培养植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌的条件下，将离体的植物（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。
由于培养物是脱离植物母体，在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离体培养。
在有些情况下，再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞[3]。
植物组织培养是20世纪初发展起来的一门新兴技术,随着这项技术的日益完善,其应用也越来越广泛,可用于种苗快繁、植物脱毒、植物育种、种质资源保存以及次生代谢物提取等方面。
尤其植物快繁和脱毒是应用最多和最广的方面,而且许多花卉苗木的试管育苗已进入了商品化生产[4]。
脱毒株苗具有无杂菌、适应能力较强、繁育较快、质量优、抗性好、分蘖性强、繁殖系数高、大批量生产、周年供应、便于运输等优点，已得到有关专家的鉴定及高度评价和种植试验区、种植产区果农的认可。
例如脱毒马铃薯、脱毒红薯、脱毒生姜、脱毒大蒜、脱毒草莓、脱毒苗木、脱毒花卉等等，已成为现代农民致富的新宠[5]。
通过茎尖分生组织培养脱除病毒自上世纪70年代以来在马铃薯上推广应用，种薯生产技术随着生物技术的发展不断改进[6]。
利用马铃薯茎尖组织培养结合病毒检测,进行马铃薯脱毒的组织培养技术,可大批量地进行种薯繁殖,又可防止亲代植株的病毒传染给子代[7]。
作为马铃薯生产第一大国,中国的马铃薯单产低于世界平均水平。
种薯问题是限制其单产提高的主要因素,要提高种薯质量,茎尖分生组织培养脱毒、组培苗离体快繁和(或)试管薯生产方面的研究是其技术基础,植物生长物质在上述三方面的应用是研究方向之一[8]。
马铃薯薯块及芽外植体消毒灭菌后在MS基本培养基中培养效果最好[9]。
黄萍等[10]认为在马铃薯初代培养基(作茎尖培养用)和增殖培养基(作试管苗快速繁殖用)中分别加入25μg/ml链霉素、四环素和苯甲酸钠3种抗污染剂,结果发现:苯甲酸钠在初代培养基中抑菌效果最好;而在增殖培养基中以四环素的抑菌效果最佳。
植物组织中普遍存在内生菌,当植物组织进行离体培养时,这些内生菌就会产生污染[11]。
为了消除植物组织培养过程中出现的真菌和细菌污染 ,而又不杀伤植物组织 ,采用多菌灵和青霉素混合溶液浸泡污染的组培苗茎段的结果发现 ,多菌灵对真菌有杀灭作用 ,对细菌没有明显作用 ;青霉素只对细菌有抑制作用 ,继代后细菌污染照常存在 ;而对污染的组培苗采用 75 %乙醇和 0 .1% Hg Cl2 处理可彻底杀灭真菌和细菌[12]。
3 植物激素对马铃薯生长的影响试验以品种为主区,激素处理为副区进行裂区设计,研究了赤霉素(GA3)与茉莉酸甲酯(MeJA)对雾培马铃薯内源激素与生长发育的影响。
结果表明:外源GA3处理增加了3个马铃薯品种叶片内源IAA和JA的含量,降低了中晚熟品种高原7号的内源ABA含量。
外源MeJA 对马铃薯块茎均有一定诱导作用,但结合GA3处理其诱导结薯的能力会减弱[13]。
蒙美莲等[10]发现马铃薯块茎形成期,脱落酸含量显著增加,赤霉素含量则显著降低,赤霉素与脱落酸比值下降到一定水平是块茎开始形成的重要条件。
外加脱落酸喷施叶面,使块茎形成提早,但结薯数并未增加;外加赤霉素喷施叶面,使植株细高,匍匐茎细长,块茎形成显著延迟,块茎数显著减少,这一结果进一步证明了脱落酸和赤霉素在块茎形成中的作用。
张志军等[14]研究表明外源添加赤霉素(GA,Gibberellins)能促进马铃薯茎、叶和匍匐茎的生长,而抑制块茎的形成.添加GA生物合成抑制剂可降低植株体内GA水平和活性,促进块茎形成.石瑛等[15]在诱导结薯的过程中给以不同浓度的香豆素处理,研究香豆素对试管微型薯诱导的影响。
结果表明,在诱导结薯的培养基中,添加香豆素处理的浓度为30mg/L时,获得的微型薯块茎较大且大薯率较高。
陈善娜等[16]在加入100mg/l香豆素时,试管结薯的数量与使用500mg/l矮壮素效果相近似。
使用50mg/l人参寡糖素或10mg/l黑节草寡糖素时,试管结薯的数量明显超过或略超过用500mg/l矮壮素的效果。
IAA与GA互作对马铃薯试管苗生长有积极的促进作用,能够明显提高试管苗的高度,最大增幅可达90.3%,而IAA与BAP互作对试管苗生长有明显抑制作用。
IAA与GA互作对试管苗根的形成和生长影响不明显。
BAP对试管薯形成有重要作用,而GA与BAP互作能进一步促进试管薯生长,处理4(IAA+GA十BAP)比处理3(IAA+BAP)的试管薯鲜重和直径分别增加163.8%和46.4%[17]。
低浓度的2,4-D有利于红色愈伤组织的花色苷积累,高浓度的2,4-D促进其生长而不利于花色苷的积累;高浓度的6-BA能促进红色愈伤组织中花色苷的积累并诱导白色愈伤组织花色苷的合成,但抑制其生长;卡那霉素能使白色愈伤组织变红并积累花色苷,高浓度的卡那霉素严重抑制愈伤组织的生长并最终变褐死亡;提高蔗糖浓度能促进愈伤组织花色苷的产生和积累,但超过70g/L时抑制生长[18]。
4 马铃薯组织培养的具体实验方案4.1外植体培养从已催出芽（芽长一般2—4cm）的干净健康马铃薯块茎上掰下芽，用自来水冲洗干净，放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟，在超净工作台上消毒完后，放入无菌水中浸泡6次，每次5分钟，然后接种到MS＋6－BA1.5mg/L（毫克/升）＋GA30.5mg/L＋IBA0.5mg/L ＋琼脂8g/L＋蔗糖30g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种1—5个外植体。
4.2茎尖剥离及初代培养外植体培养20天后，在超净工作台上解剖镜下用解剖针将生长点0.1——0.5mm部分剥离出来，转接到MS＋肌醇100mg/L+6－BA1.5mg/L＋GA30.5mg/L＋泛酸钙1.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种4—5个生长点。
光照保持3000—6000Lux（勒克斯）左右，每天照光13—16小时，温度控制在23℃，经2—6个月左右培养诱导，其间转接2——3次，生长点即可长成新的小植株。
经病毒检测不带病毒的株系就可进行扩繁，未脱毒的株系淘汰。
4.3试管苗扩繁扩繁前的准备1扩繁培养基的制备。
扩繁培养基以MS培养基为扩繁基本培养基，外加6—BA0.5mg/L+NAA0.5－1.5mg/L+蔗糖30g/L＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L，pH值为5.8。
2把接种用具在超净工作台上用紫外线灯消毒20—30分钟，关掉紫外线灯，打开日光灯和吹风机。
3用肥皂把手洗干净并擦干，再用75%酒精消毒，待手上酒精干后，点上酒精灯，把剪子、镊子培养皿等所需用具在酒精灯上进行消毒。
接种扩繁用75%酒精喷待接的试管苗和制备好待用的扩繁培养基表面，将已脱毒株系按每苗留1—2片叶为一个茎段剪下，正向插入扩繁培养基（即MS＋6－BA0.5mg/L＋NAA0.5－1.5mg/L ＋蔗糖30g/L＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L，PH值为5.8的培养基）上。
一般每个培养瓶接种15个茎段，在温度25—27℃,光照2000—3000Lux，每天15—16小时条件下培养3—4天即可生根长芽。
30天后可按1：7瓶进行扩繁一次，即原来每瓶15苗扩繁一次可达7瓶105苗，以后每隔30天扩繁1次，繁殖到目标苗数后，再经2—3个月培养即可扦插到原原种繁殖网室，进行原原种繁殖[19]。
5 结论与讨论5.1 马铃薯组织培养的前景展望组织培养是一种打破传统的新型繁衍后代方法，能最大效率地利用空间，使高等作物生长发育的微生物化，田间马铃薯育种材料圃种植 45000株/hm2，在组织培养室每 4cm2培养1株 ,且能多层架放置培养瓶, 加上繁殖周期短, 变异母体材料扩大了500-2000倍。