马铃薯组织培养
马铃薯组织培养
继代和生根培
继代和生根培养成功的马铃薯脱毒苗，经 ELISA （试剂盒）鉴定后（试管苗应每 3月检测一次，每年 4 次） 鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在 （或平放）固体培养基上，每瓶可插 20 个左右茎段，经 20d左右发育成 5~10cm 高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖 5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止 液体培养。 滨 州 职 业 学 院培养基,MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙 10,3%蔗糖,20-25度,30004000LX,14-16小时光照，每 3周继代一次，单芽茎段约 1 厘米，可插也可平放，原则试管苗用 2年 — 3年。 滨 州 职 业 学 院滨 州 职 业 学 院
三、马铃薯组织培养参考资料
取材和培养一般多采用在室内发芽，芽经热处理 （ 38℃ ） 2周。然后取顶芽或侧芽 1厘米的茎尖，在自 来水下冲洗干净，无菌条件下先用 70％的酒精浸润组织 15-20秒， 再用 2％的次氯酸钠溶液浸泡 4--5min， 然后用无菌水冲洗 3次。把消毒好的芽放在解剖镜下仔细 剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留 1-2个 叶原基,0.2— 0.3毫米，随即接种于 MS液体培养基上，每升加 0.1mgNAA, 0.2mgGA3,0.5BA,2%蔗糖,p H 值 5.8。培养条件,21~25℃,20003000 lx,12h/d。 2-3周愈伤,4-5周绿点,3--6月长成 2-3厘米小芽，越慢越好， 出芽很快的扔掉。
马铃薯的组织培养
生物工程学院 生物技术及应用12043班 李江涛
目录
一、马铃薯的简介 二、马铃薯的生物学习性 三、马铃薯组织培养参考资料 四、我的设计方案
马铃薯组织培养
马铃薯组织培养1、繁殖瓶苗将待繁脱毒苗在无菌条件下每叶节切一段，接种在仅含大量元素、微量元素和铁盐的无激素M S固体或液体（可用纸桥）培养基的组培瓶中，置培养室内培养。
培养条件为：光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培养温度（25±2）℃，空气相对湿度50%-60%，自然通风。
叶节段接种30-50d后长成3-5片叶的幼苗。
记录苗芽发生时间，生长状况，污染率。
再按照上述方法重复进行扩繁，直到达到要求繁殖数量为止。
2、繁殖微型薯将上述具有3-5片叶幼苗，加入液体培养基（MS+BA2-10mg/L)或（MS+BA2-10mg/L+IAA1m g/L+CCC100-500mg/L+糖80-100g/L),放入培养室，遮光全黑暗或光照时数少于8h/d，温度（20±2）℃，空气相对湿度50%-60%，自然通风。
经40-70d后，在植株叶腋处长出微型薯。
记录微型薯发生时间，生长状况，污染率。
马铃薯组织培养及原原种生产技术摘要：本文作者根据自己多年的工作经验，详细地介绍了马铃薯组织培养方法和原原种生产技术。
关键词：马铃薯组织培养原原种生产技术病毒和类病毒的累积性感染是引起马铃薯种性退化的重要因素，而通过组织培养获取无病毒种薯来恢复种性的方法已被马铃薯生产地区广泛采用。
现将马铃薯组织培养方法和原原种生产技术介绍如下：1 马铃薯组织培养1.1外植体培养从已催出芽（芽长一般2—4cm）的干净健康马铃薯块茎上掰下芽，用自来水冲洗干净，放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟，在超净工作台上消毒完后，放入无菌水中浸泡6次，每次5分钟，然后接种到MS＋6－BA1.5mg/L （毫克/升）＋GA30.5mg/L＋IBA0.5mg/L＋琼脂8g/L＋蔗糖30g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种1—5个外植体。
1.2茎尖剥离及初代培养外植体培养20天后，在超净工作台上解剖镜下用解剖针将生长点0.1——0. 5mm部分剥离出来，转接到MS＋肌醇100mg/L+6－BA1.5mg/L＋GA30.5mg/L＋泛酸钙1.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种4—5个生长点。
马铃薯组织培养
马铃薯组织培养前言：马铃薯组织培养的意义 .马铃薯（Solanum tuberosum）属茄科茄属植物! 常见的育种途径有: 常规二倍体杂交法,四倍体水平的品种间杂交法,远缘种间杂交法 ,2n配子利用法。
这些途径都是通过有性生殖产生马铃薯变异体，通过系谱，回交，轮回选择的方法，需经过6-8代选出附合目标性状的新个体。
进入 20世纪90年代后，随着生物技术的深入发展，人类对植物细胞遗传行为，基因表达传递行为达到分子水平深入了解，作物育种工作者开始引入了除单纯户外有性杂交育种之外，又一育种方法室内体细胞无性系变异育种法，其中组织培养（tissue culture）诱导再生植株的突变就是最常用的一种。
当马铃薯外植体（茎尖脱毒分生组织）培养时，由于组培环境引发了细胞异染色质 DNA延迟复制, 产生了较田间自然突变率高出500倍的大量变异。
这一现象已越来越被马铃薯育种工作者所认可，并成为一条马铃薯育种的有效途径。
现从组织培养及组织培养在马铃薯育种上的发展历史，研究意义，研究方式以及未来展望等方面逐一论述。
马铃薯的市场效益（为什么选马铃薯作试验材料）马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物就单位面积出产的干物质而言，它高于小麦、大麦和玉米，就单位面积出产的蛋白质而言，分别为小麦、水稻和玉米的2.02，1.33和1.20倍。
目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右，鲜薯年总产量5 500万吨，居世界第一位。
种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。
但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢，基本上以鲜食为主，少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉，深加工产品很少，而且加工生产规模小，工艺落后。
20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期然而产品与外同类产品相比，无论是在色泽、口味、品质，还是在包装上均存在一定差距。
马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低，所含的维生素C是苹果的10倍，B族维生素是苹果的4倍，各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等，土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病。
马铃薯组织培养苗真菌污染原因及防治
马铃薯组织培养苗真菌污染原因及防治马铃薯组织培育中，真菌污染比较常见，找准污染缘由，做好防治是提高微型薯产量和质量的关键措施。
一、马铃薯组培苗真菌污染的缘由
1、培育基污染：可能是灭菌不彻底，封口材料老化、密封性差造成的；
2、组培苗带菌：主要是由于接种材料本身带菌，但前期菌量少未表现出来，接种后菌量富集而污染；
3、接种室或培育室真菌孢子浓度过大；
4、接种器械灭菌不彻底；
5、超净台不干净。
二、防治马铃薯组培苗真菌污染的措施
1、灭菌前先检查封口材料是否完好，密封性是否强；常常检查灭菌锅的灭菌质量，如有问题应马上检修；灭菌锅内的灭菌材料不能堆放过满，以免影响蒸汽的流通和热交换；冷空气要彻底排放洁净，以免导致灭菌锅内的实际温度与压力表上的温度不全都；升降温速度不能太快。
2、继代培育中若有真菌污染应采纳30g/L的多菌灵无菌水溶液浸泡半个小时以上，用无菌水冲洗后接种或直接接种。
3、针对接种室或培育室内的真菌孢子浓度过大造成的污染，应实行75%的乙醇溶液定期喷雾降尘，杀灭空气中的孢子，以保持室内清洁。
4、接种器械定期放入灭菌锅内灭菌，接种时要勤换工具以免交叉污染，接种过程中要常常对接种器械进行彻底消毒。
5、定期对超净台进行清理检修。
灭菌前超净台内的紫外灯要开30分钟以上，接种时超净台上的空白培育基不能堆放过多，否则造成气流不畅。
6、接种过程中要严格根据操作规程进行，常常用75%的乙醇擦拭双手。
7、接种前认真检查基础苗是否污染，对选择来的基础苗容器外壁用75%的乙醇进行彻底消毒。
马铃薯组培生产流程
马铃薯组培生产流程介绍马铃薯组培是一种无性繁殖技术，通过将马铃薯的离体培养提供适宜的营养条件和激素刺激，使其快速增殖。
组培技术被广泛应用于马铃薯种苗生产、病毒清除和基因转化等领域。
下面将详细介绍马铃薯组培的生产流程。
步骤一：材料准备与消毒1.选择适宜的母本马铃薯作为组培的起始材料。
母本应选取无病虫害、无病毒污染、形状规则的健康马铃薯。
2.将选取的母本进行消毒处理。
首先用水清洗去除表面的土壤和杂质，然后将马铃薯浸泡在10%含氯消毒液中，保持30分钟。
之后，用去离子水反复冲洗3-4次，确保彻底去除消毒剂。
步骤二：组织切割1.将消毒后的马铃薯切割成5mm×5mm的组织块，每块含有一个芽眼。
切割时要确保刀具和工作台的消毒，避免污染。
2.切割好的组织块放入含有抗生素的高浓度杀菌剂中，进行再次消毒处理，时间为30分钟。
步骤三：愈伤组织诱导1.将消毒后的组织块放置在含有适宜激素的培养基上，培养基中添加有机植物激素，如生长素（NAA）和维生素B6（PA）等，以促进愈伤组织的形成。
2.将培养瓶或培养皿密封，放置在光照适宜、温度适宜、湿度适宜的培养箱中。
通常，培养温度为20-25摄氏度，光照强度为3000-5000勒克斯，湿度控制在60-70%。
步骤四：愈伤组织块增殖1.经过适当时间的培养（通常为4-6周），愈伤组织块开始增殖。
此时，可以将它们转移到新的含有低浓度激素的培养基中，以促进增殖。
常用的增殖培养基包括MS培养基、SH培养基等。
2.愈伤组织块的增殖可分为两个阶段，即缩小增殖和快速增殖。
在缩小增殖阶段，愈伤组织块的增殖速度较慢，所需时间较长。
而在快速增殖阶段，增殖速度显著加快，愈伤组织块数量迅速增加。
步骤五：愈伤组织分化1.当愈伤组织块增殖至一定数量时，可以进行愈伤组织的分化。
将增殖后的组织块转移到含有适宜激素的培养基中，培养出新的植株。
2.分化培养基的选择要根据所要培养的植株部位而定。
例如，若要培养出根系，可选择含有较高浓度生长素（IBA）的培养基；若要培养出茎叶，可选择含有较高浓度细胞分裂素（KT）的培养基。
马铃薯组培生产流程
马铃薯组培生产流程马铃薯组培生产流程马铃薯是世界上重要的粮食和工业作物之一。
传统的马铃薯种植方法存在许多问题，如土壤污染、病虫害等，给农民带来很大的经济损失。
为了解决这些问题，马铃薯组培生产技术应运而生。
本文将介绍马铃薯组培生产的主要流程。
1. 材料准备组培生产的第一步是收集马铃薯的组织细胞。
通常，我们会选用新鲜、健康的马铃薯作为材料。
然后，将马铃薯切成小块，用含有植物生长素和细胞分裂素的培养基进行处理。
2. 培养基制备培养基是组培生产的关键。
它提供了细胞分裂和植物成长所需的营养和激素。
通常，马铃薯培养基中含有葡萄糖、无机盐、维生素和胰蛋白胨等物质。
3. 细胞培养与增殖将经过处理的马铃薯细胞块放入培养基中，并在暗室中进行保温处理，使其不受外界干扰。
此时，细胞逐渐长成植物体，并逐渐增殖。
4. 植株分化将培养好的细胞块移植到含有植物生长素和细胞分裂素的新培养基中，可以促进细胞的不定向分化，形成不定芽、根和茎。
然后，将不定芽、茎、叶和根分开移植，进行标准化处理和定向培养，最终形成真正的植株。
5. 普通育苗和大田试验植株培育好之后，将其移植到普通的苗床中进行管理。
在它们长成健康的马铃薯苗后，会进行大田试验，以确保它们在真实环境下的适应性和生产能力。
6. 入市销售经过上述步骤的马铃薯植株可以投放市场销售，它们可以用来繁殖更多高质量的马铃薯，并在硬化、销售和应用等环节进行处理。
通过以上流程，马铃薯组培生产技术可以确保生产出高品质、高产量的马铃薯，从而提高效率降低成本，增加农民收入。
这种技术也可以避免植物疾病的传播和土壤污染等问题，减少对环境的影响，是一种非常值得推广的作物生产技术。
马铃薯组织培养技术
Zhongfeinongyao
马铃薯组织培养技术
刘志强
一、马铃薯的组织培养
1、种薯的茎尖脱毒 植 物 组 织 培 养 也 叫 PlantTissueCul－ ture，广义指在特定条件下，植物生长过程
灯火焰下 10cm 以内接入到三角瓶内，每 遍，要求认真细心，避免折断薯苗，清洗后 瓶接种 10 段左右，火焰封口后，贴上标签， 的薯苗再置于一定浓度的杀菌剂溶液中浸 标签上要标注接种时间、品种及接种人。重 泡 5min 后，立即移栽。按 6～8cm 的株距移
接种人员先换上拖鞋、剪掉手指甲、用
香皂洗净双手后，进入到缓冲间内。换上拖 鞋及工作服后，进入接种室，用 75%的酒精 对双手、套袖进行喷雾消毒，然后就座于超
移栽前一天揭开封口膜。移栽时，小心
的用手洗去根部附着的培养基，水温在 22℃左右，去掉培养基的苗再用清水洗两
活。因此要采取防治手段，主要有下面几 点：①使用固体培养方法，提升琼脂浓度，
品，每次接种前需将超净工作台用紫外灯 改变了人为的条件，短时间中组培苗适应 组织结构发生变化，生理功能产生异常，主
进行杀菌半小时左右，20min 后工作人员 不能适应。因此，组培苗必须移出培养室， 要体现为分化能力下降，不能独立增殖成
方可进入。
在室温下炼苗 3-5 天。
芽或者生根，移栽到自然界中更是很难成
管斜面上，每个试管内接种一块愈伤组织， 生长出浓密而粗壮的不定根，以提高组培 操作环境方法减少真菌产生。另外植物组
在 25℃左右的培养室进行培养。脱毒培养 苗对外界环境的适应力及驯化移栽的成果 织培养过程中，内源菌污染的处理工作比
基一般为 MS 培养基中加入 0.5mg·L-16- 率，获得更多高质量的商品苗。马铃薯组培 较复杂。该污染指外植体材料内部中微生
马铃薯的组织培养
培养条件：21‾25℃、20003000 lx、12h/d。 2-3周愈伤，4-5周绿点，3--6月 长成2-3厘米小芽，越慢越好， 出芽很快的扔掉。
（2） 继代和生根 培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂
盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4 次）鉴定后，采用固体、液体培养基相结
合方法扩繁。取试管苗单节切段扦插在 （或平放）固体培养基上，每瓶可插20 个左右茎段，经20d左右发育成5‾10cm 高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度 快，每月可繁殖5‾8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培
我国的马铃薯平均单产仅为13.60吨/公顷，是 世界单产最高国这瑞士（48.80吨/公顷）的 1/4。造成如此大的差别，最主要的因素就是 种薯质量差，品种布局不合理。采用脱毒快繁 技术，种用脱毒种薯，一般可增产30-50%， 甚至成倍增产，充分发挥品种的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ能，提高马 铃薯生产能力。如果我国现有马铃薯播种面积 的1/3（即114万公顷）用脱毒种薯，就可年增 产粮食100多亿公斤。
因此，采用组织培养技术， 通过一定良种繁殖体系，生 产优质种薯，是保证马铃薯 高产、稳产的一项有效措 施。
全国现有马铃薯播种面积300多万公 顷，且有逐步增加的趋势，每年需合格 种薯45亿公斤，脱毒原种4亿公斤，脱 毒小薯或微型薯45亿粒。因此，脱毒马 铃薯推广具有广阔的市场前景，对于增 加农民收入和发展马铃薯产业化生产具 有十分重要的意义。
我国在70年代用茎尖组织培养方法得到 脱毒马铃薯试管苗，并成功地获得脱毒 复壮的马铃薯，开始了脱毒种薯的生产 和推广。"八五"期间，农业部在全国范围 内设立了6个马铃薯原原种基地建设和种 薯生产项目，初步形成了脱毒草种薯生 产体系。共推广脱毒种薯36.5-40万公 顷，获经济效益近30.8亿元。
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马铃薯组织培养前言：马铃薯组织培养的意义 .马铃薯（Solanum tuberosum）属茄科茄属植物! 常见的育种途径有: 常规二倍体杂交法,四倍体水平的品种间杂交法,远缘种间杂交法 ,2n配子利用法。
这些途径都是通过有性生殖产生马铃薯变异体，通过系谱，回交，轮回选择的方法，需经过6-8代选出附合目标性状的新个体。
进入 20世纪90年代后，随着生物技术的深入发展，人类对植物细胞遗传行为，基因表达传递行为达到分子水平深入了解，作物育种工作者开始引入了除单纯户外有性杂交育种之外，又一育种方法室内体细胞无性系变异育种法，其中组织培养（tissue culture）诱导再生植株的突变就是最常用的一种。
当马铃薯外植体（茎尖脱毒分生组织）培养时，由于组培环境引发了细胞异染色质 DNA延迟复制, 产生了较田间自然突变率高出500倍的大量变异。
这一现象已越来越被马铃薯育种工作者所认可，并成为一条马铃薯育种的有效途径。
现从组织培养及组织培养在马铃薯育种上的发展历史，研究意义，研究方式以及未来展望等方面逐一论述。
马铃薯的市场效益（为什么选马铃薯作试验材料）马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物就单位面积出产的干物质而言，它高于小麦、大麦和玉米，就单位面积出产的蛋白质而言，分别为小麦、水稻和玉米的2.02，1.33和1.20倍。
目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右，鲜薯年总产量5 500万吨，居世界第一位。
种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。
但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢，基本上以鲜食为主，少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉，深加工产品很少，而且加工生产规模小，工艺落后。
20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期然而产品与外同类产品相比，无论是在色泽、口味、品质，还是在包装上均存在一定差距。
马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低，所含的维生素C是苹果的10倍，B族维生素是苹果的4倍，各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等，土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病。
近年来随着人民群众生活水平的日益提高，我国的食品结构出现了一些新的变化，中西方的饮食文化开始相互渗透和融合，马铃薯加工食品在我国同样备受欢迎。
随着麦当劳、肯德基等洋快餐在我国落户，其中必有一款的炸薯条、薯泥等马铃薯食品很受国内中层消费者的喜爱，尤其是儿童对其情有独钟，成为未来我国马铃薯食品潜在的庞大的消费群体。
1 马铃薯的生态习性和种类马铃薯生长对土壤的适应性很强，但对气候要求凉、冷、燥，在湿热地区虽然也能生长，不过一代以后品种就会演化，需要经常从寒冷地区引进新的种。
种薯在土温5～8℃的条件下即可萌发生长，最适温度为15～20℃。
适于植株茎叶生长和开花的气温为16～22℃。
夜间最适于块茎形成的气温为10～13℃（土温16～18℃），高于20℃时则形成缓慢。
出土和幼苗期在气温降至-2℃即遭冻害。
开花和块茎形成期为全生育期中需水量最大的时期。
马铃薯在原产地就有几百个品种，在世界各地又不断地培养新品种，目前全世界有几千个品种，有含淀粉比例较高，适合作为主食的，也有适合作为蔬菜食用的。
人们根据不同的用途培养出很多新品种，花色有白色、红色、紫色等品种，地下块茎有圆形、卵形和椭圆形，其皮色有红色、黄色、白色和紫色的不同品种。
一般用块茎上的“芽眼”切下播种，如果用种子种植，很快就会产生变异，因此非常容易出现新品种。
2 马铃薯茎尖的组织培养植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌的条件下，将离体的植物（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。
由于培养物是脱离植物母体，在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离体培养。
在有些情况下，再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞[1]。
植物组织培养是20世纪初发展起来的一门新兴技术,随着这项技术的日益完善,其应用也越来越广泛,可用于种苗快繁、植物脱毒、植物育种、种质资源保存以及次生代谢物提取等方面。
尤其植物快繁和脱毒是应用最多和最广的方面,而且许多花卉苗木的试管育苗已进入了商品化生产[2]。
马铃薯薯块及芽外植体消毒灭菌后在MS基本培养基中培养效果最好[3]。
黄萍等认为在马铃薯初代培养基(作茎尖培养用)和增殖培养基(作试管苗快速繁殖用)中分别加入25μg/ml链霉素、四环素和苯甲酸钠3种抗污染剂,结果发现:苯甲酸钠在初代培养基中抑菌效果最好;而在增殖培养基中以四环素的抑菌效果最佳。
[4]植物组织中普遍存在内生菌,当植物组织进行离体培养时,这些内生菌就会产生污染[5]。
为了消除植物组织培养过程中出现的真菌和细菌污染 ,而又不杀伤植物组织 ,采用多菌灵和青霉素混合溶液浸泡污染的组培苗茎段的结果发现 ,多菌灵对真菌有杀灭作用 ,对细菌没有明显作用 ;青霉素只对细菌有抑制作用 ,继代后细菌污染照常存在 ;而对污染的组培苗采用 75 %乙醇和 0 .1% HgCl2 处理可彻底杀灭真菌和细菌[6]。
3 植物激素对马铃薯生长的影响试验以品种为主区,激素处理为副区进行裂区设计,研究赤霉素(GA3)与茉莉酸甲酯(MeJA)对雾培马铃薯内源激素与生长发育的影响。
结果表明:外源GA3处理增加了3个马铃薯品种叶片内源IAA和JA的含量,降低了中晚熟品种高原7号的内源ABA含量。
外源MeJA 对马铃薯块茎均有一定诱导作用,但结合GA3处理其诱导结薯的能力会减弱。
[7]马铃薯块茎形成期,脱落酸含量显著增加,赤霉素含量则显著降低,赤霉素与脱落酸比值下降到一定水平是块茎开始形成的重要条件。
外加脱落酸喷施叶面,使块茎形成提早,但结薯数并未增加;外加赤霉素喷施叶面,使植株细高,匍匐茎细长,块茎形成显著延迟,块茎数显著减少,这一结果进一步证明了脱落酸和赤霉素在块茎形成中的作用。
[8]研究表明外源添加赤霉素(GA,Gibberellins)能促进马铃薯茎、叶和匍匐茎的生长,而抑制块茎的形成.添加GA生物合成抑制剂可降低植株体内GA水平和活性,促进块茎形成。
[9]在诱导结薯的过程中给以不同浓度的香豆素处理,研究香豆素对试管微型薯诱导的影响。
结果表明,在诱导结薯的培养基中,添加香豆素处理的浓度为30mg/L时,获得的微型薯块茎较大且大薯率较高。
[10]在加入100mg/l香豆素时,试管结薯的数量与使用500mg/l矮壮素效果相近似。
使用50mg/l人参寡糖素或10mg/l黑节草寡糖素时,试管结薯的数量明显超过或略超过用500mg/l矮壮素的效果。
IAA与GA互作对马铃薯试管苗生长有积极的促进作用,能够明显提高试管苗的高度,最大增幅可达90.3%,而IAA与BAP互作对试管苗生长有明显抑制作用。
IAA与GA互作对试管苗根的形成和生长影响不明显。
BAP对试管薯形成有重要作用,而GA与BAP互作能进一步促进试管薯生长,处理4(IAA+GA十BAP)比处理3(IAA+BAP)的试管薯鲜重和直径分别增加163.8%和46.4%[11]。
低浓度的2,4-D有利于红色愈伤组织的花色苷积累,高浓度的2,4-D促进其生长而不利于花色苷的积累;高浓度的6-BA能促进红色愈伤组织中花色苷的积累并诱导白色愈伤组织花色苷的合成,但抑制其生长;卡那霉素能使白色愈伤组织变红并积累花色苷,高浓度的卡那霉素严重抑制愈伤组织的生长并最终变褐死亡;提高蔗糖浓度能促进愈伤组织花色苷的产生和积累,但超过70g/L时抑制生长[12]。
4 马铃薯组织培养的具体实验方案4.1外植体培养从已催出芽（芽长一般2—4cm）的干净健康马铃薯块茎上掰下芽，用自来水冲洗干净，放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟，在超净工作台上消毒完后，放入无菌水中浸泡6次，每次5分钟，然后接种到MS＋6－BA1.5mg/L（毫克/升）＋GA30.5mg/L＋IBA0.5mg/L ＋琼脂8g/L＋蔗糖30g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种1—5个外植体。
[13]将接种好的培养皿用封好置于恒温光照箱中进行培养，培养条件为28℃，每天光照16h，光照强度>2 ooo Ix。
形成团状的愈伤组织后，继续培养至根、芽分化后，及时移植于三角瓶中培养。
[14]4.2茎尖剥离及初代培养外植体培养20天后，在超净工作台上解剖镜下用解剖针将生长点0.1——0.5mm部分剥离出来，转接到MS＋肌醇100mg/L+6－BA1.5mg/L＋GA30.5mg/L＋泛酸钙1.5mg/L＋蔗糖30g/L ＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种4—5个生长点。
光照保持3000—6000Lux（勒克斯）左右，每天照光13—16小时，温度控制在23℃，经2—6个月左右培养诱导，其间转接2——3次，生长点即可长成新的小植株。
经病毒检测不带病毒的株系就可进行扩繁，未脱毒的株系淘汰。
[15]4.3试管苗扩繁4.3.1扩繁前的准备1扩繁培养基的制备。
扩繁培养基以MS培养基为扩繁基本培养基，外加6—BA0.5mg/L+NAA0.5－1.5mg/L+蔗糖30g/L＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L，pH值为5.8。
2把接种用具在超净工作台上用紫外线灯消毒20—30分钟，关掉紫外线灯，打开日光灯和吹风机。
3用肥皂把手洗干净并擦干，再用75%酒精消毒，待手上酒精干后，点上酒精灯，把剪子、镊子培养皿等所需用具在酒精灯上进行消毒。
4.3.2接种扩繁用75%酒精喷待接的试管苗和制备好待用的扩繁培养基表面，将已脱毒株系按每苗留1—2片叶为一个茎段剪下，正向插入扩繁培养基（即MS＋6－BA0.5mg/L＋NAA0.5－1.5mg/L ＋蔗糖30g/L＋琼脂8g/L＋活性炭0.17g/L，PH值为5.8的培养基）上。
一般每个培养瓶接种15个茎段，在温度25—27℃,光照2000—3000Lux，每天15—16小时条件下培养3—4天即可生根长芽。
30天后可按1：7瓶进行扩繁一次，即原来每瓶15苗扩繁一次可达7瓶105苗，以后每隔30天扩繁1次，繁殖到目标苗数后，再经2—3个月培养即可扦插到原原种繁殖网室，进行原原种繁殖[16]。
5 马铃薯组织培养中的污染原因及控制措施1．污染的症状和原因真菌性污染主要指霉菌引起的污染。
一般接种后3～8d可在培养基中发现各种颜色的菌斑。
真菌性污染，一般是由空气污染和瓶口边缘的灰尘和真菌孢子落人器皿中造成的。
另外，在湿度太大的季节和培养室内。
棉塞也会长出真菌孢子引起大量污染。