染色体实验室配置
染色体实验准备
染色体制片实验准备一所用试剂及配制：1、0.8％生理盐水：8gNaCl溶于1000ml蒸馏水，4℃存放。
2、PHA：例如，粉剂10mg溶于100ml灭菌生理盐水得到100ug/ml的注射液。
必须根据鱼的大小来确定配制的注射液的浓度。
4℃存放。
3、秋水仙素：1mg溶于100ml灭菌生理盐水得到10ug/ml的注射液。
必须根据鱼的大小来确定配制的注射液的浓度。
4℃存放。
4、0.075M KCl：5.59gKCl溶于1000ml蒸馏水，4℃存放。
5、卡氏固定液：甲醇：冰醋酸(体积比)＝3：1，现配现用，充分混匀。
6、Giemsa染液：用1ml Giemsa母液加6～7ml磷酸缓冲液（即PBS,PH6.8）稀释后用。
7、PBS（pH6.8）：先配制：甲液：KH2PO49.078g加蒸馏水至1000ml.乙液：Na2HPO4.2H2O 11.876g(或Na2HPO4.12H2O 23.8g)加蒸馏水至1000ml.再配制pH6.8 PBS：若为100ml，则取甲液50.8ml+乙液49.2ml混合而成。
二器材准备1、载玻片处理：将载玻片一片一片放入肥皂液中后煮沸30min，趁热刷洗干净，自来水冲洗后放入蒸馏水中浸泡一天（更换数次蒸馏水），再浸入95％酒精保存待用。
滴片前放入玻片盒，干燥后放入－20℃冷冻。
2、注射器及针头处理：肥皂液中煮沸、刷洗，自来水冲洗，蒸馏水浸泡，80℃烤干，盒内保存。
3、注射器: 5ml或1ml；针头4.5号，青霉素小瓶（同样方法洗净），其他不同大小试剂瓶。
4、解剖盘，镊子，大剪刀，小剪刀，小培养皿。
5、10ml刻度离心管，乳头吸管，100ml量筒；试管架，4000转电动离心机6、－20℃冰箱，显微镜，数码相机。
三实验步骤1 实验前准备：实验前1天按质量比10 µg/g鱼体重在实验鱼胸鳍基部往腹腔注射PHA，隔12小时后，按8 µg/g鱼体重再次给实验鱼腹腔注射PHA，4.5小时后，按2 µg/g鱼体重给实验鱼腹腔注射秋水仙素。
人类染色体标本制备经验手册
人类染色体标本制备经验手册3.0版本广州市达晖生物技术有限公司印制GUANGZHOUDAHUIBIOTECHCO.,LTD 目录第一部分各类器械清洗与常用试剂配置4页第三部分探讨染色体标本制备技术中的若干问题22页第五部分附录25页第一部分一、实验室要求1、准备室（约30平方米）：供清洗玻璃仪器、配制试剂仪器包装消毒及制片场所，还必需配置耐酸碱水池、实验操作台、药橱等设施。
并能合理放置冰箱、电热干燥箱、离心机、纯水器、消毒锅、天平等仪器，以方便使用。
2、无菌室（约25平方米）：用作细胞的接种培养、配备培养基。
分为更衣室（约4平方米）、缓冲室（约6平方米）、接种室（约15平方米）。
配备空调机、传递窗、离心机、倒置显微镜、超净工作台、臭氧发生器或紫外灯、培养箱等设备仪器。
二、设备仪器（一）仪器1、超净工作台一台2、光学显微镜二台（可以安装染色体软件分析系统）倒置显微镜与带照相装置的正立显微镜各一台。
倒置显微镜用作细胞培养；正立显微镜用作核型分析，有条件的单位可配备染色体分析软件、电脑、打印机等。
3、隔水式恒温培养箱一台开展产前检查的单位，最好购买二氧化碳培养箱。
4、电热干燥箱一台5、冰箱二台：普通冰箱和低温冰箱各一台6、酸度计一台（可略）7、纯水器（电阻率18兆欧姆）一台；（可略）-1-8、高压灭菌锅一台（可略）9、电热磁力搅拌器一台（可略）10、真空泵（无油）一台（可略）11、电子天平二台（万分之一天平与普通天平各一台）12、水平式离心机二台转速0-4000转/分，10毫升/管，大容量与小容量各一台。
大容量的供制片用，小容量的放置无菌室供细胞培养用。
13、可调移液器若干支：规格从5-5000微升若干支14、超声波清洗器一台（可略）15、水浴箱（0-100℃可调）（二）玻璃器皿与耗材1、培养瓶：15毫升链霉素瓶，25毫升小方瓶（建议采用一次性培养瓶）。
2、刻度离心管（10毫升）50支3、量筒（10-1000毫升）：各种规格各一个。
人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察实验方案
人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察实验方案清晨的阳光透过实验室的窗户，洒在桌子上，我拿起笔，准备写下这个实验方案。
人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察，这是一个既熟悉又充满挑战的课题。
就让我以意识流的方式，带你走进这个神秘的实验世界。
一、实验目的1.了解人体外周血淋巴细胞染色体的基本结构。
2.学习并掌握染色体制备与观察的方法。
3.分析染色体形态，探讨其在遗传研究中的应用。
二、实验原理1.人体外周血淋巴细胞具有分裂能力，可进行有丝分裂。
2.通过特定染色方法，使染色体着色，便于观察。
3.利用显微镜技术，观察染色体形态和结构。
三、实验材料1.人体外周血：新鲜、无污染。
2.染色剂：吉姆萨染液、醋酸洋红染液。
3.试剂：肝素钠、氯化钠、磷酸缓冲液。
4.实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、离心机、移液器、吸管、计时器等。
四、实验步骤1.采集外周血：抽取2ml静脉血，加入含有肝素钠的抗凝管中，轻轻摇匀。
2.制备淋巴细胞悬液：将抗凝血置于离心管中，加入适量氯化钠溶液，1500r/min离心10分钟，弃上清，重复洗涤2次。
加入适量磷酸缓冲液，重悬细胞。
3.染色：取适量淋巴细胞悬液，滴加吉姆萨染液或醋酸洋红染液，染色5-10分钟。
4.制片：将染色后的细胞悬液滴在载玻片上，用盖玻片覆盖，轻轻压实。
5.观察染色体：将制片置于显微镜下，调节光线和倍数，观察染色体形态和结构。
6.记录结果：记录观察到的染色体形态、数量、排列等信息。
五、实验结果分析1.染色体形态：观察到的染色体呈棒状或X形，颜色鲜艳。
2.染色体数量：正常人体外周血淋巴细胞染色体数为46条。
3.染色体排列：有规律地排列成2个染色体组。
4.遗传研究应用：通过染色体分析，可研究遗传病、肿瘤等疾病的发生机制。
六、实验注意事项1.采集外周血时，要确保无污染。
2.制备淋巴细胞悬液时，要充分洗涤，去除红细胞和血浆。
3.染色过程中，要控制好染色时间，避免过染或欠染。
4.观察染色体时，要调节好显微镜光线和倍数，确保清晰。
染色体实验室可行性操作方案
新建染色体实验室可行性操作方案一、派遣计划：实验室建立初期市场尚未深入，标本量较少，为避免人力及物力资源的浪费，染色体实验室建设可分为两个阶段：第一阶段，标本量不足40例时：1．在当地联系合作医院，标本暂时外包；染色体属于形态学范畴，部分结果的判断并没有一个统一的标准，这样既可以加强与当地实验室及当地遗传专家的联系，又可在实验室出现仪器故障等突发事件时可暂时外包标本；2．就近送给已开展染色体项目的高新达安临检实验室，但必须将时间控制在标本抽取后24小时内送达实验室，以免影响试验效果。
第二阶段，标本量达到40例以上时：1．标本量达到40例时，派遣制片技术人员1名完成前期的试验处理，制好的玻片就近送往广州或上海两地的实验室进行阅片，也可根据实际情况在当地外聘阅片专家，完成阅片工作；2．标本量超过80例时，派遣熟练阅片技术人员1名，完成整个实验流程。
3．以后每增加40例标本可增加技术人员1名。
成立技术监督小组（1-3人），全面负责各实验室的技术及质量问题：①对各分点实验室提供技术协助；②观注行业的发展方向，寻找新项目，为本专业的发展提供更多理论支持；③培训：组织各实验室每月进行一次网络培训；④部分对试验效果影响较大的自配试剂统一由中心统一配置。
2．质量方面：①常用试剂的对比试验：某种试剂需更换厂家时，则由技术监督小组负责进行对比试验及质量评估；②盲点检查：每100份标本中抽取5份标本进行盲点检查，包括标本编号、病人基本信息、实验记录、核型分析记录及结果的核对等；②疑难片的会诊流程：a.拓展实验室提出申请，并附上详细的病历资料、标本玻片4张，提交给中心实验室；b.中心实验室组织专家进行会诊；c.中心实验室将会诊结果转交拓展实验室，报告单由拓展实验室发出。
二．实验室配置：1．实验室要求：①制片室：供清洗玻璃仪器、配制试剂及标本的接种、收细胞、制片、染片的场所，还必需配置耐酸碱水池、实验操作台等设施。
并能合理放置冰箱、电热干燥箱、离心机等仪器，以方便使用；②培养室：用作细胞的接种培养及部分试剂的配备，根据需要可仪器；③阅片室：为观察分析核型、整理资料场所。
细胞遗传室工作手册SOP
第一章设备与器械1目的规范实验室用房，确保实验室工作和业务用房的正常需要，以促进科室的发展，确保各项工作顺利进行。
2实验室用房规范与要求细胞遗传学实验室一般分为洗涤室、培养室、细胞学处理室、阅片室、暗室、档案室。
其要求一般与其他普通实验室的要求基本相同:1.便于所有器具的清洗。
2.\3.便于准备消毒及各种试剂的保藏。
4.便于使用各种方法检测待检标本，进行细胞遗传学方面的临床诊断。
但同时需要具有暗室并具有符合医疗档案存放的档案室。
洗涤室玻璃器皿的清洗、包装，培养物质的准备与消毒，供应物品的保藏等工作都需在洗涤室里进行，洗涤室的大小一般为4m×6m，洗涤室应设有下列设备：1.一个清洗玻璃器皿的水槽，便于清洗、晾干；2.电热干燥消毒箱，用于玻璃器皿的干热灭菌；3.高压蒸汽灭菌锅，用于不能耐受干热灭菌物品的处理；、4.烤箱两个便于烤干玻璃器皿或高压蒸汽灭菌物品；5.石英玻璃双重蒸馏器或超纯水装置，用于蒸馏水或超纯水的制备；6.真空泵一个，以备配制培养基过滤时用；7.物品准备台，以备包裹玻璃器皿等；8.储柜或储架，便于清洗干燥的器皿或其它物品存放；9.酸缸，一般最好是耐酸材料，用于盛装清洗液，清洗液多为含重铬酸钾的硫酸溶液。
培养室培养室包括操作间和缓冲室，操作室功能是进行无菌操作和细胞培养，如各种组织取材与接种材料的准备、培养物的生长状态观察等，因此应配有超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、小型低速离心机、冰箱、玻璃柜等。
缓冲室则是供工作人员进入培养室前换消毒衣服、鞋、帽等之用。
培养室一般3m×3m已够用，要求清洁、干燥、不通风、光线适宜。
操作间必须墙壁光滑并装有空调器，操作间与外间实验室之间最好有传递窗，以便传递临时需用的实验用品。
培养室空气消毒可采取紫外线消毒或空气净化。
'细胞学处理室细胞学处理室需要配备普通离心机、恒温水浴箱及恒温电烤箱（烤片用）等，主要用于染色体的收获与显带。
医院细胞遗传室常用实验溶液试剂的配置作业指导书
医院细胞遗传室常用实验溶液试剂的配置作业指导书1目的规范试剂的配制，为临床实验的可靠性提供质量保障。
2原则专人负责，一剂一皿，一配一录，双人核签。
定期校对，可溯源。
3性能特征规范试剂的配制，为临床提供准确稳定有效的试剂，减少人为因素对临床试验结果的影响。
4 方法化学实验试剂的配制方法5 试剂与耗材量筒、烧杯、玻棒、电子称、量杯、容量瓶、定容瓶、油纸、药勺、100ul 加样枪、100ul 枪头6 操作步骤6.1 生理盐水准确称取氯化钠（NaCl ）（生产商xxxx, 批号xxxx 有效期xxx）8.5 g,加二蒸水溶解定容至1L,待充分溶解混匀装瓶，贴标签（配置日期、药品名称、浓度、用途、有效期、配制双人），记录双人签名6.2 0.075M 氯化钾溶液氯化钾（KCI）5.587g ,加二蒸水至1000ml,室温保存，用于细胞低渗处理。
6.312X SSC 溶液氯化钠（NaCl）105.3g柠檬酸钠（Na3C6H3O7• 5H2O）52.94g加二蒸水至1000ml，室温保存，临用时用二蒸水稀释至所需浓度。
6.40.25%胰蛋白酶溶液（Trypsin ）胰蛋白酶粉末（1:250）250mg无Ca2+, Mg2+的PBS 加至100ml先用少许消毒的PBS 将胰蛋白酶粉末溶解，再补足PBS 至100ml，搅拌混匀，置4C冰箱4小时，用0.22um微孔滤膜除菌，分装成小瓶于-20 C保存，用于消化细胞。
6.5Giemsa 染色液Giemsa 储备液：配制：Giemsa粉末1g加少许甘油混合研碎宀共计加入甘油66ml，充分混匀-倒入烧杯中在55-60 C水浴中加热2 小时T冷却T加入甲醇66ml，充分混合—在室温中静置2-3 周，过滤贮存于棕色瓶中，可长期使用。
6%Giemsa 工作液：47ml 蒸馏水中加入Giemsa 储备液3ml，用于染色体标本的染色，一般染色时间为10-20分钟。
6.6 无钙镁离子溶液氯化钠（NaCl）8 g氯化钾（KCl ）0.2g柠檬酸三钠（Na3C6H5O7?2H2O）1g 磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）0.05g 碳酸氢钠（NaHCO 3）1g 葡萄糖1g依次溶于二蒸水，最后加二蒸水至保存于4C冰箱备用。
遗传学实验室
遗传学实验室遗传学实验室是进行遗传学研究与实验的专门场所，旨在探索基因传递、变异与表达等相关机制。
本文将介绍遗传学实验室的设备与工具、实验流程与方法、实验室管理与安全等方面的内容。
一、实验室设备与工具1. 显微镜：遗传学实验中常用的工具之一，用于观察显微细胞结构和染色体。
2. PCR仪：聚合酶链式反应（PCR）是遗传学领域常用的实验方法，PCR仪是进行PCR实验的必备设备。
3. 离心机：用于离心沉淀、分离细胞和提取DNA等实验步骤。
4. 培养箱和培养皿：遗传学实验室中常用的细胞培养设备，用于培养细胞并进行实验操作。
5. 电泳仪：用于分离、检测DNA、RNA等分子的大小和电荷的设备。
6. 核酸提取试剂盒：用于从样本中提取DNA或RNA的试剂盒，是遗传学实验中不可或缺的工具。
二、实验流程与方法1. 样本采集：遗传学实验通常需要样本，包括人类和动植物组织、细胞、体液等。
样本的采集需要遵循严格的伦理规范和安全操作。
2. 样本处理：将采集到的样本进行处理，如细胞培养、分离细胞、提取DNA或RNA等。
3. 分子生物学实验：包括PCR扩增、酶切、DNA测序、基因克隆等实验。
这些实验可以揭示基因的结构、功能及其遗传变异等信息。
4. 细胞遗传学实验：通过显微镜观察染色体、细胞分裂等现象，探究染色体组成与结构、染色体数目异常与疾病的关系等。
5. 生物信息学分析：将实验中得到的数据进行处理与分析，借助生物信息学工具挖掘基因座、比对序列等。
三、实验室管理与安全1. 实验室安全：遗传学实验室工作存在一定的危险性，应根据实验室的具体情况建立相关安全操作规范（SOP），包括个人防护、样本处理和实验废物处置等。
2. 知识产权保护：遗传学研究涉及到的基因、DNA序列等信息具有重要价值，相关研究成果应符合知识产权的保护法律法规。
3. 实验室质控：定期检查实验室设备的状态和性能，确保实验的准确性和可重复性。
同时，建立实验室质量管理体系，进行相关认证和评估。
植物常规染色体制片-取材
实验一植物常规染色体制片Ｉ
-取材和预处理
（综合性实验）
遵义师范学院生命科学学院韦若勋
一、实验目的
1、掌握植物根尖染色体制片过程中预处理的方法；
2、掌握植物根尖染色体制片过程中取材的方法；
3、熟悉预处理药剂的配制。
二、实验原理
②促1、预处理原理植物根茎尖分生组织进染色中分裂细胞能达到3个效果。
体缩①③短妨降
三实验器具及试剂
三实验器具及试剂
2、实验试剂及配制
2实验试剂及配制
（1）0.002mol/L 8-羟基喹啉（分子量0002l/L8
145.17）
8-羟基喹啉0.29g，少许乙醇溶解，鲜蒸馏水定溶1000ml。
四、实验材料
1、蚕豆、绿豆、洋葱和大蒜的根尖
蚕豆：2n = 12
绿豆：2n = 22
洋葱、大蒜：2n = 16
洋葱大蒜216
25℃，浸种4-5h；发芽16-24h；
25℃浸种45h；发芽1624h；
五、实验方法与步骤
2
8mm
3
2mm
1
色较深
六、实验作业
实验报告。
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注：后附染色体配套设备表
前言
染色体是遗传物质的载体，近40-50年来，对染色体的研究发展迅速。
目前由染色体畸变引起的疾病发现的越来越多，应用染色体诊断疾病，探讨病因和发病机制，合理制定出治疗方案和合理用药，采取必要的预防措施及推算预后等都提供了科学的依据．因此对染色体的研究已成为临床医学中一个组成部分．染色体制备、分析日益广泛应用，如何正确识别人类染色体显得十分重要。
基于这种想法，编写这本材料，以供学习参考。
由于水平所限错误之处再所难免，敬请批评指正。
实验室的基本设备
开展人类染色体研究的实验工作，应具有一定的条件、设备和器材才能顺利地开展工作。
一、实验室
实验室的间数、大小应根据从事的研究的内容、工作人员和设备的多少，并根据各单位具体情况安排。
一般包括：
1、准备室：为实验主要工作场所，除放置冰箱、烘烤箱、恒温箱、离心机、天平等仪器外，还备有箱厨和其它橱柜放置玻璃器皿、各种日常应用物品。
室中央设有操作台，以供实验操作用。
2、无菌室：为无菌操作室。
应设在实验室靠近最里面的位置，以利于防止空气流通引起污染。
在无菌室外要有缓冲室，室内应装空调、紫外线光源、清洁工作台等设备。
3、研究室：供电脑染色体分析用，并要有显微镜、整理研究资料等用。
二、大型器械
1、电热恒温培养箱：最好用隔水式的，用于细胞培养。
2、电热恒温干燥箱：以中型较合适，因为干燥灭菌时的温度要达到160℃，故应购置能升温到300℃的较为安全适用。
3、高压蒸汽灭菌器：以电热恒温式较好。
4、普通冰箱：主要用于短期保存血清、培养液、生理盐水、消化液等各种溶液。
5、低温冰箱：作为培养基、血清等的长期保存，温度达到-40℃即可。
6、离心沉淀机：一般应购置0-4000转/分，最好12管，每管容量为10ml为水平式的。
若自制血清则购置0-4000转/分，4管，每管容量为250-300ml的水平式为好。
7、酸度计：又称为氢离子测定计或PH计，是测定各种溶液酸碱度的必须工具。
8、天平：架盘天平两台，分析天平（万分之一）一台，应有固定的台座，以免震动，影响精确度。
9、显微镜：是从事染色体研究工作必须具备的工具，每一名研究人员需配一台。
目镜应配5×、10X、15×，物镜应配4×、10×、40×、100×。
镜台上要配刻度移动尺。
10、荧光显微镜：这是开展Q、R显带及Y小体检查时用的。
11、染色体核型分析仪一套：应配有显微镜、CCD、打印机及相关软件。
12、蒸馏器：组织细胞的培养对水的质量要求极高，一般要用三蒸水，其中以石英蒸馏器为最好。
13、真空泵：用于液体除菌过滤的负压装置，一般购置一台30升旋片式真空泵即可。
14、玻璃除菌装置：大部分细胞培养液不能高压灭菌，必须用玻璃除菌器。
一般5、6号（G5、G6）便能保证除菌。
可买3-4套备用。
15、水浴箱：电热恒温双孔水浴箱，用于水浴加温等。
16、或超级恒温水浴箱，用于调控溶液浓度作染色体标本和各式显带处理用。
三、小型器械
常用的如下：
1、刀：普通解剖刀几把。
2、剪：应配有各种直、弯的、有齿、无齿的若干把。
3、镊子：钟表镊子、敷料镊子几把
4、试管架若干：用于安插试管、离心管等。
5、橡皮塞：应选用质量比较好的硅橡皮、纯树胶橡皮制的普通皮塞和反口橡皮塞。
6、清洗桶：制备和储藏洗涤液（可用陶瓷），新洁尔灭、来苏等可用塑料桶。
7、酒精灯：用于瓶口灭菌、制片等。
8、钢精锅：用于煮沸玻璃器皿等。
9、钢丝网筐：用于灭菌时盛装各种用具。
10、钢丝钳、试电笔等修理用具。
四、玻璃器皿
玻璃器皿是直接或间接与培养细胞相接触的工具，故采用中性硬度的硼酸盐的玻璃制品比较好。
1、培养瓶：根据培养物的不同可选用不同的容量的培养瓶，一般培养外周血、骨髓、胸腹水等用的培养瓶用链霉素的空瓶代替即可。
培养羊水、绒毛、皮肤等用25ml 的八角方瓶。
2、试管：用于细胞培养等。
3、离心管：10ml，用于沉淀细胞用等。
4、存水瓶：5000-10000ml玻璃瓶，用于储存蒸馏水及各种溶液。
5、试剂瓶：30-500ml无色或棕色瓶，用于储存各种试剂。
6、染色缸：5片装立式，用于玻片标本的染色及玻片标本的各种特殊处理。
7、量筒：10-1000ml用于量取各种溶液。
8、盐水瓶：容量250-500ml用于盛装有关溶液和培养基进行高压灭菌等。
9、乳钵：容量20-500ml用于研磨各种染料。
10、吸管：1-20ml用于吸取各种溶液。
11、烧杯：5-5000ml用于盛装加温各种溶液等。
12、载玻片：用于制作染色体标本。
13、盖玻片：用于观察染色体标本等。