菌种培养
培养菌种的方法
培养菌种的方法在菌类的世界中，不同种类的菌种需要不同的培养方法。
以下是几类常见的菌种和它们的培养技巧。
一、细菌培养细菌是一类较小的单细胞生物，它们对生命系统有着至关重要的作用，但也可以导致许多疾病。
细菌的研究对医学、农业和食品加工业都有着极其重要的意义。
细菌培养需要一些简单的实验室设备和材料，以下是具体的步骤：1. 准备培养基。
在无菌条件下，将培养基加热使其溶解，再灭菌杀死其中的微生物。
常用的培养基有营养琼脂、液体蛋白胨和血琼脂。
2. 取植株。
用无菌建设和无菌技术取植株。
3. 转移和接种菌落。
用无菌方法取一定量的菌液，均匀转移于培养基表面。
4. 培养。
在恒温恒湿的环境中，等待菌落的生长。
二、真菌培养真菌是另一类微生物，包括蘑菇、面包酵母和霉菌等各种生物种类。
真菌的培养需要相对较高的温度、湿度和通风环境，以及一些常见的试剂和设备：1. 准备基质。
真菌栽培的基质多数为有机材料，如秸秆或蘑菇土等。
这里以蘑菇为例，需要准备好基质和蘑菇种子。
2. 发菌。
将基质放入高温高湿的环境中，等待蘑菇发芽成菌丝。
3. 隔菌子。
将隔绝后的菌丝接种至准备好的蘑菇培养基中。
4. 育种。
等待蘑菇长成成熟的状态，开始拔种并继续育种。
三、细胞培养细胞培养虽然不属于菌类，但是同样是生物学研究中非常重要的一类实验。
细胞培养需要的常见材料有培养基、细胞、培养箱等设备。
以下是具体的操作步骤：1. 细胞分离和分选。
将分离后的细胞和培养基混合均匀。
2. 培养。
将混合好的细胞和培养基放入玻璃培养器中，放置于恒温恒湿的环境中，使细胞开始生长。
3. 替换培养基。
定期更换细胞培养基，以防止细胞过度生长或死亡。
4. 细胞子培养。
将细胞转移到另外的培养基中继续培养，以便更好地衍生出同种或不同种类的细胞株。
以上是常见的几种菌种培养方法，在实验室中，科学家们用各种方法研究这些尚未被完全了解的微观世界，希望能够为治疗疾病、保障食品和提高农业生产水平做出贡献。
菌种的种植方法
菌种的种植方法菌种是生产菌类产品的重要原料之一，其种植方法的好坏直接关系到产品的质量和产量。
本文将介绍菌种的种植方法，希望对菌类生产者有所帮助。
一、菌种的选择选择优质菌种是种植成功的关键。
首先要选择符合国家标准的菌种，其次要选择活力强、繁殖力强、抗病能力强的菌种。
菌种的来源可以是自然采集，也可以是从菌块中提取。
二、菌种的培养菌种的培养是种植的第一步。
菌种的培养可以使用液体培养和固体培养两种方法。
液体培养是将菌种放入含有营养物质的液体培养基中进行培养。
液体培养需要注意的是培养基的pH值、温度、通气等因素，同时要避免污染。
固体培养是将菌种放入含有营养物质的固体培养基中进行培养。
固体培养需要注意的是培养基的配方、温度、湿度等因素，同时要避免污染。
三、菌种的接种接种是种植的第二步。
接种可以使用直接接种和间接接种两种方法。
直接接种是将培养好的菌种直接接入生产菌种的培养基中。
直接接种需要注意的是接种量、接种位置、接种时间等因素。
间接接种是将培养好的菌种先接入一定量的培养基中进行繁殖，然后再将其接入生产菌种的培养基中。
间接接种需要注意的是繁殖时间、繁殖温度、接种量等因素。
四、菌种的培育培育是种植的第三步。
培育是将接种好的菌种放入适宜的环境中进行生长繁殖。
培育需要注意的是温度、湿度、通风、光照等因素，同时要避免污染。
五、菌种的储存储存是种植的最后一步。
储存是将培育好的菌种保存在适宜的环境中，以备下次使用。
储存需要注意的是温度、湿度、通风等因素，同时要避免污染。
六、结语以上就是菌种的种植方法。
菌种的种植方法需要综合考虑多种因素，只有科学合理的种植方法才能获得优质的菌种，从而保证产品的质量和产量。
希望本文对菌类生产者有所帮助。
培养纯菌种可以用哪些方法？
培养纯菌种可以用哪些方法？培养纯菌种可以分为三个步骤，分别是培养母种，培养原种和培养栽培种。
你知道培养纯菌种可以用哪些方法吗？来学习一下吧！一、木棒培养母种这种方法适用于木耳、香菇和银耳等生于段木上的食用菌。
选出菇最多，生长最好的段木，并将其上出菇最多的一节锯下来，长约3厘米，去树皮。
将心木放入75%酒精中消毒2分钟，用蒸馏水冲洗干净，用消毒纱布擦干。
再用刀纵劈成3厘米长的木条，形状像火柴棒，棒中长满了菌丝。
用镊子夹取1条，斜插在试管中马铃薯洋菜培养基的斜面上。
将试管放在25℃的环境中培养，约30天，菌丝长满培养基，就可以得到我们需要的母种了。
这个方法有以下几个特点。
第一个，容易感染杂菌。
因此，段木用75%酒精消毒后，仍应在培养基中加些链霉素、青霉素或金霉素等，其用量是每毫升中加30单位（或1000毫升中加40微克），以抑制杂菌。
第二个，无性繁殖，菌丝为双核菌丝。
第三个，对银耳来说，木条中已有两种菌丝。
接种后，银耳菌丝与香灰菌丝同时生长，香灰菌丝由白色变成浅灰色，培养基由黄变黑，这表明香灰菌丝成熟，而不是杂菌。
二、木塞培养栽培种用打孔器，在桑、榆、槐、乌柏、重阳木、无患子、栗和悬铃木等硬木上打孔，取下圆柱形的木塞，直径约1厘米，长约1.5厘米。
将木塞浸入水中24小时，使其吃透水分，再取出沥水，按其干重的3份比例，加入锯末培养基2份，拌和均匀。
然后进行装瓶，在750毫升的广口瓶中，可装木塞200~300个，其间用锯末培养基填充。
在高压灭菌锅中加压灭菌2小时后，放凉，即可接入原种。
在25℃的室内培养30天，菌丝长满全瓶，即为栽培种。
木塞栽培种，适用于段木栽培香菇、木耳和银耳等。
如果有意识地选择直径10-20厘米的段木，按行距5厘米，株距10厘米的距离，梅花形打孔取木塞，培养成栽培种，则在接种时，将木塞从栽培种瓶中取出来，直接放回原来的孔中，木塞中长满了菌丝，即生入段木中。
菌种瓶中充满着锯末培养基，也是栽培种，可在段木上砍花接种。
菌种扩大培养的一般流程
菌种扩大培养的一般流程菌种扩大培养是微生物学实验中常见的一项操作，其目的是在较小的培养基中培养并扩大菌种数量，以满足后续实验的需要。
下面将介绍一般的菌种扩大培养流程，以帮助读者了解和掌握这一技术。
第一步：选择适当的培养基菌种扩大培养的第一步是选择适当的培养基。
不同的菌种对培养基的要求不同，因此选择合适的培养基是非常重要的。
一般来说，培养基应包含适当的营养物质，如碳源、氮源、矿物质和水等，以满足菌种生长的需要。
第二步：制备培养基制备培养基是菌种扩大培养的关键步骤之一。
一般情况下，制备培养基需要将适量的培养基粉末溶解在适量的蒸馏水中，并进行加热煮沸，以杀灭其中的细菌和其他微生物。
然后，将煮沸的培养基倒入无菌培养皿或试管中，并在冷却后加入适量的菌种。
第三步：接种菌种接种菌种是菌种扩大培养的关键步骤之一。
接种菌种时，首先需要将菌种从原始培养基中转移到新的培养基中。
这可以通过采用无菌的接种环、接种针等工具，将菌种从原始培养基中接种到新的培养基中完成。
为了确保接种的无菌性，可以在接种后进行密封和贴标。
第四步：培养菌种在接种菌种后，需要将培养基置于适当的环境条件下进行培养。
一般来说，菌种的生长需要适宜的温度、湿度和氧气条件。
因此，在培养过程中需要注意保持适宜的培养环境，并定期观察菌落的生长情况。
第五步：检测菌种的生长情况在培养一定时间后，需要检测菌种的生长情况。
这可以通过肉眼观察菌落的形态、颜色和大小等特征来判断。
同时，也可以采用显微镜观察菌落的细胞形态和结构，以进一步确定菌种的生长情况。
第六步：收获菌种在菌种生长到一定程度后，可以进行菌种的收获。
一般来说，菌种可以通过离心、过滤和冻干等方法进行收获。
收获后的菌种可以用于后续的实验操作或保存在冷冻库中。
菌种扩大培养的一般流程包括选择适当的培养基、制备培养基、接种菌种、培养菌种、检测菌种的生长情况和收获菌种等步骤。
通过掌握和熟练操作这一流程，可以有效地扩大菌种数量，并满足后续实验的需要。
蘑菇菌种的培育方法
蘑菇菌种的培育方法
1、建堆发酵
想要自己培养蘑菇菌种，就需要配制适宜的营养基质，可以把无霉变的碎玉米、干牛粪、尿素等混合均匀，并将其堆成一米高的发酵堆，然后上方覆盖一层稻草保温，等发酵堆自然发酵后，即可培养蘑菇菌种。
2、做床播种
当植料堆完全发酵后，且温度降至二十八度时，开始播种菌种，此时要先将培养基质抖松整平，注意中间要比边缘厚两到三厘米，然后将蘑菇菌种接种在基质上，并用塑料布包裹住培养基。
3、出菇管理
养护蘑菇菌种时，要保持一定的空气湿度，而且当菌丝长至距离表层一厘米时，需要及时喷水，使土壤的含水量为百分之十六到十八，并维持温度在十到二十度之间，同时保证两小时的通风时间。
菌种培养过程中常见的问题
在菌种培养过程中，可能会遇到一些常见问题。
以下是一些可能出现的问题以及可能的解决方法：1. 污染：污染是菌种培养中最常见的问题之一。
可能的污染源包括空气、培养基、仪器设备等。
为了防止污染，可以采取以下措施：- 严格的无菌操作：使用无菌技术进行培养操作，包括洗手、穿戴无菌手套、喷雾消毒操作台等。
- 使用高质量的培养基和试剂：选择经过验证和检测的培养基，并确保其无菌。
- 定期检查培养物：观察培养物是否有异常的颜色、形态或气味等变化提示污染发生。
2. 生长不良：菌种在培养过程中可能会出现生长缓慢、生长不均匀或无生长等问题。
解决方法可能包括：- 检查培养条件：检查温度、湿度、氧气和二氧化碳浓度等培养条件是否适合该菌株的生长要求。
- 营养补充：检查培养基中的营养物浓度是否适当，并考虑添加合适的营养物以提供必要的生长要素。
- 检查菌种质量：确保菌种的纯度和活力，可以进行冻存备份或重新分离培养。
3. 发生菌株突变：在长期培养过程中，菌株可能发生突变，导致菌株特性的改变。
要解决这个问题，可采取以下措施：- 定期进行感性检查：定期检查培养基中的菌株特性，如形态、生长速度、代谢产物等。
- 保存原始菌株：在培养初期获得的原始菌株可以保存备份，以备将来恢复原始性状或与突变菌株进行比较。
4. 产物产量低：如果所期望的产物产量低于预期，可能是由于某些因素的影响。
解决方法可能包括：- 优化培养条件：例如，调整温度、pH值、培养基组分等，以最大程度地促进产物的合成和积累。
- 改进培养策略：例如，采用特定的培养方式（如批量培养、连续培养、补料策略等）来提高产物产量。
- 改进菌株选择：有时候，通过筛选和选育新的高产株系或采用遗传工程手段来改进产物产量。
5. pH 值偏离理想范围：菌种在培养基中的生长和代谢通常对pH 值敏感。
如果pH 值偏离了菌种所需的理想范围，可以采取以下措施：- 调整培养基的pH 值：通过添加酸或碱来调整培养基的pH 值，使其适应菌种的生长要求。
培养菌种的方法有几种
培养菌种的方法有几种培养菌种是微生物学研究中的基础技术之一，它是指将微生物在适宜的环境中得以生长和繁殖，以便进行相关的研究和应用。
根据不同的目的和需求，培养菌种的方法可以分为多种不同的类型。
下面将详细介绍一些常见的培养菌种的方法。
一、液体培养菌种的方法液体培养是利用液体培养基来培养微生物。
液体培养常用于大规模的菌种生产和实验室试验，它具有操作简便、易于扩展培养规模的优点。
液体培养可以分为摇瓶培养和搅拌罐培养两种。
1. 摇瓶培养摇瓶培养是将菌种接种到含有适宜营养物的培养基中的密封瓶内，通过摇动瓶子来提供充足的氧气和养分供给，促进微生物的生长繁殖。
在实验室中，常用的摇瓶培养器有搅拌培养器、震荡器等。
摇瓶培养可以适用于各类微生物的培养。
2. 搅拌罐培养搅拌罐培养是将液体培养基和菌种接种到搅拌罐中，通过搅拌罐内的搅拌装置来提供充足的氧气和均匀的营养物供给，促进微生物的生长和繁殖。
搅拌罐培养主要适用于培养需要大量氧气的菌种和生产过程中的大规模培养。
二、固体培养菌种的方法固体培养是指将微生物接种到固体培养基上，通过固体培养基提供的营养物来支持菌种的生长。
固体培养可以分为平板培养和斜面培养两种。
1. 平板培养平板培养是将液体培养基倒入培养皿中，使其凝固成为固体培养基，然后将菌液等接种于培养基表面，使菌落在培养基上生长。
平板培养常用于鉴定微生物种类和菌群分析。
2. 斜面培养斜面培养是将液体培养基倒入试管中，然后将试管斜放，在培养基凝固之前稍微晃动试管一下，使培养基凝固成为一层斜面上，然后将菌液等接种于斜面上，使菌落在斜面上生长。
斜面培养常用于长期保存和分离纯培养菌种。
三、溶液培养菌种的方法溶液培养是将微生物接种到液体溶液中，通过溶液中的养分物质来支持微生物的生长和繁殖。
溶液培养常用于病毒和酵母菌等微生物的培养。
1. 细胞培养细胞培养是通过将细胞接种到含有适宜营养物的液体培养基中，提供合适的生长条件来培养和繁殖细胞。
菌种培养的正确方法
菌种培养的正确方法
菌种培养是微生物学研究中非常重要的一环。
常常被用于研究细菌的形态、生长特性、代谢过程、生产等。
然而，不正确的培养方法不仅会导致实验失败，还可能产生假象和误导，因此，在对菌种进行培养之前，了解正确的培养方法是非常必要的。
以下是菌种培养的正确方法：
1. 选择合适的培养基
选择合适的培养基是培养菌种的一个关键问题。
不同的菌种需要不同的营养成分，在选择培养基时应该考虑到每种菌的生长需要，包括碳源、氮源、矿物质盐、维生素等，不同的营养成分可以使菌种获得最佳的生长环境。
2. 环境要清洁
培养菌种的环境要保持干净，清洁，并且避免强烈的异味或吸烟。
使用灭菌器和消毒剂能够清洁和维护较高水平的清洁环境。
3. 选择适当的培养条件
温度、湿度和氧气浓度对菌种生长有着重要的影响，因此，在培养菌种时应该选择适当的温度、湿度和氧气浓度以保证菌种最佳的生长。
4. 正确的接种
正确的接种方式是培养菌种成功的重要环节。
应该选择正常生长状态的菌种，通过手套、不锈钢钳或者草绳取出并进行接种。
按照实验设计的要求和培养方式将菌种置于培养基上进行培养。
5. 维护好培养条件
在采取上述方法之后，还需要通过定期的检查、记录和调整来维护好培养条件。
当菌种开始生长时，应该及时对培养箱、培养器、培养基以及其他相关设备进行维护，以保证菌种的顺利生长。
总之，正确的菌种培养方法可以使你获得可靠的实验结果，并且减少实验中的变异因素。
培养菌种是微生物学研究的重要手段，我们需要在进行实验前认真了解并实践正确的培养方法，以提高实验的成功率和可靠性。
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在自然界里，食用菌都不是单独存在的，而是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的。
所谓菌种分离，就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来，通过培养，获得纯的优良菌种。
菌种分母种、原种、栽培种。
(一）母种的分离培养食用菌母种的分离，可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。
1.孢子分离法孢子分离法，是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝，培养成菌种的方法。
这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差异，且自然分化现象较严重，变异大，需经出菇试验才能在生产上应用。
（l）单孢分离法：是每次或每支试管只取一个担孢子，让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。
蘑菇和草菇用单孢分离得到的菌丝，有结实能力，可采用此法分离生产纯菌种。
单孢分离生产上较少采用，而且技术复杂，一般采用多孢分离法。
（2）多孢分离法：就是把许多孢子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。
具体操作方法，有以下几种：①种菇孢子弹射法：选择个体健壮、朵形圆正，无病虫害、出菇均匀、高产稳产，适应性强的八九分成熟的种菇，切去大部分，菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。
在接种箱或无菌室内，把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面，漏斗倒盖在培养皿上面；上端小孔用棉花塞住。
培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上，静置12～20小时，菌褶上的孢子就会散落在培养皿内。
形成一层粉末状孢子印（平菇极淡紫色，蘑菇、草菇为褐色，香菇、金针菇孢子印白色）。
用接种针沾取少量孢子在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。
待孢子萌发，生成菌落时，选孢子萌发早、长势好的菌落进行试管培养。
还可用孢子采集器收集孢子。
方法是选好种菇后，按上述程序，轻轻掀开玻璃钟罩，将种菇柄朝下插在孢子采收器的钢丝架上，放在培养皿正中央。
随即盖好玻璃罩，用纱布将钟掌周围塞好。
并在纱布上倒少许升汞或无菌水。
移入20℃左右恒温箱培养。
②褶上涂抹法：按无菌操作分离时；应选择成熟的种菇，用接种针直接插入褶片之间，轻轻抹取褶片表面子实体尚未弹射的孢子，再在培养基上划线接种。
③钩悬法：取成熟菌盖的几片菌褶或一小块耳片（黑木耳、毛木耳、白木耳〕，用无菌不锈钢丝（或铁丝、棉线等其他悬挂材料）悬挂于三角瓶内的培养基的上方，勿使接触到培养基或四周瓶壁。
置适宜温度下培养、转接即可。
④贴附法：按无菌操作将成熟的菌褶或耳片取一小块，用溶化的琼脂培养基或阿拉伯胶、浆糊等贴附在配管斜面培养基正上方的试管壁上。
经6～12小时的培养，待孢子落在斜面上，立即把孢子连同部分琼脂培养基移植到新的试管中培养即可。
孢子分离得到的母种、必须进一步提纯复壮，当母种定植一星期左右，菌丝布满斜面时，选择菌丝健壮、生长旺盛无老化、无感染杂茵的母种试管，进而转管扩大，一般到栽培种，转管不宜超过5次。
孢子分离得到的母种，必须通过出菇试验，鉴定为优质菌种后，才可供生产使用。
一般菌类如蘑菇、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多孢分离法获得母种。
现就银耳孢子分离略述于下：按无菌操作获取种耳后，悬挂种耳的三角瓶经12小时培养后，瓶底培养基表面就有"孢子印"。
取出种耳，置20℃—25℃温箱培养2～3天，培养基表面会出现乳白色透明的糊状小菌落，就是银耳的酵母状分生孢子形成的少量银耳菌丝。
此时移接入试管斜面培养基上，待长满斜面后，再移接入营养丰富，且表面比较干燥的培养基上。
经30天左右，菌落长出白色菌丝。
银耳的酵母状分生孢子、菌丝只有与羽毛状菌丝的子囊菌（香灰菌丝）混合培养时，由后者帮助分解木材及其他一些纤维物质，提供营养，才能利于银耳孢子萌发，菌丝的定植和子实体的形成。
在两种菌丝交会时，先选出两种纯菌丝。
羽毛状菌丝要纯化选育，一般要选取生长迅速，爬壁力强的试管斜面或种瓶，取先端菌丝，转管移接，置25℃—28℃上培养，重复转管几次即可得到优良纯种。
银耳菌丝的特点，菌丝生长缓慢，担孢子也不易萌发。
在进行两菌混合时，先取经8～IO天培养的银耳菌丝斜面，按无菌操作方法在该斜面上距银耳菌丝约0.5厘米处接入一小块羽毛状菌丝。
置25℃下培养1周即得到混合好的银耳母种。
2．组织分离培养法利用子实体内部组织，进行无性繁殖而获得母种的简便方法，即组织分离。
该法操作简便，菌丝生长发育快，品种特性易保存下来，特别是杂交育种后，优良菌株用组织分离法能使遗传特性稳定下来。
常采用以下分离方法。
（l）子实体分离：种菇要选朵大盖厚，柄短，八九分成熟的优良品种。
切去菇两基部，在无菌箱内以0.1％的升汞水浸几分钟，再用无菌水冲洗并揩干或用75％酒精棉球擦拭菌盖与菌柄2次，进行表面消毒。
接种时，只要将种菇撕开，在萌盖和菌柄交界处或菌褶处，挑取一小块组织；移接到PDA培养基上。
置25℃左右温度下培养3-5天，就可以看到组织上产生白色绒毛状菌丝，转管扩大即得到菌种。
如香菇、平菇等可以用此方法。
（2）菌核分离：茯苓、猪苓、雷丸等菌的子实体不易采集。
而常见的是它贮藏营养的菌核。
用菌核分离，同样可以获得菌种。
方法是将菌核表面洗净，用酒精或升汞消毒后，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA 培养基斜面上，保温培养。
应注意的是，菌核是贮藏器官，大部分是多糖类物质，只含有少量的菌丝，因此挑取的组织块要大一些，如果组织块过小，则不易分出菌种。
（3）菌素分离：有一部分子实体不易找到，也没有菌核，可以用菌素进行分离。
如蜜环菌、假蜜环菌。
其操作方法是先用酒精或升汞将菌素表面黑色皮层轻轻擦拭2～3次，然后去掉黑色外皮层（菌鞘），抽出白色菌髓部分；用无菌剪刀将菌髓剪一小段，接种在培养基上，保温培养，即得该菌菌种。
菌素分离要注意：因菌素比较细小，分离素也比较细小，分离时极易污染杂菌，所以要严格操作。
3．基内菌丝分离培养法利用食用菌生育的基质作为分离材料，来得到纯菌种的一种方法，叫基内菌丝分离法。
此种分离方法是适宜只有在特定的季节才出现，而且是朝生暮死，不易采得的子实体。
基内分离法与组织分离法不同之点是，干燥的菇木或耳木中的菌丝常呈休眠状态。
接种后有时并不立刻恢复生长。
因此，有必要保留较长的时间（约1个月），以断定菌丝是否能成活。
基内菌丝分离法又可分为，材中菌丝分离（即菇木或耳木分离法）及土中菌丝分离法等。
（1）材中菌丝分离法：就是菇木或耳木分离法，为了减少杂菌的感染，菇（耳）木在分离之前，必须进行无菌处理。
可以把菇（耳）水表面用酒精灯火焰轻轻烧过，以烧死霉菌的孢子，或再用0.1％的升汞水浸孢几分钟，然后用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干。
接种块切取时应注意。
接种块必须在该菌菌丝分布的范围内切取。
所以，菌丝生长缓慢的种类应浅取；菌种生长快的种类可以深取。
同时。
还应根据菇菌的种类、木材质地、菇（耳）木粗细、发育时间的长短来确定菌丝分布的范围。
然后用一把利刀进行切取。
接种块应尽量小些，以减少杂菌感染机会，提离菌种的纯度。
接种块移到培养基上，就应该放到适合菌丝生长的22℃～26℃的温室或温箱中培养，使菌丝恢复生长。
（2）土中菌丝分离：食用菌种类很多，许多土生的食用菌；孢子不易萌发。
组织分离也不易成功，用土中菌丝分离获得纯种的方法，叫土中菌丝分离。
土中菌丝分离时要注意，由于土中菌丝体的周围生活着多种多样的土壤微生物，因此分离时必须尽可能避开这些微生物的干扰，尽可能批取清洁菌丝素的尖端、不带杂物的菌丝接种，反复用无菌水冲洗，在培养基中加入一些抑制细菌生长的药物，如40微克／升的链霉素或金霉素。
如发现感染细菌，可以把菌落边缘的菌丝挑出来，接种到木屑培养基中。
因细菌没有分解木质素的能力，因此在木屑培养基中不易扩展；只局限于接种处。
待菌丝长出感染区后，就可以再进行扩大提纯了。
（3）子实体基部分离：从瓶栽、袋栽或大床栽培的子实体基部分离出新菌丝的方法，叫子实体基部分离，现以袋栽银耳为例说明：从出耳早、出耳率离、无病虫害的栽培室中；选择生活力最强的幼耳5袋，移到气候温和，有散射光的野外场所进行后期培养，以增强菌丝体的生活力。
经培养7～10天后，待子实体直径达4～5厘米时便可取回，作为分离的母体。
再从中筛选最理想的一朵，用利刀割掉银耳子实体，放置于0℃的冰箱或有敌敌畏的容器中过夜，以便杀死瓶中的害虫。
然后用75％酒精或升汞擦洗耳基和袋子外边的杂质，连同接种工具、接种培养基等移进无菌室。
经灭菌后，用接种刀把袋口上部约15毫米厚的老菌根挖除，并进行培养。
待袋口露出白色菌丝时，用接种针挑取一块半粒米大的白色菌结体，迅速移入母种试管培养基的中央，轻轻地脱去接种针，塞上棉塞。
为了能够获得较多的母种，一次接种量要有100—200支试管，以便从中选择。
分离后应及时移入22℃—24℃恒温箱或温室中培养。
由于培养基内水分较多，菌丝恢复要比耳木分离得快。
经2-3天后，分离物的边缘就可看到白色菌丝。
每天要至少观察两次，以便提纯。
观察、提纯方法与耳木分离法担同。
经适温培养10-15天后，当接种块扭结团出现红、黄色水珠时，即可扩大原种。
（二）原种和栽培种的接种培养母种获得以后，为了满足菌种生产的需要。
应选出优良、纯度高的母种进一步扩大为原种。
原种培养基一般采用棉籽壳、木屑、草类等培养基。
瓶装或袋装的原种培养基灭菌后，可送入灭过菌的接种箱内，待瓶中的培养基冷至30℃以下，可按照无菌操作程序进行接种。
菌种瓶（袋）放入培养室时，要经常进行检查，一经发现杂菌污染，立即取出。
培养成的原种，菌丝体必须健壮有力，紧贴瓶壁而不干缩，颜色纯正，具有一定清香味，生活力强，扩制成栽培种时吃料快。
栽培种就是将原种进一步扩大培养成三级种，它和原种的接种及培养相同。
一般香菇、平菇、冬菇、猴头、木耳、银耳的栽培种多用锯木、棉皮作培养基。
蘑菇多用粪草做培养料。
栽培种要求料块不脱水干缩。
菌丝体健壮有力、颜色纯正，有清香味，无老化现象，无杂菌污染，有的种许可有少量原基，接入栽培料后，发菌快，长势好，生活力强。
原种在接栽培种时，原种瓶口的一层菌丝体应挖去不用。
（三）液体种的简单培养目前，用液体深层发酵法生产菌种，具有生产量大、周期短、菌龄整齐、成本低廉、接种方便等特点，是实现食用菌工厂化生产的目标。
现将液体种培育过程简述于后，供参考。
简言之就是将纯正优良的菌种，接入液体培养基（固体培养基不加凝固剂），使菌丝繁殖形成大量小菌球，然后将这种培养基拌入木屑或棉籽皮料内，制成菌块、培养其形成子实体。
还可用于制原种、栽培种。
培养液体菌种，可将培养液装入三角瓶中，约占空瓶的五分之一重量。
用摇瓶机（也称摇床）来培养。
摇瓶机有旋转式和往复式两种，一般多用往复式。
液体培养基可用马铃薯汁（加糖），麦芽汁配制，也可用玉米粉、豆饼粉、糖、无机盐等配制。
可以混合培养基，因适用于多种食用菌和药用菌的培养，均有好效果。