枯草芽孢杆菌B_1_菌株产蛋白酶液体发酵条件优化
枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件优化
枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件优化李洪康;李由然;李赢;顾正华;丁重阳;石贵阳;张梁【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2016(042)005【摘要】对1株枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵培养基以及发酵条件进行了优化,最终确定了摇瓶最佳发酵培养基为:甘油40 g/L、豆粕粉30 g/L、麸皮10 g/L、Na2HPO44 g/L、K2HPO40.3 g/L.摇床最佳发酵条件为:温度30℃、转速250 r/min、接种量体积分数6％,在此发酵条件下,酶活达到6 082.7 U/mL,发酵强度为56 U/(mL·h).在15 L发酵罐进行了初步验证,通过流加甘油分批发酵,在第25h酶活达到最大值,为11 871 U/mL.【总页数】6页(P102-107)【作者】李洪康;李由然;李赢;顾正华;丁重阳;石贵阳;张梁【作者单位】江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122;江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122;江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122;江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122;江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122;江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122;江南大学,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏无锡,214122【正文语种】中文【相关文献】1.枯草芽孢杆菌J-4菌株产抑菌物质发酵条件优化 [J], 翟玉洁;邓祖丽颖;姜军坡;王世英2.枯草芽孢杆菌8-32产抗真菌物质发酵条件优化 [J], 贾田惠;杨可欣;时向哲;王欢;刘雪娇;高同国;朱宝成3.枯草芽孢杆菌L07产中性蛋白酶发酵条件优化 [J], 卢超;陈景鲜;王国霞;陈刚;李春阁;王会鱼4.枯草芽孢杆菌S-16产抗菌蛋白发酵条件优化及蛋白分离纯化 [J], 路妍;杨鑫;吴文庆;连紫倩;扈景晗;周洪友5.枯草芽孢杆菌SX3411产抑菌物质的发酵条件优化 [J], 丰磊;魏伟群;付鸣佳;肖世平;叶德晓;钟雪晴;黄紫妍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
泡盛曲霉液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件优化
泡盛曲霉液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件优化刘二伟;杨绍青;闫巧娟;江正强【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2017(038)016【摘要】从土壤样品中筛选得到一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的真菌,经鉴定为泡盛曲霉(Aspergillus awamori),命名为Aspergillus awamori CAU33.依次采用单因素试验和响应面分析法优化了其液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件,得到该菌株产酶的最适条件为:玉米芯质量浓度55 g/L、大豆蛋白胨质量浓度25 g/L、曲拉通X-114质量浓度23 g/L、初始pH 4.5、培养温度35℃、培养时间6d.在此条件下β-1,3-1,4-葡聚糖酶活力达到8 447U/mL,为优化前的17.6倍.【总页数】7页(P29-35)【作者】刘二伟;杨绍青;闫巧娟;江正强【作者单位】河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳 471000;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083;中国农业大学工学院,北京 100083;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083【正文语种】中文【中图分类】TS201.3【相关文献】1.产β-1,3-1,4-葡聚糖酶特基拉芽孢杆菌Bacillus tequilensis CGX5-1发酵培养基的优化 [J], 刘晓玲;王金晶;李永仙;李崎2.拟青霉WPG-1的鉴定及固体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶条件的优化 [J], 唐艳斌;胡婉峰3.泡盛曲霉CAU33固体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶发酵条件优化 [J], 刘二伟;刘学强;杨绍青;江正强4.泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化、性质及其用于制备β-葡寡糖 [J], 陈子贤;刘学强;张彬;闫巧娟;江正强5.黄曲霉产胞外β-1,3-1,4-葡聚糖酶的发酵条件优化 [J], 刘璐;陈洲;陈瑶瑶;刘杨柳;李思霆;贾英民;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
枯草芽孢杆菌工程菌株产普鲁兰酶发酵条件的优化
Ｉｄ ｓ ａＥ ｚｍ ｓＴａｊ ｅ ｂｒｔ ｙ ｆｎ ｕｔａＭｉ ｏ ｉｏ ， ｈ ｏ ｅｅ ｆ ｉ ｅｈ ｏ ｇ， ｉ ｊ ｎｖｒｔ ｏ ｎ ｕｔ ｌ ｎｙ ｅ， ｉ ｉ Ｋ ｙ ｏａ ｒ ｏ ｄ ｓ ｉ ｃ ｂ ｌ Ｔ ｅ ｌ ｇ ｏ ｃ ｎｌ ｙＴａ ｉ Ｕ ｉ ｓｙ ｆ ｉ ｒ ｎｎ ａ Ｌ ｏ Ｉ ｒｌ ｒ ｏ ｇ ｙ Ｃ ｌ ｏＢ ｔ ｏ ｎｎ ｅ ｉ
—＝ １ ６ ＝＝ ３
２１ ０ ２年 ７月 第３ ３卷第 ７期
Ｆ ｏ ｅｅｒｈＡ ｄＤ ｖｌ ｍ ｎ ｏｄＲ ｓａｃ ｎ ｅｅ ｐ ｅ ｏ
食品研究与开发
生物 工程
枯草芽孢杆菌工程菌株产普鲁兰酶发酵条件的 优化
刘逸寒 ， 薄嘉鑫 。 王亚品， 张志萌 。 王建玲试 验进行发 酵培养基优化 ，得 到产酶最佳 配方为玉米淀粉 ３０％，酵母 膏 ２ ． ． ０％，ａ １００ Ｃ Ｃ ． ３％， Ｎ ２ Ｐ ．％。 ａ Ｏ１ Ｈ Ｏ 同时对重组菌株摇瓶条件下液体发酵的主要 影响因素初 始 ｐ 接种 量、 Ｈ、 装液量、 转速 、 温度等进行探 讨， 确定 了产酶 最佳培养条件为 ， ３ 以 ％接种量接种 于优化后培养基 ， 初始 ｐ ７ ， Ｈ ． 装液量 ３ ｍｌ２０ ，７ ２０ｄ ｉ ０ ０ Ｊ ５ ｍＬ ３ ℃，０ ｍ ｎ
（ 工业发酵微 生物教育部重点实验室 ， 工业酶 国家工程实验室 ， 天津市工业微生物重点实验室 ， 天津科技大学生物工程学院 ， 天津 ３ ０ ５ ） ０ ４ ７
摘 要 ： 用基 因工程手段获得的产长野 芽孢杆 菌普鲁 兰酶的枯草 芽孢杆 茵基 因工程 菌株 ＷＢ Ｏ／ＷＢ ｐ ｌ 通过 利 ６Ｏｐ － ｕ Ｂ，
摇 床 培 养 ３ 。 此优 化 条 件 下 ， 鲁 兰酶 活 力 达到 ２ ． ／ Ｌ 是 之 前 研 究结 果 （０ ４ ， Ｌ 的 １ ４倍 。 ６ｈ 在 普 ０１ Ｕｍ ， ６ １． ｍ ） ． ９Ｕ ８
玉米原料高产γ-聚谷氨酸优良菌株的选育及发酵条件优化
玉米原料高产γ-聚谷氨酸优良菌株的选育及发酵条件优化梁金钟;李艳华;范洪臣
【期刊名称】《中国生物工程杂志》
【年(卷),期】2007(27)12
【摘要】以筛选到的一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-1为出发菌株,采用紫外诱变技术对出发菌株进行反复诱变,得到一株能够利用玉米原料生产γ-聚谷氨酸的优良高产菌株B-115,摇瓶发酵γ-聚谷氨酸的产量由原菌株的12.5g/L提高到19.5g/L。
再以该菌株为研究对象利用响应面法进行碳源、氮源、谷氨酸钠、金属离子等发酵条件的优化实验,经48h摇瓶发酵,γ-聚谷氨酸产量达到40.98g/L。
【总页数】6页(P46-51)
【关键词】γ-聚谷氨酸;枯草芽孢杆菌;玉米原料;诱变;优化
【作者】梁金钟;李艳华;范洪臣
【作者单位】哈尔滨商业大学食品工程学院;东北农业大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q933
【相关文献】
1.常熟虞山松蕈优良菌株选育及深层发酵条件的优化 [J], 徐兵;郑丽雪;翁渝洁;冀宏
2.γ-聚谷氨酸高产菌株的选育和发酵培养基的初步优化 [J], 邓毛程;宋炜;张远平
3.γ-聚谷氨酸高产菌株选育及发酵条件优化 [J], 罗丽娟;王刚;万玉军;关统伟;李南
臻;庹有朋;吴泽;苟红梅
4.γ-聚谷氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化 [J], 杜沛;宴正;陈双喜
5.γ-聚谷氨酸高产菌株筛选及发酵条件优化 [J], 胡荣章;叶海峰;金丽;吴昌琳;吴自荣
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枯草芽孢杆菌菌株发酵生产工艺优化
３ 结论 风干燥箱 ，上海产，型号 Ｉ Ｏ １ Ａ 一 ３ ；电热恒温培养箱 ，上海产 ，型号 对于培养基的选择应该遵循原料取材方便 ， 来源广泛 ， 价格低廉的 Ｄ Ｈ Ｐ 一 ９ １ ６ ２ ； 垂直流超净工作 台， 上海产 ， 型号 ２ Ｈ Ｊ Ｈ 一 １ １ １ ２ ； 显微镜 ， 日 原则， 酵母膏、 酵母粉这类药品成本较高， 不适用于工业化生产。 本研究 本产 ， 型号 Ｎ ｉ ｋ ｏ ｎ — Ｙ Ｓ １ ０ ０ ； 手提式高压灭菌锅 ， 哈尔滨市医疗器械厂制 在通用培养基中添加了不同比例的的工农业副产品——豆饼粉和麸子 造； 可控温式摇床， 哈尔滨市东联科学仪器厂制造。 即适量的碳源和氮源 ， 根据发酵过程中枯草芽孢杆菌菌体数量的变 １ ． ４方法 。１ Ａ ． １ 菌种活化。 将保存的枯草芽孢杆菌移接到斜面试管 粉 ， 化 ， 得到最佳培养基配方， 即通用培养基 ＋ １ ． ５ ％豆饼粉 ＋ １ ｍ 麸皮 ， 利用 培养基 中， 在恒温培养箱 ３ ７ ±１ 。 ｃ 培养 ２ ４ ｈ 。１ ． ４ ． ２种子液的制备。 取一 这一配方， 生产 出了成本低廉 、 菌活数达 １ ８ 亿 ／ ｍｌ 以上的枯草芽孢杆菌 环 已活化完成斜 面菌种接人到三角瓶种子培养基 中， ５ ０ ０ ｍＬ三角瓶 达到了促进枯草芽孢杆菌菌株生长的目的， 增加了发酵液中菌体 中，装量为 １ ０ ０ ｍ Ｌ种子培养基 ， ３ ７± １ ｏ Ｃ ， １ ８ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ， 摇床 中震荡培养 菌剂 ， 数 量 和代谢 产物 ， 为 工业 化发 酵生 产 和大 面积 推广应 用 提供 充足 的 、 廉 ２ ４ ｈ 。１ ． ４ ． ３ 菌株发酵培养。取 ｌ ｍ Ｌ培养好的种子液， 以２ ％的接菌量ｆ 即 价 的微 生物 菌体及 发酵 菌液 。 在每 ｌ Ｏ Ｏ ｍｌ 的液体培养基 中接入 ２ ｍ ｌ 浓度为 ｌ ｘ ｌ Ｏ ｇ ｅ ｆ ｕ ／ ｍ ｌ 的发酵液汾 参 考文 献 别接入到 ｌ ５ 个（ 每种培养基 ３ 个） 装有 １ ０ ０ ｍ Ｌ发酵培养基的 ５ ０ ０ ｍＬ １ 阿 红， 蔡 学清， 洪永聪等． 辣椒内生细菌的分 离及拮抗菌的筛选ｌ Ｊ １ ． 中国 三角瓶 中， ３ ７ ±１ ℃， １ ８ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ， 摇床中振荡培养 。 １ Ａ ． ４ 测定方法。 将各摇 ［
枯草芽孢杆菌液态发酵的研究
枯草芽孢杆菌液态发酵的研究李情敏;何名芳;张凤英;张超凤;陈卫平【摘要】该研究选取了一株从无花果中分离出的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)作为试验菌株,它可以产生抗逆性强的芽孢,非常适合应用于益生菌饲料加工生产.在单因素试验基础上,进行L9(33)正交试验,获得芽孢产量高、原料成本低廉的液态发酵培养基最佳配方为碎米水解液6％、酵母粉0.7％、KH2PO40.5％;对该菌的摇瓶发酵条件进行了初步研究,确定了液态发酵的最佳条件为pH值为5,温度37℃,接种量6％,转速200 r/mm,培养时间19h.在此最佳培养基配方及发酵条件下,发酵液OD600mm值可达7.38.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)002【总页数】5页(P43-47)【关键词】枯草芽孢杆菌;液态发酵;培养基配方;培养条件;优化【作者】李情敏;何名芳;张凤英;张超凤;陈卫平【作者单位】江西农业大学食品科学与工程学院,江西南昌330045;赣州农业学校食品教研组,江西赣州341100;江西农业大学食品科学与工程学院,江西南昌330045;江西农业大学食品科学与工程学院,江西南昌330045;江西农业大学食品科学与工程学院,江西南昌330045【正文语种】中文【中图分类】TQ920.6益生菌的生理功能有很多，最重要的是可以促进肠道有益微生物的繁殖，降低病原菌数量，提高机体免疫的功能［1］。
益生菌制剂以无毒、无残留、无副作用、不污染环境等优点，使其成为了有效的抗生素替代物，在防治动植物疾病，促进机体发育，延缓人类衰老等方面被人们广泛使用［2］，并成为生态循环农业中的一个重要纽带。
由于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）可形成抗逆性极强的芽孢，在稳定性方面具有先天优势，且枯草芽孢杆菌是我国农业部和美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）允许作为饲料添加剂的菌种［3-4］，其可以产生抑菌活性物质［5-6］，也可以作为一种理想的抗生素替代物。
枯草芽孢杆菌高产中性蛋白酶发酵条件的优化
枯草芽孢杆菌高产中性蛋白酶发酵条件的优化刘颖;张彬彬;孙冰玉;刘琳琳;邹丽宏;石彦国【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2014(035)013【摘要】通过单因素试验和正交试验对枯草芽孢杆菌10075菌株发酵产中性蛋白酶的培养基组分及培养条件进行优化,达到提高菌株中性蛋白酶产量的目的.结果表明,发酵培养基的最佳组分:添加麦芽糖8.0％、蛋白胨4.0％、MgSO4 0.08％;最适发酵条件为发酵温度37℃、初始pH 7.0、发酵时间42 h,酶活力由最初的98.36 U/mL提高到353.45 U/mL.【总页数】5页(P166-170)【作者】刘颖;张彬彬;孙冰玉;刘琳琳;邹丽宏;石彦国【作者单位】哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江省普通高等学校食品科学与工程重点实验室,黑龙江哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江省普通高等学校食品科学与工程重点实验室,黑龙江哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江省普通高等学校食品科学与工程重点实验室,黑龙江哈尔滨150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江省普通高等学校食品科学与工程重点实验室,黑龙江哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江省普通高等学校食品科学与工程重点实验室,黑龙江哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江省普通高等学校食品科学与工程重点实验室,黑龙江哈尔滨 150076【正文语种】中文【中图分类】Q939.97;TS201.3【相关文献】1.枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件优化 [J], 李洪康;李由然;李赢;顾正华;丁重阳;石贵阳;张梁2.枯草芽孢杆菌ZC 1发酵产中性蛋白酶的条件优化 [J], 黄达明;宋庆春;管国强;张志才;李倩3.枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化 [J], LIU Wenlong;WANG Xingji;WANG Kefen;WANG Shuai4.枯草芽孢杆菌L07产中性蛋白酶发酵条件优化 [J], 卢超;陈景鲜;王国霞;陈刚;李春阁;王会鱼5.蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶发酵条件的优化 [J], 于平;吴赟婷;杨柳贞;贺敏;胡淳玉;刘航;易明花因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
微生物学控制与发酵考试重点
微生物学控制与发酵考试重点work Information Technology Company.2020YEAR1、代谢控制发酵：指利用遗传学的方法或者其它生物化学的方法，人为地在脱氧核糖核酸（DNA）分子水平上改变和控制微生物的代谢，使目标产物大量生成、积累的发酵。
2、营养缺陷型：指原菌株由于发生基因突变，致使合成途径中某一步骤发生缺陷，从而丧失了合成某些物质的能力，必须在培养基中补加该营养物质才能生长的突变型菌株。
3、结构类似物：指与代谢途径中的代谢产物结构相类似，能与代谢物一样与调节酶结合引起酶活性的变化，但不具有代谢物生理功能的一类化合物。
4、调节酶：是参与代谢调节的酶的总称。
作为一个反应链的限速因子，对整个反应起限速作用。
常称为关键酶，主要包括变构酶、同功酶和多功能酶。
5、积累反馈抑制：每一个最终产物只单独地、部分地抑制共同步骤第一个酶，并且各最终产物的抑制作用互不影响，当几个最终产物同时存在时，他们的抑制作用是积累的6、转化：指相当大的游离的供体细胞的DNA片段被直接吸收到受体细胞内，并整合于受体细胞的基因组中，从而使受体细胞获得供体细胞部分遗传性状的现象。
7、操纵子：是指原核生物基因组的一个表达调控序列，长度约1000bp左右，由若干结构基因串联在一起，其表达受到同一调控系统的调控。
8、巴斯德效应：在有氧的条件下，由于进行呼吸作用而使酒精发酵和糖酵解作用受到抑制的现象。
9、诱变：利用物理或化学因素处理微生物细胞群体，促使其中少数细胞中的遗传物质（主要是DNA）的结构发生改变，从而引起微生物的遗传性状发生变化，然后通过目的选择标记设法从群体中筛选出少数性状优良的突变菌株的过程。
10、二次生长：在分批培养微生物的过程中，由于微生物分阶段利用基质中的主要成分，而出现的两个高速生长现象。
1、能荷：能荷是机体能量在数量上的衡量形式。
为从量上表示细胞内ATP-ADP-AMP的能量情况，1968年Alkinson提出了能荷概念。
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山地农业生物学报25(6):554~557,2006Jour nal of M oun tai n Agricu lture and B iology⑥菌株产蛋白酶液体发酵条件优化枯草芽孢杆菌B1郭成栓,谢和(贵州大学生命科学学院,贵州贵阳550025)关键词:枯草芽孢杆菌;蛋白酶;液体发酵;影响因素中图分类号:TQ92016;TQ92512文献标识码:A文章编号:1008-0457(2006)06-0554-04Opti m iz i n g li q ui d fer m entation conditions of protease by Bacill u s subtilis B1⑥GUO Cheng-shuan,X IE H e(Co llege of L ife Science,Gu izhou University,Guizhou Guiyang550025,China)K ey word s:B acillus subtilis;protease;liquid fer m en tati on;a ffecti ng fac tors蛋白酶作为一种重要的酶制剂,广泛应用于医药、食品、酿造、纺织以及洗涤剂等行业[1-2],在工农业生产和人们的生活中发挥着重要的作用。
本实验室从酱香酒高温大曲中分离到1株产酱香兼性嗜热枯草芽孢杆菌B1⑥,该菌株可用来生产优异的具有浓郁酱香风味的食品[3]。
研究表明,该菌株产生的蛋白酶与食品酱香风味的产生具有密切的关系,利用提取的蛋白酶可发酵生产出酱香风味的食品[4],因而该菌株产生的蛋白酶在食品开发上具有重要的应用价值。
液体发酵一直是微生物生产酶类的主要方法,然而微生物的代谢过程受到p H、温度、溶解氧等一系列外界条件的影响,不同的菌株其发酵条件有非常大的差别,因此选择一个合适的发酵条件对于蛋白酶的生产是非常必要的。
为此,笔者测定了碳源、氮源、p H值、温度、接种量、种龄、溶氧量等条件对该菌株液体发酵产蛋白酶的影响,以确定其最佳发酵条件,以期为蛋白酶的液体发酵生产和应用奠定一定的基础。
1材料与方法111菌株兼性嗜热枯草芽孢杆菌B1⑥,分离自贵州珍酒高温大曲。
112培养基11211种子培养基细菌种子培养基:葡萄糖10g、蛋白胨5g、酵母膏5g、N a C1014g、KH2HPO40103g、CaC120102g、M gSO417H2O0102g,p H值710~712,121e、011MPa灭菌30m in。
11212发酵培养基碳源、氮源、NaC10.4g、KH2H PO40.03g、C a C120.02g、M gSO417H2O0.02g、p H值710~7.2,121e、011MPa灭菌30m i n。
113蛋白酶活力测定采用FoLin)酚法[5]。
2结果与分析211不同氮源对产酶的影响以2g葡萄糖作为碳源,大豆粉、胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、硫酸铵各2g作为氮源,培养基装收稿日期:2006-06-02;修回日期:2006-07-03作者简介:郭成栓(1977-),男,河南南阳人,华南理工大学在读博士生,主要从事发酵工程的研究。
量为50mL ,自然p H 值,40e 、200r #m i n -1发酵48h ,测定酶活力。
不同氮源的酶活力分别为634L #mL -1、460L #mL -1、520L #m L -1、354L #mL -1、686L #mL -1、0L #mL -1。
由此可见,以牛肉膏为氮源产酶量最高,以硫酸铵作为氮源时则不产酶。
212 不同碳源对产酶的影响以筛选出来的2g 牛肉膏作为氮源,小麦粉、玉米粉、小麦粉+玉米粉、蔗糖、木糖、乳糖葡萄糖各2g 作为碳源,培养基装量为50mL,自然pH 值,40e 、200r #m i n -1发酵48h ,测定酶活力。
不同碳源的酶活力分别为505L #mL -1、461L #m L -1、576L #mL -1、668L #mL -1、518L #mL -1、508L #mL -1、708L #mL -1。
以葡萄糖作为氮源时,产酶量最高,这可能是因为葡萄糖结构简单,是最容易被利用的单糖,不需要被降解和转化。
213 发酵培养基优化实验以葡萄糖、大豆粉、N a C l 作为三因素,采用三水平(单因子初筛)正交实验:葡萄糖(3,4,5)、大豆粉(3,4,5)、NaC l(0.4,0.6,0.8),培养基装量为50mL ,自然pH 值,接种量体积分数为2%,40e 、200r #m in -1发酵48h,测定酶活力。
从表1和图1可以看出,葡萄糖为3g ,大豆粉为4g ,NaC1为016g 时的培养基,产生蛋白酶量最高,说明这是产蛋白酶最优培养基。
从表1还可以看出,各因子对蛋白酶产量影响大小为大豆粉>葡萄糖>N a C1,大豆粉在蛋白酶生产中的作用比较大,极差比较明显。
表1 培养基优化正交实验极差分析Tab 11 The ana lysis o f devia ti o n o f orthogona l expe rm i en t o f optm i izing med ium处理号1葡萄糖2大豆粉3NaC l A B C 重 复 实 验 结 果12总 和11(3)1(3)1(014)11121082219421(3)2(4)2(016)15121490300231(3)3(5)3(018)10421034207642(4)1(3)2(016)10101045220552(4)2(4)3(018)12561314257062(4)3(5)1(014)10361102213673(5)1(3)3(018)910932184283(5)2(4)1(014)11701208237893(5)3(5)2(016)96210341986K 1727260916078K 2676179507043K c 362066198640820239K c 1121210151118K c 2112713251173A 1B 2C 2K c 3103410331068R B >R A >R CR178310105图1 各因素不同水平的生物效应F i g .1 T he b i o log ic effect o f each fac t o r in d i verse level555第6期 郭成栓,等:枯草芽孢杆菌B 1⑥菌株产蛋白酶液体发酵条件优化214 接种量对产酶的影响发酵培养基装量为50mL ,接种量体积分数分别为1%、2%、3%、4%,40e 、200r #m in -1下发酵48h ,测定酶活力。
从图2可以看出,接种量为2%时,其酶活最高。
这说明接种量为1%时由于菌体细胞量少,产酶量也相应降低;接种量为3%、4%时,菌体细胞量太多,在菌体生长期已把营养物质消耗完,到产酶期营养物质浓度降低,不利于菌体产酶,所以蛋白酶产量下降。
215 pH 值对产酶的影响发酵培养基分别配置成初始p H 值为610、710、810、910、1010,装量为50mL,接种量体积分数为2%,40e 、200r #m i n -1发酵48h ,测定酶活力。
从图3可以看出,在初始p H 值为810时,灭菌后p H 值为710,即中性pH 值产酶量最高,这说明中性培养基有利于产酶。
216 温度对产酶的影响发酵培养基装量为50m L ,接种量体积分数为2%,200r #m i n -1分别置于30e 、40e 、50e 下发酵48h,测定酶活力。
从图4可以看出,温度为40e 时,其酶活最高。
217 种龄对产酶的影响发酵培养基装量为50mL ,接种量体积分数为2%,200r #m in -1分别接种种龄为16h 、24h 、32h 、40h 的菌种,40e 、200r #m i n -1下发酵48h ,测定酶活力。
从图5可以看出,接种24h 种龄的种子产酶量最高,这可能是24h 菌龄的菌株进入对数期,菌体产酶最高活性最强。
218 转速对产酶的影响发酵培养基瓶装量为50mL ,接种量体积分数为2%,分别在50r #m i n -1、100r #m in -1、150r #m in -1、200r #m in -1的振荡速度下培养48h ,测定酶活力。
从图6可以看出,随着摇床转速的增加,产酶量也随着增加,这说明增加溶氧量有利于产酶。
219 培养基装量对产酶的影响250mL 的三角瓶中分别装入25mL 、50mL 、75mL 、100mL 发酵培养基,接种量体积分数为2%,200r #m i n -1振荡速度培养48h ,测定酶活力。
从图7可以看出,随着培养基装量的增加,溶氧量降低,其产酶556山地农业生物学报2006年量相应减少。
对枯草芽孢杆菌B 1⑥菌株产蛋白酶液体发酵条件研究结果表明,其液体最适产酶条件:碳源为葡萄糖,浓度3%,氮源为大豆粉,浓度4%,pH 值810,温度40e ,接种量体积分数为2%,种龄24h ;同时随着溶氧量的增高,蛋白酶的产量随之增高。
但是枯草芽孢杆菌B 1⑥菌株发酵液黏性较大,可能是多糖产量较高,不利于蛋白酶的提取。
后续工作可以对菌株B 1⑥进行诱变育种,从而筛选产蛋白酶活力更高和蛋白酶更易提取的菌株。
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