Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒说明书

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Annexin ⅴ凋亡检测试剂盒操作步骤

1. 贴壁细胞,先用胰酶消化;

2. 细胞计数后取5×105 ~1×106 个细胞,1000rpm,4℃离心 10

分钟,弃上清;

3. 加入1ml 冷的PBS,轻轻震荡使细胞悬浮;

4. 1000rpm,4℃离心10 分钟,弃上清;

5. 重复步骤3、4 两次;

6. 将细胞重悬于200ul Binding Buffer;

7. 加入10ul Annexin V-FITC 轻轻混匀,避光室温反应15 分钟

或4℃反应30 分钟。

8. 加入300ul Binding Buffer(总反应体积500 ul)以及5ul PI,上机检测;(建议在加入PI 之前将细胞悬液用200 目筛网过滤。)

9. 若用荧光显微镜检测,将细胞混合液离心,取细胞沉淀涂片,再进行观察。

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