一株犬细小病毒的分离及VP2基因序列分析
犬细小病毒中国内蒙株VP2基因克隆及序列分析
犬细小病毒中国内蒙株VP2基因克隆及序列分析Ξ董江丽1,李淑芬2,张鹤龄11(内蒙古大学生命科学院,呼和浩特010021)2(内蒙古农业大学生物工程系,呼和浩特010018)摘要:从我国内蒙古地区流行的犬细小病毒病病犬的肠溶物中分离提纯犬细小病毒(CPV )。
提取病毒基因组DNA ,并以此DNA 为模板,采用人工合成的引物进行PCR 扩增,PCR 产物经B am H I 、S ac I 双酶切后,克隆于pUC19质粒的B am H I/S ac I 位点。
重组质粒pUCVP2经PCR 鉴定、限制酶切分析和序列分析,结果表明:获得了犬细小病毒内蒙株(CPV 2IM )VP2基因的全长克隆,VP2基因全长1755nt ,与国外报道的美国1株(CPV 2N )、美国2株(CPV 2B )和猫全白细胞减少症病毒(FPLV )的核苷酸序列同源性分别为99.32%、98.29%、98.52%,氨基酸序列同源性分别为98.87%、97.09%、97.77%。
关键词:犬细小病毒;VP2基因;序列分析中图分类号:S852.655 文献标识码:A 文章编号:1003-5125(2000)04-0379-09犬细小病毒(Canine Parvovirus ,CPV )属自主复制的细小病毒,该病毒可引起犬细小病毒病,又称犬细小病毒性肠炎。
本病以剧烈呕吐、出血性肠炎、白细胞显著减少为主要特征,不同品种和年龄的犬都易感,幼犬在16周出现心肌炎、死亡率高达20%～100%[1]。
目前,国内主要采用CPV 灭活疫苗和犬五联弱毒疫苗进行免疫预防,由于母源抗体的干扰及CPV 毒株在强大的免疫压力下产生抗原漂移,常导致免疫失败。
1993年,布日古德等用HA 和HI 调查内蒙警犬基地的CPV 感染,结果表明,在正常接种下,感染率高达26%[2]。
细小病毒是目前动物病毒中最小、最简单的一类单链线状DNA 病毒。
CPV 病毒粒体直径为25nm ,无囊膜,呈二十面体,其基因组为单链、负链DNA ,全长5323nt 。
犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析
犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析林鹏;赵航;王建科;程悦宁;任静强;易立;仝明薇;程世鹏【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2015(042)010【摘要】本试验从北京某动物医院疑似犬细小病毒(CPV)感染犬粪便中分离出一株病毒.通过电子显微镜观察、血凝试验、动物回归试验和分子生物学鉴定,本试验成功分离出一株CPV,命名为BJ-24.对BJ-24株的VP2基因序列分析发现该分离株为CPV-2a亚型,其VP2基因与GenBank中19株CPV VP2基因核苷酸序列有较高的同源性,均在98.7％以上,甚至与CPV-JS2株达到100.0％.系统进化分析结果表明所分离的BJ-24株属于中国分支,与CPV-JS2株遗传距离最近.本试验对进一步开展北京地区CPV的流行病学调查提供基础依据,并对防制病毒传播和疫苗研制奠定了坚实的基础.【总页数】7页(P2587-2593)【作者】林鹏;赵航;王建科;程悦宁;任静强;易立;仝明薇;程世鹏【作者单位】中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室,长春130112【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.犬细小病毒YBYJ株的分离鉴定及VP2基因的序列分析 [J], 张立媛;高旭;陈海迪;于清洋;方爽2.犬细小病毒JN株的分离鉴定及VP2基因序列分析 [J], 姜燕霞;张淑玲;王金良;申识川3.犬细小病毒昆明流行株的分离鉴定与VP2基因序列分析 [J], 赵屹钦;曾梦颖;郭娟;张迪;高洪;严玉霖4.犬细小病毒VP2基因序列分析及BJ-1株的分离鉴定 [J], 周宏专;苏霞;林路路;齐颀;张进;徐福洲;杨兵5.三株犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因序列分析 [J], 陈延宗;钱晶;王晶宇;赵航;毕振威;夏兴霞;诸玉梅;芮荣;王永山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
犬细小病毒JN株的分离鉴定及VP2基因序列分析
况， 分 离鉴 定 Ｃ Ｐ Ｖ 的 当地流 行毒 株 以及 对结 构蛋 白
ＶＰ ２基 因进行 序 列分 析 是 了解 和 掌握 Ｃ Ｐ Ｖ 变异 趋 势 的 主要方 法＿ ４ ］ 。本研 究从 疑似 犬 细小 病 毒感 染 犬 粪便 中成 功分 离鉴 定一 株 Ｃ Ｐ Ｖ， 并 进行 了 ＶＰ ２ 基
病毒科（ Ｐ 口 ｒ ０ 口 Ｐ ） 细小 病 毒属 （ Ｐ ａ ｒ ｖ ｏ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ） ， 基
因序列 分 析 ， 旨在 丰 富 我 国 Ｃ Ｐ Ｖ 分 子 流 行 病 学 资 料， 为Ｃ Ｐ Ｖ 新 型疫 苗与诊 断试 剂 的研究 提供 依据 。
１ 材 料 与方 法
１ ． １ 材 料
引起 的犬 的 一 种 急性 、 烈性传染病 ， 该病 于 １ ９ ７ ８年
在美 国首 次 发现 ， 目前 呈世 界范 围 内流行 ， 是 危 害犬
类 的最重 要 传染 病 之 一 ， 每 年都 给 全 球 养 犬 业 和 宠 物行 业带 来 了 巨大 的 经 济 损 失＿ １ ］ 。Ｃ Ｐ Ｖ 属 于 细小
中 图分 类 号 ： ￥ ８ ５ ２ ． ６ ５ ９ ． ２ 文 献标 识 码 ： Ａ
文章编号 ： １ ０ ０ ７ — ５ ０ ３ ８ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ０ ８ ３ — ０ ４
犬 细小 病毒 病 （ Ｃ ａ ｎ ｉ ｎ ｅ ｐ ａ ｒ ｖ ｏ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ， Ｃ Ｐ ＶＤ） 是 由犬 细 小 病 毒 （ Ｃ ａ ｎ ｉ ｎ ｅ ｐ ａ ｒ ｖ ｏ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ， Ｃ Ｐ Ｖ）
Ｈ Ａ Ｎ Ｔｉ ｎｇ — ｙ ｉ ， Ｗ Ａ Ｎ Ｇ Ｓｈｅ ｎ ｇ — ｇｕ ｉ
犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因的克隆分析
犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因的克隆分析易立;程世鹏;闫喜军;柴秀丽;罗国良;张海玲;王建科;赵建军【期刊名称】《畜牧与兽医》【年(卷),期】2008()4【摘要】2006年从南京疑似细小病毒感染的病犬中分离犬细小病毒一株,分离的病毒培养物能凝集猪红细胞,凝集效价达到128倍,并能被已知的犬细小病毒阳性血清所抑制。
其衣壳蛋白基因VP2被克隆并测序,核酸、氨基酸序列同源性分析表明:血清型为CPV-2b。
通过软件对其氨基酸序列分析,预测VP2区域可能的B细胞表位分别为:5-30,300-320,360-380,380-400,400-420区段,这为犬细小病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。
【总页数】4页(P60-63)【关键词】犬细小病毒;分离;鉴定;克隆;序列分析【作者】易立;程世鹏;闫喜军;柴秀丽;罗国良;张海玲;王建科;赵建军【作者单位】中国农业科学院特产研究所【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.犬细小病毒CPV-SHZ分离株VP2基因的克隆与序列分析 [J], 刘志强;钟发刚;王新华2.犬细小病毒山东分离株VP2基因的克隆与遗传变异分析 [J], 于永乐;张传美;张倩;杨海燕;杨瑞梅;张洪亮;单虎3.成都地区犬细小病毒VP2基因克隆分析及基因型鉴定 [J], 杨晓农;王成东;项振义;王斌;张焕容;杨发龙;于学辉;龙虎;刘群;陈世界;严玉宝;余华4.三株犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因序列分析 [J], 陈延宗;钱晶;王晶宇;赵航;毕振威;夏兴霞;诸玉梅;芮荣;王永山5.犬细小病毒分离株VP2基因的克隆与序列分析 [J], 杨玲;徐向明;殷俊;宗卫峰;陈璐;李厚达因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
犬细小病毒JN株的分离鉴定及VP2基因序列分析
犬细小病毒JN株的分离鉴定及VP2基因序列分析姜燕霞;张淑玲;王金良;申识川【摘要】本研究从疑似犬细小病毒感染犬粪便中分离鉴定一株犬细小病毒,并进行了VP2基因序列分析.分离株病毒命名为JN株,分离株病毒对猪红细胞的血凝效价为1∶512,Reed-Muench法测定分离株病毒TCID50为10-3.5/0.1 mL,动物回归试验显示攻毒犬能复制出犬细小病毒病的典型临床症状和病理变化,VP2基因序列分析表明该分离株为CPV-2a亚型,与GenBank中的8株CPV VP2基因序列核苷酸同源性在98.7 ％～99.6％之间.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2013(034)005【总页数】4页(P83-86)【关键词】犬细小病毒;分离鉴定;VP2基因;序列分析【作者】姜燕霞;张淑玲;王金良;申识川【作者单位】滨州医学院附属医院,山东滨州256603;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;滨州市妇幼保健院,山东滨州256600;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;湖南省宁远县畜牧水产局,湖南宁远425600【正文语种】中文【中图分类】S852.659.2犬细小病毒病（Canine parvovirus disease，CPVD）是由犬细小病毒（Canineparvovirus，CPV）引起的犬的一种急性、烈性传染病，该病于1978年在美国首次发现，目前呈世界范围内流行，是危害犬类的最重要传染病之一，每年都给全球养犬业和宠物行业带来了巨大的经济损失［1－5］。
CPV属于细小病毒科（Parvoviridae）细小病毒属（Parvovirus），基因组为单股线状DNA病毒，全长为5.0kb，编码2个结构蛋白（VP1、VP2），其中VP2蛋白是保护性颗粒抗原，可诱导机体产生中和抗体，VP2中的几个关键碱基和氨基酸的变化就可改变病毒的抗原特性和宿主范围［4－6］。
近年来，CPV不断出现新的变异情况，分离鉴定CPV的当地流行毒株以及对结构蛋白VP2基因进行序列分析是了解和掌握CPV变异趋势的主要方法［4.6－7］。
犬细小病毒DD株的分离鉴定和VP2基因序列分析
Ａ ｓ ａｔ Ａ ｓ ａｎ ｏ ａ ｉｅ ｐ ｒｏｉ ｓ Ｃ Ｖ） ａ ｓｌ ｅ ｒｍ ｂｏｄ ｅｅ ｆａ ｌ ｐ ｐ ｙ ｓｓｅｔ ｆ ｂ ｔ ｃ ： ｔ ｉ ｆｃｎｎ ａｖｖｒ （ Ｐ ｗ ｓｉ ａ ｄ ｆ ｌ ｙ ｆｃｓｏ ｎ ｉ ｕ ｐ ｕｐｃｅ ｏ ｒ ｒ ｕ ｏｔ ｏ ｏ ｌ ｄ ｐｒｏｉ ｓｉ ｅｔ ｎ ｅ ｉｇ ｈ ｔ ｉ，ｄｓ ｎｔｄａ Ｐ ａｖｖ ｕ ｆｃ ｏ ｓｉ Ｂ ｉｎ ．Ｔ ｅｓ ａ ｒ ｎ ｉ ｎ ｊ ｒ ｎ ｅｉ ａ ｓＣ Ｖ—Ｄ ｗ ｓｉ ｌ ｅ ｙｉｏｕａｉｇＣ Ｆ ｅ ｓ ｎ ｇ ｅ Ｄ， ａ ｏ ｔｄｂ ｃｌｔ Ｒ Ｋ ｃｌ ｓａ ｎ ｎ ｌｉ
ｓ ｎ ｈ ｏ ｉｍ ｎ ａ ｄ ｎ ｉ ｅ ｓ ｓ ｒ ｔｐ Ｐ 一２ ｙ Ｐ Ｒ ，ｔ ｅ ＨＡ ，Ｉ Ａ ， ｌｃ ｒ ｎ ｍｉｒ ｓ ｏ ｙ ｏ ｓ ｒ ａｉ ｎ ａ ｄ ｙ ｃ ｒ ｎ ｓ ａ ｄ ｗ ｓｉ ｅ ｔ ｄ ａ ｅｏ ｙ ｅ Ｃ Ｖ ｉ ｆ ａｂ Ｃ ｈ Ｆ ｅｅ ｔ ｃｏ ｃ ｐ ｂ ｅｖ ｔ ｎ ｏ ｏ
［ 关键词 ］ 犬细小病毒 ；Ｐ ； Ｖ ２ 分离； 鉴定
Ｉ ｏａ ｉｎ ｎ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔｏ ｆ Ｃａ ｉ ｒ ｏ ｉｕｓＤＤ ｔ ａｎ ｎｄ ｓ ｌ ｔｏ ａ ｄ Ｉ ｅ ｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｎ ｎｅ Ｐａ ｖ ｖｒ ｉ Ｓｒｉ ａ
Ｓ ｑ ｅ ｃ ａｙ ｉ ｆｔ ｅ ＶＰ ｎ ｅ ｕ ｎ ｅ Ａｎ ｌ ｓｓｏ ２ Ｇｅ ｅ ｈ
ｓｑ ｅ ｃｎ ｆ ２ｇ ｎ ．Ａ ｕ ｉｕ ｌ ｅ ｕ ｎ ｉｇｏ ＶＰ ｅ ｅ ｎｑ ｅＩ ｅ一３ ４ ｉ ２ ｏ ２ ｎＶＰ ｆＤＤ ｓ ａｎｗａ ｕ ｄ，ｃ ｎｒｓ ｎ ｒ ｔ ｉ ｓｆ ｎ ｒ ｏ ｏ ｔ ｔ ｇｔ ａＴ ｙ一３ ４ ｉ ｅＶＰ ａｉ ｏ ２ ｎｔ ２ ｈ
犬细小病毒VP2基因序列分析及BJ-1株的分离鉴定
本研究在对 ＶＰ２基因进 行 分 析 的 基 础 上，对 鉴 定为 Ｎｅｗ ＣＰＶ２ａ的北京毒株进行分离和病毒相 关 特性鉴定，有 助 于 了 解 和 掌 握 目 前 ＣＰＶ 的 流 行 情 况，为更好地防控 ＣＰＶ 提供参考。
１ 材 料 与 方 法
１．１ 材 料 １．１．１ 临床 样 本 临 床 样 品 来 自 北 京 和 山 东 两 地 的宠物医院，病 犬 临 床 症 状 为 呕 吐、腹 泻 等，临 床 疑
似为 ＣＰＶ 感染，同时采集病犬的粪便样品备用。 １．１．２ 细 胞 与 主 要 试 剂 Ｆ８１ 细 胞，本 实 验 室 保 存；ＣＰＶ 单 克 隆 抗 体，ＩＮＧＥＮＡＳＡ 公 司 产 品；Ｇｏａｔ ａｎｔｉＭｏｕｓｅＩｇＧ （Ｈ ＋Ｌ）Ｈｉｇｈｌｙ ＣｒｏｓｓＡｄｓｏｒｂｅｄ ＳｅｃｏｎｄａｒｙＡｎｔｉｂｏｄｙ，ＦＩＴＣ（货 号 Ａ１６０７９），英 潍 捷 基（上 海 ）贸 易 有 限 公 司 产 品；２×Ｅｓ犜犪狇 Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ，康为世纪生物 制 品 有 限 公 司 产 品；粪 便 基 因 组 提取试剂盒、质 粒 提 取 试 剂 盒、ＤＮＡ 片 段 回 收 试 剂 盒、Ｔｏｐ１０ 感 受 态 细 胞 和 细 菌 基 因 组 ＤＮＡ 提 取 试 剂盒，天 根 生 化 科 技 有 限 公 司 产 品；ＤＮＡ 标 准 ＤＬ２０００，ＴａＫａＲａ 有 限 公 司 产 品；ＤＭＥＭ、胎 牛 血
犬细小病毒分离株VP2基因的克隆与序列分析
第 ２ ３卷 第 ３期
２０ ０ ２年 ９月
扬 州大学 学报 （ 业 与生命 科 学 版 ） 农
Ｊ ｕｒ ａ ｆ Ｙａ ｇ ｈｏ ｏ ｎ ｌ ｏ ｎ ｚ ｕ Ｕｎｉｅ ｓ ｔ （ ｒｃ ｌｕｒ ｌａ ｄ Ｌｉ ｃ ｅ ｃ ｓ Ｅｄ ｔｏ ｖ ｒ ｉｙ Ａｇ ｉｕ ｔ ａ ｎ ｆ Ｓ ｉ ｎ ｅ ｉｉ ｎ） ｅ
Ｓｌ ａ Ｉ双 酶 切 筛 选 到 阳 性 质 粒 ， 一 步 对 该 片 段 进 行 序 列 分 析 。结 果 表 明 ：所 扩 增 基 因 片 段 长 度 为 １ ４ ｐ 进 ０ｂ ，与 美 国 参 考 ７ 侏 Ｃ Ｖ— （ｙ ｅ２ 、 Ｐ １ ｔｐ ａ 、 Ｐ ３ （ｙ ｅ２ ） 比较 ， 苷 酸 同 源 性 分 别 高 达 ９ ． 、９ ７ 、９ ７ 。 Ｐ ｄ ｔ ｐ ） Ｃ Ｖ一 ｙ ｅ２ ） Ｃ Ｖ一 ９ ｔｐ ｂ 相 ５（ 核 ９ ５ ９ ． ９ ． 关 键 词 ：犬 细 小 病 毒 ；ＶＰ ２基 因 ；序 列 分 析 ；同 源 性 中 图 分 类 号 ： ５ ． ５ ． Ｓ８ ２ ６ ９ ２ 文 献标识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：１ ７ ４ ５ （ ０ ２ ０ —０ １ —０ ６ １— ６ ２ ２ ０ ） ３ ０ ２ ３
ｍ ｅａ ｅｃ ｒ ｓ ｈａｉ ｅ ｃ ｉ ｎ Ｏ ａ ｐｌ ｙ ｈｅ Ｖ Ｐ２ ｇｅ ． Ｔ ｈ ｐ ｃｆｃ ７ ｐ ａｎｄ ｗ ａ ｍ ｐｌｆ ｄ ａ ｌ ｎｅ ｎｔ Ｕ Ｃ １ ｖ ｃ ｏｒ ａ ｎ ｒ ａ ｔｏ ｔ ｍ ｉ ｔ ｆ ｎｅ ｅ ｓ ｅ ｉｉ １ ４０ ｂ ｂ ｓａ ｉｅ ｎｄ ｃ ｏ ｄ ｉ ｏ ｐ ８ ｅｔ ｔ ｔ ｅ ｔ ｉｔｏｎ ｅ ｈｅ ｒ ｓ ｒｃ ｉ ｎｄｏｎｕ ｅ ｓ ｏ Ｉ ａ ｃｌａ ｅ Ｅｃ Ｒ ｎｄ ＳａｌＩ ｓｔ ｓ Ｔｈｅ ｒ ｃ ｍ ｂ ｎａ ａ ｍ ｉ ｅ ｅ ｉ ｎｔｆｅ ｅ ｔ ｉｔｏｎ ｅ ｉｅ ． ｅ ｏ ｉ ｎｔ ｐｌｓ ｄｓ ｗ ｒ ｄｅ ｉｉｄ ｂｙ ｒ ｓ ｒｃ ｉ ｎｄｏ ｎｕｃｅａ ｅ ｌ ｓ ａ ｌ ｉ． Ｔｈｅ ｅ ｇｅ ｎａｙｓｓ ｘｏ ｎｏｕｓ ｉ ｅｒ ｆｒ ｃ ｍ ｂ ｎａ ａｓ ｉ ａ ｕｒ ｈｅ ｏｎｆｒ ｅ ｙ ｅ ｅ ｅ ａ ｎｓ ｔ ｏ ｅ ｏ ｉ ｎｔｐｌ ｍ ｄ ｗ ｓｆ ｔ ｒｃ ｉｍ ｄ ｂ ｓ ｑｕ ｎｃ ｎａｌ ｉ ． Ａ ｆｅｒｓ ｕｅ ｉ ｙｓｓ ｔ ｅｑ ｎｃｎｇ， Ｖ Ｐ２
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种优 势 ， 尽管不 如育肥性 能 明显 。商品 肉兔 半净膛 率和 全净膛率分别 为５ ． Ｉ ３４ ５６ ］ ． ％￣ ５ ％，后腿 比例 高达 ３ ． ９１ ％，显
示 出较 高 的产 肉 能 力 。 在 肉品 质 方 面 ，Ｉ 和 商 品 代 的 熟 Ｉ 系 肉率 高 于Ｉ ， 说 明 保 水 性好 ；剪 切力 值 较 小 ， 肉较 嫩 。 系
；＾：Ｊ：
ｍ
＾：Ｊ： ：Ｊ １
５７ 。Ｉ Ｉ 交 商 品 兔 在 产 肉性 能 上 也 有 一 定 程 度 的 杂 ． ％ ＸＩ杂
装 的加 工。而皮 板品质指标的变异系数均在 ｌ％以下 ，说 Ｏ 明不 同皮张质量 的一致性较高 。
表３ 商品 兔皮 板质 量评 定结 果 （ｍ、分 ） ｃ
６
２１ 年第 １ （ ０１ 期 总第 １８ ） ６期
毒 ，定名为Ｂ Ｙ２ ０ 。对其ＶＰ 基因进行 了扩增测序 ，初 Ｊ ０６ ２
步 确 定 为２ 亚 型 。 对 该 病 毒 的遗 传 特 性 与 演 化 进 行 了研 ａ
显 的细 胞病 变 ，病 变发 生 在接 种后 ５ｈ，表现 为细 胞 圆 ０
山
３ ２
一
株 犬细 小病毒 的分离及Ｖ ２ 因序 列分析 Ｐ基
杨龙峰① 李英 杰① 艾萍萍① 肖胜 南① 韩 柳② 焦万亮① 王建芬① 张延光① 刘月焕
（ 北京 市延 庆县 农业局 １２０ ② 北 京诚安 动物 医院 ① ０ １０
摘要
⑧ 北京 市农 林科 学 院畜牧 兽 医研 究所 ）
中图分类号 ：￥ ５ ． ８ ２ ５５ ６
１７ 年 ，犬 细小 病毒（ａ ｉｅ ｐｒｏ ｉ ｓ Ｐ 同 时从 ９８ ｃｎｎ ａｖ ｖｒ ， ｖ） ｕｃ 加拿大（ ｈｍｓｎ 、澳 大利亚（ ｌ ） Ｔ ｏ ｏ 等） Ｋｅｙ 患肠炎 的病犬 中分 ｌ 离获得【。Ｃ Ｖ可 引起 犬的出血性肠 胃炎和心肌 炎，并使 ‘ Ｐ 】 白细胞 大量减 少 ，在 幼犬 中的发病 率和死 亡率 都很高 ， 症 状 与猫 泛 白细 胞 减少 症 相似 。本 病 虽 出现 的时 间不
采集病 犬的粪便 ，经处理后接 种狗 肾传代 细胞 系（ ＭＤＣ ） Ｋ ，培 养９ ｈ ６ 无任何细胞病 变，盲传 到第３ 时细胞 系 代
出现 明显 的细胞脱落 ，核 圆缩 ，形成Ｃ Ｅ（ ｔ ａ ｉ ｅ ｅｔ Ｐ ｃ ｏ ｔｃ ｆ ｃ 。继续传代 到ｇ７ ｙｐｈ ｆ ） 代。第 ｌ 代 的细胞培养物 不能凝集猪的红 、２ 细胞 ，第３ 以后 的细胞 培养物可 以凝 集猪 的红细胞 采用Ｐ Ｒ 术，在各代次 的培 养物 中均能扩增得 到特异性 的Ｄ Ａ 代 Ｃ技 Ｎ 片断，经序 列测定后鉴定 为犬细小病毒 ，定名 为Ｂ Ｙ ６ Ｊ ０ 。为进一 步研 究该 分 离株的遗传演化 情况 ，扩增得到 了 Ｐ 基 因 Ｖ２
质 ：而毛 的长度 评分２ 分，说 明毛较 短，非常适合毛 皮服
［】徐 立德 ．家兔 生产 学［ ． 京 ：中 国农业 出版 社，９ ４ １ Ｍ】 北 １９ ．
（］张沅， 家畜育种学［ ．北京： ２ 等． Ｍ】 中国农业大学出版社， ０ １ ２０ ．
（ 收稿 日期 ：２ １－ １ １ ） ０ １ｏ— １
９ ．％ ～ｌ Ｏ 。 ７１ Ｏ％
关键 词 犬细小病毒
病毒分 离 鉴 定 Ｐ Ｒ Ｐ 序列分析 Ｃ Ｖ ２
文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ ．７３２ １）１０ ０ ．３ ０ ７１３ （０ １０ ．０ ６０ 长 ，但 目前 已扩散 到世 界各地 ，几 乎所有 养犬 的地方都 有本病的存在ｔ。１８ 年 １ 月，我国报道在暴发传染性 出 ２ ９２ ０ Ｊ 血性腹 泻 的病 犬 的粪便提 取物 中发现 细小病 毒 ，随后 ， 在我国各地 陆续 有本 病发生的报道 。 本 试验 从临床 发病 犬 的粪 便 中分离 到一株 犬细 小病
表２ 纯系 兔及 配套 商品 兔的产 肉性 能 与肉品 质 （ 、％） ｇ
３ 小 结
杂交试 验 的结果显 示 了两个专 门化 品系 良好 的杂交 效果 ，达到 了多个 经济性状 在 不同 品系分散 选育 ，然后 在 杂种 中进行综合的 目的。预期两系配套杂种在低遗传力
注 ：８ 龄每组 屠 宰２ ４日 Ｏ只 。
缩 、 颗 粒 增 多 ， 胞 核 浓 缩 ， 脱 落 ， 拉 网 ， 病 变 逐 日严
究 ， 以期 为更 好 地 为预 防 和控 制 犬 细 小 病毒 病 提 供 资 料 。同时为大范 围的对Ｃ Ｖ进行流行病学调查提供可行的 Ｐ
的繁殖性状上 的杂种优势应更显著 ，但 限于两系配套 ，繁 ８ ４日龄商 品兔 屠宰后对 板皮 的
殖 性 状 上 的杂 种 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 势不 能得 到 有 效利 用 。
参 考 文献
２３ 商品 兔的板皮质 量 ．
品质进 行了评定 （ ） 由表３ 表３ 。 可知 ，商 品兔 具有较大的
皮板面积 （ ４ ｍ 。密度 、光泽度 、平整度 、含绒率的 ８ ８ｃ ） 评 分均 在３３ 以上 ，评 分较 高 ，显 示 出较 好 的 毛皮 品 ．分
＋ 通讯 作者
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的全序 列。经序列 测定，用Ｄ ＮＳａ软件分析表 明Ｂ Ｙ０ 毒株 为Ｃ Ｖ ２ ： 型 ， 所得 到的Ｖ ２ 因全长 １５ ｂ ，含有 完整 Ａ ｔ ｒ Ｊ ６ Ｐ －ａ － ． ￣ Ｐ基 ７５ ｐ 的 阅读 框 架 ，编 码 ５ ４ 氨 基 酸 。 与 其 它 亚 型 的 毒 株 相 比较 核 苷 酸 的 同 源性 为 ９ ． ９ ． 。氨 基 酸 同 源 性 为 ８个 ８３ ９６ ％～ ％