HMOX1对巨细胞病毒感染小鼠肝癌进程影响机制研究

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HMGB1在内毒素血症小鼠肝损伤中的作用

HMGB1在内毒素血症小鼠肝损伤中的作用

HMGB1在内毒素血症小鼠肝损伤中的作用柳毅;陈国千;袁劲松;帅朝霞;徐明【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2009(013)012【摘要】目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在内毒素血症小鼠肝损伤中的作用.方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、0.2 mg/kg脂多糖组、1 mg/kg脂多糖组、5 mg/kg脂多糖组、AG 490处理组和氟达拉宾处理组,AG 490和氟达拉宾的使用剂量分别为20 mg/kg和10 mg/kg.于腹腔注射后不同时间观察肝组织HMGB1 mRNA表达、血清HMGB1水平和丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活力的变化.HMGB1 mRNA表达和HMGB1含量分别采用RT-PCR方法和ELISA检测.结果小鼠注射脂多糖后,肝组织HMGB1 mRNA表达、血清HMGB1水平和丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活力均呈剂量相关性升高,而使用JAK/STAT通路抑制剂AG 490和氟达拉宾处理后,以上指标均明显下降(P<0.05).结论脂多糖诱导的HMGB1释放与胞内JAK/STAT信号通路有关,HMGB1在内毒素血症小鼠肝损伤中具有作用.【总页数】4页(P1704-1707)【作者】柳毅;陈国千;袁劲松;帅朝霞;徐明【作者单位】南京医科大学附属无锡人民医院,医学检验科,江苏,无锡214023;南京医科大学附属无锡人民医院,医学检验科,江苏,无锡214023;南京医科大学附属无锡人民医院,医学检验科,江苏,无锡214023;皖南医学院第二附属医院,检验科;卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R364.7【相关文献】1.Toll样受体4在内毒素血症小鼠心肌TNF-α表达中的作用初探 [J], 程姝娟;薛桥;王士雯2.库普弗细胞在内毒素血症致肝损伤中的作用 [J], 罗玉政;宋林学;龚建平3.Mas受体在内毒素血症急性肝损伤大鼠肝组织中动态表达的研究 [J], 齐海宇;肖红丽;文艳;段婷;阴赪宏4.NF-κB在内毒素血症大鼠肝损伤中的变化及意义 [J], 张慕;裴凌5.血小板活化因子在内毒素血症肝损伤中的作用及机理 [J], 杜文华;陈惠孙;胡德耀;陆松敏因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

三氧化二砷抑制小鼠体内肝癌细胞增殖的实验研究

三氧化二砷抑制小鼠体内肝癌细胞增殖的实验研究

三氧化二砷抑制小鼠体内肝癌细胞增殖的实验研究唐印华;田永刚;刘铁夫;徐洪雨;庄丽维;梁桃;姜爱民【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2005(13)17【摘要】目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠H22肝癌细胞增殖的抑制作用.方法:建立小鼠H22肝癌实体型及腹水型移植瘤模型,腹腔应用As2O3治疗后,通过瘤体生长及生存时间的比较,PCNA及cyclinD1免疫组化检测,腹水细胞周期的流式术检测,电镜观察等指标反映细胞增殖改变.结果:As2O3高剂量及低剂量组均有效地抑制实体瘤组荷瘤鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为39.1%和45.7%,且明显延长腹水瘤组荷瘤鼠的生存时间,延命率分别为57.2%和97.7%,其作用呈一定的量效关.PCNA及cyclinD1阳性表达率均明显降低,分别由57.9±6.6%降为44.0±5.0%(P<0.01),由49.2±9.3%降为37.6±6.3%(P<0.01).腹水流式细胞术可见细胞周期发生明显变化,主要作用于G0/G1期及G2/M期,电镜观察可见细胞发生典型的凋亡形态学改变,并可见早期凋亡小体形成.结论:As2O3对小鼠肝癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,具有治疗肝癌的潜在价值.【总页数】4页(P2074-2077)【关键词】三氧化二砷;肝癌;小鼠【作者】唐印华;田永刚;刘铁夫;徐洪雨;庄丽维;梁桃;姜爱民【作者单位】哈尔滨医科大学第一临床医学院消化内科;哈尔滨医科大学第四临床医学院普通外科【正文语种】中文【中图分类】R735.7;R733.71【相关文献】1.rhTNFα加rhIL-2诱导小鼠CNE3细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究 [J], 焦伟;刘时才;莫祥兰;黄振录2.三氧化二砷抑制肝癌细胞增殖的体内实验研究 [J], 唐印华;刘铁夫;等3.消软肝方抑制荷瘤小鼠H22肝癌细胞增殖与诱导凋亡作用的实验研究 [J], 苏春芝;赵惠;孙丽静;郝艳超;王瑞超;周顺;;;;;;;;;;;;;;;;;;;4.阿霉素诱导小鼠MCF-7乳腺癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究 [J], 王文武;欧阳学农;姜浩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

肝细胞生成素(HPO)在肝癌细胞侵袭性生长中的作用

肝细胞生成素(HPO)在肝癌细胞侵袭性生长中的作用

中国人民解放军军事医学科学院硕士学位论文肝细胞生成素(HPO)在肝癌细胞侵袭性生长中的作用姓名:***申请学位级别:硕士专业:肿瘤学指导教师:张伟京;杨晓明20030927——墨兰塑堕堕英文缩略语HPOhepatopoiefinALRaugmenterofliverregenerationHGFhepatoc.vtegrowthfactorMMPmatrixmetalloproteinaseu队ECMPCRRT.PCRG3PDHFBSDEPCBSAEDTAIPTGX-galrpmSDSF!AGEAP,1肝细胞生成素肝再生增强因子肝细胞生长因子基质金属蛋白酶urokinase-typeplasminogenactivator尿激酶型纤溶酶原激活物extracellularmatrix细胞外基质polymerasechainreaction聚合酶链式反应reversetranscriptionPCR反转录PCRglyceraldehydes·3一phosphatedehydrogenase甘油醛.3.磷酸脱氢酶fetalbovineserum胎牛血清Diethylpyrocarbonate焦磷酸二乙酯bovineserumalbumin牛血清白蛋白Ethylenediaminetetraceticacid乙二胺四乙酸Isopropyl-8-D-thiogalactoside异丙基.B.D.硫代半乳糖菅5-Bromo,4-chloro-3-indolyl-B—D—galactoside5-溴.4.氯一3一吲哚.B—D.半乳糖苷rotateperminute每分钟转速sodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠polyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳activatorprotein1激活蛋白1中文摘要肝细胞生成素(HPO)在肝癌细胞侵袭性生长中的作用摘要肝细胞生成素(I-tPo)是一种能够特异性刺激肝源细胞增殖的细胞活性因子,与肝损伤后修复关系密切。

HMGB1对肝癌细胞侵袭和转移影响的实验研究的开题报告

HMGB1对肝癌细胞侵袭和转移影响的实验研究的开题报告

HMGB1对肝癌细胞侵袭和转移影响的实验研究的开题报告题目:HMGB1在肝癌细胞侵袭和转移中的作用研究背景:肝癌是一种常见的恶性肿瘤,其容易侵入周围组织和转移至其他部位,给患者带来极大的威胁。

此外,许多研究已经证明,高迁移率族HRas是引起肝癌转移的关键基因。

但是,目前关于肝癌侵袭和转移的分子机制仍然不清楚。

高迁移率族HRas结合蛋白1 (HMGB1) 是一种DNA结合蛋白,广泛参与细胞周期、DNA修复、抗病毒、肿瘤发生和关键的转化过程等多种细胞生物学过程。

最近的研究表明,HMGB1可能在肝癌细胞侵袭和转移中发挥重要作用。

目的:本研究旨在进一步探究HMGB1在肝癌细胞侵袭和转移中的作用。

方法:采用人肝癌细胞株 Huh7 作为研究对象,应用 RNA 干扰技术或过表达技术,调控 HMGB1 在 Huh7 细胞中的表达水平。

通过划痕试验、Transwell细胞侵袭试验、转移实验等方法,检测 HMGB1 对 Huh7 细胞侵袭和转移的影响。

通过 Western blotting 技术检测 HMGB1 对 Huh7 细胞相关信号通路的调控。

预期结果:我们预计 HMGB1 对肝癌细胞的侵袭和转移具有显著影响。

过度表达 HMGB1 可以增强 Huh7 细胞的侵袭和转移,而 HMGB1 的沉默则可以减弱 Huh7 细胞的侵袭和转移。

通过 Western blotting 技术,我们还将确定 HMGB1 是否可通过调节与肝癌转移相关的信号通路来实现其效应。

意义:本研究将有助于深入了解 HMGB1 在肝癌细胞侵袭和转移中的作用机制,因此将为肝癌治疗和预防提供新的思路和策略。

HMGB1抗体对刀豆蛋白A引起小鼠肝损伤的保护作用

HMGB1抗体对刀豆蛋白A引起小鼠肝损伤的保护作用

HMGB1抗体对刀豆蛋白A引起小鼠肝损伤的保护作用黄泽炳;黄燕;周蓉蓉;陈若蝉;易盼盼;李宁;范学工【摘要】Objective To detect the protective role of high mobility group box-1 protein (HMGB1 )antibody in concanavalin A(ConA)-induced liver injury in mice.Methods The healthy male Balb/c mice were grouped into con-trol group (saline injection),model group(ConA injection)and experimental group(ConA+HMGB1 antibody injec-tion).After 6 hours of injection,mice blood was collected for detecting alanine transaminase (ALT)and HMGB1 , liver tissue was used to do HE stain,Tunel,and immunofluorescence detection.Results Pathological inflammation in experimental group was slighter than model group.The levels of ALT and HMGB1 in mice serum were (52.00± 8.34)U/L and (7.54 ±0.53)ng/mL in control group,(5 551 .50 ±1 445.74)U/L and (18.06 ±1 .65 )ng/mL in model group,(1 977.40±654.89)U/L and (10.77±0.71)ng/mL in experimental group,respectively;the expres-sion levels of HMGB1 mRNA and HMGB1 (relative value)in liver tissue were 1 .886±0.253 and 0.086±0.028 in control group,4.718±0.341 and 0.268±0.043 in model group,3.005 ±0.331 and 0.116±0.008 in experimental group,respectively;the expression levels of ALT and HMGB1 in serum,as well as HMGB1 mRNA and HMGB1 in liver tissue of experimental group were all lower than model group(all P<0.001).Apoptosis and HMGB1 migra-tion in the liver cell (normalized)were 1 ±0 and 1 ±0 in control group,4.67 ±0.33 and 4.50±0.22 in model group,2.67±0.21 and 2.33 ±0.21 in experimentalgroup,respectively;apoptosis and HMGB1 migration in liver tissue of experimental group were both lower than model group(both P<0.001).Conclusion HMGB1 antibody can improve the pathological injuryof liver tissue,and protect mice liver against the injury induced by ConA.%目的:研究高迁移率族蛋白1(HMGB1)抗体对刀豆蛋白 A(ConA)引起小鼠肝损伤的保护作用。

甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中HMGB1表达的影响

甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中HMGB1表达的影响

甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中HMGB1表达的影响张留鲁;罗新华;危敏【摘要】目的:探讨甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中小鼠肝组织高迁移率族蛋白 B1(HMGB1)表达的影响。

方法取雄性昆明种小鼠72只,随机分为正常对照组、急性肝功能衰竭组及甘草酸二铵治疗组。

模型组及治疗组予 D-Galn 500 mg/kg 及LPS 10μg/kg 腹腔注射建立急性肝功能衰竭小鼠模型,并于建模1 h 后予以甘草酸二铵70 mg/kg 对治疗组小鼠进行灌胃处理,正常对照组及模型组予等量生理盐水灌胃。

以建模后4,8,12,24 h分别取静脉血以常规生化方法检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平,HE 染色法检查肝组织病理学变化,采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR 检测小鼠肝组织中 HMGB1的蛋白表达量及 mRNA 水平。

结果模型组及治疗组小鼠血清ALT 和AST 水平均显著高于正常对照组(P <0.01),且模型4,8 h 组小鼠血清 ALT 和 AST 含量均高于相应治疗组(P <0.05),模型8,12,24 h 组及甘草酸二铵治疗12,24 h组小鼠血清 TBIL 水平均显著高于正常对照(P <0.05)。

免疫组化结果发现,模型8,12,24 h 组及治疗8,12,24 h组小鼠肝组织中 HMGB1蛋白表达水平较相应正常对照组显著增加(P <0.01),且随肝衰竭发展明显增加,模型8,12 h 组 HMGB1蛋白表达量高于相应甘草酸二铵治疗组(P <0.05)。

Real time-PCR 结果显示,模型组和治疗8,12,24 h 组小鼠肝组织 HMGB1 mRNA 表达量高于正常对照组(P <0.05),模型8 h、12 h 组 HMGB1 mRNA 表达量高于相应治疗组(P <0.05)。

结论HMGB1在小鼠急性肝功能衰竭过程中发挥了重要作用。

甘草酸二铵可能通过抑制HMGB1的产生减轻肝损伤。

癌消I号对肝癌H_(22)和艾氏腹水瘤小鼠的影响

癌消I号对肝癌H_(22)和艾氏腹水瘤小鼠的影响

癌消I号对肝癌H_(22)和艾氏腹水瘤小鼠的影响
郭玲;雷成康;郭惠玲;赵勤
【期刊名称】《现代中医药》
【年(卷),期】2006(26)1
【摘要】目的研究癌消I号对肝癌22和艾氏腹水瘤小鼠的作用。

方法以肝癌(H22)小鼠和艾氏腹水瘤(EAC)为模型,观察癌消I号的抗肿瘤作用,并分别计算出抑瘤率和生命延长率。

结果相当于生药3、6、12g/kg的癌消I号对肝癌(H22)小鼠的抑瘤率均在40%以上,与对照组比较差异均有显著性意义,P<0.01;能延长艾氏腹水瘤(EAC)小鼠的生存期,生命延长率均在50%以上,与对照组比较差异均有显著性意义,P<0.01。

结论癌消I号对肝癌H22和艾氏腹水瘤有明显作用。

【总页数】2页(P4-5)
【关键词】癌消Ⅰ号;肝癌(H22);艾氏腹水瘤
【作者】郭玲;雷成康;郭惠玲;赵勤
【作者单位】陕西中医学院中药系
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
【相关文献】
1.消癌平与消癌平联合奥曲肽对肝癌H22小鼠肿瘤生长影响 [J], 陈妍;杜秀玉;裴毅
2.消癌解毒方对H_(22)荷瘤小鼠基因表达谱的影响 [J], 吴勉华;李黎
3.瘤体内注射消痔灵对荷H_(22)肝癌小鼠凋亡蛋白表达的影响 [J], 崔艳;肖曼丽
4.“治癌灵”穴贴及针刺对H_(22)肝癌小鼠抑癌作用的影响 [J], 刘瑞;周艳丽
5.扶正消癥方(含药血清)对H_(22)肝癌荷瘤小鼠IL-8及VEGF的影响 [J], 周语平;李华;刘光炜;陈彻
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HCMV IE1蛋白对小鼠Raw264.7细胞株TNF-α、IL-1β表达的影响

HCMV IE1蛋白对小鼠Raw264.7细胞株TNF-α、IL-1β表达的影响

HCMV IE1蛋白对小鼠Raw264.7细胞株TNF-α、IL-1β表达的影响罗开军【期刊名称】《实用预防医学》【年(卷),期】2007(14)4【摘要】目的构建人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)立即早期蛋白1(IE1)真核表达载体pcDNA3.1(-)-IE1,将其转染小鼠巨噬细胞Raw264.7细胞株,观察IE1蛋白在细胞中的表达及其对小鼠巨噬细胞Raw264.7分泌细胞因子功能的影响。

方法双酶切pQE30-IE1,回收目的基因IE1,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),筛选、鉴定阳性克隆得pcDNA3.1(-)-IE1;提取质粒pcDNA3.1(-)-IE1,通过Super FectTM脂转染试剂将质粒pcDNA3.1(-)-IE转染Raw264.7细胞,Western-blot鉴定IE1蛋白的表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养上清液中细胞因子TNF-α、IL-1β的表达水平。

结果与结论①成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-IE1;②pcD-NA3.1(-)-IE1能在Raw264.7细胞中表达;③IE1的表达可上调巨噬细胞TNF-α、IL-1β的表达水平。

【总页数】4页(P1031-1034)【关键词】人巨细胞病毒;即刻早期蛋白1;巨噬细胞;细胞因子【作者】罗开军【作者单位】吉首大学医学院【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.腺病毒介导的小鼠过氧化物酶体增殖剂活化受体γ基因过度表达对Raw264.7细胞小窝蛋白-1基因和蛋白表达影响的实验研究 [J], 胡琴;张宪军;姜虹;朱清;张运;刘春喜;张梅;井玛;贺红;冯进波;王蓉;蒋桂花2.RAW264.7小鼠巨噬细胞与阿萨希毛孢子菌相互作用后TNF-α、IL-1β和CCL3的表达变化 [J], 丛林;夏志宽;李海涛;杨蓉娅3.异丙酚对内毒素诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞P2X7受活化和IL-1β蛋白合成的影响 [J], 刘红亮;刘玉华;戴体俊4.氨基多糖纳米微粒对 RAW264.7 细胞株TNF-α基因mRNA表达量的影响 [J], 赵义龙;黄金凤;李云华;陈雪;李太元;全海志;许梓荣;赵金香5.青心酮对活化RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳及TNF-α表达的影响 [J], 张代娟;吴萍;盘茜;万敬员;张力;吴涛;周晓燕;叶笃筠因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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p<0.01
组3(实验1) 组3 HO-1蛋白含量
项目预期
组3(实验1) 组3 miR122含量
组3(实验1) 组3 肝细胞活性
存在的问题
• HCMV与MCMV之间的差异对实验结果的影响 • 关于HO-1对肿瘤细胞生长的研究有不同的结论 • 本项目建立的小鼠肝癌模型属于早期肝癌,进行HO-1干
预的实验结果与临床上中晚期使用索拉非尼进行化疗的效 果之间可比程度如何
项目操作
实验三: 组2,3小鼠10只,分别取肝组织1g 构建miR122过表达载体,转染; 测量HO-1蛋白含量、miR122的转录水平、肝细胞/肝癌细胞 的活性;
项目操作
实验一:
p<0.01 p<0.01
p<0.01 p<0.01
p<0.01 p<0.01
组1 组2 组3 HO-1蛋白含量
项目预期
项目设计
小鼠肝癌模型制备
MCMV感染
CMV
分组C、57B肝L/6组J 织分离
项目操作
组1:正常组:20只 组2:肝癌组:30只 组3:感染组:30只
观察指标: HO-1表达水平(免疫组化法):表达HO-1阳性细胞百分比、 阳性显色度 肝细胞活度(MTT法):吸光度OD值 miR122表达水平(RT-PCR)
HMOX1对巨细胞病毒感染小鼠肝 癌进程影响机制研究
• 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属于β疱疹病毒亚科, 是巨细胞包涵体病的病原体,人群感染十分普遍,但通常为潜伏感染, 临床上常无症状。
• 根据目前的研究进展,HCMV主要起到了肿瘤调节作用,例如在协同人 乳头瘤病毒(HPV)使人正常鳞状上皮恶变过程中起到了协同作用。
• 诸多实验观察发现,患严重肝病时,机体免疫力降低,可使体内潜伏 的HCMV被激活,造成活动性感染,同时也提示HCMV活动性感染与肝癌 发展可能存在关联性。
• 最新的研究结果显示,HCMV在PHH和HepG2细胞系中培养,可通过激活 IL-6-JAK-STAT3信号通路促进细胞增殖和生长,可能与肿瘤形成有关。
p<0.01
项目思路
HO-1 expression in monocytes infected with s
control NF-kB inhibitor
项目思路
breast cancer patients: peripheral blood monocytes
• Heme oxygenase-1 could be considered as a new marker in the diagnosis of some cancers, especially hepatomacarcinoma.
• The combination of gene-silencing effect of HO-1 and chemotherapy might be considered as a new modality for the treatment of cancers in which the expression HO-1 is up-regulated.
p<0.01
项目思路
control metadherin depletion
HO-1 expression in lung metastatic breast cancer cell line
抗氧化
HO-1的细胞保护作用
抗凋亡
抗增生
a)降解产物的作用; b)抑制NOS; c)影响p21的表达; d)影响Bcl-2的表达; e)存在AP-1、STAT结合位点; f)HO-1/CO→p38MAPK,NFkB通路
项目操作
实验一: 取组1,2,3肝组织各10份,每份3g,各制备成细胞悬液后 平均分成3份,分别测量HO-1蛋白含量、miR122的转录水平、 肝细胞/肝癌细胞的活性;
项目操作
实验二: 取组1,2,3肝组织各10份,每份3g,各制备成细胞悬液后 平均分为3份,加入选择性HO-1抑制剂锌原卟啉IX,分别测量 HO-1蛋白含量、miR122的转录水平、肝细胞/肝癌细胞的活 性;
Bahmani P, Hassanshahi G, Halabian R, et al. The Expression of Heme Oxygenase-1 in HumanDerived Cancer Cell Lines[J]. Iranian journal of medical sciences, 2011, 36(4): 260.
背景介绍
• 针对HCMV在肝癌早期发展过程中的作用(此种作用可能促进乙肝病毒 的感染)以及HCMV参与调节的肝癌细胞信号通路,寻找特定靶点进行 干预,可望在早期干预肝癌演进,同时配合相关治疗手段,促进肝癌 预后。
项目意义
• 现已查明,处于潜伏状态的HCMV,尽管呈组织泛嗜性,但不会感染 外周血白细胞。相反,一旦再活化,即可在外周血白细胞检测出。
项目思路
Sorafenib索拉非尼
抑制 RAF/MEK/ERK 临床治疗clinical therapy
项目思路
抗凋亡
新靶点new target
miR122 ↓
HMOX1↑
HCMV 感染
激活IL-6-JAK-STAT3 激活ERK/MAPK 以及其他可能机制
凋亡
• 基于血红素加氧酶1(HMOX1/HO-1)在肝癌中的异 常表达及其与miR122之间的关联性,观察干预HO1、miR122表达对肝癌细胞生长的影响。
项目思路
• Up-regulation of (HO-1) has contributed to tumorogenicity of some cancers.
• The examined cancer cell lines constitutively expressed different variety of HO-1 on mRNA level. Strong expression of HO-1 was observed in HepG2, MCF-7 and A549 cells.
组1 组2 组3 miR122含量
组1 组2 组3 肝细胞活性
实验二:加入HO-1抑制剂
p<0.01
p<0.01 p<0.01
p<0.01 p<0.01
组1 组2 组3 HO-1蛋白含量
项目预期
组1 组2 组3 miR122含量
组1 组2 组3 肝细胞活性
实验三:诱导miR122过表达
p<0.01 p<0.01
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