2型糖尿病动物模型研究概况
2型糖尿病大鼠模型的建立及其糖代谢特征分析
引言：
2型糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其发病率逐年上升。该病的发生与遗 传、环境、生活方式等多种因素有关。为了深入研究2型糖尿病的发病机制和治 疗方法，建立可靠的动物模型是至关重要的。大鼠作为常用的实验动物，具有易 饲养、易繁殖、费用低等优点，被广泛应用于医学研究中。
在本次演示中，我们通过腹腔注射链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模 型，并对其糖代谢特征进行分析。
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实验组（n=18）360±406.5±0.810.6±2.7*
注：与对照组比较，*P<0.05。
3、胰岛素抵抗与胰岛细胞功能
与对照组相比，实验组大鼠的HOMA-IR显著升高（P<0.05），而ISI显著降低 （P<0.05），表明实验组大鼠存在胰岛素抵抗和胰岛细胞功能受损。结果如表2 所示。
与对照组相比，实验组大鼠的体重和血糖水平均显著升高（P<0.05），而对 照组大鼠的体重和血糖水平无明显变化（P>0.05）。结果如表1所示。
表1：两组大鼠体重与血糖水平 比较（x±s）
组别体重（g）FPG（415±355.0±0.67.8±1.9
表2：两组大鼠胰岛素抵抗与胰 岛细胞功能比较（x±s）
组别HOMA-IRISI
对照组（n=19） 1.9±0.416.4±3.8
实验组（n=18）3.6±0.89.5±2.7
注：与对照组比较，*P<0.05。
4、讨论
本研究成功建立了2型糖尿病大鼠模型，并发现模型大鼠的体重、血糖水平 和胰岛素抵抗指数均显著高于对照组，而胰岛细胞功能指数显著低于对照组。这 些结果表明，建立的2型糖尿病大鼠模型符合临床2型糖尿病的特征，为研究该病 的发病机制和治疗提供了可靠的动物模型。然而，建模过程中可能受到某些因素 影响，如STZ剂量、注射途径等。
2型糖尿病动物模型的建立
内容提要糖尿病是一类由遗传、环境、免疫等因素引起的以高血糖为特征的代谢性疾病。
近年来发病率显著上升，2003年国际糖尿病联盟(IDF)报告全球糖尿病病人已超过1.94亿，预计到2025年这个数字将增加近一倍(3.33亿)。
其中2型糖尿病的发生，在国外占整个糖尿病比例的85%~95%以上，而国内则更高，达98%以上。
因此，建立比较理想的2型糖尿病动物模型对于糖尿病防治药物的研究具有十分重要的意义。
本研究采用先高脂喂养实验动物一段时间再给予链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病动物模型。
研究结果表明：高脂喂养SD大鼠28天后一次性腹腔注射链脲佐菌素 40mg/kg，可以建立稳定的具有高血脂和胰岛素抵抗为特征的2型糖尿病大鼠模型；高脂喂养ICR小鼠21天后一次性腹腔注射链脲佐菌素100mg/kg，可以建立稳定的具有高血脂和胰岛素抵抗为特征的2型糖尿病小鼠模型；在链脲佐菌素和高脂饮食协同作用下可肝脏、肾脏和胸腺等器官指数发生改变；综合分析用大鼠比用小鼠建立糖尿病动物模型更有优势。
因此，本研究已经成功建立了2型糖尿病动物模型，并且筛选出最佳的实验动物。
关键词：糖尿病；动物模型；大鼠；小鼠；链脲佐菌素；血糖；胰岛素英文缩写DM糖尿病NIDDM非胰岛素依赖性糖尿病IDDM胰岛素依赖性糖尿病STZ链脲佐菌素TC总胆固醇TG甘油三酯LDL低密度脂蛋白HDL高密度脂蛋白ip腹腔注射iv静脉注射sc皮下注射IR胰岛素抵抗INS胰岛素敏感指数GFR肾小球滤过率Ccr肌酸清除率ESRD终末期肾病DN糖尿病肾病DR 糖尿病性视网膜并发症SCH 慢性持续性高血糖症IDF 国际糖尿病联盟目录引言 (1)第一部分2型糖尿病大鼠模型的建立 (12)实验器材与方法 (12)结果 (17)第二部分2型糖尿病小鼠模型的建立 (20)实验器材与方法 (20)结果 (23)讨论 (27)结论 (36)参考文献 (37)附图 (42)中文摘要 (1)ABSTRACT (4)致谢导师及作者简介引言糖尿病是一类由遗传、环境、免疫等因素引起的以高血糖为特征的代谢性疾病。
型糖尿病动物模型研究进展
Ⅱ型糖尿病动物模型研究进展摘要: 糖尿病是以高血糖为主要标志的内分泌代谢性疾病，是严重威胁人类健康的主要慢性病之一，而Ⅱ型糖尿病占糖尿病总数的90%～95%左右。
建立合适的Ⅱ型糖尿病动物模型是阐明其发病机制的前提条件。
因此，该文综述了目前国内外糖尿病研究中常用的动物模型，对发展新型Ⅱ型糖尿病动物模型的研究提供参考价值。
关键词：Ⅱ型糖尿病；动物模型；模型构建Research Progress about the Construction of Type ⅡDiabetic Animal ModelLIU Shu—YunAbstract: Diabetes mellitus，the endocrine and metabolic diseases，is characterized by hyperglycemia． It is one of the most prevalent chronic diseases that threat to human health，and type 2 diabetes accounted for 90% -95% of the total diabetes. The animal model of type 2 diabetes provide the important precondition to many scholars in study of the pathogenesis and mechanism of diabetes．Therefore，this article reviews a number of animal models of T2DM commonly used according to the articles that have been published both inside country and abroad，which will provide reference for the development of type II diabetic animal models．Key Words：Type Ⅱ Diabetes Mellitus， Animal model，Model construction糖尿病( Diabetes mellitus，DM) 是以高血糖为主要标志的内分泌代谢性慢性疾病，其严重威胁着人类健康。
2型糖尿病研究进展
一：糖尿病诊断标准:1、有糖尿病症状，并且随机血糖≥11.1mmol／L。
随机血糖是指就餐后任意时间的血糖值，典型的糖尿病症状包括多尿、烦渴和无其它诱因的体重下降。
2、空腹血糖≥7.0mmol／L，空腹状态定义为至少8小时内无热量摄入。
3、OGTT时二小时血糖≥11.1mmol／L。
OGTT仍然按WHO的要求进行。
符合上述标准之一的患者，在次日复诊仍符合三条标准之一者即诊断为糖尿病。
二：Ⅱ型糖尿病动物模型的建立给家兔饲以高糖、高脂诱发糖尿病饲料（10%猪油、37%白蔗糖混合53%基础饲料）单笼饲养，每只动物每天约喂食100ｇ饲料，自由饮水，室温18～25℃，实验期为32周。
结果发现，高糖高脂饲料对新西兰兔具有脂肪毒性和葡萄糖毒性,损害胰岛细胞的结构和功能,可诱发较明显的糖尿病。
在喂食高糖、高脂饲料后，新西兰兔血糖、血脂持续升高，与人类Ⅱ型糖尿病具有高度近似性。
三、检测指标（一）一般性指标糖尿病时会导致动物摄食量、饮水量增加和血清葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸、糖化血红蛋白、乳酸分泌增高，而血清胰岛素、红细胞胰岛素受体最大亲和力、糖耐量降低。
测定上述指标可反映实验动物是否产生高血糖或患糖尿病。
（二）其他生化和免疫学指标可应用ELISA测定TNF-α、INF-γ、IL-４等细胞因子和免疫球蛋白IgE（反映细胞凋亡情况）；还可测定内皮素（ET）和NO（反映氧自由基产生情况）、Ang-Ⅱ和（AT-１）mRNA（反映血管变化及间接反映氧自由基产生情况）、IGF-１即胰岛素样生长因子-１和瘦素（了解胰岛素的分泌,间接反映氧自由基情况）、AGEｓ即糖基化产物（反映体内氧化应激和糖基化反应情况）、PAH即苯丙氨酸羟化酶（反映糖异生的快慢）、GAD即谷氨酸脱羧酶抗体（该抗体阳性，表明细胞自身免疫性破坏）、胰岛素抗体（抗体阳性，说明胰岛素分泌不足）、Ｃ肽（反映胰岛β细胞的功能）等。
四：检测指标1糖化血红蛋白测定（GHb）：糖化血红蛋白是血中葡萄糖与红细胞的血红蛋白相结合的产物,也是由血红蛋白A组成的某些特殊分子部位与葡萄糖经过缓慢而不可逆的非酶促反应结合而成.糖化血红蛋白的多少与血中葡萄糖含量的高低成正比的关糖化血红蛋白(GHbA1c）的水平高低主要取决于血液中的血糖浓度和血红蛋白与血糖作用时间的长短。
自发性2型糖尿病动物模型
自发性2型糖尿病动物模型
自发性2型糖尿病动物模型
糖尿病的患病率呈逐年升高的趋势,已成为全球重点关注的公共性卫生问题.糖尿病动物模型可以部分模拟人的糖尿病状态,广泛应用于对糖尿病病因与治疗方法方面的研究与分析.非人灵长类动物在生理学、遗传学及生物学等特性方面与人类极相似,是生命科学及生物医药研究与开发方面是不可替代的实验动物.文章旨在对自发糖尿病动物模型,特别是非人灵长类糖尿病动物模型进行综述.
作者：万玉玲刘晓明 WAN Yu-ling LIU Xiao-ming 作者单位：广东省昆虫研究所,广州,510260 刊名：医学综述ISTIC英文刊名：MEDICAL RECAPITULATE 年，卷(期)：2008 14(14) 分类号：Q95 关键词：非胰岛素依赖性糖尿病 2型糖尿病动物模型非人灵长类动物。
2型糖尿病大鼠模型中对胰岛素升高机制的初步探讨的开题报告
2型糖尿病大鼠模型中对胰岛素升高机制的初步探讨
的开题报告
糖尿病是一种由胰岛素分泌不足或组织胰岛素不敏感导致的高血糖症。
其中，2型糖尿病占据了大多数病例。
研究2型糖尿病的动物模型，是了解疾病机制以及开发新的治疗手段的重要途径。
本研究主要以2型糖尿病大鼠模型为研究对象，初步探讨了该模型中胰岛素升高的机制。
首先，我们将从实验上确定2型糖尿病大鼠模型。
该模型通常采用高脂饮食喂养鼠类，再注射低剂量链脲佐菌素（STZ）诱导胰岛素抵抗。
通过检测餐后血糖水平和胰岛素抵抗指标，确认模型建立成功。
其次，我们将通过检测血浆中多个激素的含量，探讨该模型中胰岛素升高的机制。
预计在2型糖尿病大鼠模型中，血浆中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和瘦素等激素的含量将显著升高。
该结果将进一步提示这些激素在模型的胰岛素升高中具有重要作用。
最后，我们将利用分子生物学技术，探究这些激素对相关蛋白的表达及信号通路的调节。
尤其是探究IGF-1和胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）在该模型中的变化情况以及分析IGF-1R信号通路的影响。
这将为更深入地理解疾病机制提供参考。
本研究的实验方案和结果，将加深我们对2型糖尿病的理解和治疗方法的研究。
2型糖尿病鼠类模型的研究进展
2型糖尿病鼠类模型的研究进展高秀莹，周迎生【摘要】【摘要】小鼠、大鼠糖尿病模型对基础与临床防治研究十分重要，不同的研究目标对应不同的动物模型载体。
本文就目前常用的2型糖尿病鼠类模型的构建、主要疾病特征及应用等进行评述，为研究者了解、选择适合的动物模型提供参考。
【期刊名称】中国实验动物学报【年(卷),期】2014(000)004【总页数】6【关键词】【关键词】 2型糖尿病；动物模型；鼠类综述·进展糖尿病已成为全球性的公共健康问题，据IDF统计2013年全球糖尿病患者达3.82亿，预计至2035年全球糖尿病患者将增至5.92亿[1]。
在我国，糖尿病成为继肿瘤、心脑血管病之后的第三大严重危害人们健康的慢性疾病，2010年我国糖尿病患者已达9240万[2]，其中超过90%的患者为2型糖尿病。
2型糖尿病的发病机制尚未明确，建立一种既符合人类2型糖尿病发病特点，又稳定、实用的动物模型在2型糖尿病研究中起着至关重要的作用。
鼠类作为目前应用最广的糖尿病动物模型，因其体积小、生长周期短、经济易得、易于实现基因修饰等，较其他种属有着无可比拟的优势。
目前2型糖尿病鼠类模型主要分为三大类：自发性2型糖尿病模型、诱发性2型糖尿病模型、转基因/基因敲除2型糖尿病模型。
本文对近年来国内外较常用的2型糖尿病鼠类模型构建、主要疾病特征、确立标准及其应用进行概述，为研究者提供参考。
1 2型糖尿病鼠类模型分类1.1 自发性2型糖尿病模型该模型动物未经过任何有意识的人工处置，多数采用有自发性糖尿病倾向的近交系纯种动物，按照饲养条件喂养，自发成模，最接近人类疾病的发病过程。
该模型可分为肥胖自发性2型糖尿病模型和非肥胖自发性2型糖尿病模型，因2型糖尿病患者多伴肥胖，故以前者应用居多。
1.1.1 肥胖自发性2型糖尿病模型常用的肥胖自发性糖尿病模型包括单基因遗传背景的ob/ob小鼠、db/db小鼠、Zucker糖尿病肥胖大鼠(Zucker diabetic fatty rat,ZDF)和多基因背景的KK/Ay小鼠、OLETF大鼠。
2型糖尿病证病结合动物模型的研究
【 摘要 】 目的
型。方法
探讨 ２型糖尿病证病结合动物模 型的造模 方法 及成 模标准 ， 建立 ２型糖 尿病病证结 合动物模
（ ） 模后 出 现 饮 水 增 多 、 量 增 多 、 长 迟 缓 、 体 消瘦 、 尾 排 便 、 尿 等 糖 尿 病 大 鼠 １造 尿 生 身 拉 排
２型糖 尿 病 证 病 结 合 动 物 模 型 的研 究
李 敬 林 王 太 一 王禄 增 董 天 宝 吴 忆 邱 乐 ， ， ， ， ， ， 郜凌 学
（ ． 宁 中医 药 大学 ， 阳 ｌ０ ３ ； ． 国 医科 大学 ， 阳 ｌ０３ ； １辽 沈 １０ ２２ 中 沈 １０２
应 用 ＳＺ造 成 大 鼠糖 尿 病 （Ｂ Ｔ Ｆ Ｇ≥ １ ． ｍ ｏ Ｌ 后 应 用 中 药 造 成 中 医 阴 阳 两 虚 ； 虚 热 盛 ； 阴 两 虚 ； ６７ ｍ ｌ ） ／ 阴 气 血
瘀 气滞证候模型。结果
共 同 特 征 。 阴 阳 两 虚 组 大 鼠 还 出 现 大 便 干 燥 、 红 等 征 象 ； 虚 热 盛 组 大 鼠 出 现 大 便 干 燥 、 红 等 征 象 ； 阴 两 虚 舌 阴 舌 气 组 大 鼠 出 现 精 神 萎糜 、 怠 懒 动 、 胖 大 ， 津 ； 瘀 气 滞 组 大 鼠还 出 现 背 毛 减 少 、 部 毛 色 枯 黄 、 情 暴 烈 、 激 倦 舌 少 血 臀 性 易 惹 、 捉 时 叫声 频 繁 、 抗 力 大 、 击 行 为 频 繁 、 便 质 稀 色 深 、 质 暗 等 血 瘀 气 滞 气 滞 的 症 状 。 （ ） 验 室 指 标 有 捕 抵 攻 大 舌 ２实 不 同 程 度 改 变 。结 论 应 用 传 统 的 糖 尿 病 造 模 方 法 与糖 尿 病 病 证 特 点 和 中 药 四 气 五 味 药 性 理 论 相 结 合 ． 制 ２型 研 糖尿病病证结合动物模型具有可行性 。
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2型糖尿病动物模型研究概况高秀娟马会霞江春花(华北煤炭医学院中医学系河北唐山063000)[关键词]2型糖尿病动物模型研究进展[中图分类号]R25[文献标识码]A[文章编号]1008-6633(2009)06-783-03糖尿病是一种慢性代谢紊乱疾病,世界范围内约有1.7亿患者,其中2型糖尿病(T2D M)占整体糖尿病的90%以上,可靠的动物模型是研究T2D M发生机制及新的干预措施的重要手段。
目前制备T2D M模型应用的动物种类多种多样,动物种属的选择非常重要,其中鼠科动物由于具有体积小,生殖周期短,容易通过饲料、药物处理或遗传方法诱导疾病等优势,被广泛的应用于T2D M模型的制备中,它是人类研究T2D M的强有力的工具。
下面就应用鼠科动物制备T2D M模型的研究进展作一综述,仅供参考。
1自发性动物模型1.1自发性2型糖尿病大鼠主要包括G/K大鼠(Goto-K ak2 izaki R at)、OLETF大鼠(O tsuka Long Evans To kushi ba F atty R at)、Z DF大鼠(Zuke r d i abe ti c fatty R a t)等,这类动物多数肥胖,有明显的高胰岛素血症,类似人类2型糖尿病的发病特征,国外研发口服抗糖尿病及并发症的新药多选用这类动物[1]。
1.1.1G/K大鼠。
G/K大鼠是日本的一大鼠品系,是一种常用的自发性非肥胖型T2D M实验动物模型,其特点是高血糖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗出现早[2]。
其发病机制可能是骨骼的糖元合成酶不能有效地将多余的葡萄糖转化为糖元贮存起来,从而使动物出现高血糖。
G/K大鼠的特征有,葡萄糖刺激的胰岛素分泌受损,B细胞数目减少,肝脏对胰岛素的敏感程度降低导致肝糖生成过多等,此外具有与人类T2D M微血管并发症相似的改变。
骨组织形态学和生物力学分析显示,非肥胖的2型糖尿病G/K大鼠有明显的骨代谢紊乱,骨强度明显降低[3]。
近来的研究表明G/K大鼠子一代的胰岛及胰腺血流量的增加有赖于迷走神经[4]。
G/K大鼠子一代轻度高血糖、葡萄糖耐受受损伤。
在病理性的腹腔葡萄糖耐量出现后一周测其胰岛及整个胰腺的血流量,发现其血流量增加、胰岛所占胰腺血流量增加,切断腹腔双侧迷走神经,胰岛及胰腺血流量降低。
Pa rt haB认为G/K是研究糖尿病最好的动物模型,但是其发病过程中B细胞数目降低后有一个增殖的过程,这与人类发病情况有很大不同,也是限制G/K大鼠应用的关键[5]。
1.1.2OL ETF大鼠。
OLETF大鼠是最近常用的T2D M动物模型。
其特点是:轻度肥胖、高胰岛素血症、高甘油三酯血症。
史红莉等[6]研究发现14周的OL ETF大鼠已存在胰岛素抵抗,体重和腹内脂肪重量增加,同时存在三酰甘油和胆固醇的增高。
大鼠在24周龄时发病率为100%。
组织学研究发现此种大鼠胰腺呈进行性纤维化,并可出现肾脏并发症,其与T2D M患者的病理变化极为相似。
1.1.3Z DF大鼠。
Z DF肥胖T2D M大鼠是良好的肥胖型T2D M 的动物模型。
该动物易发展为肾微血管病变。
此种大鼠由于瘦素受体突变导致多食、肥胖,同时伴有高血糖、高胰岛素血症、高脂血症、中度高血压,较接近于人的胰岛素抵抗同时伴有高血压的患者,可作为胰岛素抵抗的动物模型。
一般8~10周出现糖尿病,有糖尿病的典型症状如多饮、多尿、体重增加缓慢等,并可出现神经病变[7]。
对fa/fa ZDF的胰岛分离,测其磷酸肌酐(P I)水解及胰岛素分泌反应,结果磷酸脂酶C调节的胰岛P I水解和高血糖刺激的胰岛素释放增加,这二者的增加能先于糖尿病被检测出来。
因此P I水解的变化可能是Z DF大鼠胰岛素抵抗的原因[8]。
1.1.4肥胖。
W istar糖尿病大鼠(o beseW i star fa tty rats)该品系动物T2D M实验动物模型的特征为甘油三酯生成过量,但机体对其分解的能力却受到了损伤,这种损伤是因低密度脂蛋白不易移去甘油三酯和机体不易移去低密度脂蛋白-甘油三酯,另外果糖能够进一步增加肝甘油三酯产生,导致高甘油三酯恶化[9]。
1.2自发性T2D M小鼠主要包括D i abetes(DB)小鼠、Obese (OB)小鼠、Toronto-KK(T-KK)小鼠、Nagoya Shi bata Yasuda (NS Y)小鼠等。
1.2.1db小鼠。
db小鼠是l epti n受体基因缺陷导致的先天肥胖性T2D M小鼠,其发病过程与人T2D M非常相似,是国际上广为采用的研究T2D M的动物模型[10]。
其瘦素受体基因失去功能,在出生后2周内就发生高胰岛素血症,3~4周发展为肥胖,4 ~8周后就发展为非常严重的高血糖症,其间有胰岛素抵抗发生,B细胞功能衰竭,一般在10个月内死亡,可发生明显的肾病。
1.2.2ob小鼠模型。
o b小鼠模型是一种瘦素受体与瘦素基因均发生变异的模型,属常染色体隐性遗传,表现为饮食过量,3~ 4周发展为高胰岛素血症伴发胰岛素抵抗,最后发展为非常严重的糖尿病。
1.2.3KK糖尿病小鼠。
1941年K#Ko ndo用日本商人的小鼠原种(Kansukabe群)培育而成的,该动物对胰岛素不敏感,对葡萄糖耐量小,糖尿病发病率高,以具有轻度肥胖、高胰岛素抵抗和高血糖症的特征。
KK小鼠对胰岛素有轻度抗性,易于出现类似糖尿病肾病的肾脏损害[11]。
1.2.4NSY小鼠(Nagoya-sh i bata-yas uda)。
NS Y小鼠发展为糖尿病的速度相对较为缓慢,具有年龄依赖性,年龄在糖尿病的发展过程中占有重要作用,12周龄后,胰岛素抵抗也不是很明显,其与人类疾病情况相似,减肥食谱的摄入能减轻其疾病状态,高脂食品能够加速疾病的发生过程,并且会出现胰岛素分泌不足及胰岛素作用受损现象[12]。
胰岛素含量36周龄后显著增加,NS Y小鼠将有助于人们对T2D M遗传学倾向及病理发生的进一步研究。
2诱发性动物模型2.1高脂饲料喂养近年来实验研究发现高脂膳食可诱发T2D M,为深入研究T2D M的发病机制,阐明营养因素与糖尿病的关系提供了重要线索及实验依据,也为广泛开展T2D M的实验研究提供了良好的动物模型。
高脂饮食可诱发糖尿病的报道很多,脂肪在食物中所占的比重很大,脂肪提供的热量可高达59%(主要为X-6多不饱和脂肪酸),碳水化物仅提供20%左右的热量;在高果糖饲料中,碳水化物提供70%左右的热量(主要是果糖)。
鲁瑾等[15]采用占摄入热卡61%的高脂饮食(主要是饱和脂肪酸的动物脂肪,其中蛋白质占19%,碳水化合物占20%,脂肪占61%),饲养动物7周后,大鼠出现了高胰岛素血症,并且葡萄糖-胰岛素耐量实验显示产生明显的胰岛素抵抗,是一个可靠的由高脂饮食造成的胰岛素抵抗模型。
葛学美等[16]用脂肪占总热能的45.5%的高脂饮食成功地诱发了C57BL/6J小鼠产生T2D M,并可使小鼠血清胰岛素水平不断提高,血糖升高,小鼠体重超常,伴血脂明显差异。
2.2药物诱导链脲佐菌素(streptozotoc i n,STZ)诱导T2D M大鼠或小鼠动物模型,是目前糖尿病动物实验研究中应用最多的方法,S TZ对实验动物的胰岛B细胞具有高度选择性毒性作用,对组织毒性小,诱发动物糖尿病模型成功率高,且一般不表现自发性缓解,是目前使用最广泛的2型糖尿病动物模型化学诱导剂。
2.2.1腹腔注射。
腹腔注射方法中主要包含以下几种不同的方法:高脂饲料加小剂量S TZ联合诱发:本法最常用,造模的方法有两种:一种为先用高脂饲料喂养高脂饲料饲养2~4周后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(一般为15~45m g/kg)诱导大鼠T2D M模型[17~19]。
周迎生选用S D大鼠适应性饲养1周后称体重,喂以高脂饲料,即普通饲料中加入20%的脂肪(50%猪油和50%蛋黄粉)和20%蔗糖,4周后禁食不禁水16小时,一次性腹腔注射低剂量S TZ45m g/kg,3天后测血糖,以空腹血糖\ 10.0mm ol/L为模型成功标准。
此种方法高脂饲料造成外周组织对胰岛素不敏感,加之S TZ破坏一部分胰岛B细胞功能,因此其模型比较接近于人T2D M。
一种为先腹腔注射STZ,然后再以高脂饲料喂养,杜丽坤等[20]将大鼠将大鼠每日按25mg/kg腹腔内注射STZ连续3d,1周后测葡萄糖耐量异常者,再继续喂高脂饲料8周。
M as i e llo等[21]对3月龄W istar在应用STZ之前,给予适当剂量(230m g/kg)的烟酰胺,部分保护胰岛B细胞的功能,使动物最大程度地产生中等的、稳定的高血糖症,制造出一种新的T2D M实验动物模型,在症状上比其他可利用的实验动物模型更接近人类糖尿病。
2.2.2尾静脉注射。
即大鼠或小鼠经高脂饲料喂养后, STZ15m g/kg一次性尾静脉注射,或普通饲料喂养,STZ50m g/kg 一次性尾静脉注射。
崔明霞等[22]将大鼠高脂饲料喂养后,均自尾静脉注射STZ25m g/kg,成功的诱导出糖尿病性肥胖的大鼠模型。
2.3药物+手术先将大鼠进行右肾脏切除,2周后用STZ35m g/kg一次性腹腔注射,也有研究是把大鼠进行右肾脏切除后,立即腹腔注射STZ45mg/kg。
药物诱导糖尿病动物模型的成功率受诸多因素影响,例如给药方法、给药剂量、S TZ的不同溶剂、大鼠品种以及体重因素等。
目前STZ的剂量大小还没有统一的认识,造模成功率报道也不尽相同,一般认为剂量过小造模成功率较低,剂量过大则容易形成1型糖尿病模型。
李桂云等[22]将4周龄SPF级雄性SD大鼠高糖高脂饲料喂养4周,分别按30m g/kg、40m g/kg、50mg/kg体重剂量腹腔注射S TZ建立T2D M大鼠模型,结果:40m g/kg剂量组大鼠的成模率最高(73. 3%),成模大鼠具有胰岛素抵抗、高血糖、高胰岛素血症和血脂紊乱的T2D M临床特征,高血糖持续时间最长、最稳定(到实验结束模型稳定至少28天)。
30mg/kg剂量组大鼠成模率只有40%,成模大鼠于实验结束血糖水平已基本恢复正常,50m g/kg 剂量组成模大鼠倾向于1型糖尿病。
认为短期高糖高脂饮食联合STZ腹腔注射建立T2D M SD大鼠模型的STZ最佳注射剂量为40m g/kg。
宋立江等[23]研究了不同溶剂溶解S TZ对造模成功率的影响。
用p H4.5柠檬酸PBS、p H5.5H anks、p H7.0H anks、p H7.0生理盐水4种溶剂,溶解链脲佐菌素小鼠腹腔注射,结果p H4.5柠檬酸PBS造模成功率高达86.7%,认为p H4.5柠檬酸PBS可以作为理想的溶剂。
郭学军等[24]W istar大鼠成模率和死亡率均高于SD大鼠。
选用中剂量给药及两次给药的方式可提高SD大鼠成模率,并降低死亡率,维持时间较长。