培养基配方

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培养基制备

培养基制备

培养基制备一、概述培养基是生物实验中必不可缺的基础设施,它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。

本文将介绍常用的培养基配方和制备方法,以及如何根据中国国情进行优化。

二、常用培养基1.大肠杆菌培养基(LB)配方:10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。

特点:优点是制备方便、易于培养,多数菌株生长良好。

缺点是含有大量营养物质,若用于长期贮存菌株,容易导致突变风险增加。

2.液体麦康凯发酵培养基(BHI)配方:将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。

特点:适合多种微生物的生长,包括厌氧微生物。

BHI较LB富含营养物质,可提供较好的生长环境,适合繁殖菌株。

3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基(PDA)配方:20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。

特点:适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物,能有效地防止杂菌的污染。

三、优化培养基由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同,因此需要进行针对性的优化,以满足不同微生物的生长需求。

1.调整pH值许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。

但是,我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手,适当调整pH值,以便营养物质的有效吸收。

2.添加一些特殊成分在中国有些地区,水质有问题,例如含有高浓度的重金属和有机物污染,这些都会影响微生物的生长和繁殖。

因此,在制备培养基时,要添加些许抗菌剂和抗氧化剂,保证培养环境的纯净度和稳定性。

3.注意制备温度对于不同的菌株,其适宜的生长温度也有所不同。

在制备培养基时,应根据菌株的特点,以及所处的生态环境,调整制备温度,将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法,避免纳米材料产生自拍。

四、结论在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中,培养基是至关重要的实验基础设施。

几种培养基的配方

几种培养基的配方

几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。

根据微生物的特性和应用需求,可以设计出不同成分和配方的培养基。

以下是几种常见的培养基配方:1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)的配方:-牛肉膏:5g-蛋白胨:5g-水解酵母膏:1.5g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中,添加纯化琼脂,混合并加热直至溶解,然后倒入培养皿中。

2. EMB(Eosin Methylene Blue)培养基的配方:-蛋白胨:17g-明胶胨:3g-乳糖:10g-酵母提取物:3g-果糖:1g- Eosin Y:0.4g-亚甲蓝:0.065g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加Eosin Y和亚甲蓝,最后加入纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。

3. 铡锰培养基(Sabouraud Agar)的配方:-葡萄糖:40g-酵母膏粉:5g-水解麦粉:15g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。

4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基(TRYPTICASE™SOYBROTH)的配方:-胰蛋白酶胨:15g-大豆酪蛋白胨:5g-食盐:5g-葡萄糖:20g-蒸馏水:1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温。

5. M9盐碱培养基(M9 minimal medium)的配方:-磷酸一氢二钾:3g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:0.5g- 氨氯化铁:7.5mg-葡萄糖:4g-去离子水:1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温后添加葡萄糖。

这只是几种常见的培养基配方,实际上还有很多不同成分和配方的培养基。

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。

2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。

3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。

4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。

5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。

这些是一些常用的培养基配方,适用于细菌和真菌的培养。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基(Culture medium)是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。

常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。

下面列举了一些常用的培养基配方。

1. LB培养基(Luria-Bertani medium)成分:-牛肉提取物:10克-酵母提取物:5克-热可溶性淀粉:10克-氯化钠:10克-水:1升2. NB培养基(Nutrient broth)成分:-牛肉提取物或肉蔻精:8克-酵母提取物:4克-葡萄糖:4克-水:1升3. MacConkey培养基成分:-水解动物蛋白:17克-中和胆盐:1.5克-中性红:0.03克-水:1升4. TSB培养基(Tryptic soy broth)成分:-大豆胨:17克-酵母提取物:3克-水:1升5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)成分:-脑心汤固体:37克-水:1升6.R2A培养基成分:-水解酵母提取物:0.5克-蛋白胨:0.5克-葡萄糖:0.5克-脱脂乳粉:0.5克-黄豆粉:0.5克-高氯酸钠:0.3克-多聚体1466:0.05克-水:1000毫升7.比尔斯氏培养基(BHI培养基)成分:-大豆胨:37克-脑心汤固体:2克-水:1升8. 培养基199(Medium 199)成分:-高锰酸钾:0.015克-硫酸:1.55克-磷酸一氢钠:0.184克-高氯酸钠:8.0克-溴酚蓝:0.4克-d-葡萄糖:5.55克-l-谷氨酸:40.525克-苏打粉:0.84克-水:1升9. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)成分:-苔藓胶原酸:1克-乳糖:1克- 谷氨酸:584mg- 水:1000ml这只是一小部分常见的培养基配方,实际上有很多种不同的培养基,它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。

不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种,包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。

下面以常用的LB培养基和M9培养基为例,介绍它们的配制方法。

1. LB培养基(Luria-Bertani agar)LB培养基是一种通用培养基,适用于许多不同类型的细菌。

它由三种主要成分组成:蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。

配方如下:-蛋白胨:10克-酵母提取物:5克-NaCl:10克-精制水:1000毫升步骤如下:1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。

2)加入适量的精制水,搅拌溶解。

3) 将溶液移至一个继续器中,并用精制水补足至1000ml。

4)蓄满培养基的瓶子,盖上盖子,并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌,或者将瓶子放入高压灭菌器中,将压力调至15磅(每平方英寸)。

2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基,常用于细菌的生长和培养。

它的配方相对简单,由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。

配方如下:-Na2HPO4:6克-KH2PO4:3克-NaCl:0.5克-NH4Cl:1克-葡萄糖:0.4克-维生素B1:0.1克-精制水:1000毫升步骤如下:1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。

2)加入一部分的精制水,搅拌溶解。

3)加入葡萄糖和维生素B1,搅拌均匀。

4) 将溶液移至一个继续器中,并用精制水补足至1000ml。

5)蓄满培养基的瓶子,盖上盖子,并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌,或者将瓶子放入高压灭菌器中,将压力调至15磅(每平方英寸)。

以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。

当然,实验室中还有很多其他种类的培养基,它们的配制方法也各有不同,需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。

在培养基配制过程中,应当注意严格按照配方比例配制,保持清洁卫生,避免污染,并注意高压灭菌的操作安全。

146种常用培养基配方

146种常用培养基配方

146种常用培养基配方以下是一些常见的培养基配方:1.LB培养基:-牛肉浸液:10g-酵母浸粉:10g-纯化水:1L-加热溶解牛肉浸液和酵母浸粉在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。

2.菌落计数培养基:-蛋白胨消化物:5g-酵母浸粉:2.5g-葡萄糖:1g-纯化水:1L-加热溶解蛋白胨消化物、酵母浸粉和葡萄糖在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。

3.大肠杆菌选择性培养基:-精制豆粉精:10g-纵剖海藻酸钠:10g-氯化钠:5g-硫酸镁:0.2g-活性炭:1g-纯化水:1L-加热溶解精制豆粉精、纵剖海藻酸钠、氯化钠、硫酸镁和活性炭在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。

4.SDA培养基(用于真菌培养):-磷酸二氢钾:1g-葡萄糖:20g-氯化钠:5g-氯化钠:5g-酵母浸粉:10g-酪蛋白胨:5g-地蜡:20g-纯化水:1L-加热溶解磷酸二氢钾、葡萄糖、氯化钠、酵母浸粉、酪蛋白胨和地蜡在纯化水中,煮沸溶解后,灭菌。

5.霍乱弧菌选择性富营养培养基:-精制海藻剖面:23g-麦芽浸粉:10g-氯化钠:10g-磷酸二氢钠:1.5g-纯化水:1L-加热溶解精制海藻剖面、麦芽浸粉、氯化钠和磷酸二氢钠在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。

这只是一些常用的培养基配方的例子,根据不同的微生物需要,还有更多类型的培养基配方可供选择。

每个培养基的配方具体组成和浓度可以根据实验需要进行调整和优化,以获得最佳的培养条件。

同时,配方中的成分应根据实验目的和研究对象的特性进行选择,以确保培养基能够提供必要的营养物质和环境条件,促进微生物的生长和培养。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。

其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。

以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。

2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。

3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。

培养基配方

培养基配方

培养基配方1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。

用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml,用于抑制细菌的生长。

2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。

用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml,用于抑制真菌生长。

115℃,20min 灭菌。

3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 μM,FeCl3 50 μM,ZnCl2 1 μM,VB1 2 μM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 μg/mL,苯丙氨酸50 μg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

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培养基配方
一、LB培养基:
Yeast extract 5 g/L
Tryptone 10g/L
Nacl 10g/L
PH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

二、YEB培养基:
Yeast extract1 g/L
Peptone(或Tryptone) 5 g/L
Beef extract 5 g/L
Sucrose 5 g/L
MgSO4 2 mmol/L
PH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):
① N6大量母液1:20×大量元素(1L)50ml KNO
3
56.6g
(NH
4)
2
SO
4
9.26g
KH
2PO
4
8g
②N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25ml
2·2H
2
O 3.32g
③N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25ml MgSO
4?7H
2
O 3.7g
④B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml
溶液A:
MnSO
4?H
2
O 781mg
ZnSO
4?7H
2
O 200mg
溶于400ml无菌水溶液B:
H 3BO
3
300mg
KI 75mg
溶于400ml无菌水
然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L
⑤B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1ml Na
2MoO
4
2
O 125mg
CuSO
4·5H
2
O 12.5mg
CoCl
2·6H
2
O 12.5mg
⑥B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml
盐酸硫胺素 500mg
盐酸吡哆醇 50mg
烟酸 50mg
⑦B5维生素II:100×维生素(500ml)10ml
甘氨酸 100mg
⑧200×铁盐(500ml) 5ml
Na
2
-EDTA 3730mg
FeSO
4·7H
2
O 2780mg
⑨ 2,4 D:100×2,4 D10ml
200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。

配制1L NBD2 培养基时分别加入母液1 50 ml,母液2、3 各25 ml,B5微量I 10 ml,B5微量II 1ml,B5维生素I、II 各10ml 和200×铁盐 5 ml,另加入
蔗糖 30g
肌醇 0.1g
L-脯氨酸 0.5g
L-谷氨酰胺 0.5g
水解酪蛋白 0.5g
调节pH 值至5.8,高压灭菌。

(固体培养基加0.3%的phytagel) 四、 MS 母液(现在基本用MS粉代替):
母液1:20×大量元素(500ml)
KNO
3
38g
NH
4NO
3
33g
MgSO
4·7H
2
O 7.4g
母液2:20×钙盐(1L)
CaCl
2·2H
2
O 8.8g
母液3:20×钾盐(1Ll)
KH
2PO
4
3.4g
母液4:100×微量元素(1L)
MnSO
4·4H
2
O 2230mg
ZnSO
4·7H
2
O 860mg
H 3BO
3
620mg
KI 83mg
Na
2MoO
4
·2H
2
O 25mg
CuSO
4·5H
2
O 2.5mg
CoCl
2·6H
2
O 2.5mg
母液5:100×维生素(500ml) 甘氨酸 200mg
盐酸硫胺素 40mg
盐酸吡哆素 50mg
烟酸 50mg
肌醇 10000mg
母液6:200×铁盐(500ml)
Na
2
-EDTA 3730mg
FeSO
4·7H
2
O 2780mg
配制1L MS 培养基时分别加入母液1、2、3 各50 ml,母液4 10 ml,母液5、6各 5ml。

五、AAM-AS 液体培养基
10×AA大量元素
KH
2PO
4
1.7g/L
MgSO
4·7H
2
O 3.7g/L
CaCl
2·2H
2
O 4.4g/L
100×AA微量元素I
MnSO
4·H
2
O 1.69g/L
ZnSO
4·7H
2
O 0.86g/L
H 3BO
3
0.62g/L
KI 0.083g/L 1000×AA微量元素II CuSO
4·5H
2
O 0.025g/L
NaMoO4·2H
2
O 0.25g/L
CoCl
2·6H
2
O 0.025g/L
10×AA氨基酸
谷氨酰胺 8.77g/L
天冬氨酸 2.66g/L
精氨酸 2.88g/L
甘氨酸 0.75g/L
200×铁盐(500ml)
Na
2
-EDTA 3730mg
FeSO
4·7H
2
O 2780mg
100×MS维生素
烟酸 0.05g/L
盐酸硫胺素 0.1/L
盐酸吡哆醇 0.05g/L
配制1L AAM培养基加入AA大量 100ml,AA微量I 10ml,AA 微量II 1ml,AA氨基酸100ml,铁盐5ml,MS维生素10ml。

另外加入:
KCL 2.94/L
水解酪蛋白 500mg/L
蔗糖 68.5g/L
葡萄糖 36g/L
肌醇 0.1g/L
调节pH 值至5.2,高压灭菌。

用时加入AS(乙酰丁香酮)200Μμ/L。

六、MS-H分化培养基
MS母液6瓶,外加
干酪素 500 mg/L
6-BA 2 mg/L
ZT 0.2 mg/L
激动素(KT) 0.5mg/L
NAA 0.5 mg/L
蔗糖 30g/L
山梨醇 15 g/L
调节PH 值至5.8,高压灭菌。

(固体培养基加0.3%的phytagel)。

七、 NBD2-AS 培养基
配制1L NB-AS 培养基时按照NB-2,4D培养基配方加入9个母液,另外再加入水解酪蛋白 1g
肌醇 0.1g
蔗糖 30g
葡萄糖 10g
调节pH 值至5.2,高压灭菌(固体培养基加0.3%的phytagel)。

倒平板时加入AS(乙酰丁香酮)100μΜ/L。

八、生根培养基(1/2MS)
MS粉 2.215/L
蔗糖30g/L
调节pH 值至5.8,加0.2%的phytagel,高压灭菌。

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