注射用氨苄西林钠氯唑西林钠说明书

注射用氨苄西林钠/氯唑西林钠是氨苄西林钠和氯唑西

林钠按活性成分含量11组成的复方制剂。由于氨苄西林

和氯唑西林的疏水性相差较大, 在通常的反相色谱系统[ 1]

中, 氨苄西林的容量因子约为1, 与有关物质的分离较差; 氯

唑西林的容量因子约为30, 使得分析时间很长。本文建立采

用阳离子交换柱的H PLC 法可同时测定注射用氨苄西林钠/

氯唑西林钠中的氨苄西林和氯唑西林的含量, 该法可在不足

10m in时间内有效分离氨苄西林、氯唑西林及其主要杂质。

1仪器与试药

高效液相色谱仪; 色谱柱( 200mm ! 46mm, 5m ); 氨苄

西林和氯唑西林对照品(中国药品生物制品检定所); 注射用

氨苄西林钠/氯唑西林钠(上海新先锋药业有限公司); 磷酸

和磷酸氢二铵均为分析纯, 乙腈为HPLC级, 水为蒸馏水。

2色谱条件

流动相为磷酸盐缓冲液( 001m o l/L 磷酸氢二铵溶液,

用磷酸调节pH 值60) 乙腈( 9010); 流速10m l/m in; 柱温25∀; 检测波长225nm; 进样体积20l。

3方法与结果

对照品溶液取氨苄西林和氯唑西林对照品各20m g,

精密称定, 置200m l量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度, 摇匀。

供试品溶液取供试品50m g, 精密称定, 置250m l量瓶中, 加

水溶解并稀释至刻度, 摇匀。系统适用性溶液称取供试品约

50mg, 置50m l量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度, 摇匀, 室温

( 约25∀)放置24h, 即得。氨苄西林峰和氯唑西林峰的理论

板数分别约为3500 和3000, 拖尾因子分别为10 和11, 两

者间的分离度约为40。

31线性与范围取氨苄西林和氯唑西林对照品各20m g,

精密称定, 置100m l量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度, 摇匀,

作为贮备液。精密量取此液75、60、50、40 和25m ,l 分别置

10m l量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 在上述色谱条件下分别

进样分析。以面积( A)为纵坐标, 浓度( C )为横坐标, 回归方

程分别为: 氨苄西林A= 1647C+ 7 6 r= 10000氯唑西林A = 4585C+ 107 r= 10000 氨苄西林和氯唑西林分别在45

~ 134和44~ 131g /m l范围内呈良好的线性关系。

32检测限和定量限氨苄西林和氯唑西林的检测限按信噪

比3 1 计均为01g /m ,l 定量限按信噪比10 1 计均为03g /m l。

33精密度取同一批供试品, 配制成6份溶液, 分别进样分析, 氨苄西林和氯唑西林含量的平均值分别为4467%

( RSD= 05%, n= 6)和4438% ( RSD= 06%, n= 6)。

34耐用性另选用2支相同品牌填料的色谱柱实验, 均

可得满意的色谱图。

35回收率精密量取同一份供试品溶液10m ,l 分别置

20m l量瓶中, 精密量取并加入对照品贮备液5m ,l 加水稀释

至刻度, 摇匀。在上述色谱条件下进样分析。测得氨苄西林

和氯唑西林的平均回收率分别为999% ( RSD = 04%, n=

6)和1000% ( RSD= 05%, n= 6) 。

36样品测定采用国家药品标准方法[ 1] 对同一批供试品进行测定, 测得氨苄西林和氯唑西林的含量分别为4430%

( n= 3)和4491% ( n= 3) , 与本文方法的测定结果一致。

4讨论

离子交换H PLC 法是建立在多重保留机理( 如反相和离

子交换) 上的, 一般可提供独特的色谱选择性, 同时又具有简

便和重现性好的特点[ 2]。研究结果显示, 缓冲液中磷酸氢二

铵的浓度为001mo l/L, pH 值由50逐渐增至70 时, 氯唑

西林的保留值显著减少, 氨苄西林的保留仅稍减弱; 缓冲液

pH 值为60时, 缓冲液中磷酸氢二铵的浓度由001m o l/L逐

渐增至0025m o l/L, 氯唑西林的保留值显著增加, 氨苄西林

的保留仅稍增强。显然, 由于# 盐析∃效应, 组分的保留随着

离子强度的增加而增强, 表现出类似于化合物在疏水相互作

用色谱中的色谱行为[ 2b]。鉴于两组分在本色谱系统中的

色谱行为与通常的离子交换色谱行为相反, 即盐或缓冲液浓

度的增加反而导致组分保留的增强, 故可以推断, H ypersil

SCX填料在本色谱系统中主要表现为疏水或反相色谱行为

的特征[ 2b]。选择缓冲液中磷酸氢二铵的浓度为001mo l/

L, pH 值为6时, 可在不足10m in的分析时间内有效地分离

氨苄西林、氯唑西林及其主要杂质。本色谱系统尚可用于类

似品种如注射用阿莫西林钠/双氯西林钠的含量测定, 惟流

动相需稍作调整为磷酸盐缓冲液( 0005m o l/L磷酸氢二铵溶

液, 用磷酸调节pH 值为64) 乙腈( 9010) , 同样可在不

足10m in的分析时间内有效地分离阿莫西林、双氯西林及其

主要杂质。

参考文献

[ 1 ] 国家食品药品监督管理局国家药品标准WS10001(H D0620)

2002注射用氨苄西林钠氯唑西林钠[ S] , 2002: 7, 88

[ 2 ] Snyd er L R, K irk land J J, G lajch J L P racticalH PLC M ethod De velopm en t [ M ], 2nd ed New Y ork: John W iley & Son s, In c,

1997, a: 341; b: 345

收稿日期: 2009 - 04- 13__