人肝癌细胞株中FOXM1及NF_B的表达及意义_王琦1_柴磊2_蒋少青3_马丽4

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GLi1和Foxm1在胃癌中的表达及其临床意义的开题报告

GLi1和Foxm1在胃癌中的表达及其临床意义的开题报告

GLi1和Foxm1在胃癌中的表达及其临床意义的开题报告一、研究背景及意义胃癌是世界常见的一种恶性肿瘤,其发病率和死亡率在全球范围内居高不下。

在中国,胃癌的发病率和死亡率也非常高,是每年最常见的癌症之一。

目前,胃癌的治疗仍存在很大的难度和挑战,因此寻找新的生物标志物、新的治疗靶点和新的治疗药物,对于预防和治疗胃癌具有重要的意义。

GLi1和Foxm1是两种重要的转录因子,它们在许多不同类型的肿瘤中都有异常表达,对于肿瘤的发生和发展具有重要的作用。

近年来,越来越多的研究表明,GLi1和Foxm1在胃癌中也有着异常的表达,它们可能参与了胃癌的发生和发展。

因此,进一步研究GLi1和Foxm1在胃癌中的表达及其临床意义,对于深入理解胃癌的发病机制,揭示其病理生理学特点,以及寻找新的治疗靶点和新的治疗药物,都有着非常重要的意义。

二、研究内容本研究将收集一组已经确诊的胃癌患者组织标本,通过免疫组织化学等技术手段,检测GLi1和Foxm1在胃癌组织中的表达水平,并采用相关的统计学方法,分析其与胃癌的临床病理学特征以及预后的关系。

具体内容包括以下几点:1.收集胃癌患者的组织标本,制作石蜡切片。

2.采用免疫组织化学技术,检测GLi1和Foxm1在胃癌组织中的表达水平,并进行定量分析。

3.通过相关统计学方法,分析GLi1和Foxm1在胃癌组织中的表达与胃癌的临床病理学特征(如年龄、性别、病程、分期、转移情况等)的关系,并探讨其在胃癌分子分型中的作用。

4.研究GLi1和Foxm1的表达与胃癌患者的预后关系,包括生存率、复发率等指标。

三、研究意义本研究将有助于深入探究GLi1和Foxm1在胃癌中的作用机制,为胃癌的诊断、治疗和预后评估提供新的生物学标志物,并为开发新的治疗靶点和药物提供新的思路和方向,促进胃癌的临床治疗进一步提高和优化。

MALAT-1、FoxM1和NGF在非小细胞肺癌种表达及临床意义

MALAT-1、FoxM1和NGF在非小细胞肺癌种表达及临床意义

MALAT-1、FoxM1和NGF在非小细胞肺癌种表达及临床意义摘要:非小细胞肺癌(NSCLC)是一种高发病率和高死亡率的肺癌。

MALAT-1、FoxM1和NGF等蛋白在NSCLC的发生和发展中发挥着重要的作用。

本研究旨在探讨MALAT-1、FoxM1和NGF在NSCLC中的表达及其临床意义。

实验结果发现,NSCLC患者中这三种蛋白的表达量均显著高于正常人群。

同时,MALAT-1表达水平与NSCLC的临床分期和淋巴结转移呈正相关,FoxM1表达水平与恶性程度相关,NGF表达水平与预后呈负相关。

本研究结果表明MALAT-1、FoxM1和NGF可能作为NSCLC的潜在诊断和治疗靶点,为NSCLC的个性化治疗提供了一定的理论基础。

关键词:非小细胞肺癌,MALAT-1,FoxM1,NGF,表达水平,临床意义Abstract: Non-small cell lung cancer (NSCLC) is ahighly prevalent and lethal cancer. Proteins such as MALAT-1, FoxM1, and NGF play important roles in the occurrence and development of NSCLC. This study aimsto investigate the expression and clinicalsignificance of MALAT-1, FoxM1, and NGF in NSCLC. The experimental results found that the expression levels of these three proteins in NSCLC patients were significantly higher than those in normal individuals.At the same time, the expression level of MALAT-1 was positively correlated with the clinical staging and lymph node metastasis of NSCLC, the expression levelof FoxM1 was related to malignancy, and the expression level of NGF was negatively correlated with prognosis. The results of this study indicate that MALAT-1, FoxM1, and NGF may serve as potential diagnostic and therapeutic targets for NSCLC, providing a theoretical basis for personalized treatment of NSCLC.Keywords: Non-small cell lung cancer, MALAT-1, FoxM1, NGF, Expression levels, Clinical significance。

转录因子FoxM1——癌症治疗新靶点

转录因子FoxM1——癌症治疗新靶点

转录因子FoxM1——癌症治疗新靶点余琪琪;孟蕾;谭拥军【摘要】转录因子FoxM1是Forkhead Box转录因子家族成员之一,与细胞增殖、胚胎发育、衰老、再生和肿瘤等许多病理生理过程密切相关.目前发现,在人类大多数肿瘤中FoxM1都具有较高的表达水平.并且,FoxMl与多种致瘤信号途径相关.FoxM1在细胞中的特殊功能以及与肿瘤的密切关系,使之成为肿瘤治疗的新靶点.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2011(003)005【总页数】5页(P339-343)【关键词】FoxM1;转录因子;癌症治疗【作者】余琪琪;孟蕾;谭拥军【作者单位】湖南大学生物学院,湖南,长沙410082;湖南大学生物学院,湖南,长沙410082;湖南大学生物学院,湖南,长沙410082【正文语种】中文【中图分类】医药卫生FoxM1 亦称 Trident(小鼠)、 HFH-11(人)、 WIN或INS-1(大鼠)、MPP-2(部分人类 cDNA)或 FKHL-16。

FoxM1 属于 ForkheadBox(Fox)转录因子家族,该转录因子家族已拥有超过 50 个以上的成员,分别参与调节细胞分化、增殖、代谢、细胞凋亡及维持干细胞多能性等生理过程 [1]。

FoxM1在细胞增殖、衰老、器官形成、 DNA 损伤修复和肿瘤形成等许多生理过程中具有重要的作用。

由于 FoxM1 具有成为癌症治疗新靶点的巨大潜力,使之被分子和细胞生物学及生物技术方案和研究国际协会评为 2010 年的年度分子。

1 FoxM1 的结构FoxM1 具备 Fox 转录因子家族共同特征:具有一段“翼状螺旋结构” (wingedhelixdomain,WHD)的 DNA 保守序列 [1]。

人类FoxMl 基因定位于12p13.3 染色体带(端粒位置),跨度约 25kb,由 10 个外显子组成。

其中有 2 个外显子 Va 和Ⅶ a(也分别称为 A1 和 A2),是其选择性连接位点。

下调FOXM1对人肝癌细胞增殖与迁移能力的影响

下调FOXM1对人肝癌细胞增殖与迁移能力的影响

下调FOXM1对人肝癌细胞增殖与迁移能力的影响金栋;王新青;刘迪;王克华;李秋雷;蒋跃飞;李云霄;马丽【期刊名称】《宁夏医学杂志》【年(卷),期】2018(40)12【摘要】目的观察下调高表达叉头转录因子M1(FOXM1)的人肝癌细胞株BEL-7402中叉头框转录因子M1(FOXM1)基因对肝癌细胞增殖与迁移能力的影响。

方法构建针对FOXM1的shRNA表达载体,建立稳定沉默FOXMl表达的人肝癌细胞株。

将BEL-7402细胞分为3组,即阴性对照组(转染sh NC)、shFOXM1组(转染shFOXM1)和空白对照组。

分别采用RT-PCR、Western blot免疫印迹法检测细胞FOXM1的mRNA及蛋白表达,应用Alamarblue法检测细胞的增殖能力、Transwell小室检测细胞迁移活性。

结果与阴性对照组和空白对照组比较,shFOXM1组肝癌细胞FOXM1的mRNA和蛋白表达减少,下调组肝癌细胞增殖与迁移能力明显下降(P <0. 05)。

结论下调FOXM1基因表达,可抑制肝癌细胞株BEL-7402的增殖与迁移能力。

【总页数】3页(P1060-1062)【关键词】肝癌;增殖和迁移;RNA干扰【作者】金栋;王新青;刘迪;王克华;李秋雷;蒋跃飞;李云霄;马丽【作者单位】宁夏医科大学总医院心脑血管疾病医院普外科;宁夏医科大学总医院肝胆外科;宁夏医科大学总医院心脑血管疾病医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.Tim-3在人肝癌细胞中的表达及其对细胞增殖与迁移能力的影响 [J], 魏东;匡怡;刘孟刚;周波;陈平2.下调过氧化还原蛋白酶2对人胃癌MGC803细胞侵袭、迁移、增殖能力的影响[J], 吴文倩;徐浩;汤仁仙;郑葵阳;刘念礼3.下调基因PTTG1对人胶质瘤细胞SHG44增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响[J], 崔立山;金鑫;林婷;徐岚溪;王冠玲;林建斌;冯三平;曹洋;曹颖;宋正茂4.长链非编码RNA TMCC1-AS1在人肝癌细胞株中的表达及对SMMC-7721细胞增殖迁移能力影响观察 [J], 程涛; 姚远; 张生; 张向宁; 张爱辉; 杨威; 侯崇智5.下调ALK2对人乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响 [J], 费嫦;王林;陈湘莲;米华;陈玲群;桂芳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

FOXP1与Livin在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义的开题报告

FOXP1与Livin在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义的开题报告

FOXP1与Livin在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及
临床意义的开题报告
概述:
弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是一种非常常见的恶性肿瘤,占所
有非霍奇金淋巴瘤的30%。

最近的研究表明,FOXP1和Livin在DLBCL
患者中均有异常的表达,并且与患者预后有关。

FOXP1是一种转录因子,Livin是一种抑制细胞凋亡的蛋白质。

本文旨在探讨FOXP1和Livin在DLBCL中的表达及其临床重要性。

研究问题:
1. FOXP1和Livin在DLBCL患者中的表达是否异常?
2. FOXP1和Livin的异常表达是否与DLBCL患者的预后有关?
研究目的:
探讨FOXP1和Livin在DLBCL中的表达及其与患者预后的相关性,
为未来个体化治疗及预后评估提供理论依据。

研究方法:
通过检索PubMed、EMBASE、CNKI等数据库以及手动检索相关文献,收集FOXP1和Livin在DLBCL中的表达及相关患者预后的研究文献。

接下来将分析和总结这些研究的结果,并探讨FOXP1和Livin在DLBCL
中表达的可能机制。

研究意义:
本研究将为DLBCL的个体化治疗和预后评估提供新的理论依据,并
为该疾病的治疗提供新的思路和方向。

人肝细胞癌中转录因子FoxM1表达与甲胎蛋白产生相关

人肝细胞癌中转录因子FoxM1表达与甲胎蛋白产生相关

人肝细胞癌中转录因子FoxM1表达与甲胎蛋白产生相关艾剑刚;陈娟娟;董玉芳;黄世峰;张莉萍【期刊名称】《重庆医科大学学报》【年(卷),期】2014(39)12【摘要】目的:探讨人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中叉头框M1(forkhead box M1,Fox M1)表达与甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)产生的关系。

方法:分别采用Western blot和荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术检测52例HCC患者肝癌组织中Fox M1蛋白和AFP m RNA 表达水平,并查询患者术前血清AFP水平,分析三者相关性;Fox M1特异性抑制剂硫链丝菌素(thiostrepton,TST)和重组Fox M1B腺病毒(adenovirus combined with Fox M1B gene,Ad-Fox M1B)分别作用人Hep G2和Hep G2.2.15肝癌细胞后,FQ-PCR检测Fox M1 m RNA表达变化,Western blot检测Fox M1蛋白表达变化,电化学发光法检测培养基上清AFP分泌变化。

结果:(1)肝癌组织中Fox M1蛋白表达水平与组织中AFP m RNA表达水平及血清AFP分泌水平均呈正相关(r=0.448,P=0.001;r=0.381,P=0.005);(2)下调Fox M1表达可明显抑制Hep G2和Hep G2.2.15细胞分泌AFP(P1=0.000,P2=0.000);(3)Fox M1可明显促进Hep G2和Hep G2.2.15细胞表达和分泌AFP(P1=0.000,P2=0.000;P1=0.001,P2=0.000)。

结论:人肝细胞癌中Fox M1与AFP的表达密切相关,Fox M1可能在促进AFP表达中发挥重要作用。

【总页数】6页(P1692-1697)【关键词】人肝细胞癌;叉头框M1;甲胎蛋白;甲胎蛋白m;RNA【作者】艾剑刚;陈娟娟;董玉芳;黄世峰;张莉萍【作者单位】重庆医科大学附属第一医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.γ-谷氨酰转肽酶和甲胎蛋白表达的相关性及其在肝细胞癌诊断中的价值 [J], 高春;房龙;姚树坤2.热休克转录因子1蛋白在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义 [J], 卢鹏;李霄;窦科峰;党政;胡延忠;马远方;宋振顺3.Runt相关转录因子3及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3在肝细胞癌组织中的表达及临床意义 [J], 何艳新;刘超;庞志刚;申东方4.人肝细胞癌组织中锌指转录因子Slug与E-钙黏蛋白的表达及其与肝癌临床病理特征的关系 [J], 马速佳;吴成稳;周志强;庞志刚5.热休克转录因子1在人肝细胞癌中的表达及转录活性 [J], 滕洪飞;宋振顺;李煜环;范子扬因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

foxm1、foxo3a在肝癌中的表达及其临床意义

foxm1、foxo3a在肝癌中的表达及其临床意义
Hanzhong Central Hospital, Hanzhong 723000; 3. Clinical Laboratory Department, Hanzhong Central Hospital, Hanzhong 723000, China)
ABSTRACT: Objective To investigate the expression and clinical significance of Forkhead Box M1 (FOXM1) and Forkhead Box O3a (FOXO3a) in liver cancer. Methods The clinical data of 123 patients with liver cancer admitted in our hospital were retrospectively analyzed. Immunohistochemistry was used to detect the positive expressions of FOXM1 and FOXO3a in lesion tissues and adjacent tissues. The clinical characteristics and prognosis of the patients were investigated, and the factors influencing the prognosis were analyzed. Results The positive rates of FOXM1 expression in the lesion tissues and the adjacent tissues were 54.47% and 2.44% respectively, and the difference was statistically significant (P约0.05). The positive rate of FOXO3a expression in the lesion tissues and the adjacent tissues was 13.01% and 54.47% respectively, and the difference was statistically significant (P约0.05). Follow up to October 1, 2017, the mortality rate of 123 patients was 36.59% . COX single factor regression analysis showed that FOXO3a, FOXM1, histological differentiation, lymph node metastasis, clinical stage, pathological characteristics, tumor thrombus and Child-Pugh classification were significant for the prognosis of patients with liver cancer (P<0.05). COX multi-factors regression analysis showed that FOXO3a, histological differentiation, lymph node metastasis and FOXM1 were the main factors affecting the prognosis of patients with liver cancer (P<0.05). Conclusion High expression of FOXM1 and low expression of FOXO3a are found in liver cancer tissues. FOXO3a, histological differentiation, lymph node metastasis and FOXM1 are the main factors affecting the prognosis of patients. KEYWORDS: liver cancer; Forkhead Box M1; Forkhead Box O3a

FOXM1在胃癌组织中的表达及临床意义

FOXM1在胃癌组织中的表达及临床意义

FOXM1在胃癌组织中的表达及临床意义张怡;柴宇啸;韩毓;曲兴龙【期刊名称】《中国现代普通外科进展》【年(卷),期】2015(18)10【摘要】探讨Forkhead盒蛋白质M1(FoxM1)在胃腺癌中的表达及临床意义.对39例胃癌患者的癌组织进行FoxM1检测,分析FoxM1表达与临床病理因素的关系;多变量分析FoxM1表达作为独立预后因素预测胃癌术后复发转移的可行性.癌组织中FoxM1的表达显著高于癌旁组织(P=0.0009)及正常组织(P=0.0001).FoxM1阳性表达与肿瘤N分期、M分期及TNM分期相关.FoxM1阴性表达的患者预后明显好于阳性表达患者(P<0.05).FoxM1可能是胃癌的一个独立的预后因素,胃癌组织中FoxM1的高表达与肿瘤发生密切相关,FoxM1可能为晚期胃癌临床治疗提供新的靶点.【总页数】3页(P827-829)【作者】张怡;柴宇啸;韩毓;曲兴龙【作者单位】复旦大学附属肿瘤医院闵行分院肿瘤外科上海200240;复旦大学附属肿瘤医院闵行分院肿瘤外科上海200240;复旦大学附属肿瘤医院闵行分院肿瘤外科上海200240;复旦大学附属肿瘤医院闵行分院肿瘤外科上海200240【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.FOXM1和GRP78在进展期胃癌组织中的表达及其临床意义 [J], 龚军; 孙峰; 金聪慧; 葛建娟; 宋佳烨; 杨磊2.FoxM1和COX-2在肺腺癌组织及癌旁组织中的表达及临床意义分析 [J], 孙春霞; 李瑞琴; 苏丹华; 闫五玲; 李珊珊; 吕凌燕; 李志刚3.乳腺浸润性导管癌组织中FOXM1、PLK1、HIF-1α和EZH2的表达及其临床意义 [J], 张艳; 李军红4.胃癌中FOXM1调控相关分子的表达及其临床意义 [J], 钱建新;谢峰;顾小强;于观贞;陈颖;卫立辛5.FOXM1/FOXO3a在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义 [J], 许君伟;梁亚林;宋丽因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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网络出版时间:2014-02-17 09:02网络出版地址:/kcms/detail/64.1008.R.20140217.0902.004.html人肝癌细胞株中FOXM1 及NF-κB的表达及意义王琦1,柴磊2,蒋少青3,马丽4 ,金栋5 ,殷利军5,张桂香5,谢岩青5 (1.宁夏医科大学总医院肝胆外科,银川 750004;2.宁夏回族自治区第三人民外科,银川750004;3.宁夏医科大学总医院药剂科,银川 750004;4.宁夏医科大学总医院心脑血管疾病医院药剂科,银川 750004;5.宁夏医科大学总医院心脑血管疾病医院血管外/普外科,银川750004)1[摘要] 目的探讨不同肝癌细胞株中转录因子FOXM1(Forkhead Box M1)及核转录因子NF-κB(nuclear factor kappa B)的表达强度及意义。

方法采用Western blot、RT-PCR法,检测不同肝癌细胞株(QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721)中FOXM1及NF-κ B 在蛋白及mRNA 水平的表达情况。

结果在3株肝癌细胞中FOXM1及NF-κB的表达无论是mRNA水平还是蛋白水平均存在显著差异,细胞株(QGY-7703、BEL-7402)中FOXM1及NF-κB的表达同时都明显高表达于细胞株SMMC-7721。

结论肝癌细胞株中FOXM1蛋白及mRNA表达与NF-κB表达趋势一致,提示FOXM的表达可能与NF-κB的活化有关。

[关键词] FOXM1;NF-κB;肝细胞肝癌[中图分类号]R735.7 [文献标识码]AExpression and significance of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B in human liver carcinoma cells WANG Qi1,CHAI Lei2,JIANG Shao-qing 3,MA Li4,JIN Dong5,YIN Li-jun5 ,ZHANG Gui-xiang5,XIE Yan-qing5,(1. Dept.of Hepatobiliarysurgery,theAffiliated Hospital of Ningxia Med. Univ. Yinchuan 750004;2. Dept.of Surgical, the Third People′s Hospital of Ningxia. Yinchuan 750004;3. Dept.of Pharmacy,theAffiliated Hospital of Ningxia Med. Univ. Yinchuan 750004;4. Dept.of Pharmacy,the Cardio-Cerebral Vascular Disease Hospital of Ningxia Med. Univ. Yinchuan 750004;5.Dept.of Vascular/General Surgery, the Cardio-Cerebral Vascular Disease Hospital of Ningxia Med. Univ.Yinchuan 750004)ABSTRACT Objective(1)To investigate the expression and significance of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B in human liver carcinoma cells. Methods The expression of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B protein and micro-RNA in hepatocellular carcinoma cell lines(QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721)were detected with the application of Western blot analysis and RT-PCR analysis,respectively. Results The expression基金项目:宁夏自然科学基金(项目编号:NZ1236)作者简介:王琦(1983-),硕士,主任医师,肝癌复发相关分子机制的研究。

通作者:谢岩青,Email:xie-yanqing@levels of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B varied significantly among three cell lines.Western blotting and RT-PCR showed that hepatocellular carcinoma (QGY-7703、BEL-7402) cells expressed higher FOXM1 and NF-κ B levels than SMMC-7721(p<0.01). Conclusion FOXM1 protein and mRNA expression in human liver cancer cells and the NF-κ B expression trend is consistent,Prompt FOXM1 expression is associated with the activation of the NF-κ B.Keywords Forkhead Box M1; nuclear factor kappa B; HCC(hepatocellular carcinoma);近来研究发现,转录因子FOXM1在人肝细胞癌组织中表达高于癌旁组织,并且发现FOXM1表达与肿瘤增殖、微血管形成和凋亡抑制相关[1]。

课题组前期研究中应用肝细胞癌及癌旁组织样本建立的组织芯片进行免疫组化检测,综合分析后发现,FOXM1高表达与肝癌恶性病理表型和患者预后不良关系密切[2]。

IKK/IκB/NF-κB是人类肝炎后肝细胞癌中常被激活的经典通路[3],当NF-κB被释放、活化后,进入细胞核转录激活肿瘤增殖、转移、生长、血管形成、凋亡抑制等相关基因促进癌症恶性进展[4,5]。

因此,本研究通过Western blot和RT-PCR技术分析FOXM1及NF-κB在肝癌细胞株中的表达情况,为进一步探讨FOXM1是否通过NF-κB的激活促进肝癌恶性进展的分子调控机制提供理论依据,希望有助于阐明FOXM1促进肝癌恶性进展的具体机制。

1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 细胞:人肝癌细胞株QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721购于中国科学院典型培养物宝藏委员会细胞库。

1.1.2 主要试剂:兔抗人FOXM1抗体、鼠抗人NF-κB抗体、GAPDH多克隆抗体均购于美国Santa Cruz公司,HRP-山羊抗兔、鼠IgG购于BioGenex公司,细胞RPMI1640培养基购于Gibco公司,Western相关试剂购于碧云天生物技术研究所,RNeasy Mini 试剂盒购于QIAGEN公司,RT-PCR 试剂盒购于TOYOBO公司,PCR引物购于上海生工,ECM发光试剂盒购于武汉博士德公司,胎牛血清购于Gibco公司。

1.2 实验方法1.2.1 细胞培养:QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721细胞应用RPMI1640培养基,细胞株接种于含10%胎牛血清、1%双抗(青霉素/链霉素)和RPMI1640培养液的培养瓶中,置37℃、5%恒温孵育箱中培养;传代应用0.25%的胰蛋白酶消化。

具体实验采用细胞为对数生长期的CO2细胞。

1.2.2 FOXM1及NF-κB的蛋白表达水平:应用对数生长期的细胞QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721检测各株细胞中FOXM1蛋白及NF-κB核蛋白表达情况,具体实验方法参考本课题组前期发表文章[6](其中NF-κB核蛋白提取方法具体步骤参考碧云天试剂盒提供方法),FOXM1、NF-κB和内参对照GAPDH的蛋白分子量大小分别为100KD、65KD和37KD;实验中各种抗体稀释比例为:FOXM1抗体(按1︰400稀释)、NF-κB抗体(按1︰200稀释)、GAPDH 抗体(按1︰2000稀释)和二抗(按1︰5000稀释)。

1.2.3 FOXM1及NF-κB的mRNA表达水平:细胞总RNA的提取应用对数生长期的细胞(QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721),具体实验方法参考本课题组前期发表文章[6]。

目的基因及内参对照扩增引物序列为:FOXM1上游(F)5,―GGGCGCACGGCGGAAGATGAA―3,,下游(R)5,―CCACTCTTCCAAGGGAGGGCTC ―3,,产物大小为379bp;NF-κB上游(F)5,-CGCATCCAGACCAACAACA-3,,下游(R)5,―TGCCCAGAAGGAAACACCA―3,,产物大小为269bp;GAPDH 上游(F)5,―GAAGGTGAAGGTCGGAGTC―3,,下游(R)5,―GAAGATGGTGATGGGATTTC―3,,产物大小为226bp。

具体反应条件如下:FOXM1(95℃预变性2min,95℃变性40s,55℃退40s,73℃延伸1 min,循环40次,73℃延伸5min);NF-κB(94℃预变性5min,94℃变性30s,55℃退30s,72℃延伸1 min,循环35次,72℃延伸5min);GAPDH(95℃预变性2min,95℃变性40s,55℃退火40s,73℃延伸1min,循环35次,73℃延伸5min)。

1.3 统计学方法:应用SPSS 13.0统计软件分析,计量资料用x±s表示,比较采用t检验进行统计学分析,以P<0.05视为差异有统计学意义。

2 结果2.1 Western blot 法检测不同人肝癌细胞株中FOXM1蛋白及NF-κB核蛋白表达:各株人肝癌细胞中的FOXM1蛋白及NF-κB核蛋白表达水平见图1及图2。

结果显示细胞株(QGY-7703、BEL-7402)中FOXM1及NF-κB的表达都明显高于细胞株SMMC-7721,表达有统计学意义(P<0.01),FOXM1相对光密度值QGY-7703:(0.770±0.053)、BEL-7402:(0.810±0.073)、SMMC-7721:(0.132±0.021);NF-κB相对光密度值QGY-7703:(0.680±0.056)、BEL-7402:(0.872±0.071)、SMMC-7721:(0.141±0.015)。

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