人肝癌细胞株HepG2 和BEL 一7402 对放射敏感性的体外实验研究
２５４· 塞坦照壁盎盔—２ 蟹 量 １王鳖堑ｊ盟．ｆ ｐｒａ￣ｌｔｃａｌ』 ｒｎ Ｃａｎｗｒ 人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２和ＢＥＬ一７４０２对放射敏感性的 体外实验研究 石卫民 范义湘 陈龙华 【摘要】 目的采用体外实验方法探讨人肝癌细胞林ＨｅｐＧ２和ＢＥＬ一７４０２对放射的敏感性。方法 对人肝癌细胞株 Ｈ ｐＣ２和ＢＥＬ一７４０２进行俸外培养，应用集落形成法和ＭＴＴ法测定６ＭＶｘ线不同剂量照射后细胞的存活率，计算２株细胞放 射敏感性参数（ ） 结果ＨｅｐＧ２的Ｄ０值为１ ５，ＳＦ２为（０ ４５±０ ０５）；ＢＥＬ一７４０２的Ｄ０值为ｌ ６，ＳＦ２为（０ ６３±０ ０５）。ＭＴＴ 法与集落形成法相关性较好（ ＝０ ９４６，Ｐ＜０ ０５）。结论ＨｅｐＧ２具有较高的放射敏感性，ＢＥＬ一７４０２的放射敏感性较低；ＭＴＴ 法可替代集落形成法作细胞放射敏感性的快速测定。 【关键词】人肝癌细胞系；照射效应；放射敏感性 中图分类号：Ｒ７３５ ７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００ｌ＋５９３０ｆ２００２｝０３ ０２５４—０３ Ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅｓ ＨｅｐＧ２ ａｎｄ ＢＥＬ一７４０２ ＳＨＩ Ｗｅｉ—ｒａｉｎ，ＦＡＮ Ｙｉ—ｒｉａｎｇ，ＣＨＥＮ Ｋｏｕｇ－ｈ㈨Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｏｎｃａｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｍｉｌｌｉｔａｒｇ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，５１００１０ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｒａｄｉｏ￣ｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ＨｅｐＧ２ ａｎｄ ＢＥＬ一７４０２ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｕｓｉｎｇ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｅｉｎｇ ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ—ＨｅｐＧ２ ａｎｄ ＢＥＬ一７４０２，ｗｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｔｈｅｉｒ ｓｕｒｖｉ￣ｎｇ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｂｙ ｃｌｏｎｏ－ ｇｅｎｉｃ ａｓｓａｙ ａｎｄ ＭＴＴ ａｆｔｅｒ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｂｙ ６ＭＶ Ｘ—ｒａｙ ｗｉｔｈ ｄｏ￣ｅｓ ｒａｎｇｉｎｇ ０－－１０ Ｇｙ Ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ， ，ｗａｓ ｃａ１ｃｕｌａｔｅｄ Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ Ｄ０ｏｆＨｅｐＧ２ｗａｓ１．５Ｇｙ，ＳＦ２（０．４５±０ ０５）．Ｔｈｅ Ｄ０ ｏｆ ＢＥＬ一７４０２ｗＮｓ１．６Ｇｙ，ＳＦ２（０．６３±０．０５）．Ｔｈｅｒｅｗａｓ ａ ｇｏｏｄ ｃｏｒｒｅｌａ． ｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｍｍ Ｍ丌ａｎｄ ｃｌｏｎｏｇｅｎｉｃ ａｓｓａｙ（７＝０ ９４６，Ｐ＜０ ０５）Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｌｔｌｖｉｔｙ ｏｆ ＨｅｐＧ２ ｒａｔｈｅｒ ｈｉｇｈ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＢＥＬ一７４０２．ＭＴＴ ｉｓ ａ ｑｕｉｃｋ ｗａｙ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎｓｔｅａｄ ｏｆ ｄｏｎｏｇｅｎｉｃ ａｓ－ ｓａｙ ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｈｕｍａｎ ｂｅｉｎｇ ｈｅｐａｔｃ￣ｒｃｉｎｏｒｔｍ ｃｅｌｌ】ｉｎｅ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｌＲａｄｉａｔｉｏｎ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ （ＴｈｅＰｒａｃｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣａｎｃｅｒ，２００２，１７：２５４ ２５６） 原发性肝癌是我国高发的恶性肿瘤之一，近年来 立体适形放疗的实践证实肝癌对射线有相当高的反应 率…，但是目前尚缺少肝癌细胞放射敏感性的实验研 究资料，本研究拟以人肝癌细胞ＨｅｐＧ２和ＢＥＬ～７４０２ 为模型，应用放射生物学方法评价肝癌细胞的放射敏 感性。 １材料与方法 １＿１细胞系及照射条件 人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２、ＢＥＬ一７４０２为人原发性肝 癌切除标本传代培养细胞株，由第一军医大学南方医 院全军消化研究所提供。细胞在３７℃、５％ｃＯ 条件 下，培养于含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ １６４０培养液中。 细胞处于指数生长期时进行照射（换液后２４ ｈ） 使用 作者荦他：５１（ＩＯ１（Ｉ广州 ：区ｒ州总医院放射 憎科（６－Ｉ Ｊ【也） ５１０５１５第一车睚大学 方 院艘疗科（范义湘、陈尼华】 Ｖａｒｉａｎ ２１００ Ｃ直线加速器６ Ｍｖ Ｘ线照射，等中心照 射，射野大小为加ｃｍ×１０ ｃｍ，剂量率４００ ｃＧｙ／ｍｉｎ， 照射时培养皿上下各置１．５ ｃｍ厚的有机玻璃板。 １．２集落形成实验 处于指数生长期的细胞经０．２５％胰蛋白酶消化 制成单细胞悬液，按照射剂量将１×１０ ～１×１０ｓ个细 胞接种于直径为３ ｃｍ培养皿中，分别给予０～１０ Ｇｙ 单剂量照射，培养１２～１４天后中止培养，甲醇固定， Ｇｉｅｍｓａ染色，镜下计数超过５０个细胞的集落，计算细 胞存活分数（ＳＦ）。每个剂量点设３个平行样品，取均 数。集落形成率（ＰＥ）＝集落形成数／接种细胞数。细 胞存活分数（ＳＦ）＝照射组集落形成率／对照组集落形 成率。 １．３ ＭＴＴ实验 将射线照射和未照射的细胞分别接种于９６孔培 养板中培养，每孔接种细胞数５×１０ 个。３天后于终 止培养前６ ｈ，每孔加入０ ５％ＭＴＴ ２０“ｌ。孵育完毕， 吸除孔内液体，每４ＬＮ １５０ １ ＤＭＳＯ，振荡５ ｍｉｎ，
用 奎周痨壁盈， ２０ｏ ｒ王旦璺卫鲞盈 ＥＬ３４０型酶标仪（美国Ｂｉｏ—Ｔｅｃ公司）在５７０ ｎｍ波长 下测定各孔光吸收值（ＯＤ），计算细胞存话分数。细胞 存活分数（ｓＦ）＝照射组ＯＤ值厂对照组ＯＤ值。 １．４统计分析 以上实验均重复３次，取均数。应用多靶单击模 型［ＳＦ＝１一（１一ｅ。ｎ ｏ） ］计算细胞放射敏感性参数 （Ｄｆ）），亚致死损伤修复能力（Ｄｑ）和外推数（ｎ）。用 ＳＰＳＳ软件进行统计分析。 ２结果 ２．１ ２株细胞的放射敏感性 用集落形成实验结果拟合细胞剂量存活曲线，以 照射剂量为横坐标，以细胞存活分数的对数值为纵坐 标，得到２株细胞的剂量存活曲线，见图１。按文献 的方法以剂量存活曲线计算细胞的放射敏感性参数。 ＨｅｐＧ２的Ｄ０值为１．５ Ｇｙ，Ｄｑ值为０．８Ｇｙ，ｎ为１ ８， 细胞受２．０ Ｇｙ照射时的存活分数（ＳＦ２）为０ ４５± ０ ０５；ＢＥＬ一７４０２的Ｄｎ值为１．６ Ｇｙ，Ｄｑ值为１．３ Ｇｙ，ｎ为２．４，ＳＦ２为０．６３±０ ０５。以Ｄ０值作标准，结 果显示，ＨｅｐＧ２的放射敏感性较高，ＢＥＬ一７４０２的放 射敏感性较低。 蔓 萎。 薰 ０ 照射剂量（Ｇｙ 图ｌ ２株人肝癌细胞剂量存活曲线 为ＨｅｐＧ２． 为ＢＥＬ一７４０２ ２．２ ＭＴＴ结果与集落形成宴验结果比较 细胞受照射后的死亡分为问期死亡和增殖性死 亡，当细胞丧失了无限增殖的能力即成为放射生物学 意义上的死亡，因为增殖性死亡可以发生在照射后的 数个细胞周期内，也可能发生在照射后的数十个细胞 周期后，因此为了更好地衡量存活细胞的多少，理论上 应尽量延长照射后培养的时间。本研究的预实验表 明，当细胞密度在ｌ×１０ ～２×１０６个／孑Ｌ时 ＯＤ值随 Ｖ ２５５· 细胞密度的增大而递增，表明细胞数在此范围内时， ＭＴＴ法能较好地反映细胞数量的变化。考虑到兼顾 增殖性死亡的细胞和存活并继续增殖的细胞的细胞 数，本实验选用５×１０４个／子Ｌ。ＭＴＴ法与集落形成法 测定的２株细胞的存活分数的相关比较见图２，直线回 归分析表明，ＭＴＴ法与集落形成法相关性较好， ＝ ０．９４６（Ｐ＜Ｏ．Ｏ５）。 蜒 《 壤 铽 蛏 碧 导 细胞存恬分数｛ＭＴｒ法） 图２ ２种方法摁Ｉ定２株细胞存活分数的相关直线 ３讨论 肿瘤细胞的放射敏感性体外测定结果与临床肿瘤 放疗的疗效密切相关ｌ３】。因此，进行肿瘤细胞体外放 射敏感性的测定，有助于临床上制订更加合理、有效的 放疗计划。 以往对于肝癌对射线的敏感性认识不足，本实验 证实体外培养的人肝癌细胞对放射线比较敏感。李伟 雄等ｌ４ 报道的人鼻咽癌ＣＶＥ细胞系的Ｄｆ）值为１．２ ， 刘斌等［ ］报道口腔黏液表皮样癌细胞ＭＥＣ一１的Ｄ０ 为１ ５４，而本研究的ＨｅｐＧ２的Ｄ０值为１．５ Ｇｙ，ＢＥＬ ７４０２的Ｄ０值为１．６ Ｇｙ，与其近似，因此有理由认为 其也具有相似的较高的放射敏感性。哺乳动物细胞剂 量存活曲线拟合的ｎ值在１～５，本实验发现，ＨｅｐＧ２ 的ｎ值为１ ８，ＢＥＬ一７４０２的ｎ值为２．４，说明其细胞 内靶较少，因此被射线全部击中细胞内靶的概率较高， 所以有较高的放射敏感性。近年来，Ｓ 成为描述细 胞放射敏感性的１个重要指标。Ｄａｚａ等【６１报道舌鳞 癌细胞系ＳＣＣ一４的ＳＦ２为０．６。Ａｎｔｈｏｎｙ等【７ｊ发现 甲状腺癌细胞系Ｋ２的ｓＦ２为０．４７。Ｒｅｉｂｅｉｒｏ等 则 报道膀胱癌细胞系ＢＬ—ｌ７的ＳＦ２为０．５７，相比之下， ＨｅｐＧ２的Ｓ 为０．
４５±０ ０５，ＢＥＬ一７４０２为Ｏ．６３± ２５６ 塞ＪＪ．痛 越． ｑ：５ ｌ７壹孔ｊ盟一 ［ 旦翌地 ｊ ａｔ ＣａｒＪ！；ｅ ０ ０５，具有与上述３株细胞相似的放射敏感性。我们 曾应用立体定向适形放疗已治疗肝癌２Ｏ例，近期疗效 很好［１ｌ，本体外实验结果与临床研究结果基本吻合。 近年来，肿瘤细胞放射敏感性的研究技术向着敏 感和快速的方向发展。集落形成法作为经典的方法， 能够比较真实地反映照射后细胞存活分数的多少，但 实验周期较长，操作复杂，容易污染 ＭＴＴ已广泛用 于研究细胞增殖以及测定肿瘤细胞对化疗药物的敏感 性【 ，具有简便、快速、经济的特点。本实验比较分析 了上述２种方法测定细胞存活曲线，发现ＭＴＴ法与 集落形成法有良好的相关性（ ＝０ ９４６），表明ＭＴＴ 法可以替代集落形成法进行肿瘤细胞放射敏感性的测 定。 参考文献 ［１］石卫民，陈龙华原发性肝癌立体定向适形放疗的近期疗 效评价［Ｊ］．癌症，１９９９，１８（５）：６０４ （２］夏寿萱放射生物学［Ｍ］第１版北京：军事医学科学出 版社，１９９８：６０． ［３］浦佩玉，徐 波，杨天恩．恶性肿瘤体外放射敏感性与临 床故疗疗效相关性研究［Ｊ］癌疗．１９９５，１４（Ｉ）：３３ ［４］李伟雄，沈瑜．谷铣之７６４—１对鼻咽癌细胞放射增敏作 用的研究［Ｊ］中华放射肿瘤学杂志，１９９４，３（４）：２４７ ［５］刘斌，司徒振强，吴军正，等人黏液表皮样癌ＭＥＣ—ｌ 细胞放射敏感性的研究［ｊ］实用口腔医学杂志，１９９７，１３ （２）：１２６ ｆ６］Ｄａｚａ Ｐ，Ｓｃｈｕｂｌｅｒ Ｈ，Ｍｃｍｉｌｌａｎ ｒｊ，ｅｔ ａｌ Ｒａｄｉｏ．￣ｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｄｏｕｂｌｅ ｓｔｒａｎｄ—ｂｒｅａｋ ｒｅｊｏｉｎｉｎｇ ｉｎ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃ ａｎｄ ｎｏｎ— ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃ ｈｕｍａｎ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ＬＪ］ Ｉ ｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｌ Ｂｉｏｌ，１９９７，７２（１）：９１． ［７］Ａｎｔｈｏｎｙ Ｇ，Ｊｅａｎ ＤＬ，Ｎａｄｉｎｅ Ｂｔ，，ｅｔ ａｔ Ｒａｄｌｏ．．￣ｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｕｎｌａｎ ｎｏｒｍａｌ ａｎｄ ｔｕｍｏｒａｌ ｔｈｙｒｏｉｄ ｃｅｌｌｓ ｕｓｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓ ｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｏｎｏｇｅｎｌｃ ＳＵｒｖｉｖａｌ ａｓｓａｙ （Ｊ］ｌｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｂｌｏｔ Ｐｈｙｓ，１９９９，４４（３）： ６８３ ［８］Ｒｉｈｅｉｒｏ ＪＣ Ｂａｒｎｅｔｓｏｎ ＡＲ，Ｆｉｓｈｅｒ ＲＪ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｒａｄｌｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｐ５３ ｓｔａｔｕｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｌａｄ— ｄｅｒ ｃａｎｃｅｒ ｃｅ ｓ［Ｊ］ｌｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｂｉｏｌ，１９９７，７２（１）：ｌ１． ［９］ 尤迎春，丛文铭，王一，等ＭＴＴ比色分析法快速测定 肝癌细胞株对化疗药物敏感性的方法研究［Ｊ）癌症， １９９６，１５（３）：２１９． （收稿日期２００１—１０—３０修回日期２００２—０３—２５） （上接第２４９页） 结果还显示，随着胃癌细胞ＦａｓＬ表达水平的升高、 ＴＩＬ浸润程度降低和ＴＩＬ捅亡水平升高，胃癌细胞的 凋亡指数逐渐降低，胃癌细胞的凋亡指数与ＴＩＬ的凋 亡指数有显著负相关关系，提示胃癌细胞的凋亡也与 其ＦａｓＬ表达密切相关，支持胃癌细胞可能通过ＦａｓＬ 表达水平上调诱导Ｔ】Ｌ凋亡（即上述“肿瘤细胞反击 免疫细胞”的机制），间接减弱Ｔ】Ｌ对胃癌细胞的杀伤 作用，从而达到逃避机体免疫监视的观点【１—１。 我们的研究结果还显示，晚期胃癌组织中Ｆａｓ表 达水平有所下降，这与其他的研究结果相似Ｌ５ Ｊ。表明 胃癌细胞免疫逃避的机制既多样又复杂，Ｆａｓ表达水 平的逐步下调可能是其中之．Ｉ ，非ＦａｓＬ依赖的肿 瘤细胞杀伤Ｔ淋巴细胞的机制有待进一步研究。 参考文献 １］Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｎ Ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｆｉｇｈｔ ｂａｃｋ ｔｏ ｂｅａｔ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ［Ｊ］Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，２７４（１Ｏ）：１３２０． ［２］Ｓｈｉｒａｋｉ Ｋ，Ｔｓｕｊｌ Ｎ，Ｓｈｌｏｄａ Ｔ，ｅｌ ａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆａｓ ｌｉｇ ａｎｄ ｊｎ ｌｉｖｅｒ ｍａｔａｓｔａｓｅ￣ｏｆ ｈｕｍａｎ∞ｌｏｎｉｃ ａｄ ［Ｊ］Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９９７，９４（８）：６４２０． ［３］Ｂｅｎｎｅｔｔ Ｍｗ，０ Ｃｏｎｎｅｌ Ｊ，Ｏ Ｓｕｌｌｉｖａｎ ＧＣ，ｅｔ ａｌ Ｅｘｐｒｅｓ． ｓｉｏｎ ｏｆ Ｆａｓ ｌｌｇａｎｄ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ａｄｅｎｏｅａｒｅｌｎｏｍａｓ：ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｅｓｃａｐｅ ｉｎ ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］Ｇｕｔ，１９９９，４４（２）：１５６ ［４］刘海峰，刘为纹，房殿春，等胃癌组织中ＦａｓＬ表达及其 与细胞凋亡的关系［Ｊ］．解放军医学杂志 １９９９，２４（１）： ６３ ［５ Ｊ Ｓｈｉｍｏｎｉｓｈｌ Ｔ，Ｉｓ Ｋ Ｓｈｉｂａｔａ ＧＣ，ｅｔ ａｌ Ｕｐ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｓ ｌｌｇａｎｄ ａｔ ｅａｒｌｙ ｓｔａｇ￣ａｎｄ ｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆ∞ａｔ ｐｒｏｇｒ￣ｓｅｄ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｄｎｏｍａ ｒｅ． ｆｌｅｅｔ ｅｖａｓｉｏｎ ｔｒｏｍ ｉｍｍｕｎｅ ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ［Ｊ】Ｈｅｐａｔｏｔｏｇｙ， ２００１），３２（３）：７６１ ［６］贾百是，李继昌、张和平，等Ｆａｓ表达及细胞凋亡与胃癌 浸润及转移的关系［Ｊ］实用癌症杂志，２００１），１５（３）：２３８ （收稿１３期２００１一ｏ９—０７修回日期２００２—０２—２６）
2021年中药骆驼蓬抗肿瘤作用的研究进展
摘要骆驼蓬为蒺藜科植物骆驼蓬属多年生草木植物的全草，是维吾尔民族医常用药，其有效化学成分为生物碱，具有广泛的药理作用。自80年代我国学者首次报道了骆驼蓬总碱及骆驼蓬生物碱单体具有明确抗肿瘤作用，使该植物和其中的有效成分受到我国学者的重视。目前越来越多的研究集中在其抗肿瘤相关方面，本文就近年来骆驼蓬在抗肿瘤方面的研究进展进行综述。
关键词骆驼蓬；抗肿瘤；研究进展
骆驼蓬（Peganum harmaia L）又名骆驼蒿、苦苦菜、臭草、臭牡丹，为蒺藜科（Zygophllaceae）植物骆驼蓬属（Paganum）多年生草木植物的全草。骆驼蓬首载于阿维森纳的《医典》，也是维吾尔民族医常用药，维吾尔语叫阿德拉斯曼。它性平，味苦，辛，有毒，维吾尔医学认为它具有坚固筋脉、助阳暖阴、消除黏稠体液、消散寒湿之气等功能。主治筋脉软弱、关节骨痛、咳嗽痰多、偏瘫健忘、神昏头痛、月经不调等症[1]。我国有3个品种，即骆驼蓬（Peganum harmalaL）、骆驼蒿（P.nigellastrum Bge）和多裂骆驼蓬（P.multisectum（Maxim）Bobr）。主要分布在西北部新、蒙、陕、甘、宁干旱地区，骆驼蓬草和种子均可入药，其中种子的药用成分较高，其种子已被收载于新疆地方标准。
骆驼蓬植物的有效化学成分为生物碱，具有广泛的药理作用。骆驼蓬生物碱对心血管系统、呼吸系统和中枢神经系统有治疗作用，同时还具有抗肿瘤、镇痛、消炎及抗真菌、杀细菌、抗病毒、驱虫等作用[2]。骆驼蓬种子中总碱含量约为92%～0%，主要成分为β-咔啉类生物碱和喹唑啉类，其中β-咔啉类生物碱的主要成分是骆驼蓬碱（harmaline HL）、去氢骆驼蓬（harmine HM）、去甲氧基骆驼蓬碱等。其中HL和HM含量高、结构稳定、具有明显的抗肿瘤作用[3]。80年代后，我国学者首次报道了骆驼蓬总碱及骆驼蓬生物碱单体具有明确抗肿瘤作用，使该植物和其中的有效成分受到我国学者的重视。目前越来越多的研究集中在其抗肿瘤相关方面，现将其抗肿瘤方面的研究进展综述如下
卡铂对肝癌HepG2细胞影响的基因芯片分析
卡铂对肝癌HepG2细胞影响的基因芯片分析
岳萍;陈琳;黄文竹;胡祖权;王赟;邱炜
【摘 要】目的:分析卡铂对肝癌HepG2细胞基因转录水平的影响.方法:用50
mg/L卡铂处理HepG2细胞48 h后,Trizol法抽提总RNA,利用基因芯片检测HepG2细胞基因在转录水平上的表达变化,分析获得差异基因;采用基因本体论(GO)分析差异转录基因分子功能、细胞组成及参与的生物过程,采用京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析差异转录基因涉及的相关信号通路.结果:差异转录的基因共有1 474个(与对照组相比,变化倍数＞3),其中上调基因有520个,下调基因有954个;这些差异转录基因参与了酶结合、腺嘌呤核苷酸结合等相关功能,并与内质网、高尔基体、细胞骨架、锚定连接及细胞外间隙等有关;差异转录基因涉及淀粉和蔗糖代谢、抗坏血酸和醛酸代谢、MAPK通路、类固醇激素生物合成、补体与凝血级联途径等信号通路.结论:卡铂影响HepG2细胞中多个基因的转录,这些基因调控细胞多种功能.
【期刊名称】《贵阳医学院学报》
【年(卷),期】2019(044)003
【总页数】5页(P279-282,288)
【关键词】肝肿瘤;卡铂;HepG2细胞;基因芯片;差异基因;GO分析;KEGG分析
【作 者】岳萍;陈琳;黄文竹;胡祖权;王赟;邱炜
【作者单位】贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550025
【正文语种】中 文
【中图分类】R735.7
肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是世界上最主要的恶性肿瘤之一，被认为是癌症相关死亡的第三个最常见的病因，其发病率和死亡率几乎相等]1-3]。由于HCC缺乏明显的临床症状和特异性的血清学诊断指标，其在早期很难被发现。因此，大多数患者在确诊时已是HCC晚期，患者5年生存率较低]4-5]。卡铂是第二代铂制剂，它除了保留了第一代铂(顺铂)的抗肿瘤范围广、对实体肿瘤疗效高等优点外，其对神经系统及肾脏的毒性作用明显低于顺铂]6-7]。大量临床试验表明，卡铂对HCC、肺癌、脑肿瘤、淋巴瘤、神经母细胞瘤、生殖细胞瘤等多种恶性肿瘤有明显的治疗作用]8-13]。目前，卡铂与紫杉醇、依托泊苷等其他药物联合化疗的治疗方案已被证实具有明显的优越性]14-17]。卡铂主要作用于DNA，破坏DNA复制，从而产生细胞毒性，抑制肿瘤的生长]18-19]。本课题组的研究发现，卡铂对肝癌HepG2细胞膜流动性、渗透脆性、迁移能力和细胞骨架等生物流变学特性有显著影响(待发表)，为进一步了解其分子机制，本研究利用基因芯片技术检测卡铂对HepG2细胞总体基因转录的影响，分析获得差异基因；采用基因本体论(gene ontology，GO)分析差异转录基因分子功能、细胞组成分及参与的生物过程，采用京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and
古抑菌素对人肝癌细胞作用的研究
古抑菌素对人肝癌细胞作用的研究
段承刚;王丽;刘晓燕;何涛;梅志强
【期刊名称】《现代医药卫生》
【年(卷),期】2010(026)015
【摘 要】目的:通过组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACS)抑制剂古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)对人肝癌细胞HepG2(以下简称HepG2)和正常肝细胞LO2(以下简称LO2)增殖与凋亡作用的比较,探讨TSA对肝癌的作用机制.方法:应用光学显微镜、透射电镜、四氮唑蓝(MTT)法、免疫细胞化学法观察经不同浓度TSA处理后的HepG2和LO2的增殖、凋亡与凋亡相关蛋白的改变.结果:HepG2细胞经TSA处理后,电镜下超微结构发生了凋亡早期改变;小剂量TSA对HepG2细胞具有较强的抑制作用,对LO2细胞影响不明显,当TSA浓度达到1000 nmol/L以上时,对LO2表现出明显的细胞毒性作用;TSA可诱导HeptG2细胞凋亡,并增加凋亡相关蛋白Bax的表达.结论:TSA可明显抑制肝癌细胞HepG2的增殖,其机制可能与上调Bax的表达,诱导细胞凋亡有关.
【总页数】3页(P2248-2250)
【作 者】段承刚;王丽;刘晓燕;何涛;梅志强
【作者单位】泸州医学院医学分子生物学实验室,四川,泸州,646000
【正文语种】中 文
【中图分类】R34
【相关文献】 1.曲古抑菌素A对人肝癌细胞HepG2中FHIT基因表达的影响 [J], 王丽;刘晓燕;龚舒;何涛;段承刚
2.曲古抑菌素A对人Tenon囊成纤维细胞作用的研究 [J], 李晓艳;邓颖;杨建刚
3.免疫制剂对肝癌大鼠单核巨噬细胞抑人肝癌细胞增殖作用的影响 [J], 白咸勇;贾秀红;成令忠
4.古抑菌素A对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响及其机制研究 [J], 黄刚娅;王丽;段承刚;何涛
5.曲古抑菌素A增加人肝癌Bel7402细胞对TRAIL敏感度的实验 [J], 李伟;朱明月;董栩;夏华;陈栘;鲁琰;郭峻莉;谢协驹;符史干;李孟森
重楼药理作用的研究进展
重楼药理作用的研究进展
何明生;李秀
【摘 要】Paris polyphylla is a traditional Chinese Medical herb that has
been used for thousands of year. Modem pharmacological studies have
shown that Paris possess a variety of pharmacological effects ,such as anti
- tumor, anti - inflammatory, antibacterial, sedation, analgesia, hemostasis.
In recent years, the pharmacological mechanism of Paris polyphylla
focuses on its anti - tumor and renal protective effects. This paper
reviewed the progress in the studies on pharmacological effects of Paris
polyphylla.%重楼(Rhizoma Paridis)为常用中药,种类众多,资源丰富,有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊的功效.现代药理研究表明,重楼具有抗肿瘤、消炎、抑菌、镇静、镇痛、止血等作用等多种药理作用.近年来对重楼药理作用的研究主要集中在其抗肿瘤和肾脏保护作用上,作者就重楼的药理作用国内外最新研究现状作一综述.
【期刊名称】《世界中医药》
【年(卷),期】2012(007)006
【总页数】4页(P579-582)
【关键词】重楼;药理作用;抗肿瘤;重楼总皂苷
【作 者】何明生;李秀
【作者单位】云南省肿瘤医院血液科,云南省昆明市西山区昆州路519号,650118;云南省肿瘤医院血液科,云南省昆明市西山区昆州路519号,650118 【正文语种】中 文
马齿苋提取物对肝癌细胞HepG-2抑制作用的实验研究
ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００７ ＶＯＬ．１８ ＮＯ．５ 时珍国医国药２００７年第１８卷第５期
马齿苋提取物对肝癌细胞
ＨｅｐＧ一２抑制作用的实验研究
崔香淑，金元哲，张学武
（延边大学基础医学院，吉林延吉１３３０００）
摘要：目的观察马齿苋提取物对肝癌ＨｅｐＧ一２的抑制作用。方法采用ＭＴＴ比色法观察马齿苋提取物抑制肝癌ＨｅｐＧ
一２细胞增殖；采用流式细胞仪检测马齿苋对ＨｅｐＧ一２细胞周期分布的影响。结果马齿苋提取物可抑制肝癌ＨｅｐＧ一２
细胞增殖。其作用具有时间和浓度依赖性；可改变细胞周期分布，多数细胞阻滞于Ｓ期，与对照组比较，细胞凋亡率差异 有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论马齿苋提取物可诱导肝癌ＨｅｐＧ一２细胞凋亡，改变细胞周期分布，从而抑制细胞增殖。
关键词：马齿苋；细胞周期；细胞凋亡
中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０８０５（２００７）０５—１０６５－０１
Ｉｎｈｉｂｉｔ０ｒ、 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｐｏｒｔｕｌａｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ．Ｏｉｌ Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＨｅｐＧ一２ Ｃｅｌｌｓ
ＣＵＩ Ｘｉａｎｇ—ｓｈｕ，ＪＩＮ Ｙｕａｎ—ｚｈｅ，ＺＨＡＮＧ Ｘｕｅ—ｗｕ
（Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｎｉｔｙ，Ｙａ ，Ｊｉｌｉｎ １３３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｒｔｕｌａｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ．ｏｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｈｅｐａｔｏｍａ ＨｅｐＧ一２ ｃｅｌｌｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＭＴｒ ａｓｓａｖ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｘａｍｉｎｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｐｏｒｔｕｌａｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ．ｏｎ ｔｌｌｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＨｅｐＧ一２ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍ－
瑞香狼毒药效组分对裸鼠肝癌移植瘤的抑制及其机制
瑞香狼毒药效组分对裸鼠肝癌移植瘤的抑制及其机制
潘国凤;杨庆;刘安;朱晓新
【期刊名称】《世界华人消化杂志》
【年(卷),期】2011(19)26
【摘 要】目的:评价瑞香狼毒药效组分抑制人肝癌细胞株BEL-7402裸鼠皮下移植瘤作用的强度,并探讨其机制.方法:建立人肝癌BEL-7402裸小鼠皮下移植瘤模型研究瑞香狼毒药效组分Zp1111抗肿瘤作用与对荷瘤裸鼠体质量与免疫器官的影响,免疫组织化学法检测用药前后BEL-7402皮下移植瘤组织Bcl-2与Bax阳性表达的变化.结果:Zp1111对裸小鼠皮下移植瘤BEL-7402具有较强的抑制作用,187.5mg/kg、250mg/kg(折合成生药量)剂量时对移植瘤的相对肿瘤增殖率T/C小于60%;该组分能显著上调BEL-7402移植瘤组织Bax基因的表达,但对Bcl-2的表达影响较弱.结论:瑞香狼毒药效组分在体内对人肝癌细胞BEL-7402裸鼠移植瘤具有较强的抑制作用并呈现一定的剂量依赖关系,该组分具有一定的诱导凋亡作用,可能与上调Bax有关.
【总页数】6页(P2717-2722)
【关键词】肝肿瘤;瑞香狼毒;细胞凋亡;Bcl-2;Bax
【作 者】潘国凤;杨庆;刘安;朱晓新
【作者单位】首都医科大学附属北京世纪坛医院;中国中医科学院中药研究所
【正文语种】中 文
【中图分类】R730.5 【相关文献】
1."肝癌一号"对裸鼠人肝癌移植瘤生长的抑制作用及机制研究 [J], 谭德明;刘作金;吴勇;李旭宏;石毓君;龚建平
2.狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究 [J], 冯传平;刘艳;李福元;梁健;刘颖新;姚淑琼;丁海霞
3.人参皂苷Rg3联合紫杉醇抑制人肝癌细胞HepG2增殖和对裸鼠移植瘤模型的作用机制研究 [J], 张奉海;张瑞荣;陈淑娟;王金红;于永兰
4.翼核果素对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制探讨 [J], 徐宏;陈金元;陆国寿;胡筱希;刘瑛
NU7026对人肝癌细胞HepG2生物学行为的影响
[收稿日期] 2020-11-27[修回日期] 2021-02-11[基金项目] 湖南省教育厅科学研究重点项目(19A429)[作者简介] 李娟,硕士研究生,研究方向为放射医学,E-mail为lijuan9508@。通信作者黄波,博士,硕士研究生导
师,副教授,研究方向为放射医学,E-mail为huangbo0930@。·基础医学·DOI:10.15972/ki.43-1509/r.2021.03.011
NU7026对人肝癌细胞HepG2生物学行为的影响
李娟,颜宇龙,万丹婷,李蕊,周美艳,周洁,黄波(南华大学公共卫生学院,湖南省衡阳市421001)
[关键词] NU7026; 肝癌; HepG2细胞; 增殖; 迁移[摘 要] 目的 探讨NU7026对HepG2细胞的影响,为治疗肝癌提供理论基础。方法 用NU7026作用HepG2
细胞,将实验分为空白组、对照组和NU7026组。CCK8实验检测NU7026对肝癌HepG2细胞存活率的影响。生长曲线实验和克隆实验检测HepG2细胞增殖能力,划痕实验检测HepG2细胞迁移能力,流式细胞术检测HepG2细胞凋亡和周期。结果 与0μmol/L组和DMSO组比较,15μmol/L和20μmol/LNU7026作用于HepG2细胞,细胞存活率明显下降(P<0.05);与DMSO组相比,10μmol/LNU7026作用于HepG2细胞24、48、72h后,细胞存活率下降(P<0.05);10μmol/LNU7026作用HepG2细胞,细胞增殖能力和迁移能力下降(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞周期无明显改变。结论 NU7026能抑制HepG2细胞增殖能力和迁移能力可能与促进细胞凋亡有关。
[中图分类号] R735.7[文献标识码] A
EffectofNU7026onthebiologicalbehaviorofhumanhepatocarcinomacellHepG2
常见肝癌细胞株
实验室用肝癌细胞株
细胞英文名称 Hep G2 [HepG2] 细胞中文名 人肝癌细胞
形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白；表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体；该细胞具有3-羟基-3-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
培养基 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)
血清 10%FBS 其它因子 1%NEAA
传代方法 1:4~1：6传代；每周2次。 传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性
细胞英文名称 SMMC-7721 [SMMC7721] 细胞中文名 人肝癌细胞
形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长
特征特性 取人肝癌组织，采用静置和旋转管法培养11天细胞开始生长，首次传代23天。AFP阳性。用Northern blot方法，未能检测到细胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达，免疫缺陷小鼠体内可成瘤。
培养基 RPMI 1640 (w/o Hepes)
血清 10%FBS 其它因子 无
传代方法 1:3传代；3~4天1次。 传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性
细胞英文名称 Hep3b 细胞中文名 人肝癌细胞
形态特性 上皮细胞样 生长特性 贴壁生长 。
特征特性 该细胞源自一位患有肝癌的7岁黑人男童，HBV阳性。