临床检验技士-临床免疫学和免疫检验 讲义 07
第七章放射免疫分析
第一节放射免疫技术
一、基本类型及原理
（一）放射免疫分析（RIA）以放射性核素标记抗原与未标记抗原竞争结合特异性抗体，测定样品中抗原量的一种分析法。
（二）免疫放射分析（IRMA）用放射性核素标记的过量抗体与待测抗原直接结合，固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析法。
二、常用的放射性核素
125I、131I、3H、14C等，使用最广泛的是125I。
三、放射性标记物制备及鉴定
（一）原理：以放射性碘原子置换被标记物分子中酪氨酸或酪胺残基以及组胺残基上的氢原子。
蛋白质、肽类等含有上述基团，可用125Ⅰ直接标记，不含上述基团的甾体激素或药物分子，须连接相应基团才能用于放射性碘标记。
（二）标记及类型
1.直接标记法：肽类、蛋白质和酶的碘化标记。
常用的方法为：①氯胺 T（ch-T）法；②乳过氧化物酶标记法。
2.间接标记法：也称连接标记法，是最常用的间接碘标记方法。
该法主用于甾体类化合物、环核苷酸、前列腺素等缺乏碘标记基团的小分子化合物的标记。
（三）放射标记物的纯化
1.凝胶过滤法：分子筛机制。
2.离子交换层析法：游离125Ⅰ与标记物分子极性差异进行吸附解离。
3.聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）：按分子所带电荷和直径不同在电场作用下分子迁移速率不同。
4.高效液相色谱法。
（四）放射标记的鉴定
1.放射化学纯度：单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率，要求＞95%。
该参数还是观察在贮存期内标记物脱碘程度的重要指标。
2.免疫活性：制备的标记物与抗体结合的能力。
3.比放射活性：单位化学量标记物中所含的放射性强度，即每分子被标记物平均所结合放射性原子数目。
四、方法学评价
除常规的灵敏度、精密度、准确性、特异性和稳定性等指标外，还应注意以下指标：
（一）可靠性：又称健全性，是评价被测物与标准品的免疫活性是否相同。
借助标准曲线与样品稀释曲线的平行性分析来判断。
平行性好者可靠。
（二）剂量-反应曲线：通过已知浓度的标准品和相应的反应参数绘制成剂量-反应曲线，待测物定量是通过计算其反应参数在剂量-反应曲线上对应的标准品浓度值而确定。
（三）高剂量钩状效应：标本中被测物浓度超过线性范围上限时，所得结果反而降低或呈阴性的现象。
可以通过选用髙亲和力抗体或对此类标本进行稀释后测定以改善或消除。
第二节放射免疫分析
放射免疫分析（RIA）是以放射性核素作示踪剂的标记免疫分析方法，特别适用于激素、多肽等的超微量分析。
一、基本原理
经典RIA是采用标记抗原和非标记抗原竞争性结合有限量特异性抗体的反应。
二、实验方法及测定
（一）抗原抗体反应：将未标记抗原（标准品和待测样品）、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中，在一定条件（温度、时间及介质pH）下进行竞争抑制反应。
先加待测样品（或标准品）和抗血清，使非标记抗原与抗体达到结合平衡，然后再加入标记抗原竞争与抗体结合。
（二）分离结合与游离标记物：RIA反应平衡后，标记抗原与试剂抗体形成免疫复合物（B）。
由于其含量极少，不能自行沉淀，需加入适当的沉淀剂将其彻底沉淀，然后经离心使其与游离的标记抗原（F）分离。
某些小分子抗原，也可采用吸附法分离B与F。
理想的分离方法应分离彻底、迅速；分离试剂和过程不影响反应平衡，而且效果不受反应介质因素的影响；操作应简单、重复性好以及经济。
方法：
1.第二抗体沉淀法：反应完成后加入二抗形成复合沉淀。
为增强效果可加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG，或是将二抗与某些颗粒固相物连接。
2.聚乙二醇（PEG）沉淀法：能非特异地沉淀抗原抗体复合物等大分子蛋白质，而不沉淀小分子抗原。
当温度髙于30℃时，沉淀物易复溶。
3.PR试剂法先将二抗与PEG按一定比例混合成悬液后进行试验。
此法保留了二者的优点，节省了二者的用量，且分离迅速，简便。
4.活性炭吸附法：活性炭可吸附小分子游离抗原或半抗原，而大分子蛋白（如抗体和免疫复合物）则留在溶液中。
（三）放射性测量及数据处理
分离B、F后，可分别对二者进行测定。
绘制标准曲线（剂量-反应曲线），样品管以其测量或计算的反应参数，通过标准曲线即可查出相应的待检抗原浓度。
第三节免疫放射分析
免疫放射分析（IRMA）是以过量125I标记抗体与待测抗原进行非竞争性免疫结合反应，用固相免疫吸附剂对B或F进行分离，其灵敏度和可测范围均优于RIA，操作程序较RIA简单。
一、基本原理
1.单位点IRMA：利用过量标记抗体与待测抗原进行反应，形成抗原-抗体复合物，反应平衡后，再用固相抗原结合反应液中剩余的未结合标记抗体并将其分离，测定上清液的放射量。
2.双位点IRMA：先用固相抗体与抗原反应结合，然后再用过量的标记抗体与已结合于固相的抗原的另一抗原决定簇结合，形成固相抗体-抗原-标记抗体复合物，洗弃反应液中剩余的标记抗体，测定固相上的放射性。
两种IRMA最后测得的放射性均与样品中待测抗原的含量呈正相关。
第四节放射免疫分析技术的应用
常用于各种激素、微量蛋白质、肿瘤标志物和药物等微量物质的测定。
但具有放射污染和危害，常用放射性核素半衰期短，试剂盒有效期不长，无法自动化分析等诸多不足。
下列有关放射免疫分析的叙述中，错误的是
A.以放射性核素作为标记物
B.是一种定量检测技术
C.主要用于抗原检测
D.形成的免疫复合物中的放射强度与待测抗原含量成正比
E.定量分析时需同时作标准管
『正确答案』D
『答案解析』放射免疫分析中免疫复合物中的放射强度与待测抗原含量呈反比。
在放射免疫分析检测中，B/（B+F）表示（注：B为结合态的标记抗原，F为游离态的标记抗原）
A.结合态的标记抗原与总的标记抗原之比
B.结合态的标记抗原与游离的标记抗原之比
C.总标记抗原与抗原抗体复合物之比
D.结合态的抗原与总抗体之比
E.结合态的抗原与总抗原之比
『正确答案』A
『答案解析』放射免疫分析法（RIA）测定方法分三个步骤：①待测标本中未标记抗原，标记抗原和抗体进行竞争抑制反应。
②将标记抗原和抗体相结合的复合物（B）和未结合的标记抗原（F）的分离。
③对B进行放射性强度的测定。
根据标准曲线查得待测抗原浓度。
由上可知，B/（B+F）意义是结合态
的标记抗原与总的标记抗原之比。
在RIA反应系统中，参与反应的有标记抗原、已知抗体和待测抗原，对这三种成分的要求是
A.只需固定标记抗原量
B.待测抗原要先标记
C.标记抗原和已知抗体的量都是固定量的
D.只需要固定已知抗体的量
E.三者的量均需固定
『正确答案』C
『答案解析』在RIA反应系统中，标记抗原和已知抗体的量都是固定量的，待测抗原和标记抗原竞争
结合已知抗体，待测抗原的量和标记抗原的量成反比。
临床上通常不利用放射免疫分析技术检测的是
A.微量蛋白质
B.激素
C.小分子药物
D.肿瘤标记物
E.免疫球蛋白
『正确答案』E
『答案解析』放射免疫分析技术常用于各种激素、微量蛋白质、肿瘤标志物和药物等微量物质的测定。
临床上放射免疫分析最常用的放射性核素是
A.125I
B.131I
C.3H
D.14C
E.51Gr
『正确答案』A
『答案解析』常用的放射性核素：125I、131I、3H、14C等，使用最广泛的是125I。
用RIA检测某种激素时，结合物中的放射性强度越大，表明
A.该激素在血清中的含量越高
B.该激素在血清中的含量越低
C.游离的标记激素的浓度越高
D.与激素结合的特异性抗体浓度越高
E.结合的标记激素越少
『正确答案』B
『答案解析』在RIA反应系统中，标记抗原和已知抗体的量都是固定量的，待测抗原和标记抗原竞争结合已知抗体，待测抗原的量和标记抗原的量成反比。
所以结合物中的放射性强度越大，该激素在血清中的含量越低。
临床检验技师临床免疫学和免疫检验放射免疫分析讲义
第七章放射免疫分析第一节放射免疫技术一、基本类型及原理（一）放射免疫分析（RIA）以放射性核素标记抗原与未标记抗原竞争结合特异性抗体，测定样品中抗原量的一种分析法。
（二）免疫放射分析（IRMA）用放射性核素标记的过量抗体与待测抗原直接结合，固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析法。
二、常用的放射性核素125I、131I、3H、14C等，使用最广泛的是125I。
三、放射性标记物制备及鉴定（一）原理：以放射性碘原子置换被标记物分子中酪氨酸或酪胺残基以及组胺残基上的氢原子。
蛋白质、肽类等含有上述基团，可用125Ⅰ直接标记，不含上述基团的甾体激素或药物分子，须连接相应基团才能用于放射性碘标记。
（二）标记及类型1.直接标记法：肽类、蛋白质和酶的碘化标记。
常用的方法为：①氯胺 T（ch-T）法；②乳过氧化物酶标记法。
2.间接标记法：也称连接标记法，是最常用的间接碘标记方法。
该法主用于甾体类化合物、环核苷酸、前列腺素等缺乏碘标记基团的小分子化合物的标记。
（三）放射标记物的纯化1.凝胶过滤法：分子筛机制。
2.离子交换层析法：游离125Ⅰ与标记物分子极性差异进行吸附解离。
3.聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）：按分子所带电荷和直径不同在电场作用下分子迁移速率不同。
4.高效液相色谱法。
（四）放射标记的鉴定1.放射化学纯度：单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率，要求＞95%。
该参数还是观察在贮存期内标记物脱碘程度的重要指标。
2.免疫活性：制备的标记物与抗体结合的能力。
3.比放射活性：单位化学量标记物中所含的放射性强度，即每分子被标记物平均所结合放射性原子数目。
四、方法学评价除常规的灵敏度、精密度、准确性、特异性和稳定性等指标外，还应注意以下指标：（一）可靠性：又称健全性，是评价被测物与标准品的免疫活性是否相同。
借助标准曲线与样品稀释曲线的平行性分析来判断。
平行性好者可靠。
（二）剂量-反应曲线：通过已知浓度的标准品和相应的反应参数绘制成剂量-反应曲线，待测物定量是通过计算其反应参数在剂量-反应曲线上对应的标准品浓度值而确定。
临床检验技师临床免疫学和免疫检验概述讲义
第一章概述第一节免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答1.免疫的概念免疫是机体免疫系统识别“自己”与“非己”、排出抗原性异物、维持自身生理平衡和稳定的过程。
其生理过程对机体有益，其病理性应答对身体有害。
2.免疫应答的过程（1）识别阶段：是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。
（2）活化阶段：是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化、增殖、分化的阶段。
（3）效应阶段：是浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子，T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另有少量T细胞和B细胞在增殖分化后，不直接执行效应功能，而作为记忆细胞。
当其再次遇到相同抗原时，迅速活化、增殖、分化为效应细胞，执行高效而持久的特异性免疫效应功能。
3.免疫功能机体免疫自稳功能紊乱会导致A.恶性肿瘤B.反复感染C.自身免疫病D.免疫缺陷病E.免疫耐受『正确答案』C『答案解析』免疫的现代概念是A.机体消除和杀灭自身突变细胞B.机体排除抗原性异物的过程，对机体都是有利的C.机体抵抗病原微生物入侵的防御能力D.机体清除衰老、变异细胞的功能E.机体识别和排斥抗原性异物的功能『正确答案』E『答案解析』免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能；免疫应答是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应，并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
（一）中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所，由骨髓和胸腺组成。
1.骨髓：在出生前后，主要承担造血功能（多能造血干细胞，HSC），是各类免疫细胞以及T细胞的前体细胞的发生场所。
为B细胞分化成熟的场所。
2.胸腺：T细胞分化、发育、成熟的场所，骨髓迁入的淋巴样干细胞（LSC）在胸腺细胞和胸腺基质细胞的相互作用下，最终成为功能性CD4+、CD8+T细胞。
(完整word版)初级检验士考试(临床免疫学和免疫检验)讲义第二十一章临床免疫检验的质量保证
第二十一章临床免疫检验的质量保证第一节概述1.质量保证为一产品或服务满足特定的质量要求提供充分可信性所要求的有计划的和系统的措施。
2.室内质量控制由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，并确定当批的测定结果是否可靠，可否发出检验报告。
3.室间质量评价为客观地比较某一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位机构，采取一定的方法，连续、客观地评价实验室的结果，发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。
4.准确度（accuracy）待测物的测定值与其真值的一致性程度。
准确度不能直接以数值表示，通常以不准确度来间接衡量。
对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不准确度。
5.偏倚（bias）待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。
偏倚又分批内偏倚和批间偏倚，批内偏倚反映的是该批测定的系统误差，如校准不准、非特异显色等。
批间偏倚所反映的问题要更大一些，如试剂或校准物变质所致的误差。
6.精密度（precision）在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。
与准确度一样，精密度同样也是以不精密度来间接表示。
测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（SD）和（或）变异系数（CV）具体表示。
SD或CV越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。
7.重复性条件（repeatability conditions）是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。
8.批（run）在相同条件下所获得的一组测定。
9.均值（mean）一组测定值中所有值的平均值，亦称均数。
均值为计算值，在实际测定数据中可能会出现该数值，也可能没有。
10.标准差（standard deviation，SD或s）为表示一组测定数据的分布情况，即离散度，可用标准差来表示。
《临床免疫学与检验》课件
欢迎来到本课程的PPT课件。在这里，我们将深入探讨免疫系统的不同方面， 包括免疫学检验方法，免疫性疾病的诊断标准以及不同类型的免疫反应。让 我们开始！
免疫系统概述
免疫系统是人体内的一个重要系统，主要用于保护人体免受病原微生物、肿瘤细胞等外来抗原的攻击。本节 课程将介绍免疫系统的不同组成部分以及其作用。
MHC分子与免疫识别
MHC分子是一种高度多态性的分子，是细胞免疫和体液免疫中识别外来抗原的重要手段。在本 节课程中，我们将讨论MHC分子的不同类型以及它们在免疫识别中的作用。
MHC-I分子
主要在细胞免疫中发挥作用，帮助细胞展示其表面上的所有蛋白质。
MHC-II分子
主要在体液免疫中发挥作用，帮助B细胞等免疫细胞识别抗原。
总结
感谢您对免疫学与检验的关注。通过这一课程，您将深入了解免疫系统的不同方面，包括细胞免疫、体液免 疫、免疫学检验等。我们希望这些知识对您的未来研究和工作有所帮助。
创新研究
免疫学研究的未来非常光明。我们不断寻找新的治 疗方法和疫苗，以应对日益严重的全球免疫挑战。
疫苗接种
疫苗接种是预防疾病的最好方法之一。我们应该积 极接种疫苗，以保护自己和自己的家人免受感染和 疾病的侵害。
这种病毒可以导致人体免疫系统不断受到攻击，致 使机体免疫力下降，从而不能有效地对抗其他病原 微生物。
严重联合免疫缺陷症
这种罕见的疾病涉及有关免疫紊乱和缺陷，导致机 体无法抵御常规的感染疾病。
免疫衰弱与异常
机体的免疫功能依赖于多种细胞和分子的联合作用。在本节课程中，我们将讨论一些影响免疫系统功能的因素， 如衰老、疲劳和压力等。 免疫紊乱 免疫紊乱可能导致机体的健康和抵抗力下降，引起自身免疫性疾病，对免疫系统提高警惕。 压力的影响 长期的压力可能导致机体分泌激素、抑郁以及免疫调节不良等现象。
临床检验主管技师 临床免疫学和免疫检验 第一章 概述
第一章概述第一节免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答1.免疫的概念免疫是机体免疫系统识别“自己”与“非己”、排出抗原性异物、维持自身生理平衡和稳定的过程。
其生理过程对机体有益，其病理性应答对身体有害。
2.免疫应答的过程（1）识别阶段：是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。
（2）活化阶段：是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化、增殖、分化的阶段。
（3）效应阶段：是浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子，T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另有少量T细胞和B细胞在增殖分化后，不直接执行效应功能，而作为记忆细胞。
当其再次遇到相同抗原时，迅速活化、增殖、分化为效应细胞，执行高效而持久的特异性免疫效应功能。
3.免疫功能机体免疫自稳功能紊乱会导致A.恶性肿瘤B.反复感染C.自身免疫病D.免疫缺陷病E.免疫耐受『正确答案』C『答案解析』免疫的现代概念是A.机体消除和杀灭自身突变细胞B.机体排除抗原性异物的过程，对机体都是有利的C.机体抵抗病原微生物入侵的防御能力D.机体清除衰老、变异细胞的功能E.机体识别和排斥抗原性异物的功能『正确答案』E『答案解析』免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能；免疫应答是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应，并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
（一）中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所，由骨髓和胸腺组成。
1.骨髓：在出生前后，主要承担造血功能（多能造血干细胞，HSC），是各类免疫细胞以及T细胞的前体细胞的发生场所。
为B细胞分化成熟的场所。
2.胸腺：T细胞分化、发育、成熟的场所，骨髓迁入的淋巴样干细胞（LSC）在胸腺细胞和胸腺基质细胞的相互作用下，最终成为功能性CD4+、CD8+T细胞。
临床免疫学与检验培训课件
临床免疫学与检验培训课件xx年xx月xx日•临床免疫学基础知识•临床检验技术概述•免疫学检验技术及应用目录•临床免疫学与检验案例分析•总结与展望01临床免疫学基础知识免疫器官免疫细胞免疫分子T细胞、B细胞、NK细胞、巨噬细胞等。
抗体、补体、细胞因子等。
03免疫系统的组成与功能02 01胸腺、骨髓、淋巴结、脾脏等。
免疫细胞对外部抗原进行识别并作出反应。
抗原识别免疫细胞活化并分化为效应细胞和记忆细胞。
活化与分化效应细胞发挥免疫效应，清除抗原。
效应功能免疫应答的基本过程免疫学在医学诊断与治疗中的应用通过检测抗体或抗原检测感染。
感染诊断疫苗开发自身免疫性疾病治疗肿瘤免疫治疗基于免疫学原理开发疫苗。
利用免疫抑制剂、抗炎药物等治疗自身免疫性疾病。
利用肿瘤免疫疗法治疗肿瘤。
02临床检验技术概述临床检验的基本概念与分类01临床检验是指通过运用各种检验技术，对患者的血液、体液、分泌物、排泄物、细胞组织等进行检验，以获得客观准确的检验结果，为临床诊断、治疗和预后评估提供依据。
02临床检验技术可根据检验对象和检验目的的不同，分为血液检验、尿液检验、粪便检验、分泌物检验、细胞组织病理学检查等。
03各种检验技术都有其特定的应用范围和适用条件，临床医生应根据患者的病情和诊断需要，选择合适的检验项目和检验技术。
临床检验的流程包括患者准备、标本采集、标本处理、检验操作、结果分析和报告等环节。
在患者准备环节，应告知患者检验前注意事项，如饮食、休息、停药等。
在标本采集环节，应根据检验项目的要求，选择合适的标本类型和采集方法。
在标本处理和检验操作环节，应遵循实验室安全规范和质量控制标准，确保检验结果的准确性和可靠性。
在结果分析和报告环节，应对检验结果进行审核和校对，确保结果的准确性和完整性。
临床检验的流程与规范临床检验的质量控制包括实验室内质量控制和实验室间质量控制。
实验室间质量控制是指在不同实验室之间进行的质控活动，包括参加外部质量评价计划、比对试验等。
临床免疫学和免疫检验 ppt课件
Elispot
Elispot结果判断
方法学评价
Westernblot原理
Westernblot缺点
抗原表位可能被破坏而漏检
放射免疫沉淀试验原理
放射免疫沉淀试验
抗原表位不会破坏
酶联免疫斑点试验(enzyme linked immunospot , ELISPOT)
免疫印迹法(immunoblotting test, IBT)
放射免疫沉淀试验(radioimmunoprecipitation assay, RIPA)
IFA 和ICA
免疫渗滤测定 （IMMUNOFILTRATION ASSAY，IFA） 免疫层析测定 （IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ASSAY，ICA）
免疫金标记技术
免疫金标记技术
免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主 要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处， 在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处 大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或 半定量的快速免疫检测。这一反应也可以通过银颗粒的沉积 被放大，称之为免疫金银染色（immunogold silver staining，IGSS）。
第八代
INSTANTCHEK HIV 1+2
第九~十二代
研制中
ICA技术的发展
1990年 ABBOTT公司 Unipath公司 胶体硒标记ICA CLEARVIEW 立明衣原体 彩色胶乳标记ICA Cardiac Reader TnT 定量 0.1~3 ng/ml 合成TnT质控点
ROCHE
半定量测定
IFA 穿流（FLOW
THROUGH）
临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验—超敏反应性疾病及其免疫检测 复习资料汇编
临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验—超敏反应性疾病及其免疫检测复习资料汇编定义：超敏反应，是指机体对变应原初次应答致敏后，再次接触相同抗原刺激时，所出现的一种以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的异常免疫应答。
分为四型：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型超敏反应。
一、Ⅰ型超敏反应（一）Ⅰ型超敏反应主要由特异性IgE抗体介导产生，其发生速度最快，常在第二次接触相同抗原后数分钟内即出现临床反应，其反应可发生于局部，亦可发生于全身，故又称速发型超敏反应，习惯上又称过敏反应。
（二）主要特征①超敏反应发生快，消退快；②常引起生理功能紊乱，较少发生严重的组织细胞损伤；③由特异性IgE型抗体介导，无补体参与；④具有明显的个体差异和遗传背景。
（三）参与成分1.变应原：①某些药物或化学物质②吸入性变应原③食物变应原④有些酶类物质2.抗体—IgE：含量最低，半衰期最短，分解率最高，对热最不稳定。
主要由黏膜下固有层淋巴组织中的B细胞产生。
亲细胞抗体。
IL-4诱导产生特异性IgE。
3.细胞：①肥大细胞和嗜碱性粒细胞。
②嗜酸性粒细胞。
（四）发生过程（五）常见疾病①全身超敏反应：②药物过敏性休克③血清过敏性休克（六）局部超敏反应：1.呼吸道过敏反应2.消化道过敏反应3.皮肤过敏反应（七）免疫学检测1.皮内试验：皮肤消毒后，用注射器将变应原提取液（如青霉素、花粉、尘螨、动物皮屑、血清、食物等）注入皮内。
注入量一般为0.01～0.02ml，使皮肤形成直径约2～3mm的皮丘。
阳性结果以风团为主。
（1）假阳性的常见原因：①变应原稀释液偏酸或偏碱；②患者有皮肤划痕症；③抗原不纯或被污染；④抗原量注射过多。
（2）假阴性的常见原因：①变应原抗原性丧失或浓度过低；②患者皮肤反应较低；③受试者正使用抗组胺类药或激素类药；④注射部位过深或注射量太少。
2.挑刺试验：将抗原和对照液滴于受试者前臂内侧皮肤上，然后在该处用针尖透过抗原液滴，与皮肤呈45°进针点刺，以不出血为度，1分钟后拭去抗原液，15分钟后观察结果。
临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)讲义第三章免疫原和抗血清的制备
第三章免疫原和抗血清的制备第一节免疫原的制备免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
一、颗粒性抗原的制备细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。
细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。
细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。
颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。
二、可溶性抗原的制备和纯化（一）组织和可溶性抗原的粗提蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。
1组.织匀浆的制备（1）高速组织捣碎机法；（2）研磨法：组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。
2细.胞的破碎（）反复冻融法：℃冷冻，〜7融化。
（2）超声破碎法（3）自溶法（4）酶处理法：胃蛋白酶或胰酶。
（5）表面活性剂处理法：十二烷基硫酸钠。
3免.疫球蛋白片段的制备（）非共价键解离法：改变环境或用变性剂。
（2）共价键解离法：还原法或氧化法解离二硫键。
（3）溴化氰裂解法：溴化氰裂解蛋白质肽链。
（4）酶解法：木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶。
（二）可溶性抗原的提纯和纯化超速离心法：适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原，不适用于大多数中小分子抗原。
选择性沉淀法：（1）核酸去除法：核糖核酸降解法更简便。
（2）盐析法：常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。
（3）有机溶剂沉淀法：常采用乙醇或丙酮。
（）聚合物沉淀法：常用非离子型聚合物，如聚乙二醇（）G凝胶过滤法：根据分子大小进行分离纯化。
离子交换层析法：利用一些带电离子基团的凝胶或纤维素，吸附带有相反电荷的蛋白质抗原。
5亲.和层析法：与生物分子间不同的亲和性进行分离。
如抗原和抗体、酶和酶抑制物、酶蛋白和辅酶、激素和受体等。
电泳法：蛋白质在同一环境中，分子量和电荷不同，在电场中迁移速率不同进行分离。
（三）纯化抗原的鉴定蛋白质含量测定：常用的是紫外光吸收法，该法测定和的吸光度（）值。
最新临床医学检验技士考试大纲(105)临床免疫学和免疫学检验部分汇总
2011年临床医学检验技士考试大纲(105)临床免疫学和免疫学
检验部分
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