分光光度法测定胆固醇含量
实验六蛋黄总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)(精)
实验六蛋黄总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）一、实验目的1、学习分光光度计的原理及操作。
2、学习用分光光度法测定蛋黄中总胆固醇（脂肪）含量及标准曲线的制作。
二、基本原理胆固醇及其酯在硫酸存在下与邻苯二甲醛作用，产生紫红色物质，此物质在550nm由最大吸收值，可用比色法测定。
胆固醇含量在400mg/100ml之内与吸光度呈现良好线性关系。
本法操作简便，灵敏、稳定。
实验相关原理根据物质对光的吸收特征和吸收强度，对物质进行定性和定量的分析方法，称为分光光度法(spectrophotometry)。
该法具有一定的灵敏度和准确度，分析手续较简便快速，仪器设备也不复杂，故应用很广。
吸光度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比，称为朗伯—比尔定律，简称比尔定律，即光的吸收定律。
吸光系数的大小，取决于物质(溶质、溶剂)的本性和光的波长。
1. 物质不同，则吸光系数不同，所以吸光系数可作为物质的特性常数。
在分光光度法中，常用摩尔吸光系数ε来衡量显色反应的灵敏度，ε值越大，灵敏度越高。
2. 溶剂不同，其吸光系数亦不同。
3. 光的波长不同，其吸光系数亦不同。
如将不同波长的单色光依次通过被分析物质，分别测得吸光度，然后绘制吸光度—波长曲线，称为吸收曲线(absorption curve)，吸收曲线上有极大值的部分，称为吸收峰。
吸收峰所对应的波长，称为最大吸收波长，以符号λmax表示，这是物质定性的依据之一。
4.单色光的纯度也影响吸光系数。
单色光越纯，即经单色器分光后的波长范围越窄，其吸光系数越大。
定量方法：1、吸光系数法2、标准曲线法不是任何情况下都能适用的。
特别是在单色光不纯的情况下，测得的吸光度值可以随所用仪器不同而在一个相当大的幅度内变化不定，若用吸光系数换算成浓度，则将产生很大误差。
先配制一系列浓度不同的标准溶液，在测定条件相同情况下，分别测定其吸光度，然后以标准溶液的浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标，绘制A—C关系图，在相同条件下测出样品溶液的吸光度，就可以从标准曲线上查出样品溶液的浓度。
分光度测血脂实验报告
一、实验目的1. 熟悉分光光度计的使用方法。
2. 掌握利用分光光度法测定血脂的原理和操作步骤。
3. 学会分析实验数据，提高实验技能。
二、实验原理血脂是指血液中的脂肪，主要包括胆固醇、甘油三酯等。
分光光度法是一种常用的测定血脂的方法，其原理是基于血脂分子在特定波长下对光的吸收程度与其浓度成正比。
通过测定吸光度，可以计算出样品中血脂的浓度。
三、实验材料1. 仪器：分光光度计、离心机、移液器、容量瓶、比色皿等。
2. 试剂：胆固醇标准溶液、甘油三酯标准溶液、胆固醇测定试剂盒、甘油三酯测定试剂盒、蒸馏水等。
3. 样品：血清或血浆。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）取6个容量瓶，分别加入不同浓度的胆固醇标准溶液，再加入适量甘油三酯标准溶液，用蒸馏水定容至刻度。
（2）以蒸馏水为空白，在特定波长下测定各溶液的吸光度。
（3）以吸光度为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）取一定量的血清或血浆，按照试剂盒说明书进行稀释。
（2）取稀释后的样品，按照标准曲线绘制步骤，测定吸光度。
（3）根据标准曲线，计算出样品中胆固醇和甘油三酯的浓度。
3. 数据处理（1）将实验数据记录在实验报告上。
（2）对实验数据进行统计分析，计算平均值、标准差等指标。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制绘制出的标准曲线线性良好，相关系数R²大于0.99，说明该方法具有较高的准确性和可靠性。
2. 样品测定（1）胆固醇浓度：经测定，样品中胆固醇浓度为X mmol/L。
（2）甘油三酯浓度：经测定，样品中甘油三酯浓度为Y mmol/L。
3. 数据处理根据实验数据，计算胆固醇和甘油三酯的平均值、标准差等指标，结果如下：胆固醇浓度（mmol/L）：平均值 = X，标准差 = A甘油三酯浓度（mmol/L）：平均值 = Y，标准差 = B六、实验讨论1. 实验过程中，注意分光光度计的预热和校准，以保证实验结果的准确性。
2. 在样品测定过程中，应严格控制操作步骤，避免误差的产生。
胆固醇含量检测
法测定鸡蛋中胆固醇含量一、原理当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行皂化和提取，用硫磷铁试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
在样品的冰乙酸提取液中加磷硫铁试剂，胆固醇与试剂反应产生紫红色化合物，颜色的深浅与胆固醇的量成正比，可用分光光度计在波长560nm•处测定。
二、实验仪器及试材1.仪器：分光光度计、水浴锅2.试剂：本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。
试剂纯度均为分析纯。
（1）石油醚（沸点30-60℃）、无水乙醇、冰乙酸。
（2）50%氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（3）25%氯化钠溶液：称取25g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（4）10% 三氯化铁溶液：将10g FeCl3·6 H2O溶于磷酸中，定容至100 mL，储于棕色瓶中，冷藏保存。
（5）磷硫铁试剂：取10% 三氯化铁溶液1.5mL于100mL棕色容量瓶内，加浓硫酸定容至刻度。
（6）胆固醇标准储液：准确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，定容至100mL。
（7）胆固醇标准溶液：临用前将储液用冰乙酸稀释10倍。
三、实验方法与步骤1.样品胆固醇提取准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于25mL具塞比色管中，加入0.5mL50%氢氧化钾溶液和4.5mL无水乙醇，振荡混匀，在80℃恒温水浴中皂化20min。
皂化时每隔5min振摇一次使皂化完全。
皂化完毕，取出比色管，冷却。
加入3mL 25%氯化钠溶液后再加入10mL石油醚，盖紧玻璃塞，振摇1min，静置分层。
取上层石油醚液1mL，置于25mL具塞比色管内，在65℃水浴中让石油醚自然挥发干，加入4mL冰乙酸，轻摇使胆固醇溶解，待测。
2.样品和标准胆固醇含量测定另取两支25mL具塞比色管，一支（空白管）加入4mL冰乙酸，一支（标准管）加入1mL胆固醇标准溶液（0.1mg/mL）和3mL冰乙酸。
包括样品管，各管分别加入2mL磷硫铁试剂，混匀，25℃放置20min后在560nm波长下比色。
MMFSCNG食品中胆固醇的测定方法
MM_FS_CNG_0356食品胆固醇分光光度法MM_FS_CNG_0356食品中胆固醇的测定方法1.适用范围本方法适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。
2.原理概要当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂石油醚；无水乙醇；浓硫酸；冰乙酸：优级纯；磷酸；胆固醇标准物质；胆固醇标准液；胆固醇标准储备液（1mg／mL）：精确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，并定容至100mL。
此液至少在2个月内保持稳定；胆固醇标准常备液（100μg／mL）：吸取胆固醇标准储备液10mL，用冰乙酸定容至100mL。
此液用时临时配制；铁矾显色剂；铁矾储备液：溶解4.463g硫酸铁铵[ FeNH4（SO4）2·H2O]于100mL85％磷酸中，贮于干燥器内，此液在室温中稳定；铁矾显色液：吸取铁矾储备液10mL，用浓硫酸定容至100mL。
贮于干燥器内，以防吸水；50％氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL；5％氯化钠溶液：称取5g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL；钢瓶氮气：纯度99.99％。
3.2.仪器实验室常用设备；721型分光光度计；电热恒温水浴；电动振荡器；具玻塞试管：体积10mL、25mL。
4.过程简述4.1.胆固醇标准线吸取胆固醇标准常备液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0mL分别置于10mL试管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL。
沿管壁加入2mL铁矾显色液，混匀，在15～90min内，在560～575nm波长下比色。
以胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。
4.2.样品测定4.2.1.食品脂肪的提取与测定根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。
并计算出每100g食品中的脂肪含量。
4.2.2.食品胆固醇的测定将提取的油脂3～4滴（约含胆固醇300～500 μg），置于25mL试管内，准确记录其重量。
血清总胆固醇测定操作规程
血清总胆固醇测定操作规程《血清总胆固醇测定操作规程》一、目的本规程旨在规范血清总胆固醇测定的操作步骤，确保测定结果准确可靠。
二、适用范围本规程适用于各医疗机构进行血清总胆固醇测定的操作。
三、仪器与试剂1. 仪器：分光光度计2. 试剂：血清总胆固醇测定试剂盒四、操作步骤1. 准备工作a. 开机预热分光光度计，确保仪器处于工作状态。
b. 取出血清总胆固醇测定试剂盒，检查试剂有效期和存储条件。
c. 准备标准品和样本待测血清。
2. 操作流程a. 取出试剂盒中的标准品，按照说明书稀释成不同浓度。
b. 加标准品和待测血清分别加入试剂管中，混匀后置于恒温水浴中反应一定时间。
c. 反应结束后，使用分光光度计在特定波长下测定吸光值。
3. 结果计算a. 使用标准品的吸光值绘制标准曲线。
b. 读取待测血清的吸光值，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。
五、结果判定根据患者血清总胆固醇的测定值，参照相关标准进行结果判定和医疗建议。
六、注意事项1. 操作人员应熟练掌握仪器和试剂使用方法，严格按照操作规程进行操作。
2. 试剂及仪器的质量控制应在每次实验前进行验证。
3. 操作过程中应注意个人防护，避免污染试剂和样本。
七、记录与保存1. 对每次测定的操作步骤、结果和质控记录进行详细记录，确保测定结果可追溯。
2. 相关记录资料应按规定保存，以备查。
八、附则对于特殊情况的处理和异常结果的分析，应根据实际情况进行相应操作，并记录详细的处理过程。
以上即为《血清总胆固醇测定操作规程》，希望操作人员严格按照规程执行，确保测定结果的准确性和可靠性。
胆固醇提取实验报告
1. 理解和掌握胆固醇提取的基本原理和方法。
2. 学习有机溶剂提取法在生物样品中的应用。
3. 提高实验操作技能，掌握实验仪器的使用。
二、实验原理胆固醇是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动物细胞膜中，对维持细胞膜的稳定性和流动性具有重要作用。
本实验采用有机溶剂提取法，利用胆固醇在有机溶剂中溶解度较大的特性，从生物样品中提取胆固醇。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 动物组织（如鸡肝）- 95%乙醇- 氯仿- 无水硫酸钠- 硅胶- 1.5ml离心管- 电子天平- 离心机- 烧杯- 烘箱- 滤纸2. 实验仪器：- 紫外-可见分光光度计- 磁力搅拌器1. 称取适量的动物组织（如鸡肝），用剪刀剪成小块，放入烧杯中。
2. 向烧杯中加入适量的95%乙醇，用磁力搅拌器搅拌至组织充分溶解。
3. 将溶液转移至离心管中，加入适量的无水硫酸钠，充分振荡，使胆固醇充分溶解于乙醇中。
4. 将离心管置于离心机中，以3000r/min离心10分钟，取上清液。
5. 将上清液转移至另一个离心管中，加入适量的氯仿，充分振荡，使胆固醇从乙醇相转移到氯仿相中。
6. 将离心管置于离心机中，以3000r/min离心10分钟，取上清液。
7. 将上清液转移至烘箱中，在50℃下烘干至近干。
8. 向烘干后的残渣中加入适量的氯仿，溶解胆固醇，转移至比色皿中。
9. 用紫外-可见分光光度计在560nm波长下测定吸光度。
五、实验结果与分析1. 根据实验原理，胆固醇在氯仿中的吸光度与胆固醇浓度成正比。
2. 通过标准曲线（以已知浓度的胆固醇溶液为标准）确定实验样品中胆固醇的浓度。
六、实验讨论1. 实验过程中，应注意控制提取条件，如提取时间、温度等，以确保提取效率。
2. 实验过程中，应避免样品污染，如使用干净的实验器材、避免交叉污染等。
3. 实验结果受多种因素影响，如样品的纯度、提取方法的优化等。
七、实验总结本实验成功提取了动物组织中的胆固醇，并利用紫外-可见分光光度法测定了胆固醇的浓度。
胆固醇鉴定实验报告
一、实验目的1. 掌握胆固醇的鉴定原理和方法。
2. 学会使用化学试剂进行胆固醇的鉴定实验。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理胆固醇是一种属于类固醇的化合物，具有环戊烷并全氢化菲的基本结构。
在胆固醇鉴定实验中，通过化学试剂与胆固醇发生特定反应，生成具有特征颜色的产物，从而实现对胆固醇的鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 胆固醇标准品- 胆固醇试样- 硝化硫酸- 硫酸- 无水乙醇- 水浴锅- 试管- 移液管- 移液器2. 实验仪器：- 紫外-可见分光光度计- 电子天平- 恒温水浴锅- 移液管- 移液器四、实验步骤1. 准备工作- 称取胆固醇标准品和胆固醇试样，用无水乙醇溶解，配制成一定浓度的溶液。
- 准备硝化硫酸和硫酸溶液。
2. 胆固醇标准曲线的绘制- 取6个试管，分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL胆固醇标准溶液。
- 各试管中加入2 mL无水乙醇和1 mL硝化硫酸，混匀。
- 在60℃水浴中加热10分钟。
- 冷却后，用硫酸溶液定容至10 mL。
- 在510 nm波长处测定吸光度。
3. 胆固醇试样测定- 取6个试管，分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL胆固醇试样溶液。
- 各试管中加入2 mL无水乙醇和1 mL硝化硫酸，混匀。
- 在60℃水浴中加热10分钟。
- 冷却后，用硫酸溶液定容至10 mL。
- 在510 nm波长处测定吸光度。
4. 数据处理- 以胆固醇标准溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
- 根据胆固醇试样溶液的吸光度，从标准曲线上查出相应的胆固醇浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制- 标准曲线的线性方程为：y = 0.0624x + 0.0155，相关系数R² = 0.998。
2. 胆固醇试样测定- 胆固醇试样溶液的吸光度为0.456，根据标准曲线查得胆固醇浓度为0.4 mg/mL。
六、实验结论本实验采用化学试剂法对胆固醇进行了鉴定，实验结果表明，胆固醇试样中含有胆固醇，其浓度为0.4 mg/mL。
04血清总胆固醇浓度测定
混匀后，37℃水浴5 min，立即用分光光度计比色，于 505 nm波长处以空白管调零，读出各管吸光度
测定管吸光度 ×胆固醇标准液浓度 血清总胆固醇＝ 标准管吸光度 （200 mg/dl）
【参考范围】 正常人血清总胆固醇：3.1-5.95 mmol/L(120-230 mg/dl)
721分光光度计的使用
[原理]
分光光度计工作原理：物质对不同波长光的吸收具有选择 性，不同的物质都有各自的吸收光带。当光色散后的光谱 通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。 在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度 有一定的比例关系，即符合朗伯-比耳定律 (Lambert-Beer lg(Io/I)=abc
式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度， A为消光值(吸光度)，a为吸收系数，b为溶液的光径长度， c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收 系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化 的。
[步骤] 1、取干燥试管3支，编号，按下表操作： 血清 标准液 蒸馏水 R试剂 空白管 － － 20µl 2ml 标准管 － 20µl － 2ml 测定管 20µl － － 2ml
1.打开电源开关，预热仪器20 min。 2.选定所需波长，灵敏度档调至1档。 3.打开暗盒盖，调0(用0透光率旋钮将指针调节到透光率0处)。 4.关上暗盒盖，调100%(用100%透光率旋钮将指针调节到透光 率100%处)。重复3-4步骤数次，直至指针稳定。 5.将装有空白液、标准液、待测液的比色皿依次放入比色架中， 盖上暗盒盖，此时光路开启，使空白液位于光路部分，用 100%透光率调节旋钮使电表指针指在透光率100%位置(即 A=0.00)。 6.将标准液、待测液分别推入光路，读取吸光度值，读罢将暗 盒盖打开。 注意事项：在使用过程中应注意保护比色皿的透光面，避免其 受损或产生划痕，影响透光率。
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实验八、分光光度法测定胆固醇含量
一、实验目的
1、学习721分光光度计的使用
2、掌握分光光度法测定胆固醇含量的原理
3、学习并掌握利用分光光度法制作胆固醇含量标准曲线的方法
二、实验原理
当一束平行的单色光照射到有色溶液时，光的一部分被溶液吸收，一部分透过溶液。
假设入射光强度为I 0，透过光强度为It ，溶液的浓度为C ，液层宽度为b ，则
b C K I I A t
⨯⨯==0
log
（朗伯－比尔定律的数学表达式） 式中：A 为吸光度，没有单位
K 随C 、b 的单位而不同
C ：g/L, b : cm , k: L/g·cm ,为吸光系数；
C ：mol/L, b : cm , k: L/mol·cm ,为摩尔吸
光系数
以上式子表明：当一束单色光通过有色溶液时，其吸光度与溶液浓度及宽度成正比。
当k 、b 都一定时，A 与C 成正比，因此若已知浓度溶液（即试样溶液）的吸光值As ，在相同条件下测出未知浓度溶液的吸光值Ax ，则试样溶液的浓度Cx 可通过下式求出：
s s
x x x s x s C A A C C C A A ⨯=⇒=（标准对照法，适用于非经常性的分析工作） 若是经常性的批量测定，则应用标准曲线法，即配制一系列已知浓度的标准溶液，在选定波长处，用同样的比色皿分别测其吸光值。
作出“吸光值/含量”的标准曲线，在相同条件下测定未知浓度试样的吸光值，直接可从标准曲线上查出相应的浓度。
三、实验药品及仪器
药品: FeCl 3·6H 2O ，磷酸(A.R. 即“分析醇”) ， 浓硫酸（A.R.）， 胆固醇（C.P.），
无水乙醇。
试剂：10％三氯化铁溶液：10g FeCl 3·6H 2O 溶于磷酸，定容至100ml ，存棕色瓶中，冷藏
磷硫铁试剂（P-S-Fe 试剂）：取1.5ml 10％三氯化铁溶液于100ml 棕色容量瓶加
T ＝－
I 0 I t
（透光度或透光率）
浓硫酸至刻度。
胆固醇标准溶液（0.08mg/ml）：称取80mg胆固醇溶于无水乙醇定容至100ml，配制成10×的标准贮存液。
10×贮存液用无水乙醇稀释10倍，即为胆固醇标准溶液。
仪器：721分光光度计，比色皿，试管，移液管
四、仪器使用（721分光光度计）
1.接通仪器电源开关，打开比色皿暗箱盖，选择所需的单色光波长,预热20分钟；
2.将盛溶液的比色皿装入暗盒中（一般装空白溶液的比色皿放在第一格，装待测溶液的比色皿放在后面）
3.打开比色皿暗箱盖（光门自动关闭），调节“0”电位器，使电表指针指“0”（透光率为0），然后将盖子盖上（光电管受光），这时空白溶液的比色皿须正对于光路上，调节“100％”电位器，使电表指针指在“100”（透光率100%），若调不到100，可提高灵敏度。
4.连续几次调“0”和“100”后，就可以进行测定。
测定时，将比色皿拉杆轻轻拉出一格，使第二个比色皿内的待测溶液进入光路，此时指针所指的读数就是该溶液的吸光度。
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。
5．实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净。
注意事项：
1.读数时，视线要正对着指针，表上两排数据不要读错，小数点也不要读错！
2.放大器灵敏度有五档，“1”最低。
其选择原则是保证能使空白档良好调到“100”情况下，尽可能采用低灵敏度，这样仪器将有更高的稳定性。
所以使用时一般置“1”，灵敏
度不够时再逐渐升高，但改变灵敏度后须重新调“0”和“100”。
3.拿比色皿时用手捏住毛玻璃两面，切不可触摸光面。
每次使用完毕，应洗净，滤纸吸干，不可用碱液和强氧化剂洗比色皿，避免腐蚀玻璃或使皿粘结处脱胶。
4.比色皿放入比色皿架前，须用擦镜纸吸干外壁的水珠。
五、实验内容
1、配制10％三氯化铁溶液、磷硫铁试剂、胆固醇标准溶液
2、打开721分光光度计预热20分钟
3、取6根试管，编号1-6，各管分别加入0.08mg/ml胆固醇标准液0、0.
4、0.8、1.2、1.6、
2.0ml，以无水乙醇补足至2.0ml，然后1-6管均各加入2.0ml磷硫铁试剂，摇匀。
10分
钟后分别转移到0.5cm光径的比色皿内，用721分光光度计在560nm波长的单色光下，先用1号管的空白对照调“0”和“100”，然后同等条件下分别测定2-6管的吸光值A，记录数值。
4、算出各管胆固醇的实际浓度（单位：mg/ml）,然后以胆固醇浓度为横坐标，相应的吸光
值为纵坐标，作标准曲线。
备注:各管胆固醇实际浓度C的计算公式
C实际=胆固醇标准液原浓度×移取的胆固醇标液体积V÷各管总体积
=0.08 ×V（胆固醇体积）÷4 (单位为:mg/ml )
六、实验数据记录
用坐标纸画出标准曲线
（1）胆固醇的生理功能：
参与血浆蛋白的组成；细胞膜的结构成分；胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等的前体。
（2）临床意义：血清中总胆固醇的浓度可作为脂类代谢的指标，但脂类代谢又常与糖类及激素的代谢密切相关，故在其他物质代谢异常时亦可影响血清总胆固醇的浓度。
胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物，主要来自体内合成，一部分直接从食物中摄取。
胆固醇在体内不仅参与血浆脂蛋白的合成，而且可转变为胆汁酸盐、维生素D3及某些类固醇激素(性激素、肾上皮质激素等)。
血液中的胆固醇包括游离胆固醇及其酯两种，二者总称“总胆固醇”，其中胆固醇酯占70～75%。
糖尿病昏迷患者几乎都有血清胆固醇浓度的增加。
胆固醇增加还见于动脉粥样硬化、肾病综合症，总胆管阻塞及粘液性水肿。
粘液性水肿胆固醇增加的主要原因是甲状腺机能减退而垂体前叶有继发性活动过度所致。
其它如肥大性骨关节炎、老年性白内障、牛皮癣等，血清胆固醇浓度间或也有增加。
在恶性贫血、溶血性贫血以及甲状腺机能亢进时，血清胆固醇含量降低。
其它如严重肝病、感染、营养不良等情况，胆固醇总量常见降低。
近年来大量文献报导表明，血胆固醇含量过高与动脉粥样硬化的发病机制有关，更引起了人们的注意。
增高常见于：甲状腺功能减退、动脉硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病及高脂血症等；糖尿病患者，特别是并发糖尿病昏迷时几乎都有总胆固醇升高；慢性肾炎肾病期、肾病综合征、类脂性肾病等；胆总管阻塞(如结石、肿瘤)时，总胆固醇增高且伴有黄疸，但胆固醇酯与总胆固醇的比值仍正常；长期高脂饮食、精神紧张或妊娠期，总胆固醇也可升高。
降低临床可见于：严重的肝脏疾病患者，如急性肝坏死或肝硬化时，血清总胆固醇降低，胆
固醇酯与总胆固醇比值也降低；严重的贫血病人，如再生障碍性贫血、溶血性贫血、缺铁性贫血等，因骨髓及红细胞合成胆固醇的功能受到影响，血清总胆固醇降低；甲状腺功能亢进或严重营养不良时，总胆固醇降低。
（3）参考值：成人胆固醇 2.86-5.98mmol/L (110-230mg/d1)
儿童胆固醇 3.12-5.2mmol/L (120-200mg/d1)
722型分光光度计的使用
（1）预热仪器将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。
（为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。
）（2）选定波长根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。
（3）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此时试样室是打开的）。
（4）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
（5）固定灵敏度档在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。
但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。
选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。
（6）吸光度的测定将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显示为“.000”。
将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。
读数后，打开试样室盖，切断光路。
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。
（7）浓度的测定选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
（8）关机实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。