MMFSCNG食品中胆固醇的测定方法
食品中胆固醇含量测定方法的研究
食品中胆固醇含量测定方法的研究胆固醇是一种存在于人体细胞中，同时也存在于很多食物中的脂类，它在维持人体健康方面起着重要作用。
然而，高胆固醇摄入可能会导致心血管疾病的发生。
因此，了解食物中胆固醇含量的测定方法具有重要意义。
1. 传统测定方法传统的食品胆固醇含量测定方法是使用气相色谱法，该方法要求将样品中的胆固醇提取出来，并通过气相色谱仪分离和定量分析。
尽管该方法准确可靠，但其操作繁琐，耗时且昂贵。
因此，寻找更简单便捷的方法变得迫切。
2. 光谱测定方法近年来，一些研究者开始探索使用光谱技术测定食品中胆固醇含量。
例如，红外光谱和紫外-可见光谱可以准确地测定食品中的胆固醇含量。
这些光谱技术不需要样品前处理，操作简便，且可快速获得结果。
然而，这些光谱方法的准确性和可靠性仍需进一步验证。
3. 生物传感器测定方法生物传感器作为一种新兴的测定方法，被广泛应用于食品中营养成分的测定。
胆固醇传感器通过利用特定酶或抗体对胆固醇的选择性反应，来测定食品样品中胆固醇的含量。
此类方法具有操作简单、快速响应和高灵敏度等优点，但受到样品矩阵干扰的影响。
因此，相关研究需要进一步优化和完善。
4. 新兴技术的应用为了更好地测定食品中胆固醇含量，一些新兴技术也开始应用于相关研究中。
例如，质谱法能够快速准确地测定食品样品中的胆固醇含量，并能区别其同位素。
此外，核磁共振技术也可以被用来测定食品胆固醇含量，该方法无需样品前处理，且信息量丰富。
然而，这些新兴技术的耗材成本较高，仍需进一步的研究和开发。
总结起来，食品中胆固醇含量的测定方法不断发展和创新。
传统的气相色谱法虽然准确可靠，但操作繁琐。
一些新兴技术如光谱测定方法、生物传感器测定方法以及质谱法和核磁共振技术等也带来了便捷性和高灵敏度。
然而，这些方法仍需进一步验证和完善，以满足实际应用的需求。
随着科学技术的不断进步，相信未来一定会有更简单、快速和准确的方法用于测定食品中胆固醇含量，从而更好地保障人们身体健康。
食品中胆固醇的测定方法研究
食品中胆固醇的测定方法研究胆固醇是一种脂类物质，存在于动物源性食品中，如肉类、蛋类和奶制品中。
大量摄入胆固醇会增加心血管疾病的风险，因此对食品中胆固醇含量的准确测定具有重要意义。
本文将探讨当前用于测定食品中胆固醇的常见方法。
一、霉菌酶法霉菌酶法是目前广泛应用于胆固醇测定的方法之一。
该方法基于霉菌酶对胆固醇的选择性催化作用。
首先，将食品样品中的脂质提取出来，然后通过添加霉菌酶，使胆固醇转化为胆固醇酯。
接下来，通过酶反应或高效液相色谱等分析技术，测定出胆固醇的含量。
这种方法具有操作简单、结果可靠的优点，但也存在一些局限性。
由于霉菌酶只对胆固醇具有选择性催化作用，其他脂类物质可能会对测定结果产生干扰。
此外，该方法对样品的处理时间较长，且需要一些特殊试剂，增加了实验的复杂度。
二、氧化法氧化法是另一种常用的胆固醇测定方法。
这种方法利用氧化剂将胆固醇氧化为胆固酮，然后通过测定反应后的产物来确定胆固醇的含量。
目前常用的氧化剂包括酶、过氧化氢和碳氧化锌等。
氧化法具有测定速度快、操作简单的特点。
它适用于各种食品样品的胆固醇测定，且对其他脂类物质的干扰较小。
然而，氧化法可能会引起一些胆固醇的降解，从而影响测定结果的准确性。
此外，由于氧化剂的使用，需要一些特殊试剂和仪器设备，增加了实验的成本。
三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种基于分子之间相互作用的测定方法。
该方法将胆固醇和其他脂类物质分离，然后通过检测分离出来的胆固醇来确定其含量。
高效液相色谱法可使用不同的检测器，如紫外检测器、荧光检测器和质谱检测器等。
高效液相色谱法具有分离效果好、测定结果准确的优点。
它可以对不同样品中的胆固醇进行定量分析，且对其他脂类物质的干扰较小。
然而，该方法的操作较为复杂，需要较长时间进行样品的处理和分析。
此外，高效液相色谱法需要一些昂贵的仪器设备和试剂，增加了实验的成本。
综上所述，目前主要有霉菌酶法、氧化法和高效液相色谱法等用于食品中胆固醇测定的方法。
食品中胆固醇含量测定方法的研究与比较_丁卓平
由于深加工食品中模板含量少，需要利用高效的或
ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｅｓ ａｖａｉｌａｂｌｅ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ
特殊的 Ｄ Ｎ Ａ 提取方法，以提取到其中微量的 Ｄ Ｎ Ａ 。针
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １９９９， （９）： ３８０－３８８．
对不同的深加工食品，需要设计不同的模板提取方法。 ［４］ Ｇｅｏｒｇ Ａ Ｓ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ Ｆｏｒ ｍｅｔｈｏｄｓ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｍｏｄｉ－
酸性溶液和弱碱性水溶液等。经过多次有机溶剂提取， ［１］ Ｄ Ｎ Ａ 大量损失；并且在酸碱和加热等提取条件下，使
Ｄ Ｎ Ａ 断裂成小片段。对于经过提纯的食品或食品原料， ［２］ 如大豆精炼油、大豆异黄酮、大豆卵磷脂、大豆蛋白
等，模板 Ｄ Ｎ Ａ 有二个显著特点：其一是含量少，其二 ［３］ 是片段小。
Ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｄｕｃｔ ａｎｄ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｅｔｈｏｄ
ＤＩＮＧ Ｚｈｕｏ－ｐｕａ，ＨＥ Ｙｕ，ＺＨＡＯ Ｄｏｎｇ－ｙａｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，ＳＦＵ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９０， Ｃｈｉｎａ）
130 2004, Vol. 25, No. 1
食品科学
※分析检验
３ 讨 论
样品中十几个拷贝的 Ｄ Ｎ Ａ 模板；用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法检测 Ｎ Ｏ Ｓ ，
大豆异黄酮的提取，主要根据被提取物的性质及伴 存杂质的情况来选择合适的提取用溶剂。对大豆异黄酮 的甙类成分，一般用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、 水或某些极性较大的混合溶剂，甙元用极性较小的溶 剂，如乙醚、氯仿、乙酸乙酯等来提取。在综合提取
胆固醇含量检测
法测定鸡蛋中胆固醇含量一、原理当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行皂化和提取，用硫磷铁试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
在样品的冰乙酸提取液中加磷硫铁试剂，胆固醇与试剂反应产生紫红色化合物，颜色的深浅与胆固醇的量成正比，可用分光光度计在波长560nm•处测定。
二、实验仪器及试材1.仪器：分光光度计、水浴锅2.试剂：本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。
试剂纯度均为分析纯。
（1）石油醚（沸点30-60℃）、无水乙醇、冰乙酸。
（2）50%氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（3）25%氯化钠溶液：称取25g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。
（4）10% 三氯化铁溶液：将10g FeCl3·6 H2O溶于磷酸中，定容至100 mL，储于棕色瓶中，冷藏保存。
（5）磷硫铁试剂：取10% 三氯化铁溶液1.5mL于100mL棕色容量瓶内，加浓硫酸定容至刻度。
（6）胆固醇标准储液：准确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，定容至100mL。
（7）胆固醇标准溶液：临用前将储液用冰乙酸稀释10倍。
三、实验方法与步骤1.样品胆固醇提取准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于25mL具塞比色管中，加入0.5mL50%氢氧化钾溶液和4.5mL无水乙醇，振荡混匀，在80℃恒温水浴中皂化20min。
皂化时每隔5min振摇一次使皂化完全。
皂化完毕，取出比色管，冷却。
加入3mL 25%氯化钠溶液后再加入10mL石油醚，盖紧玻璃塞，振摇1min，静置分层。
取上层石油醚液1mL，置于25mL具塞比色管内，在65℃水浴中让石油醚自然挥发干，加入4mL冰乙酸，轻摇使胆固醇溶解，待测。
2.样品和标准胆固醇含量测定另取两支25mL具塞比色管，一支（空白管）加入4mL冰乙酸，一支（标准管）加入1mL胆固醇标准溶液（0.1mg/mL）和3mL冰乙酸。
包括样品管，各管分别加入2mL磷硫铁试剂，混匀，25℃放置20min后在560nm波长下比色。
食品中胆固醇的测定
食品中胆固醇的测定食物中胆固醇的测定方法主要有气相色谱法和比色法。
色谱法必须具备气相色谱仪，此仪器价格昂贵，故在国内不易普及，因此选用经济、简便、实用的比色法进行食物中胆固醇的测定。
比色法1.原理固醇类化合物与酸试剂作用，可脱水，发生聚合反应并产生强的颜色反应。
2.适用范围此方法适用于动物性食物中胆固醇的测定。
3.仪器（1）实验室常用设备（2）分光光度计（3）电热恒温水浴4.试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，均为蒸馏水。
（1）石油醚（2）无水乙醇（3）浓硫酸（4）冰乙酸(优级纯）（5）磷酸（6）胆固醇标准（美国Sigma公司）标准储备液：准确称取胆固醇100mg，（胆固醇标准开启后放在干燥器内）溶于冰乙酸中，并定溶至100ml。
其浓度为1g/L。
可保存2个月。
标准工作液：取标准储备液10ml，用冰乙酸定溶至100ml。
其浓度为0.1g/L。
此液用时临时配制。
（7）铁矾显色液：储备液：溶解4.463克硫酸铁铵〔FeNH4（SO4）2·12H2O〕于100ml 85%磷酸中贮于干燥器内，此溶液在室温中稳定。
* 铁矾储备液须在实验前两周配制，因硫酸铁铵不易溶解，每天要进行短时间的振摇待溶质完全溶于磷酸后再定溶到体积。
工作液：吸取储备液10ml用浓硫酸稀释到100ml。
贮于干燥器内。
（8）氢氧化钾50%溶液：溶解50g氢氧化钾于水中，定溶至100ml。
（9）氯化钠5%溶液：溶解5克氯化钠于水中，定溶至100ml。
（10）纯氮（99.99%）5.操作步骤5.1样品脂肪的提取与测定：根据食物种类分别用索氏提取法、研磨法和罗高氏法提取脂肪，并计算出每100克食物中脂肪含量。
5.2样品胆固醇的测定：准确称取提取的油脂3-4滴（约含胆固醇300-500μg）取样量可按样品中胆固醇的浓度增减。
置于25ml试管内，加入4ml无水乙醇，0.5ml50%氢氧化钾，在65℃恒温水浴中皂化1小时。
食品安全地方标准植物油中胆固醇的测定气相色谱-质谱法
表 2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差%
相对离子丰度 K
K＞50
20＜K≤50
10＜K≤20
K≤10
允许最大偏差
±20
±25
±30
±50
6.3.3 定量测定
在仪器最佳工作条件下，对胆固醇基质标准工作溶液（4.11）进行色谱-质谱分析，以峰面积为纵 坐标，基质标准工作溶液浓度为横坐标绘制，用标准工作曲线对样品进行定量，基质标准工作溶液和样 液中胆固醇的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，胆固醇的参考保留时间 为22.48min，胆固醇标准溶液的总离子流图和质谱图参见附录A中的图A.1、图A.2。
定量离子与定性离子的相对丰度比见表1dbs220062012定量离子与定性离子的相对丰度比项目定量离子定性离子定性离子特征碎片离子mz301368231相对丰度k1004756732定性测定在相同的实验条件下进行样品测定时如果样品中待测物质的色谱峰保留时间与标准品色谱峰保留时间相差在25以内并且在扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现且样品谱图中定性离子的相对丰度与浓度接近的基质标准校准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较偏差不超过表2规定的范围则可判定为样品中存在该种待测物
6.1.3 浓缩
将上述提取液经旋转蒸发仪于45℃条件下蒸发至近干，用正己烷定容至5 mL,待GC-MS测定。
6.2 阴性样品提取液的制备
取不含胆固醇的阴性植物油样品，按7.1步骤制备阴性样品提取液，用于配制胆固醇基质标准工作 溶液。
6.3 测定条件
6.3.1 气相色谱-质谱参考条件
a) 色谱柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）毛细管色谱柱或相当者； b) 色谱柱温度程序：初始温度 220℃，保持 1min，以 30℃/min 的速率，升温至 280℃，保持 9min； c) 载气：高纯氦气，纯度≥99.999%； d) 载气流速： 1.0 mL/min； e) 进样口温度：260℃； f) 进样量：1μL； g) 进样方式：不分流进样； h) 电子轰击源：70 eV； i) 离子源温度：230℃；
气相色谱-质谱法检测食品中胆固醇含量的研究
气相色谱-质谱法检测食品中胆固醇含量的研究董晓尉【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2016(000)021【总页数】1页(P69-69)【作者】董晓尉【作者单位】金华市食品药品检验检测研究院【正文语种】中文胆固醇作为人体中维持个人机体正常生理功能所必须的重要物质，而人体内所需的胆固醇含量约为140 g，若人体每天摄入胆固醇的量过高则会形成高脂血症，从而引起动脉粥样硬化，进而诱发冠心病、高血压等一系列心脑血管疾病，预防动脉粥样硬化及心脑血管疾病的重要措施是适度控制外源性胆固醇摄入。
气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）具有色谱分离效率高，定性、定量准确及质谱的灵敏度高、进样量少、分析速度快等特点，适用于易挥发或易衍生化合物的检测和分析。
由于色谱的高分离能力和质谱的鉴别特性，对复杂的混合物样品进行分离、定性和定量分析一次完成，是一种完美的现代检测分析方法。
胆固醇的介绍胆固醇是一种环戊烷多氢菲的衍生物，其又称为胆甾醇。
化学式为C27H46O，是存在动物组织中的一种白色蜡状物质。
胆固醇不溶于水，易溶于氯仿、乙醚等溶剂，其溶解性与脂肪类似。
胆固醇是动物不可缺少的重要物质，不仅参与形成组织细胞的细胞膜，而且是合成维生素D，胆汁酸以及甾体激素的主要原料。
胆固醇同时也是合成几种重要荷尔蒙及胆酸的材料。
高胆固醇的危害人体每天都需要摄入大量的各类食品，如果长期食用胆固醇含量极高的食品会使人体血液中胆固醇的含量升高。
人体每天摄入胆固醇的正常值在0～5.2mmol/L，如果超过这个水平就表现为高胆固醇，而高胆固醇会诱发高血压、心脑血管疾病、肾衰竭疾病、心脏病和牙周病等疾病的发生。
基本原理气相色谱是利用被测物质各组分在不同两相间的微小化学性质差异对物质进行分离的一种方法，这些物质在两相作相对运动时进行反复多次的分配，使不同组分由于原来只有微小的性质差异产生很大的效果而得到分离。
实际为通过样品组分沸点之间的差异先后进柱，然后在气体流动相和固定相之间分配系数的差异进一步分离。
MMFSCNG食品中胆固醇的测定方法
MM_FS_CNG_0356食品胆固醇分光光度法MM_FS_CNG_0356食品中胆固醇的测定方法1.适用范围本方法适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。
2.原理概要当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂石油醚；无水乙醇；浓硫酸；冰乙酸：优级纯；磷酸；胆固醇标准物质；胆固醇标准液；胆固醇标准储备液（1mg／mL）：精确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，并定容至100mL。
此液至少在2个月内保持稳定；胆固醇标准常备液（100μg／mL）：吸取胆固醇标准储备液10mL，用冰乙酸定容至100mL。
此液用时临时配制；铁矾显色剂；铁矾储备液：溶解4.463g硫酸铁铵[ FeNH4（SO4）2·H2O]于100mL85％磷酸中，贮于干燥器内，此液在室温中稳定；铁矾显色液：吸取铁矾储备液10mL，用浓硫酸定容至100mL。
贮于干燥器内，以防吸水；50％氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL；5％氯化钠溶液：称取5g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL；钢瓶氮气：纯度99.99％。
3.2.仪器实验室常用设备；721型分光光度计；电热恒温水浴；电动振荡器；具玻塞试管：体积10mL、25mL。
4.过程简述4.1.胆固醇标准线吸取胆固醇标准常备液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0mL分别置于10mL试管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL。
沿管壁加入2mL铁矾显色液，混匀，在15～90min内，在560～575nm波长下比色。
以胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。
4.2.样品测定4.2.1.食品脂肪的提取与测定根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。
并计算出每100g食品中的脂肪含量。
4.2.2.食品胆固醇的测定将提取的油脂3～4滴（约含胆固醇300～500 μg），置于25mL试管内，准确记录其重量。
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MM_FS_CNG_0356食品 胆固醇 分光光度法
MM_FS_CNG_0356
食品中胆固醇的测定方法
1.适用范围
本方法适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。
2.原理概要
当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。
因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。
3.主要试剂和仪器
.主要试剂
石油醚；
无水乙醇；
浓硫酸；
冰乙酸：优级纯；
磷酸；
胆固醇标准物质；
胆固醇标准液；
胆固醇标准储备液（1mg ／mL ）：精确称取胆固醇100mg ，溶于冰乙酸中，并定容至100mL 。
此液至少在2个月内保持稳定；
胆固醇标准常备液（100μg ／mL ）：吸取胆固醇标准储备液10mL ，用冰乙酸定容至100mL 。
此液用时临时配制；
铁矾显色剂；
铁矾储备液：溶解硫酸铁铵[ FeNH 4（SO 4）2·H 2O]于100mL85％磷酸中，贮于
干燥器内，此液在室温中稳定；
铁矾显色液：吸取铁矾储备液10mL ，用浓硫酸定容至100mL 。
贮于干燥器内，以防吸水；
50％氢氧化钾溶液：称取50g 氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL ； 5％氯化钠溶液：称取5g 氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL ； 钢瓶氮气：纯度％。
.仪器
实验室常用设备；
721型分光光度计；
电热恒温水浴；
电动振荡器；
具玻塞试管：体积10mL 、25mL 。
4.过程简述
.胆固醇标准线
吸取胆固醇标准常备液、、、、分别置于10mL 试管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL 。
沿管壁加入2mL 铁矾显色液，混匀，在15～90min 内，在560～575nm 波长下比色。
以胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。
.样品测定
食品脂肪的提取与测定
根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。
并计算出每100g食品中的脂肪含量。
食品胆固醇的测定
将提取的油脂3～4滴（约含胆固醇300～500 μg），置于25mL试管内，准确记录其重量。
加入4mL无水乙醇， 50％氢氧化钾溶液，在65℃恒温水浴中皂化1h。
皂化时每隔20～30min振摇一次使皂化完全。
皂化完毕，取出试管，冷却。
加入3mL 5％氯化钠溶液，10mL石油醚，盖紧玻塞，在电动振荡器上振摇2min，静置分层（一般约需1h以上）。
取上层石油醚液2mL，置于10mL具玻塞试管内，在65℃水浴中用氮气吹干，加入4mL冰乙酸，2mL铁矾显色液，混匀，放置15min后在560～575nm波长下比色，测得吸光度，在标准曲线上查出相应的胆固醇含量。
5.结果计算
X＝m×V×c
×
1
V
1
×m11000
式中：X——样品中胆固醇含量，mg／100g；
m——测得的吸光度值在胆固醇标准线上显示的胆固醇含量，μg；
V——石油醚总体积，mL；
V
1
——取出的石油醚体积，mL；
m
1
——称取食品油脂样品量，g；
c——食品样品油脂含量，g／100g；
1／1000——折算成每100g食品中胆固醇毫克数。
6.平均允许误差
同一实验室同时或连续两次测定结果之差不得超过平均值的10％。
7.标准曲线
胆固醇标准曲线
8.来源：
GB／T 15206—94。