磷酸酶抑制剂(10×)
蛋白酶抑制剂与磷酸酶抑制剂种类及浓度
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明（此文中所说的与咱的不同之处在于：原矾酸钠使用之前需要活化，另外多加了一种β-磷酸甘油的磷酸酶抑制剂）本文详细总结了常用的：蛋白酶抑制剂：PMSF、 Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin 胃蛋白酶抑制剂、EDTA-Na2磷酸酶抑制剂：NaF氟化钠、Na3VO4原矾酸钠、Beta-glycerophosphate甘油磷酸钠、Na2P2O4焦磷酸钠等的溶液配制、贮存液与工作液浓度及保存条件。
一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在 -20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4× H2O:493.6 使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(RuBPCase)检测试剂盒(RuBP比色法)
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)检测试剂盒(RuBP比色法)简介：植物光合作用的中，C3途径是所有植物共有的光合碳同化途径，核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase，Rubisco或RuBPCo或RuBPCase)是一种酶(EC4.1.1.39)，又称1,5-二磷酸核酮糖羧化酶，分子量约为53kD，由8个大亚基和8个小亚基组成，是光合作用中决定碳同化速率的关键酶，该酶活力的大小反应了植物光合能力的强弱，RUBP羧化酶是光合作用碳代谢中的重要的调节酶，主要存在于叶绿体的可溶部分，总量占叶绿体可溶蛋白50-60%。
在植物叶片发育过程中，此酶活性呈规律性的变化。
Leagene核酮糖1,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)检测试剂盒(RuBP比色法)检测原理是在Rubisco催化核酮糖1,5-二磷酸(RuBP)，1分子后者与1分子的CO2结合，产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA)，后者通过3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用，产生甘油醛-1,3-二磷酸，并使NADH氧化。
因此1分子CO2被固定，伴随2分子NADH氧化，由NADH氧化的量就可计算Rubisco的活性，通过分光光度比色法(分光光度计)测定340处吸光度的变化，计算出NADH的消耗速率进一步推算出核酮糖1,5-二磷酸羧化酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中核酮糖1,5-二磷酸羧化酶活性，25T规格的试剂盒可检测23-24个样本。
组成：编号名称TE044925TStorage试剂(A):Rubisco Lysis buffer250ml4℃试剂(B):Rubisco Assay buffer15ml4℃试剂(C):ATP Solution3ml-20℃试剂(D):CP Solution 1.5ml-20℃试剂(E):CPK Solution1ml-20℃试剂(F):PGK Solution1ml-20℃试剂(G):GAPD Solution1ml-20℃试剂(H):NADH1支-20℃试剂(I):碱性基液3ml RT 使用说明书1份自备材料：1、研钵或匀浆器2、离心管3、低温离心机4、恒温箱或水浴锅5、比色杯6、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：①植物样品：取植物组织清洗干净，切碎，按植物组织：Rubisco Lysis buffer按一定比例，加入预冷的Rubisco Lysis buffer，冰浴情况下充分匀浆或研磨。
211111088_组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他抑制肝癌细胞生长的机制
组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他抑制肝癌细胞生长的机制谷兴璐，赵晓航，孙玉琳*（国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院，分子肿瘤学国家重点实验室，北京 100021）摘要目的：探究核酸外切酶1（exonuclease 1，EXO1）在肝癌中的作用及组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）抑制剂伏立诺他抑制肝癌细胞生长可能的作用机制。
方法：构建敲降或过表达EXO1的肝癌细胞系，通过细胞表型实验探讨EXO1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。
通过同源重组报告实验、免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测EXO1在同源重组修复过程中的作用及对肝癌细胞电离辐射敏感性的影响。
使用伏立诺他处理肝癌细胞，通过CCK-8法、流式细胞术和蛋白质印迹法检测伏立诺他对EXO1表达的影响及抑制肝癌细胞生长的可能机制。
结果：EXO1在肝癌细胞中的高表达促进了肝癌细胞增殖、迁移和侵袭，其通过同源重组途径促进DNA 双链断裂修复，降低肝癌细胞对电离辐射的敏感性。
此外，EXO1表达水平升高使肝癌细胞对伏立诺他更加不敏感，而敲降EXO1可增加肝癌细胞对伏立诺他的敏感性。
且伏立诺他可通过抑制EXO1的表达从而抑制肝癌细胞同源重组修复能力，进而抑制肝癌细胞生长。
结论：伏立诺他可通过降低EXO1的表达水平抑制肝癌细胞同源重组修复能力。
EXO1可作为肝癌的潜在治疗靶点。
关键词：核酸外切酶1；肝癌；伏立诺他；同源重组修复The mechanism of histone deacetylase inhibitor vorinostat inhibiting the growthof hepatocellular carcinoma cellsGu Xinglu, Zhao Xiaohang, Sun Yulin *(State Key Laboratory of Molecular Oncology, National Cancer Center/National Clinical Research Center for Cancer/Cancer Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100021, China)AbstractObjective: To investigate the mechanism of exonuclease 1 (EXO1) in hepatocellular carcinoma (HCC) and the possible mechanism of the histone deacetylase (HDAC) inhibitor vorinostat inhibiting the growth of HCC cells.Methods: HCC cell lines with knockdown or overexpression of EXO1 were constructed. And the effects of EXO1 on the proliferation, migration and invasion in HCC were investigated by cell phenotype assays. The role of EXO1 in homologous recombination (HR) repair and its effect on ionizing radiation sensitivity of cells were detected by HR reportor assay, immunofluorescence and western blots. Additionally, HCC cells were treated with vorinostat. The effect of vorinostat on EXO1 expression and the possible mechanism of inhibiting the growth of HCC cells were detected by CCK-8, flow cytometry and Western blotting.Results: High level of EXO1 promoted the proliferation, migration and invasion of HCC cells. EXO1 also promoted DNA double-strand break repair through the HR pathway and reduced cell sensitivity to ionizing radiation. In addition, elevated EXO1 levels were less sensitive to vorinostat, whereas knockdown of EXO1 increased the sensitivity of hepatocellular carcinoma cells to vorinostat. V orinostat further inhibited the HR repair ability of HCC cells by suppressing EXO1 expression, thereby inhibiting cell growth.Conclusion: V orinostat can inhibit HR repair ability by decreasing the expression level of EXO1, which may serve as apotential therapeutic target for HCC谷兴璐国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室基金项目：国家自然科学基金（82073327）；中国医学科学院医学与健康科技创新工程（2021-I2M-1-066）*通信作者：2020年，肝癌的死亡率位居全球癌症第3位，发病率位居第6位，约有83万例死亡病例和90.6万例新发病例[1]。
0003碧云天磷酸酯酶抑制剂试剂盒说明书
包装清单：
产品编号 S1873 —
产品名称 Sodium orthovanadate (磷酸酯酶抑制剂)
说明书
包装 2g 1份
保存条件：
室温本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Sodium orthovanadate (磷酸酯酶抑制剂)
产品编号 S1873
产品名称 Sodium orthovanadate (磷酸酯酶抑制剂)
包装 2g
产品简介：
Sodium orthovanadate ， 中 文 名 为 正 钒 酸 钠 ， 是 一 种 常 用 的 磷 酸 酯 酶 抑 制 剂 ， 可 以 抑 制 碱 性 磷 酸 酯 酶 (alkaline phosphatase) ， 酸 性 磷 酸 酯 酶 (acid phosphatase) ， 蛋 白 酪 氨 酸 磷 酸 酯 酶 (tyrosine phosphatase) 等 磷 酸 酯 酶 。 Sodium orthovanadate也可以抑制Na+/K+ ATPase等ATPase。常用于抑制蛋白去磷酸化或促进蛋白的磷酸化激活，在提取细胞或组 织蛋白时常用于保持蛋白的磷酸化状态。
6. Sun SQ, Jiang CG, Lin Y, Jin YL, Huang PL. Enhanced T cell immunity by B7-H4 downregulation in nonsmall-cell lung cancer cell lines.
J Int Med Res. 2012;40(2):497-506. 7. Zhou L, Xue H, Wang Z, Ni J, Yao T, Huang Y, Yu C, Lu L.
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP比色法)
β-N-乙酰葡萄糖苷酶检测试剂盒(PNP 比色法)简介：β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷，也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷，该酶广泛存在于多种组织、体液、细胞，是溶酶体中的一种酸性水解酶，其测定方法有比色法和荧光光度法。
Leagene β-N-乙酰葡萄糖苷酶检测试剂盒(PNP 比色法)(NAG Colorimetric Assay Kit)检测原理是在酸性条件下NAG 可使底物对硝基酚-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷水解，释放出游离的对硝基酚(p -nitrophenol ，PNP)，在碱性条件下p -nitrophenol 呈黄色产物，产物黄色越深，说明β-N-乙酰葡萄糖苷酶活性越高，反之则酶活性越低，通过分光光度比色法测定吸光值，据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中的β-N-乙酰葡萄糖苷酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 离心管2、 恒温箱3、 比色杯4、 分光光度计或生化分析仪操作步骤(仅供参考)：1、 配制检测工作液：① 配制显色工作液： 取出1支4-NAG ，恢复至室温后溶解于2 ml NAG Assaybuffer ，混匀，冰上预冷备用。
新配制的显色工作液应在10天内用完。
② 配制标准品工作液：取出p -nitrophenol(10mM) 恢复至室温后，取10μl 溶解于编号 名称TE0063 50T Storage试剂(A): NAG Assay buffer 150ml 4℃ 试剂(B): 4-NAG 1支 -20℃ 避光 试剂(C): Alkaline buffer 1ml 4℃ 试剂(D): p -nitrophenol(10mM) 1ml -20℃ 避光 试剂(E): ddH 2O 10mlRT 使用说明书1份ACP Assay buffer，使p-nitrophenol达到3mM。
【国家自然科学基金】_钙调磷酸酶抑制剂_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802
科研热词 钙调神经磷酸酶 钙调磷酸酶抑制剂 钙调磷酸酶 钙网蛋白 肝移植 缺血后处理 环孢素a 活化t细胞核因子 尿微量蛋白 再灌注 免疫抑制剂 信号转导 他克莫司
推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
推荐指数 4 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
2011年 科研热词 推荐指数 序号 骨肉瘤 1 1 雷帕霉素 1 2 长期存活率 1 3 钙调磷酸酶抑制剂 1 4 钙调磷蛋白激酶(calcineurin/pp2b/cna/cn) 1 5 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 1 6 肾移植术后 1 7 肾移植患者 1 8 肾移植 1 9 肾活检 1 10 肾功能 1 突然转换 1 程序性 1 移植肾存活 1 白细胞介素-2(il-2) 1 慢性排斥反应 1 急性排斥反应 1 小鼠淋巴瘤细胞(el4) 1 免疫抑制剂 1 低剂量 1 slingshot-1l(ssh-1l) 1
2011年 科研热词 调节性 诱导免疫耐受 细胞亚群 移植免疫耐受 混合淋巴细胞培养 效应性 抗原特异性 器官移植术 免疫抑制作用 作用机制 推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2012年 序号 1 2 3 4 5 6 7
科研热词 推荐指数 钙调磷酸酶抑制剂 1 邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(dehp) 1 转换治疗 1 西罗莫司 1 白细胞介素-4(il-4) 1 活化t细胞核因子(nfat) 1 慢性移植物肾病 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在-20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保存1个月。
分子量：685.9使用：贮存浓度1mg/ml，使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。
EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4℃稳定至少6个月分子量：372.24使用：工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8~9时再加入。
必须了解的药界大家族——磷酸二酯酶抑制剂
必须了解的药界大家族——磷酸二酯酶抑制剂合理用药百科环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟苷（cGMP）是细胞内重要的第二信使，磷酸二酯酶（PDEs）可将cAMP和cGMP水解为无活力的5'-AMP和5'-GMP，降低细胞内cAMP和cGMP含量，从而调控机体多种生理病理过程。
PDEs是一个庞大而复杂的家族，由11种同工酶组成，每种同工酶各具特性，PDE4、7、8主要特异性水解cAMP，PDE5、6、9特异性水解cGMP，而PDE1、2、3、10、11则对cAMP和cGMP均起作用。
各个亚型在细胞内分布、表达、调节方式以及对抑制剂的敏感性均不同，参与了炎症、哮喘、抑郁、勃起功能障碍等多种病理过程的发生发展，因此磷酸二酯酶抑制剂大家族应运而生，在临床上得到了广泛的应用。
为了让大家更了解药界中PDEs抑制剂大家族，特此举办了PDEs 抑制剂检阅仪式，由淄博市中心医院静脉用药调配科承办，累了困了就喝白开水冠名播出。
由于PDE6抑制剂、PDE7抑制剂、PDE8抑制剂、PDE9抑制剂、PDE10抑制剂和PDE11抑制剂研究较少，未在临床广泛应用，故没有收到我们的邀请，对此我们表示非常的遗憾！好了，我们的检阅仪式马上开始。
男播报员：首先迎面向主席台走来的是PDE1抑制剂代表队，他们迈着矫健的步伐，喊着响亮不整齐（路人太多）的口号，这是一支以长春西汀为代表的成熟稳重的队伍。
长春西汀，又名长春乙酯、康维脑，可选择性抑制钙离子—钙调蛋白依赖的cGMP-磷酸二酯酶，增加血管平滑肌松弛信使cGMP作用，选择性地增加脑血流量，此外还能抑制血小板聚集，改善血液流动性和微循环。
适用于改善脑梗塞后遗症脑出血后遗症、脑出血后遗症、脑动脉硬化症等诱发的各种症状。
静脉滴注，开始剂量每天20mg，根据病情可增至每天30mg，静滴治疗后，推荐口服长春西汀片继续治疗，进行长期治疗应注意检查血象变化。
不能和肝素同时应用。
女播报员：接着向我们走来的是PDE2抑制剂代表队，他们昂首阔步，英姿飒爽，听他们坚定有力而又杂乱的脚步声（如同下饺子声），这是一支以双嘧达莫为代表具有坚定信念的队伍，有着誓与血栓栓塞斗争到底的执着！双密达莫可抑制磷酸二酯酶对cAMP的降解作用，使血小板内cAMP浓度增高而产生抗血小板作用，抑制血小板的第一相聚集和第二相聚集，高浓度（500ug/ml）可抑制血小板的释放反应。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
北京雷根生物技术有限公司
磷酸酶抑制剂(10×)
产品简介：
蛋白的磷酸化和去磷酸化控制了细胞分化、增殖、信号传导和凋亡等过程，磷酸基团的共价结合可以改变蛋白的构象和配基的结合能力， 动物细胞或组织蛋白提取的过程中,磷酸化蛋白质容易被胞体和外源性磷酸酶降解本产品为多种磷酸酶抑制剂混合物的水溶液，可抑制酪氨酸磷酸酶、丝氨酸/苏氨酸磷酸酶、酸性和碱性磷酸酶等各种磷酸酶。
Leagene磷酸酶抑制剂(10×)适用于动物细胞或组织蛋白的提取， 能最大程度地保持蛋白质磷酸化, 常用于动物细胞或组织中蛋白激酶活性和信号传导的研究，本产品为10倍的储存液。
操作步骤（仅供参考）：
1、按照缓冲液：磷酸酶抑制剂(10×)=9:1配制成1×的含磷酸酶抑制剂的工作液，或者直
接把磷酸酶抑制剂加入所需工作液中混匀即可。
注意事项：
1、尽量减少反复冻融的次数。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关产品：
产品编号 产品名称
CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CS0090阿氏液(2×Alsever液)
CS0001ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
PI0015蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC)
PS0013RIPA裂解液(强)
PT0001BCA法蛋白定量试剂盒。