CLSI临床微生物实验室标准解1
clsi药敏试验标准

clsi药敏试验标准CLSI药敏试验标准。
CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)是一个国际性的临床和实验室标准组织,致力于制定和推广医学实验室标准,为临床实验室提供指导和支持。
在临床微生物学领域,CLSI发布了一系列的标准文件,其中包括药敏试验标准,旨在规范临床微生物学实验室的药敏试验操作流程,确保结果的准确性和可比性。
药敏试验是临床微生物学中的重要内容之一,它用于确定细菌对抗生素的敏感性和耐药性,为临床治疗提供重要参考。
CLSI药敏试验标准涵盖了多个方面,包括试验操作流程、质控要求、结果解释标准等,下面将对其主要内容进行介绍。
首先,CLSI药敏试验标准规定了药敏试验的操作流程。
这包括了从细菌培养、制备药敏试验板、药物浓度的准备、试验操作步骤等方面的详细规定。
标准文件中对每个操作步骤都有具体的要求,从而保证了不同实验室在进行药敏试验时能够保持一致的操作流程,减少操作误差和结果的不确定性。
其次,CLSI药敏试验标准还对质控要求进行了明确规定。
药敏试验的质控是确保实验结果准确性和可靠性的重要手段。
标准文件中规定了质控菌株的选择、保存和使用方法,以及质控结果的解释标准,确保了质控结果的准确性和可比性。
另外,CLSI药敏试验标准还对药敏试验结果的解释标准进行了详细规定。
这包括了对细菌对不同抗生素的敏感性、中度敏感性和耐药性的界定,以及对结果的报告和解释要求。
这些规定确保了不同实验室对药敏试验结果的解释是一致的,为临床医生提供了可靠的参考依据。
总的来说,CLSI药敏试验标准的发布对于规范临床微生物学实验室的药敏试验操作流程、质控要求和结果解释标准起到了重要的指导作用。
遵循这些标准,能够保证药敏试验结果的准确性和可比性,为临床治疗提供可靠的实验室支持。
因此,实验室在进行药敏试验时应当严格遵循CLSI的相关标准要求,不断提高实验室的技术水平和服务质量,为临床医生和患者提供更好的支持和帮助。
clsi药敏试验标准2023

CLSI药敏试验标准2023一、药敏试验定义药敏试验(Antimicrobial Susceptibility Testing,AST)是一种实验室方法,用于测定细菌对各种抗菌药物的敏感性或耐药性。
药敏试验可以帮助医生选择最合适的抗菌药物来治疗感染,提高治疗效果并减少耐药性的传播。
二、试验规则1.试验方法:CLSI推荐使用微量稀释法(microdilution method)进行药敏试验。
该方法通过在试管或微孔板中加入细菌悬液和不同浓度的抗菌药物,测定细菌生长情况,从而判断细菌对药物的敏感性。
2.试验菌种:CLSI推荐使用临床分离的细菌菌种进行药敏试验,包括革兰阳性菌、革兰阴性菌、非发酵菌等。
3.药物浓度:药敏试验中使用的抗菌药物浓度应符合CLSI标准,以保证试验结果的准确性。
4.孵育时间:孵育时间应根据菌种和药物特性确定,一般为16-20小时。
5.结果判定:根据细菌生长情况,药敏试验结果可分为敏感(S)、中介(I)和耐药(R)三种类型。
三、质量控制1.室内质控:每次试验应包括阴性对照(无菌生长)和阳性对照(细菌生长),以验证试验的准确性。
2.室间质控:参加CLSI组织的室间质控计划,以确保不同实验室之间的结果具有可比性。
四、抗生素敏感性试验1.常规抗生素:包括β-内酰胺类(如青霉素类、头孢菌素类等)、氨基糖苷类(如链霉素、庆大霉素等)、氟喹诺酮类(如环丙沙星、左氧氟沙星等)等多种抗生素。
2.特殊抗生素:针对某些特定感染,如结核病、真菌感染等,需使用特殊的抗结核药物或抗真菌药物进行药敏试验。
五、抗菌药物分组CLSI将抗菌药物分为五个组别,分别为:β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、抗真菌药和其他抗菌药物。
药敏试验时应根据抗菌药物的分组选择相应的药敏试验方法。
六、选药流程1.根据感染部位和临床诊断,选择可能有效的抗菌药物。
2.根据细菌培养和药敏试验结果,调整抗菌药物的选择。
3.根据患者个体差异(如年龄、肾功能等)和药物相互作用,选择最合适的抗菌药物。
clsi药敏试验标准

clsi药敏试验标准CLSI药敏试验标准。
CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)是世界上最具权威性的临床和实验室标准制定组织之一,它的药敏试验标准对于临床医学和实验室医学有着重要的指导意义。
药敏试验是临床微生物学中常见的一种实验方法,通过对微生物对抗生素的敏感性进行测试,从而为临床治疗提供重要依据。
本文将详细介绍CLSI药敏试验标准的相关内容,帮助读者更好地理解和应用这一标准。
首先,CLSI药敏试验标准主要包括了实验室内药敏试验的基本原则和操作规范。
在进行药敏试验时,首先需要选择合适的培养基和试验方法,确保试验结果的准确性和可靠性。
其次,实验过程中需要严格控制试验条件,包括温度、湿度、培养时间等因素,以确保实验结果的可比性和稳定性。
此外,还需要对实验操作人员进行专业培训,提高其实验操作的标准化程度,从而减少实验误差,保证试验结果的准确性。
其次,CLSI药敏试验标准还规定了药敏试验结果的解读和报告标准。
在获得药敏试验结果后,需要根据标准的解读方法对结果进行分析和判读,从而为临床治疗提供科学依据。
同时,还需要将试验结果进行准确、清晰的报告,包括微生物的种属、对抗生素的敏感性和抗药性等信息,以便临床医生进行合理的药物选择和治疗方案制定。
此外,CLSI药敏试验标准还对质控和质量管理提出了要求。
在进行药敏试验时,需要建立健全的质控体系,定期对试验设备和试剂进行检验和验证,确保试验结果的准确性和可靠性。
同时,还需要建立完善的质量管理制度,对实验室人员进行定期的培训和考核,提高其实验操作的规范性和准确性,从而保证试验结果的科学性和可信度。
总之,CLSI药敏试验标准是临床微生物学领域中的重要标准之一,对于规范药敏试验的操作、结果解读和质量管理具有重要的指导意义。
通过遵循CLSI药敏试验标准,可以提高药敏试验结果的准确性和可靠性,为临床治疗提供科学依据,从而更好地保障患者的治疗效果和生命安全。
CLSI临床微生物实验室标准解读

CLSI临床微生物实验室标准解读CLSI折点变更的官方说明Janet Hindler, MCLS MT(ASCP) UCLA Medical Center Los Angeles, California CLSI M100-S20编者本文由Hindler教授提供,并允许梅里埃公司翻译及印发Janet Hindler教授现任美国加利福尼亚州洛杉矶医学中心(UCLA)资深专家,华盛顿D.C.公共健康实验室协会顾问等职。
自1994年开始在CLSI细菌抗生素药敏试验委员会的工作,参加制定每年细菌药敏标准,现任CLSI“不常见细菌和苛养菌药敏指南“学组主席,CLSI“累积抗生素药敏试验数据指南(M39-A3)”学组主席等多个CLSI分委会任职。
术语/流程A. 似乎CLSI和其他一些机构在使用术语“折点”和“判读标准”时候可交替使用。
在这两个词之间有区别吗?无区别,折点和判读标准所指的都是同一个数值。
B. 在哪里我可以找到关于CLSI如何建立药敏折点的标准?在CLSI M100-S20的第17页有关于药敏折点建立的简要说明。
关于药敏折点建立的详细指南参见CLSI 文件M23- 体外敏感性试验标准和质控参数的发展C-15682C-1562C. CLSI修订药敏折点的流程和程序是什么?简而言之,修订药敏折点包括系统性的回顾来自微生物学,药物学和临床的数据。
知名专家,赞助商(来自制药工业)和管理者参与药敏制定流程包括在每年2次的CLSI 药敏试验小组委员会会议的公开讨论。
在制定新上市药物的初始药敏折点时候,需要有对照临床试验数据。
尽管在修订药敏折点时最好能够提供对照临床试验数据,这些数据在应对快速变化的细菌耐药机制和“老药”时多数情况下是不可行的。
因此,委员会必须要依赖发表的文献,专家意见和共同商议的流程。
在药敏折点修订时必须要考虑到流行病,临床治疗和监管意见。
CLSI 分委会的会议纪要在下面的链接可以获取。
/Content/NavigationMenu/Committees/Microbiology/AS T/AST.htm在美国FDA和CLSI都建立自己的药敏折点,某些时候这两个机构所设立的药敏折点会有不同。
clsim100 32药敏试验标准2023中文版

clsim100 32药敏试验标准2023中文版介绍:药敏试验是一种通过检测细菌或其他微生物对不同抗生素的敏感性来指导临床用药的测试方法。
药敏试验标准是为了确保药敏试验结果的准确性和可比性,临床医生可以根据这些结果来选择合适的抗生素进行治疗。
2023年版的药敏试验标准更新了之前版本的内容,添加了新的试验项目和方法,以更好地适应临床需求。
本文将对2023年版的药敏试验标准进行详细介绍。
一、试验范围:2023年版的药敏试验标准适用于细菌、真菌和其他微生物的药敏试验。
其中包括对常见病原体如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等的药敏试验,以及对罕见病原体如多重耐药菌株、病毒等的药敏试验。
该标准还适用于临床、科研和药品监管等领域。
二、试验项目:2023年版的药敏试验标准包括以下试验项目:1.最小抑菌浓度(MIC)测定:该项目通过测定细菌对抗生素的最低抑制浓度,来评估其对抗生素的敏感性。
MIC测定是药敏试验的核心内容之一。
2.抗生素敏感度测试:该项目通过对不同抗生素的浓度进行渐进性稀释,判断细菌对抗生素的敏感性水平。
3.抗菌圈直径测定:该项目通过测定抗生素在琼脂平板上形成的抗菌圈直径,来评估细菌对抗生素的敏感性。
在临床上,抗菌圈直径的大小通常用来判断细菌对抗生素的敏感性和耐药性。
4.酶联免疫吸附测定(ELISA):该项目通过检测细菌分泌的特定酶或蛋白质的水平来评估其对抗生素的敏感性。
5.分子生物学检测:该项目通过检测细菌或真菌的特定基因或基因片段的存在与否,来评估其对抗生素的敏感性。
三、试验方法:2023年版的药敏试验标准规定了具体的试验方法,包括实验器材和试剂的准备、试验操作步骤、结果解读等。
标准强调了试验的操作规范和结果的准确性。
四、质量控制:标准强调了药敏试验的质量控制要求。
试验过程中需要使用合适的阳性对照菌株和阴性对照菌株来进行比对和验证。
质控菌株的选取和保存也在标准中有所规定。
五、结果解读和报告:标准对试验结果的解读和报告也进行了明确规定。
clsi-m100-s20_2010抗菌药物敏感性试验解释标准(中文)

内部交流资料
Vol . 30 No .1 M1 0 0 - S 20
抗微生物药物敏感性试验的执行标准; 第二十版信息增刊 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twentieth Informational Supplement
抗微生物药物敏感性试验执行标准; 第二十版信息增刊
Volume 30 Number 1
Franklin R. Cockerill, III, MD Karen Bush, PhD Michael N. Dudley, PharmD,FIDSA George M. Eliopoulos, MD Dwight J. Hardy, PhD David W. Hecht, MD Janet F. Hindler, MCLS, MT(ASCP) Janet A. Hindler. MCLS, MT(ASCP) Jean B. Patel, PhD, D(ABMM) Mair Powell, MD, FRCP, FRCPath, MHRA Richard B. Thomson, Jr., PhD John D. Turnidge, MD Melvin P. Weinstein, MD Barbara L. Zimmer, PhD Mary Jane Ferraro, PhD, MPH Jana M. Swenson, MMSc
细菌药敏实验分组-CLSI-原标准
表1 临床微生物实验室非苛养菌常规药敏试验和报告中应考虑的药物(待续)续表1 临床微生物实验室非苛养菌常规药敏试验和报告中应考虑的药物注释 1.表内小框中的是一些类似的药物组同一框内药物的解释结果和临床效力都很相似,因此不必重复试验。
另外“或”字表示一群相关的药物,其抗菌谱和解释结果几乎完全相同,其交叉耐药性和敏感性也几乎完全相同。
因此,通常每个小框(组或相关的群)中只选择一种药物用于试验。
一般情况下报告的药物必须是试验过的,但如果说另外的一种药物的试验可提供对该种药更为准确结果则可以例外(如葡萄球菌对苯唑西啉试验的敏感性结果可套用头孢唑啉与头孢噻吩)。
而且通常被试药物应于医院处方汇编中的药物相匹配,或在报告时加脚注,指明哪些未试药物与被试药物有相似的解释结果。
最后不常见的耐药应考虑报告(如,肠杆菌科细菌对三代头孢菌素或亚胺培南耐药)注2A;头孢噻吩可以代表头孢噻吩、头孢匹林、头孢拉定、头孢氨苄、头孢羟氨苄。
但是头孢唑啉、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢丙烯、氯碳头孢(仅对尿道分离株)应单独测试,因为某些对这些药物敏感的菌株对头孢噻吩是耐药的。
B;对于泌尿道分离菌株不常规报告。
C;四环素是所有四环素类的代表,其结果可用于强力霉素和二甲胺四环素。
对某些细菌强力霉素和二甲胺四环素可以代替或与四环素一起测定,但不能用于预测四环素的敏感性,因为它们往往比四环素更敏感。
D;RX利福平不能单独用于化疗。
E;B组药物可以用于一级试验,但是它们只是选择性的报告,例如当细菌对A 组同类药物耐药时,可以选择性的报告B组中的一些结果。
其它报告指征可包括以下几点;特定的标本来源(如三代头孢菌素对脑脊液的肠道杆菌分离株,或者磺胺甲恶唑/甲氧苄啶对尿道分离株)已知对A组药过敏、耐受或无效的病例;多种细菌感染;多种细菌多部位感染;为流行病学调查目的向感染控制组报告。
F;C组药包括替代性或补充性抗微生物药。
可在以下情况下试验某些单位潜伏存在有对一种或数种基本药物(特别是同类的,如β-内酰胺类或氨基糖苷类)耐药的局部流行或广泛流行的菌株;治疗少见菌的感染(如氯霉素对某些假单胞菌属的细菌,和氯霉、红霉素、利福平和四环素对某些耐万古霉的肠球菌);为流行病学调查目的向感染控制组报告。
CLSI解释
CLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写,英文名为Clinical and Laboratory Standards Institute。
CLSI前身是NCCLS【美国临床实验室标准化委员会】,英文名称为National committee for clinical laboratory。
美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准,是国内临床细菌检验遵循的标准。
由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力,所以大多数国家包括中国都还没有能力建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准。
CLSI标准每年更新!CLSI的部分标准及指南如下:1. AST2-A,床旁(Point-of-Care)体外诊断(IVD)检测:批准指南(1999)。
本文件为临床实验室以外的体外诊断(IVD)设备的用户提供产生可靠结果的指南。
2. C12-A,血气和pH分析相关的量和换算的定义:批准标准(1994)。
C12-A讨论特定的术语并给出血气和pH分析计算的统计解释(参见相关出版物C25-A和C27-A)。
3. C21-A,测量血样品pO2和pCO2设备的性能特征:批准标准(1992)。
由美国国家标准研究院(ANSI)批准。
C21-A探讨了为测量血中CO2和O2部分压力而设计仪器的性能和方法学(参见相关出版物C27-A)。
4. C24-A2,定量测定统计质量控制:原理和定义:批准指南(1999)。
本指南提供了分析区间的定义;质量控制方法的计划以及质量控制应用的指南。
5. C27-A,血气分析前考虑因素:标本收集,校准及控制:批准指南(1993)。
由美国国家标准研究院(ANSI)批准。
C27-A为pH和血气分析提供了动脉的血标本收集和处理的指南;讨论血气分析仪器的校准以及包含可接受的质量控制程序的建议(参见相关出版物C12-A,C21-A,H11-A2及M29-A)。
6. C28-A2,如何确定临床检验的参考区间:批准指南(2000)。
clsi m07-a9 的标准方法
CLSI M07-A9是临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)发布的标准方法之一。
该标准方法主要用于抗菌药敏感性试验,是临床微生物学领域中非常重要的一项标准。
旨在提供一个统一的、可靠的方法,以便医院实验室和临床实验室可以准确地评估细菌对抗生素的敏感性,从而指导临床医生的抗菌治疗。
下面将对CLSI M07-A9标准方法进行详细介绍。
一、概述CLSI M07-A9标准方法是抗菌药物敏感性试验(Antimicrobial Susceptibility Testing,AST)的标准之一。
该方法适用于革兰氏阳性和阴性细菌及真菌的敏感性试验。
它提供了一种标准化的操作程序,以便在不同的实验室和不同的细菌菌种之间进行可比较的敏感性分析。
二、试验流程1. 制备培养基:根据具体的试验要求,需制备适当的培养基,以供细菌的生长和试验使用。
培养基的质量和配方对试验结果有着至关重要的影响。
2. 细菌培养:接种适量的细菌菌液于培养基中,利用恒温培养箱进行培养,待细菌培养至适当浓度后方可进行下一步操作。
3. 药物敏感性试验:将不同浓度的抗生素药物加入含有细菌的培养基中,观察不同浓度的药物对细菌的抑菌效果,从而得出细菌对该药物的敏感性,通常采用克尔比法或肉汤稀释法进行测定。
4. 结果解读:根据试验结果,判断细菌对不同抗生素的敏感性,并报告相关的抗生素最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。
三、质量控制CLSI M07-A9标准方法对试验的各个环节都有着严格的质量控制要求,以确保试验结果的准确性和可靠性。
常用的质控菌株包括金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌等。
四、结果报告根据试验结果,编写标准化的报告,并按照CLSI的相关标准进行结果解读。
报告中需要包括细菌对各个抗生素的敏感性情况,以及MIC值等相关信息。
2020年(生物科技行业)CLSI临床微生物实验室标准解读
2020年(⽣物科技⾏业)CLSI临床微⽣物实验室标准解读(⽣物科技⾏业)CLSI临床微⽣物实验室标准解读CLSI临床微⽣物实验室标准解读CLSI2010更新CLSI临床微⽣物实验室标准解读第三辑2010年CLSI药敏试验的更新中国医学科学院北京协和医学院杨启⽂王辉美国临床和实验室标准化研究所(TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)是壹个国际性、跨学科、⾮营利的、致⼒于发展操作标准的教育组织。
其抗菌药物敏感性试验⼩组委员会(SubcommitteeonAntimicrobialSusceptibilitytesting)每年组织该领域专家和药⼚代表等对药敏相关⽂件M100进⾏壹次修订。
⽬前我国的临床微⽣物实验室均以CLSI⽂件作为药敏指导⽂件进⾏试验操作和报告,本⽂将CLSIM100-S20(2010年)的主要更新点总结如下:壹、主要格式的更新:下表显⽰了壹些在M100-S19(2009年)中位于最后的附录在M100-S20(2010年)⽂件中新的命名、编号和位置。
表1.M100-S20的格式更新(1)修订了“⾮敏感”的定义:M100-S20中对“⾮敏感”的定义是由于耐药菌株缺失或稀少因⽽仅确⽴了敏感性解释标准。
当药物对菌株的MIC⾼于或抑菌圈直径低于此折点时需报告为⾮敏感。
⾮敏感且不意味着菌株携带某种耐药机制。
有可能MIC⾼于敏感折点的菌株缺乏耐药机制且且属于野⽣菌株,只不过其出现于敏感性折点确⽴后。
对于“⾮敏感”的菌株,菌株鉴定和药敏结果需被再次确认。
(2)对“使⽤头孢噻吩的折点仅⽤于预测对其他头孢菌素的敏感性”增加注释:在M100-S20中,头孢噻吩的折点仅可⽤于预测菌株对⼝服药物,包括孢羟氨苄,头孢泊肟,头孢氨苄和氯碳头孢的敏感性。
旧的数据认为头孢噻吩的结果能够预测某些其他头孢菌素的敏感性可能仍然正确,但⽬前的数据尚不能⽀持此论点。
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CLSI临床微生物实验室标准解读葡萄球菌CLSI 临床微生物实验室标准解读第一辑2009年CLSI (M100-S19)中葡萄球菌属药敏更新部分中国医学科学院北京协和医院王辉陈宏斌2009年CLSI在版式上的显著变化是将K-B法和MIC法放在同一个表格中,方便比较。
对于葡萄球菌属,主要有以下更新和变化:一是去除凝固酶阴性葡萄球菌苯唑西林纸片扩散法试验;二是删除了万古霉素纸片扩散法的药敏折点;三是增加了金葡菌莫匹罗星高水平耐药性的检测。
一、β-内酰胺类的变化2009年CLSI指出在报告青霉素对葡萄球菌敏感之前,即当MIC≤0.12μg/ml或抑菌圈直径≥29 mm,需要做可诱导的β-内酰胺酶试验。
其操作如下:将分离菌株传种至血平皿或MH琼脂上,贴上作为诱导子的苯唑西林或头孢西丁纸片,35℃孵育16-18h,挑取抑菌圈边缘的细菌做b-内酰胺酶试验。
b-内酰胺酶试验阳性可以预测青霉素、氨苄西林、阿莫西林、羧苄青霉素、替卡西林、美洛西林和哌拉西林耐药。
在检测MRS时,金葡菌、路登葡萄球菌和其它凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)对苯唑西林的折点和选取的药敏方法有所不同,具体见表1(见下页)。
在CoNS(除外路登葡萄球菌以外)中,由于苯唑西林纸片扩散法存在太多假―R‖,所以此法被去除,而是采用头孢西丁纸片法、苯唑西林/头孢西丁MIC法检测mecA介导的苯唑西林耐药。
对于由CoNS(除外表皮葡萄球菌)引起的严重感染,当苯唑西林MIC值在0.5-2μg/mL之间时,应当检测该菌株是否产mecA基因或PBP2a(图1)。
利用头孢西丁检测mecA 介导的苯唑西林耐药所推荐的质控菌株是金葡菌ATCC25923-mecA阴性(抑菌圈直径23-29mm)和金葡菌ATCC43300-mecA阳性(抑菌圈直径≤21mm)。
图1 CoNS*苯唑西林MIC结果报告策略二、糖肽类耐药性的检测2009年CLSI推荐采用MIC法检测所有葡萄球菌对万古霉素的敏感性,去除了纸片扩散法。
这是因为纸片扩散法不能区分万古霉素敏感、中介耐药的葡萄球菌。
图2显示采用Etest测定万古霉素对金葡菌的MIC为8mg/ml,为―I‖,而采用纸片扩散法,抑菌圈直径为17mm,为―S‖。
万古霉素纸片扩散法仅仅对于检测含vanA的金葡菌(VRSA)是可靠的。
如果抑菌圈直径≥7mm,需要检测万古霉素的MIC值。
对万古霉素MIC值升高的金葡菌(MIC ≥4mg/mL)和CoNS(MIC≥8mg/mL)需要送往参考实验室进一步确证。
目前的研究没有重新评估替考拉宁纸片扩散法的折点,因此纸片扩散法能否将替考拉宁中介、耐药的葡萄球菌与敏感的菌株区分开来还不清楚。
2009CLSI明确指出采用含6mg/ml万古霉素脑心浸液(BHI)琼脂筛选万古霉素MIC≥8mg/ml 的金葡菌,具体步骤如下:制备含6mg/ml万古霉素脑心浸液(BHI)琼脂,将待测菌株调整到0.5麦氏单位菌悬液,用加样枪吸取10ml菌悬液点种到制备好的琼脂板上,或者是用菌悬液浸湿棉签并拧干多余的液体,在制备好的琼脂板上点种直径10-15mm的面积,35±2℃空气孵育24小时,>1个菌落或薄膜生长即可推测为万古霉素敏感性下降金葡菌。
进一步的试验是用确证的MIC方法检测在筛选平皿上生长金葡菌对万古霉素的MIC值。
BHI琼脂筛选法不能稳定地检测所有万古霉素中介金葡菌,一些万古霉素MIC为4mg/ml的金葡菌不能在琼脂板上生长。
推荐的质控菌株是粪肠球菌A TCC29212(敏感)和粪肠球菌ATCC51299(耐药)。
异质性万古霉素中介金葡菌(hVISA)是指子代中含万古霉素MIC值8-16mg/ml的细胞,大多数发生于万古霉素治疗的病人,hVISA可能造成万古霉素治疗失败。
采用标准的万古霉素MIC试验,一些hVISA的MIC值在1-2mg/ml之间,CLSI中还没有检测hVISA的特异方法。
图2 采用CLSI M100-S18万古霉素纸片扩散法折点,将―I‖金葡菌错误地判断为―S‖(此图片来自Janet Hindler教授的幻灯片)三、达托霉素药敏试验CLSI规定采用肉汤稀释法检测达托霉素MIC值,使用的培养基是CAMHB,需要将Ca2+调整至50mg/mL。
葡萄球菌属对达托霉素的MIC折点只定义敏感范围(≤1mg/mL),目前没有中介和耐药的折点。
菌株MIC值高于敏感折点被定义为不敏感(nonsusceptible)。
实验室如果碰到达托霉素不敏感株,需要重新鉴定菌株和检测药敏,然后送往参考实验室进一步确认。
2009年CLSI指出纸片扩散法检测达托霉素不可靠,琼脂稀释法用于达托霉素还没有被批准。
四.金葡菌莫匹罗星高水平耐药性的筛选莫匹罗星属于pseudomonic acid类抗生素,主要用于皮肤感染(如脓疱病)治疗和金葡菌鼻腔定植的清除,不需要常规检测药敏,仅仅在特别必要时检测。
2009年CLSI提出要筛选金葡菌对莫匹罗星的高水平耐药(见表2)。
研究表明莫匹罗星对金葡菌MIC≥512mg/mL,与定植不能清除相关。
虽然此文件没有定义莫匹罗星敏感性的具体折点,但纸片扩散法和MIC筛选法可以鉴定莫匹罗星MIC值≥512mg/mL菌株。
链球菌CLSI 临床微生物实验室标准解读第二辑CLSI的链球菌属药敏解读北京协和医院杨启文王辉对于链球菌属,CLSI将药敏分为3个部分:肺炎链球菌的药敏解读、b溶血链球菌的药敏解读和草绿色链球菌的药敏解读。
不用的菌种CLSI有不同的规定,现对链球菌属的CLSI 药敏作逐一解读:1. 肺炎链球菌:(1) 肺炎链球菌对青霉素和其他b内酰胺类药物的敏感性检测CLSI对该组合的解释标准按照感染类型和给药途径不同分为三类(表1),3种情况均有不同的折点。
对于非脑膜炎的青霉素静脉给药治疗,CLSI认为对于青霉素MIC≤2µg/ml的菌株,肾功正常的成年人,应每次至少应用200万单位,每四小时给药一次(每天1200万单位)的方式进行治疗。
对于MIC为4µg/ml的菌株则须将剂量提高至每天1800-2400万单位。
对于非脑脊液标本中分离出的肺炎链球菌,需同时使用脑膜炎和非脑膜炎的折点来报告青霉素的敏感性。
对于脑膜炎的青霉素静脉给药治疗,CLSI 认为需将青霉素用量提高至最大(如肾功正常的成年人可使用每次300万单位,每四小时一次的给药方式)。
对于脑脊液中分离的肺炎链球菌,仅需采用脑膜炎的折点报告青霉素的敏感性。
常规工作中可以用含5%脱纤维羊血的Mueller-Hinton平皿进行苯唑西林的纸片扩散法来检测青霉素的敏感性。
苯唑西林的抑菌圈直径≥20mm时,可以判定青霉素为敏感(相当于青霉素的MIC≤0.06mg/ml)。
但纸片扩散法不能用于区分耐药菌株和低耐菌株,因此抑菌圈直径≤19mm的菌株可能是青霉素耐药或中介甚至是敏感的菌株,对于这些菌株应该进行肉汤或琼脂稀释试验测定青霉素的MIC。
需要注意的是,苯唑西林纸片扩散法是用来预测青霉素敏感性的,苯唑西林MIC 本身无价值,因此无需测定苯唑西林的MIC。
对于非脑膜炎的菌株,青霉素的MIC可以预测下列β内酰胺类药物的敏感性:青霉素MIC≤0.06mg/ml(或苯唑西林抑菌圈直径≥20mm)提示菌株对氨苄西林(口服或肠外)、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、头孢地尼、头孢妥仑、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢唑肟、头孢呋辛、亚胺培南、氯碳头孢和美罗培南也敏感;青霉素MIC≤2µg/ml提示菌株对阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松和厄他培南也敏感。
表1. 青霉素对肺炎链球菌的敏感性判定折点(µg/ml)必须注意,虽然阿莫西林、氨苄西林、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛、厄他培南、亚胺培南和美罗培南可用于治疗肺炎链球菌感染,但对这些药物尚无可靠的纸片法药敏试验,最好用MIC法测定其体外抗菌活性。
对于脑脊液中分离出的肺炎链球菌,需尽快用可靠方法检测和报告青霉素和头孢噻肟(或头孢曲松或美罗培南)的MIC值。
这些菌株也需要用MIC法或纸片扩散法报告万古霉素的药敏结果。
表2. 从脑脊液中分离到的肺炎链球菌需常规报告药物的折点(2)肺炎链球菌对非β内酰胺类药物的敏感性CLSI对大环内酯类药物的红霉素、阿奇霉素、克拉霉素和地红霉素给出了纸片扩散法和MIC法的折点,并指出红霉素的敏感耐药性可以预测阿奇霉素、克拉霉素和地红霉素的敏感耐药性。
对于尿路分离的菌株,常规不报告大环内酯类药物的敏感性。
对于临床常用的氟喹诺酮类药物,CLSI提供了纸片扩散法和MIC法的折点。
并提示:对左氧氟沙星敏感的肺炎链球菌可预测对吉米沙星和莫西沙星也敏感。
然而,对吉米沙星或莫西沙星敏感的肺炎链球菌不能认为对左氧氟沙星也敏感。
2. β溶血链球菌CLSI在此部分的描述中,β溶血链球菌包括携带A群(化脓链球菌)、B群(无乳链球菌)、C 群或G群抗原的大菌落化脓性菌株。
而携带A、C、F或G抗原的小菌落β溶血菌株(咽峡炎链球菌,以前称之为米勒链球菌)则归属于草绿色链球菌群,药敏折点也应参照草绿色链球菌群。
对于化脓链球菌(A群)或无乳链球菌(B群),青霉素和其他β内酰胺类药物的药敏试验不需常规进行。
这时由于目前还没有耐药菌株的报道。
CLSI表格中所列出的折点仅是为了药物研发、流行病学以及监测耐药性的目的。
任何测定为非敏感的菌株均需送至参考实验室进行确证。
假如菌株对青霉素敏感,则可以预测对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、头孢唑啉、头孢地尼、头孢吡肟、头孢丙烯、头孢噻肟、头孢布烯(仅对A群链球菌)、头孢曲松、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢唑肟、头孢拉定、头孢噻吩、头孢匹林、厄他培南、亚胺培南、氯碳头孢和美罗培南也敏感,不必再进行这些药物的敏感性试验。
对于厄他培南、美罗培南和达托霉素,CLSI不推荐使用纸片扩散法实验,也没有提供纸片法的判定折点。
怀孕期妇女B群链球菌的预防用药推荐为青霉素或氨苄西林。
对于过敏反应低危的妇女,若对青霉素过敏可改用头孢唑啉;对于过敏反应高危的妇女,若对青霉素过敏则改用克林霉素或红霉素。
B群链球菌对氨苄西林、青霉素和头孢唑啉敏感,但可能对克林霉素和/或红霉素耐药。
当对青霉素过敏反应高危的怀孕期妇女分离出B群链球菌时,需对克林霉素和红霉素进行药敏试验并报告。
大环内酯类耐药的β溶血链球菌可以体现出对克林霉素的结构型或诱导型耐药[由erm基因介导的23S rRNA甲基化,也称为MLSB(大环内酯-林可霉素-链阳霉素B)耐药],或仅对大环内酯类耐药(由mef基因介导的外排泵机制)。
诱导型克林霉素耐药可以用D试验检测:按照标准的纸片扩散法程序,在15mg红霉素纸片周围贴2mg克林霉素纸片,两纸片的边缘相距12mm,孵育后,若克林霉素纸片抑菌圈靠近红霉素一侧未出现切割现象,则报告菌株对克林霉素敏感。