免疫抑制法测定CK-MB活性假性增高的原因分析

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肌酸激酶的假性增高

肌酸激酶的假性增高

测定CK、CK-MB活性尽量不使用溶血标本 红细胞中含有腺苷酸激酶( AK) ,溶血标本中的AK 直接参与CK 速率法的第二步反应, 对CK-MB 的测 定结果也带来一定影响 试剂中加入抑制剂AMP 抑制AK 干扰, 抑制率仅90%~ 95%
巨CK1的临床意义
一般认为是良性现象 发生率低,仅0.8-2.3 %
巨CK2的临床意义
80-90%并不引起CK 总活力异常升高,其余仅略升高 与恶性肿瘤密切相关
8322例患者中检出率1.2%
原发性肺癌检出率56.8%,13例结肠癌者术前9例检出,
Байду номын сангаас
21例结肠癌或胃癌转移者中16例检出 肝硬化中检出率14%,肝细胞癌16%,肿瘤肝转移31%, 乳腺癌5%,
免疫抑制法:测定CK及CK-MB简单、快速、不需手
工操作、可上自动生化分析仪而被广大医院采用 原理:正常人血清CK-BB极少可忽略不计,应用 单克隆抗体与CK 中的M 亚基结合,抑制CK-MM 及 CK-MB 中的M 亚基活性,通过速率法测定B 亚基, 结果乘以2 即为CK-MB 活性
CK-MB主要意义在于诊断急性心梗。当炎症或梗死 等原因引起心肌细胞受损或坏死, 大量CK释放入 血, 血清中CK-MB 占CK 总活力> 5%为阳性,最高
检测CK-MBmass的质量法,其原理是利用单克隆抗 体技术和全自动ELISA的方法直接检测CK-MB的浓
度,所以可以从根本上解决酶法的不足
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CK亚基 M B CK同工酶 MM MB BB MtMt 主要组织部位 骨骼肌 心肌 脑和结肠 肌肉、脑和结肠
Mt
血清CK同工酶正常值(占CK总活力百分比):

“CK-MB”测定的“干扰”现象及原因分析

“CK-MB”测定的“干扰”现象及原因分析

“CK-MB”测定的干扰现象及实验对策湖北省兴山县人民医院彭兰张娥、万芳、邹志宝443711【摘要】目的:探讨“CK-MB”升高的干扰原因及实验对策。

方法:采用免疫抑制法测定“CK-MB”,采用酶偶联速率法测定总CK活性。

结果,10名健康献血员、56名本院心内科人、15名本院收治的恶性肿瘤病人三组人员同时检测“CK-MB”及总CK活力;在正常献血员中有一例CK-MB值异常升高,达总活性的61%;在56例心内科病人血清中CK-MB单项升高16例,总CK单项升高33例,二项指标同时升高28例;在15例恶性肿瘤患者血清中CK -MB单项升高7例,总活性升高2例,二项同时升高1例。

结论:采用免疫抑制法CK-MB作为心肌梗塞诊断指标的特异性仍须探讨,实验存在较多的干扰因素,且CK-MB结果升高与恶性肿瘤有密切关系。

【关键词】:CK-MB 总CK 干扰用免疫抑制法检测血清CK-MB活性,观察其活力单位及与CK 的比值关系作为诊断急性心肌梗死的相对特异性指标、预测冠状动脉再通的治疗效果和观察病情变化等,已被临床广泛应用。

一般情况下正常人CK-MB主要存在于人体心肌细胞内,血清中CK的存在形式主要是CK-MM,只有少量CK-MB,不超过总活性的5%,心肌梗死发生时最高值也不超过38%。

但在日常检测工作中经常发现临床血清标本中CK-MB检测值与理论值不符合,最多见的就是CK-MB检测值大于总CK检测值的现象。

现就肌酸激酶及其同工酶的组成、临床意义和检测的方法学等方面简要分析其原因并就解决方法提出建议。

CK-MB存在于心肌细胞胞浆中,CK-MB作为诊断急性心肌梗塞或心肌坏死的特异时指标,在心肌坏死症状发作4-5小时达正常上限,12-24小时达高峰,72小时逐步恢复。

基层实验室多采用免疫抑制法测定CK-MB,对不同病程的心肌病提供较特异诊断,本室通过三组不同人群的CK-MB测验结果发现,采用免疫抑制法测定CK-MB指标有假性增高现象,与临床体征明显不符,现先从实验原理探讨;免疫抑制法测定CK-MB是用抗体将M亚基抑制,测定B亚基,结果乘以2即为CK-MB活性,当血清中出现文献报道中的巨CK或CK-BB及其它成份时,由于它们不受抗M亚基抗体抑制,其活性已完全测出,再乘以系数2,就可能出现CK-MB升高或高于总CK的现象,造成CK-MB结果失真,本室从1999.9-2000.5共收集71份血清测定CK-MB及总CK活性,现将实验中出现的异常结果提出探讨。

免疫抑制法检测患者血清CK-MB假性升高原因分析

免疫抑制法检测患者血清CK-MB假性升高原因分析

合作 为辅 助肿 瘤诊 断 的标 志物 C E A+ F D P联合 诊
断的 R OC曲线 下 面积 0 . 8 5 3 .较 单 独 诊 断 效 能 提
3 讨 论
恶 性肿 瘤 的 主要 生 物 学 特征 是 增 殖 、侵 袭 和
高 。但 由于病 例 数少 。 还需 要进 一 步扩 大样 本量 来 证实 F D P含量 与浆 膜 腔 中转移 肿 瘤分 化 程度 的关
泌的 C E A. 其 含量 与肿 瘤 细胞数 量 相关 。 C E A含 量 明显 增 高提 示 有 远处 转 移 或肿 瘤 晚期 l 7 I 8 1 纤 溶 高 癌 容 易 从原 发 灶 游离 出癌 细胞 . 导 致 转 移 增加 。 且
积液 的鉴别诊断价值[ J 】 . 临床检验杂志, 2 0 0 7 , 2 5 (  ̄: 2 8 5 — 2 8 9 .
0 . 7 8 3和 0 . 7 4 1 . 这表 明浆膜 腔 F D P与 C E A一 样 适
感度 为 0 . 7 4 、 特异 度为 0 . 7 2 临 床鉴别 良恶性 浆膜 腔积液时 . 常用 的 C E A参 考 值 为 1 5 1 .  ̄ g / m1 . 该 值 对
应 的敏感 度为 0 . 3 0 1 、 特 异度 为 0 . 9 3 9 。
显著增高 , 且 与 肿 瘤 细胞 的侵 袭 转 移 相 关 。 浆 膜 腔 积液 F D P含 量 可作 为肿 瘤及 肿 瘤 转移 的 辅助 诊 断 指 标
参考文献
【 1 ] 杨淳, 汤荣华, 刘 春 生, 等. 8 9 0例 凝 血 常 规 及 血 浆 纤 维 蛋 白 降 解 产 物 检 测结 果 的 临床 分 析 [ J 】 . 血栓与止血学, 2 0 1 1 , 1 7 ( 0 1 ) : 2 6 — 2 8 . 【 2 ] 铁依, 焦正葵, 张 玉五, 等. 恶 性 肿 瘤 患 者 血 清 纤 维 蛋 白( 原) 降 解 产 物 含 量 测 定 与 活 血 化瘀 治 疗 探 讨 [ J ] . 中西 医 结 合 杂 志, 1 9 8 5 , 5 ( 2 ) :

免疫抑制法测定非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因分析

免疫抑制法测定非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因分析

免疫抑制法测定非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因分析摘要】目的:探讨用免疫抑制法测非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因。

方法:用抗CK-M亚基抗体抑制血清中CK-M亚单位的活力,测定B亚基酶活力,即免疫抑制法。

结果:检测56例非心肌梗死患者血清标本中,CK活力相对较低,CK-MB>CK,CK-MB升高。

结论:用酶免疫抑制法测定非心肌梗死患者CK-MB时,如果CK-MB>CK,可能是血清中CK-BB,CK-MM增高以及巨CK的存在,造成CK-MB的升高。

【关键词】免疫抑制法;CK;CK-MB;全自动生化分析仪【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2015)23-0124-02肌酸激酶主要存在心肌,骨骼肌和脑组织中,有三种形式的同工酶:CK-MM,CK-MB和CK-BB。

其中CK-MB是心肌损伤特异而敏感的指标,曾被认为是诊断心肌梗死和心肌炎的金指标[1],并利用其增高的时间与梯度观察患者的病情变化,治疗效果及愈后。

1.材料1.1分析对象:病例来自我院2013年1月至2014年1月住院非心肌梗死患者56例,且标本检测的结果都是CK-MB>CK.1.2仪器:TOSHIBA 20021.3试剂:利德曼CK, CK-MB试剂.2.方法CK-MB检测方法在生化方面广泛应用的是免疫抑制法,即在试剂中加入CK-MM的抑制体(抗体),通过抗体与M亚基结合以达到抑制M亚基的活性而不抑制B亚基的活性,然后采用连续监测法测定总肌酸激酶的活性,结果乘以2既得CK-MB活性,此方法是基于CK-BB的含量极微,可忽略不计。

3.结果对56例非心肌梗死患者血清做CK-MB>CK的分析,CK活力相对较低,CK-MB 升高。

其中肿瘤患者36例,腹泻患者13例,肝硬化患者4例,其它疾病的有3例。

4.讨论测定CK-MB的方法有多种,目前临床实验中常规使用的有免疫抑制法,免疫质量法,电泳法和金标法等。

免疫抑制法测定血清CK-MB活性

免疫抑制法测定血清CK-MB活性

免疫抑制法测定血清CK-MB活性
张子宽;李晓梅
【期刊名称】《铁道医学》
【年(卷),期】1991(19)1
【摘要】血清肌酸激酶同功酶Ⅱ(CK-Ⅱ)、心肌型肌酸激酶同功酶(CK-MB)活性测定方法有多种,但大多操作繁、需时长,或需特殊设备,或难于精确定量。

本文介绍用免疫抑制法测定血清CK-MB活性,操作简单,所需时间短,敏感性高,特异性强;精密性好,线性范围宽,试剂和标本用量少,适于常规开展,特别适于急诊标本测定。

【总页数】2页(P53-54)
【关键词】免疫酶技术;磷酸肌酸;同功酶
【作者】张子宽;李晓梅
【作者单位】郑州铁路中心医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R446.6
【相关文献】
1.免疫抑制法制定血清CK-MB活性假性增高47例分析 [J], 李伟中;李杨
2.免疫抑制法测定血清CK-MB致结果偏高的原因分析 [J], 张华;闫福堂;袁军;任健康;吕晓丽;胡淑玲;马娟;郑霄
3.免疫抑制法测定肝脏病患者血清mAST活性的临床意义 [J], 陈小倩;孙志强;杨静;郭静霞;刘立明;毛远丽
4.免疫抑制法测定血清CK—MB活性假性增高的原因及鉴别 [J], 李伟中;李杨;等
5.电化学发光法与酶法测定血清CK-MB含量与活性的比较 [J], 于瑞宝;郭少磊;周珍娟
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CKMB假性升高原因

CKMB假性升高原因

1.第一种假性CK-MB升高的原因,即血液中CK-BB不等于零,见于引起脑组织损伤的各种疾病,如脑损伤,脑梗塞,使脑组织中的CK-BB大量释放入血,这时用免疫抑制方法测定CK-MB 时,血液中大量的CK-BB存在,使得测定的B亚基结果乘以2当做CK-MB结果,当然会出现使CK-MB假性大于CK的结果。

2.第二种假性CK-MB升高的原因是巨CK-1。

巨CK-1实际上使CK同工酶(抗原)与自身抗CK抗体(免疫球蛋白)形成的一种大分子复合物。

巨CK-1在老年妇女中常见,在健康人的血清中亦检出了它的存在。

目前认为,巨CK-系一种良性现象,和特定疾病无关。

利用特异性抗体进行研究证实,巨CK-1最多见的是CK-BB与IgG或IgA的复合物,少数是CK-MM与IgG或IgA的复合物。

巨CK-1导致假性CK-MB升高的原因与第一种情况相似。

3.第三种假性CK-MB升高的原因是巨CK-2。

巨CK-2被认为是线粒体CK(CK-Mt)相互聚合而成的大分子的寡聚体复合物,存在于细胞线粒体膜上,线粒体崩解时进入血液。

CK-Mt与CK-M亚基抗原性不同,抗M亚基的抗体不能抑制其活性,因此测定的几乎是总CK的活性,然后结果再乘以2,当然会使CK-MB假性升高。

4.患者血清中可能存在对肌酸激酶同工酶免疫抑制法检测有干扰的巨球蛋白或肿瘤细胞分泌蛋白。

免疫表位相似性干扰在抑制性肿瘤病例中很常见,尤其在临床应用极多的CK-MB 检测中,故应在有不可接受数据出现时及时询问初步诊断及相关症状体征以排除此类干扰。

正常人群因心肌发育,故年龄越小酶水平越高,至青春期升高渐趋缓至成人水平。

如多数实验室平时只提供成人稳定的参考范围,而幼儿范围(CK95-258U/L、CK-MB33.5-60.2U/L、LDH275-365U/L、AST10-60U/I)与成人相距较大。

35例恶性肿瘤患者血清CK-MB异常增高原因分析

35例恶性肿瘤患者血清CK-MB异常增高原因分析血清中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)、肌酸激酶(CK)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)由于在心肌组织中含量丰富,一直是衡量心肌受损的指标,特别是CK-MB被认为是诊断急性心肌梗死特异性很强的指标[1]。

我们在2008-2010诊治的35恶性肿瘤患者血清中CK-MB异常增高,现报道如下,并对其中原因进行初步分析。

1 对象和方法1.1对象本组男20例,女15例,年龄35-78岁,平均56岁。

原发性肺癌15例;肝癌4例;乳腺癌11例;结肠癌4例;食道癌1例,均经病理组织学确诊,经心电图和心脏彩超检查排除心脏严重疾患。

1.2方法入院当天或次日晨起抽取空腹静脉血,离心分离血清后立即上机检测。

AST、LDH、a-HBDH试剂盒为浙江东瓯公司生产,CK试剂盒为美国波音特公司生产,CK-MB试剂盒为OLYMPUS公司和浙江东瓯公司生产,所用质控品分别为OLYMPUS和RANDOX公司提供。

仪器为日本产OLYMPUS AU400全自动生化分析仪。

AST、LDH、a-HBDH、CK测定均为速率法。

CK-MB测定为免疫抑制法。

2 结果见表1。

表1 恶性肿瘤35例心肌酶增高的情况3 讨论血清CK和CK-MB主要用于急性心肌梗死等心脏病的诊断及动态监测,近年有学者认为也有助于某些恶性肿瘤的诊断和疗效评价。

本组10例CK异常增高(170+74) U/L,7例CK-MB异常增高(78+44)U/L(正常参考值<18 U/L),这些患者伴随LDH、Q-HBDH及AST的异常增高,有些甚至达到正常值上限的6倍以上,其原因是恶性肿瘤可由于肿瘤细胞恶性增殖和坏死而引起血清LDH及α-HBDH增高[1]。

分析肿瘤患者 CK-MB异常增高的原因:肌酸激酶在细胞质内共有三种同工酶,即CK-MM、CK-MB、CK-BB。

CK-MM主要存在于骨骼肌中。

免疫抑制法测定CK-MB活性假性增高的原因分析

免疫抑制法测定CK-MB活性假性增高的原因分析【摘要】的:通过对CK-MB异常升高的病例进行分析,探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因及实验对策。

方法:对本院2014年1月~12月临床上遇到的48例CK-MB异常升高的病例进行回顾性分析,探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因。

结果:48例非心肌梗死的病例中,出现CK-MB/CK﹥30%的有24例,出现CK-MB大于CK即比例倒置的有24例。

结论:CK-MB异常升高出现最多的是在肿瘤患者当中,其次是儿科患者,提示在一些恶性肿瘤,婴幼儿患者体内可能存在异常干扰成分。

【关键词】肌酸激酶;活性假性增高;原因分析及临床意义[Abstract]Objective:To analyze the abnormal elevation of CK-MB cases,investigate immunosuppressive activity of CK-MB assay falsely elevated causes and countermeasures experiment.Methods:The hospital in January 2014 ~ 48 cases of abnormal elevation of CK-MB in patients experiencing clinically December were retrospectively analyzed to explore falsely elevated CK-MB activity detected by reason immunosuppression.Results:48 cases of non-myocardial infarction patients,the emergence of CK-MB / CK> 30% of the 24 cases,the emergence of CK-MB is greater than the proportion of inversion of CK namely 24 cases.Conclusion:CK-MB is the most frequent abnormal increase in cancer among patients,followed by pediatric patients,suggesting that in some malignant tumors,may interfere with abnormal body composition of infant patients. [Key words]creatine kinase;false increase activity;Cause Analysis and Clinical Significance正常人CK-MB主要存在于心肌细胞内,血清中CK的存在形式主要是CK-MM,只有少量的CK-MB,不超过总CK的5%,AMI时最高也不超过30%。

CK-MB测试结果高于总CK的值的原因

CK-MB测试结果高于总CK的值的原因
目前常用的检测CKMB的方法是免疫抑制法,出现CKMB>CK 的情况就是由这种方法的检测原理造成的。

在人体中正常情况下CKBB很少,可忽略,而免疫抑制法就是建立在忽略CKBB的基础上的。

即是用抗体抑制M亚基,所以CKMM会失去活性,而CKMB 活性失去一半。

这样测出的CK活性实际就是CKMB的一半,所以CKMB活性应该为测定的2倍。

但如果CKBB存在就会使结果偏高,即测定的CKMB活性=CKMB+2CKBB。

如果CKBB>CKMM,由于结果要乘2,也就是说2CKBB+CKMB>CKBB+CKMB+CKMM,即测定得的CKMB活性>CK活性。

所以CKMB>CK是可能的的,但CKMB>2CK是不可能的
目前已经有检测CK-MBmass的质量法,其原理是利用单克隆抗体技术和全自动ELISA的方法直接检测CK-MB的浓度,所以可以从根本上解决酶法的不足。

血清CK—MB活性大于总CK活性的原因初探及处理

血清CK—MB活性大于总CK活性的原因初探及处理【摘要】本文分析了磷酸肌酸激酶(CK)同工酶CK-MB活性大于总CK 活性的原因,并给出了相关的处理方法。

标签:血清CK-MB;活性;CK;原因分析;处理磷酸肌酸激酶(CK)主要存在于骨骼肌、心肌和脑组织中,其同工酶有CK-MM、CK-MB、CK-BB三种,其中CK-MB是心肌损伤的特异而敏感的指标,曾被认为是诊断心肌梗死和心肌炎的金指标。

一般情况下正常人血清中CK-MM 占较大比例,CK-BB含量极少可忽略不计,只有少量CK-MB,CK-MB/CK比例小于5%,绝对值不超过25U/L。

如若CK-MB/CK比例大于10%,则考虑急性心肌梗死(AMI)的可能;但在实际工作中我们常发现有CK-MB/CK比例增高>30%甚至倒置而无AMI依据的病例,给临床诊断带来很大困惑甚至误诊。

下面我们就临床上遇到的这些病例,参考一些资料报道,对其中的原因进行初步的分析探讨。

1 材料与方法1.1 一般资料血清样本采自我院2011年住院非心肌梗死患者27例,其中儿科患者3例,年龄2-12岁;其余为成人患者,年龄20-85岁。

1.2 仪器与试剂贝克曼AU-2700全自动生化分析仪;美国Helena公司REP 快速电泳系统(苏北医院)。

CK及CK-MB试剂为上海科华公司产品;血清同工酶电泳试剂盒为配套试剂。

1.3 方法总CK和CK-MB活性测定:CK为速率法,CK-MB为免疫抑制法,均严格按试剂盒说明操作,电泳采用琼脂糖凝胶法。

1.4 统计分析用SPSS11.0统计软件进行数据分析,数据以均值±标准差(±s)表示。

2 结果27例非心肌梗死病例中,CK、CK-MB活性检测结果及CK-MB占总CK活性百分比见表1。

27例血清标本经同工酶电泳鉴定后,电泳图谱上发现CK-MB 活性实际为正常,但出现脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)或异常CK同工酶带,具体见表2。

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免疫抑制法测定CK-MB活性假性增高的原因分析发表时间:2016-04-15T14:25:50.793Z 来源:《航空军医》2015年18期作者:张凤华[导读] 江苏射阳县人民医院通过对CK-MB异常升高的病例进行分析,探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因及实验对策。

江苏射阳县人民医院江苏盐城 224300【摘要】的:通过对CK-MB异常升高的病例进行分析,探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因及实验对策。

方法:对本院2014年1月~12月临床上遇到的48例CK-MB异常升高的病例进行回顾性分析,探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因。

结果:48例非心肌梗死的病例中,出现CK-MB/CK﹥30%的有24例,出现CK-MB大于CK即比例倒置的有24例。

结论:CK-MB异常升高出现最多的是在肿瘤患者当中,其次是儿科患者,提示在一些恶性肿瘤,婴幼儿患者体内可能存在异常干扰成分。

【关键词】肌酸激酶;活性假性增高;原因分析及临床意义[Abstract]Objective:To analyze the abnormal elevation of CK-MB cases,investigate immunosuppressive activity of CK-MB assay falsely elevated causes and countermeasures experiment.Methods:The hospital in January 2014 ~ 48 cases of abnormal elevation of CK-MB in patients experiencing clinically December were retrospectively analyzed to explore falsely elevated CK-MB activity detected by reason immunosuppression.Results:48 cases of non-myocardial infarction patients,the emergence of CK-MB / CK> 30% of the 24 cases,the emergence of CK-MB is greater than the proportion of inversion of CK namely 24 cases.Conclusion:CK-MB is the most frequent abnormal increase in cancer among patients,followed by pediatric patients,suggesting that in some malignant tumors,may interfere with abnormal body composition of infant patients.[Key words]creatine kinase;false increase activity;Cause Analysis and Clinical Significance正常人CK-MB主要存在于心肌细胞内,血清中CK的存在形式主要是CK-MM,只有少量的CK-MB,不超过总CK的5%,AMI时最高也不超过30%。

在AMI时CK和CK-MB往往同时升高,CK的水平会显著高于CK-MB。

但在日常的工作中我发现用免疫抑制法测定CK-MB有假性增高的现象,即少数临床标本CK的结果在正常范围内,而CK-MB却明显偏高甚至会出现CK-MB大于CK却无AMI的依据,与临床体征明显不符,因此给我们检验人员和临床医生造成一定的困扰,并且干扰了疾病的正确诊断和治疗。

从理论上来说,CK-MB的活性是不可能大于总CK活性的。

1 资料和方法1.1 一般资料 CK-MB异常升高的患者48例,心电图和临床症状未显示有心肌梗死,其中13例为儿科患者,其余35例为成人患者。

1.2 仪器与试剂使用东芝TBA-120FR全自动生化分析仪,正常进行维护和保养,性能良好;CK和CK-MB试剂均由上海科华生物有限公司提供,各项参数设置准确,试剂均在保质期内。

1.3 方法 CK为速率法,CK-MB为免疫抑制法,严格按试剂盒说明书操作,采集的血1h内分离血清,室温避光放置,避免溶血,4h内完成测定。

2 结果48例非心肌梗死的病例中,出现CK-MB/CK﹥30%的有24例,出现CK-MB大于CK即比例倒置的有24例,不同的疾病类型和具体例数见下表。

3 讨论肌酸激酶(CK)广泛分布于体内需要大量能量供应的组织内,如心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体,是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要的能量调节酶。

CK是一种二聚体,由M和B两个亚基组成,并以此分为三个最基本的同工酶:肌肉型(CK-MM)、脑型(CK-BB)、杂化型(CK-MB)。

这三种同工酶分子量相同,催化相同的化学反应,但其分子结构和组织来源不同:CK-BB主要存在于脑组织、胃肠道、子宫平滑肌中,脑组织中几乎都是CK-BB;CK-MM存在于各种肌肉组织中,骨骼肌中(除外腓肠肌)98%-99%为CK-MM;而CM-MB来源于心肌,心肌中CK-MB约占CK总量的15%-25%。

在正常人体血清中主要是CK-MM和少量CK-MB,几乎不见CK-BB[1]。

CK-MB是临床应用最广泛的心肌损伤标志物,曾被认为是诊断急性心肌梗死(AMI)和心肌炎的金指标[2]。

在心肌坏死症状发作4-5小时达正常上限,12-24小时达高峰,72小时逐步恢复。

目前基层实验室多采用免疫抑制法测定CK-MB的活性,对不同病程的心肌病提供较特异性诊断。

由于CM-BB在正常人体血清中的含量极微,免疫抑制法的原理就是建立在CK-BB含量可以忽略不计的基础上,用抗CK-M单体的抗体抑制M亚基活性,CK-MM就全部失去活性,而CK-MB活性失去一半,这样测出的CK活性实际就是CK-MB的一半,所以CK-MB活性应该为测定的2倍。

用免疫抑制法检测CK-MB活性迅速、简便、省时,有较高的敏感性,但是影响因素和缺陷也很多。

从上述表中我们可以看出CK-MB异常升高出现最多的是在肿瘤患者当中,其次是儿科患者,提示在一些恶性肿瘤,婴幼儿患者体内可能存在异常干扰成分。

我科室由于实验条件有限,具体干扰成分的确认实验无法进行,现我将部分文献资料提示的干扰成分总结如下: 1.CK-BB的干扰:免疫抑制法检测CK-MB活性的原理是把标本中的CK-BB忽略不计掉,从这个原理我们不难分析如果血清中存在多量CK-BB(如脑损伤,脑组织中有大量的CK-BB释放入血),其CK-BB中的B亚基活性同CK-MB中的B亚基一起检测后乘以2,会导致测定的CK-MB活性大于CK活性[3]。

有研究发现CK-BB是CK中唯一随年龄变化的CK亚型,且在一周岁以内的婴幼儿中水平最高。

对于儿童来说,其B亚基在总CK 中的活性较成人高,因此采用免疫抑制法测定儿童CK-MB的绝对活性在总CK中的比例高于成人,甚至可能出现倒置现象。

2.巨CK的干扰:巨CK是巨分子酶,比正常情况下相应的酶有着高分子团。

有文献报道在体质较差的人群、妇女及老人体内存在着巨CK1,巨CK1是一种CK同工酶与其自身抗体的复合物。

而在一些恶性肿瘤、肝硬变患者体内中可能存在巨CK2,巨CK2是线粒体CK相互聚集合成的大分子寡聚体复合物。

由于巨CK1和巨CK2中M亚基的活性均不受抗CK-M单体的抗体抑制,因此测得的CK-MB结果都会假性增高,甚至高于CK。

3.溶血的干扰:测定CK-MB活力尽量不用溶血标本。

标本溶血可导致红细胞释放腺苷酸激醇(AK)催化ADP反应生成ATP,引起NADPH吸光度的改变,导致CK与CKMB结果假性偏高。

CK-MB的结果是CK-B乘以2,假性偏高较CK更明显,同时CK-MB参考范围较小,可能出现CK-MB大于CK,CK结果在正常范围内,而CK-MB结果却明显偏高。

4.其他部分O型或B型血肿瘤患者的免疫系统出现混乱,肿瘤刺激产生的免疫球蛋白会作为底物或辅酶参与免疫抑制法CK-MB试剂反应,从而也会引起CK-MB检测值大于CK[4]。

用免疫抑制法检测血清CK-MB活性,观察其活力单位及与CK的比值关系作为诊断AMI的相对特异性指标、预测冠状动脉再通的治疗效果和观察病情变化等,已被临床广泛应用。

CK-MB作为心肌梗死标志物有很多优点,能快速、有效、经济、准确地诊断AMI。

由于CK-MB 具有上述优点,所以对CK-MB测定方法的研究更是不断发展,经历了从早期的离子交换色谱和电泳法,到后来的免疫抑制法,至新一代的方法用单克隆抗体测量CK-MB的质量[5]。

由于免疫抑制法检测CK-MB具有迅速、简便的特点,可上全自动生化仪操作而被广大医院采用。

在绝大多数的情况下使用该法测定的CK-MB的结果是正确的,但该法易受CK-BB及巨CK成分的干扰而影响测定结果,使CK-MB假性增高,易误导临床诊断,有条件的实验室应做进一步的确诊检查试验。

进一步的鉴定方法有:①琼脂糖凝胶电泳分析。

将可疑血清进行琼脂糖凝胶电泳结合荧光染色扫描分析,正常CK电泳图谱主要是两条区带,从阳极到阴极分别是CK-MB、CK-MM,CK-BB位于阳极侧近白蛋白区域,巨CK1位于CK-MM与CK-MB之间,巨CK2位于CK-MM的阴极侧。

②热失活法。

将可疑血清置于45℃20min测定CK活性,发现CK-BB和CK-MB几乎完全失活,而CK不受影响。

③免疫学结合电泳法。

将可疑血清先与抗人IgG或IgA的抗血清进行混合,置4℃过夜,离心取上清液进行CK同工酶电泳,观察与Ig反应前后电泳区带的变化。

巨CK2无任何变化,但巨CK1则不同。

只要与相应的抗IgG或IgA抗血清发生反应后,原有的异常带减弱或消失,则提示有巨CK1的存在,其形成与该免疫球蛋白有关。

④免疫学测定。

用FEIA或CLIA等技术直接测定CK-MB质量,观察有无非CK-MB存在。

目前建议在AMI的诊断中用肌钙蛋白如cTnI/cTnT,如用CK-MB则建议测定CK-MB质量,而不要用免疫抑制法进行测定。

因此,我认为在实际工作中若发现用免疫抑制法检测CK-MB活性假性增高时,切不可盲目的发出报告,不能认为结果无意义而私自将结果改为CK高于CK-MB,我们应慎重考虑并如实报告临床,及时与临床医师取得联系,有条件的话检测CK-MB的质量或电泳分析CK同工酶的不同组分含量,也可计算CK-MB/CK比值,CK-MB/ CK比值不在5%-30%范围以内,则可能是AMI以外的原因引起的偏高。

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