实验一 水体富营养化程度的评价

实验一水体富营养化程度的评价

一、实验目的和要求

1、掌握总磷、叶绿素-a的测得原理及方法。

2、评价水体的富营养化状况。

二、实验原理和方法

富营养化(eutrophication)是指在人类活动的影响下，生物所需的氮、磷等营养物质大量进入湖泊、河口、海湾等缓流水体，引起藻类及其他浮游生物迅速繁殖，水体溶解氧量下降，水质恶化，鱼类及其他生物大量死亡的现象。在自然条件下，湖泊也会从贫营养状态过渡到富营养状态，沉积物不断增多，先变为沼泽，后变为陆地。这种自然过程非常缓慢，常需几千年甚至上万年。而人为排放含营养物质的工业废水和生活污水所引起的水体富营养化现象，可以在短期内出现。水体富营养化后，即使切断外界营养物质的来源，也很难自净和恢复到正常水平。水体富养化严重时，湖泊可被某些繁生植物及其残骸淤塞，成为沼泽甚至干地。局部海区可变成“死海”，或出现“赤潮”现象。

植物营养物质的来源广、数量大，有生活污水、农业面源、工业废水、垃圾等。每人每天带进污水中的氮约50 g。生活污水中的磷主要来源于洗涤废水，而施入农田的化肥有50%～80%流入江河、湖海和地下水体中。

许多参数可用作水体富营养化的指标，常用的是总磷、叶绿素-a含量和初级生产率的大小（见表7-1）。

1、磷的测定

在酸性溶液中，将各种形态的磷转化成磷酸根离子(PO43- )。随之用钼酸铵和酒石酸锑钾与之反应，生成磷钼锑杂多酸，再用抗坏血酸把它还原为深色钼蓝。砷酸盐与磷酸盐一样也能生成钼蓝，0.1 μg/mL的砷就会干扰测定。六价铬、二价铜和亚硝酸盐能氧化钼蓝，使测定结果偏低。

三、仪器设备及试剂

1、仪器

(1) 可见分光光度计。

(2) 移液管：1 mL、2 mL、10 mL。

(3) 容量瓶：100 mL、250 mL。

(4) 锥型瓶：250 mL。

(5) 比色管：25 mL。

(6) BOD瓶：250 mL。

(7) 具塞小试管：10 mL。

(8) 玻璃纤维滤膜、剪刀、玻棒、夹子。

2.试剂

(1) 过硫酸铵（固体）。

(2) 浓硫酸。

(3) 1 mol/L 硫酸溶液。

(4) 2 mol/L 盐酸溶液。

(5) 6 mol/L氢氧化钠溶液。

(6) 1%酚酞：1 g酚酞溶于90 mL乙醇中，加水至100 mL。

(7) 丙酮:水（9:1）溶液。

(8) 酒石酸锑钾溶液：将4.4 g K(SbO)C4 H4 O6 ·1/2H2 O溶于200 mL蒸馏水中，用棕色瓶在4℃时保存。

(9) 钼酸铵溶液：将20g (NH4 )6M O7 O24 ·4 H2 O溶于500 mL蒸馏水中，用塑料瓶在4℃时保存。

(10) 抗坏血酸溶液：0.1 mol/L（溶解1.76 g抗坏血酸于100 mL蒸馏水中，转入棕色瓶，若在在4℃时保存，可维持一个星期不变）。

(11)混合试剂：50 mL 2 mol/L硫酸、5 mL酒石酸锑钾溶液、15 mL钼酸铵溶液和30 mL抗坏血酸溶液。混合前，先让上述溶液达到室温，并按上述次序混合。在加入酒石酸锑钾或钼酸铵后，如混合试剂有浑浊，须摇动混合试剂，并放置几分钟，至澄清为止。若在4℃下保存，可维持1个星期不变。

(12) 磷酸盐储备液（1.00 mg/mL磷）：称取1.098 g KH2 PO4，溶解后转入250 mL容量瓶中，稀释至刻度，即得1.00 mg/mL磷溶液。

(13) 磷酸盐标准溶液：量取1.00 mL储备液于100 mL容量瓶中，稀释至刻度，即得磷含量为10 μg / mL的工作液。

四、实验步骤

1、标准曲线的绘制：分别吸取10 μg / mL磷的标准溶液0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00 mL于50 mL比色管中，加水稀释至约25 mL，加入1 mL 混合试剂，摇匀后放置10 min，加水稀释至刻度，再摇匀，10 min后，以试剂空白作参比，用1 cm比色皿，于波长880 nm处测定吸光度。

2、水样处理：水样中如有大的微粒，可用搅拌器搅拌2～3 min，以至混合均匀。量取100 mL水样（或经稀释的水样）2份，分别放入250 mL锥型瓶中，另取100 mL蒸馏水于250 mL锥型瓶中作为对照，分别加入1 mL 2 mol/L H2 SO4，3 g (NH4 )2 S2 O8，微沸约1 h，补加蒸馏水使体积为25～50 mL（如锥型瓶壁上有白色凝聚物，应用蒸馏水将其冲入溶液中），再加热数分钟。冷却后，加一滴酚酞，并用6 mol/L NaOH将溶液中和至微红色。再滴加2 mol/L HCl使粉红色恰好褪去，转入100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，移取25 mL至50 mL比色管中，加1 mL混合试剂，摇匀后，放置10 min，加水稀释至刻度再摇匀，放置10 min，以试剂空白作参比，用1cm比色皿，于波长880 nm处测定吸光度（若分光光度计不能测定880 nm处的吸光度，可选择710 nm波长）。

五、数据处理

1、总磷的测定

由标准曲线查得磷的含量，按下式计算水中磷的含量：

式中，P为水中磷的含量，g/L；

Pi为由标准曲线上查得磷含量，μg；

V为测定时吸取水样的体积（本实验V=25.00mL）。

六、思考题

1.水体中氮、磷的主要来源有哪些？

2.被测水体的富营养化状况如何？