第六章 外源性化学物的一般毒性作用

急性毒性试验除了计算受试物LD50外，还需要通过
观察实验动物的中毒症状判断受试物的毒作用性质， 推断中毒的靶器官。试验周期以2周为宜。
（七）观察指标
1、LD50 2、症状观察 3、病理学检查 4、其他指标观察
死亡与死亡时间 体重变化
四、急性毒性的分级与评价
为评价外源化学物急性毒性的强弱及对人类
剂量范围大约400～800mg/kg。

n 1
b a
5 1
800 1.2 400
以各组公比数计算每组染毒的剂量 a=400 mg/Kg aγ=400×1.2=480 mg/Kg aγ2=400×1.22=576 mg/Kg aγ3=400×1.23=691 mg/Kg aγ4=400×1.24=829.44 mg/Kg 以此剂量作用于小白鼠，得出结果如下：
一、基本概念
急性毒性（acute toxicity）——是指机体一次接触或24小
时内多次接触外源化学物之后所引起的快速剧烈的 毒效应。包括一般行为、外观及形态改变，甚至死 亡。
急性毒性试验（acute test）——是指一次给予或24小时
内多次给予受试物后，短时间内动物所产生的毒性 反应。
二、急性毒性试验目的
加并贮留，此现象称化学物
的蓄积作用。
积试验。
二、蓄积毒性试验方法及其评价
蓄积毒性试验是检测化学物蓄积性大小的试
验，并可为慢性毒性试验做准备。
常用的试验方法有蓄积系数法及生物半衰期
法。
（一）蓄积系数法
蓄积系数(K)是指多次染 试验常以死亡为观察的
毒使半数动物出现效应 的总剂量(ED50（n）)与1 次染毒的半效量(ED50 （1）)之比值，即：
定期递增剂量法染毒剂量表
接触天数 1～4d 5～8d 9～12d 13～16d 17～20d 2l～24d 25～28d
每天接触剂量(LD50)
0.1
0.15
0.22
0.34
0.50
0.75
1.12
四天接触总剂量 (LD50)
0.4
0.6
0.9
1.4
2.0
3.0
4.5
累积接触总剂量 (LD50)
0.4
完全则毒效应程度上有差别，一般根据K对蓄积性
进行估计。
K＜1：高度蓄积； 1≤K ＜3：明显蓄积；
3≤K
＜5：中等蓄积； K≥5：轻度蓄积。
K越大，蓄积毒性越弱。反之亦然。
1、固定剂量法
固定剂量法为Kagan和Stankevic(1964) 提出，它采
用先测出1次染毒的LD50(即为LD50 (1))，然后对另一 组动物每天给予l/10 LD50 (偶尔有用1/20 LD50 )直至 半数动物死亡为止，此时的总剂量即为LD50 (n)。如
胃染毒，要求试验前要对动物禁食。大鼠应 过夜禁食，小鼠应禁食4小时。
3、各剂量组动物数及实验动物分组
急性毒性试验中每个剂量组的动物数，小鼠不少于
10只，大鼠6～ 8只，家兔4～ 6只。
实验动物分组采用随机分组。
4、实验动物喂养环境
试验动物喂养室室温控制在（22±3）℃，家
兔可控制在（20±3）℃，无贼风。
组别 1
剂量 mg/Kg 400
动物数 10
死亡数 0
死亡率p 0
存活率q 1.0
2
3 4
480
576 691.2
10
10 10
2
5 7
0.2
0.829.44
10
10
1.0
0
计算logLD50=Xm－d(Σp－0.5) Xm：最大剂量的对数 d：相邻剂量比值的对数 Σp：各组死亡率总和 Xm=log829.44=2.9188 d=log1.2=0.0792 Σp=0+0.2+0.588+0.7+1.0=2.4 代入公式：logLD50=2.9188－0.0792×（2.4－0.5）=2.76832 查反对数得出LD50=log-12.76832=586.57mg/Kg 求logLD50标准误“S”
＞1050克
（引自《食品安全性毒理学评价程序和方法》，GB15193.1～15193.19-94）
外源化学物急性毒性分级(WHO)
6只大鼠吸入4 大鼠一次 小时死亡2～4 经口LD50 毒性分级 只的浓度(ppm) (mg/kg) (mg/kg)
兔经皮LD50 (mg/kg)
对人可能致死剂量 g/kg ＜0.05
第六章 一般毒性作用及其试验与评价方法
一般毒作用（general toxicity）：指外源化学
物在一定的剂量范围内，经一定的接触时间 按照一定的接触方式，对生物有机体产生的 综合毒性效应。又称为基本毒性（basic toxicity ）。
根据接触毒物的时间长短可分为：急性毒性、
亚慢性毒性和慢性毒性。相应的试验称为急 性毒性试验、亚慢性毒性试验和慢性毒性试 验。
剂量组的设臵应依据预试验结果而定，一般
最高最低两剂量组间差别较大者，则组数即 每组动物数应较多。 最高最低剂量相差2～4倍，至少设3～4组； 相差4～9倍者，至少应设4～5组；相差10倍 以上者，至少应设6个组。 通常最高最低剂量相差多在10倍以内，以设 臵5-7组为宜。
（六）试验周期
0.05～
(g/60kg) 0.1
3
剧毒
高毒
＜1
1～
＜10
10～
＜5
5～
中等毒
低毒 微毒
50～
500～ 5000～
100～
1000～ 10000～
44～
350～ 2180～
0.5～
5～ ＞15
30
250 ＞1000
结果判定： 1.LD50或7天喂养试验最小有作用量小于人的可 能摄入量的10倍者，则放弃该受试物用于食 品，不再继续其他毒理学试验。 2.如大于10倍，可进入下阶段试验，为慎重起 见，试验应进行重复试验，或用另一种方法 进行验证。
SlogLD50 d pq 0 1.0 0.2 0.8 0.5 0.5 0.7 0.3 1.0 0 0.0792 0.0792 0.062 0.0197 n 10 10 10 10 10
LD50的95%可信限=log-1(logLD50±1.96×SlogLD50) = log-1(2.76832±1.96×0.0197) =536.6857－567.0318
（2）正式试验的剂量设计 计算组距或公比：

γ:：各组公比数
n：剂量组数 a：最低致死量 b：最高致死量
n 1
b a
logLD50=Xm－d(Σp－0.5)
Xm：最大剂量的对数 d：相邻剂量比值的对数
Σp：各组死亡率总和
例如——每组各小白鼠给予同一种剂量，灌胃染毒，
3～4组，每组3只，各剂量组分别是1、10、100 、 1000 mg/kg，灌胃或腹腔注射染毒。若某组死亡率 为3/3，其前一组死亡率为2/3或1/3，则该组剂量就 是100%致死剂量。同样的方法找出LD0 。如果死 亡率没有获得上述的理想剂量范围，则可依据实际 情况将剂量提高或降低一个数量级继续进行预试验， 直至找出符合要求的最高和最低剂量范围为止。正 式试验按等比级数（1.2～1.5）在最高和最低剂量 范围内插上3～5个剂量组进行试验。
K 多次染毒半数效应总量 ED50(n) 一次染毒半数效应总量 ED50(1)
效应，此时：
K 多次染毒半数致死量 LD50(n) 一次染毒半数致死量 LD50(1)
如果受试物在体内物质蓄积或功能蓄积是完全的，
则多次给予的总剂量与一次给予同等剂量的毒性相 当，此时ED50（n）= ED50（1） ，即：K=1。若蓄积不
为了避免试验结果存在品系差异，最好选择
纯种动物。
性别选择以试验目的而定。 年龄一般选用初成年动物。大鼠180～240g
小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～ 250g、狗10～15kg。
实验动物应进行检疫，检疫期一般为5～7天，
剔除异常的动物。
染毒途径应模拟人可能的接触途径。经口灌
第二节 蓄积毒性作用及其评价
一、基本概念
蓄积作用（accumulation） 蓄积性的存在，无论是物
若一种外源化学物反复多次
质蓄积还是功能蓄积，都
进入机体而且其前次进入剂
量尚未完全消除，则这一化 学物在体内的总量将不断增
是长期接触毒物发生慢性
毒作用的重要条件。因此： 理论上应从蓄积试验作为 前提条件，以决定是否还 需要进一步做慢性毒性蓄
每笼动物数以不干扰动物个体活动及不影响
试验观察为度，必要时单笼喂养。
人工昼夜——早6点至晚6点进行12小时光照，
其余时间黑暗，常规饲料，自由饮水。
2、实验动物染毒方法 （1）经口（胃肠道）接触 灌胃 饲喂 吞咽胶囊 （2）经呼吸道接触：静式、动式 （3）经皮肤接触 （4）经注射途径染毒
501 ～ 5000 5001 ～ 15000 ＞15000
稍尝 500 ～ 4000 4000 ～ 30000
30000 ～ 250000 250000 ～ 500000 ＞500000
0.05 0.5 5
50 500 2500
稍尝， ＜7滴 7滴至1茶匙 1茶匙至35克
35 ～ 350克
350 ～ 1050克
的潜在危害程度，国际上提出了外源化学物
的急性毒性分级标准用以对急性毒性进行评
价。
我国食品毒理学中外源化学物经口毒性分级
相当于人的致死量 级别 大鼠口服LD50 mg/Kg mg/Kg 克/人 相当于体重70Kg人 致死剂量