底物浓度对特异性酯酶染色积分的影响
实验一底物浓度对酶促反应的影响
实验一 底物浓度对酶促反应的影响一、实验目的掌握底物浓度对酶活性的影响，了解碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase, AKP ）的Km 值的测定原理和方法，理解Km 值的意义。
二、实验原理在温度、pH 及酶浓度等恒定的条件下，底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。
当底物浓度较低时，酶促反应速度V 随底物浓度[S]的增高而显著加快，随着底物浓度渐高，反应速度加快程度渐小，当底物浓度增加到一定程度以上时，再增高底物浓度，反应速度亦不再增加，成为该条件下极限最大反应速度Vmax 。
底物浓度与反应速度的这种关系可以用下列米－曼（Michaclis-Menten ）氏方程式表示。
V=][]max [S Km S V 或Km=[S](VV max — 1)式中，Km 为米氏常数。
当V=Vmax/2时，则Km=[S]，即米氏常数是反应速度等于最大速度一半时底物物浓度的数值。
如图所示：Km [S]图1 底物浓度与酶促反应速度的关系Km 是酶的特征性常数，不同酶的Km 值不同，同一酶作用于不同底物的Km 值亦不同。
大多数纯酶的Km 值在0.01～100mmol/L 之间。
Km 值的测定在酶学研究中有重要的实际意义。
根据实验结果绘制上述直角双曲线，难以准确求出Km 和Vmax 值。
而用米曼氏方程式的下列变换式，则容易求得Km 及Vmax 值。
米曼氏方程式中各项皆采用倒数表示，则成为Lineweaver —Burk 氏方程式：V 1=max V Km ·][1S +max1V 如图所示：图2 Lineweaver —Burk 氏法作图求Km 值这是个上截式直线方程式。
V 1与S1为直线关系，如上图。
直线斜率为max V Km ，纵轴截距为max 1V ，横轴截距为－Km 1.据此可以测定不同浓度底物的反应速度，按V 1与S1关系作图而容易正确得出Km 值。
另有其他变换式，例如把上式两侧皆乘以[S]，则转换成Wilkinson 氏方程式。
高中生物必修一知识点③
课题17：物质跨膜运输的方式【课标要求】物质出入细胞的方式。
【考向瞭望】物质跨膜运输方式的探究、判断与应用。
【知识梳理】一、物质跨膜运输的方式：（一）被动运输：1、自由扩散：不需要载体和能量，如水、CO 2、O 2、甘油、乙醇等。
2、协助扩散：需要载体，但不需要能量，如红细胞吸收葡萄糖。
（二）主动运输：既需要载体协助，又需要消耗能量，如细胞吸收K ＋、Na ＋、Ca 2＋、氨基酸等。
（三）物质跨膜运输的方式说明生物膜结构特征是流动性，功能特性是选择透过性。
（四）大分子物质以胞吞和胞吐方式进出细胞，这与细胞膜的流动性有关，但不属于跨膜运输。
二、三种物质出入细胞方式的图例比较三、主动运输的意义：在细胞的生命活动过程中，主动运输起到了重要作用，它使细胞能主动地从外界吸收被选择的物质，供生命活动利用。
同样，细胞也能利用主动运输把新陈代谢产物排出细胞外。
总之，细胞通过主动运输，摄取、积累物质以及不断排出代谢废物，从而维持细胞组成成分的动态稳定，保证生命活动的正常进行。
四、影响跨膜运输的因素（一）影响自由扩散的因素：细胞膜内外物质的浓度差。
（二）影响协助扩散的因素：1、细胞膜内外物质的浓度差。
2、细胞膜上运载物质的载体数量。
（三）影响主动运输的因素：1、载体：是细胞膜上的一类蛋白质。
（1）载体具有特异性，不同物质的载体不同，不同生物细胞膜上载体的种类和数目也不同。
（2）载体具有饱和现象，当细胞膜上的载体全部参与物质的运输时，细胞吸收该载体运载的物质的速度不再随物质浓度的增大而增大。
2、能量：凡能影响细胞内产生能量的因素，都能影响主动运输，如氧气浓度、温度等。
（四）影响物质运输速度的曲线分析1、物质浓度（在一定浓度范围内）对运输速率的影响曲线：（1）自由扩散的运输方向是由高浓度一侧到低浓度一侧，其动力是两侧溶液的浓度差，在一定浓度范围内，随物质浓度的增大，其运输速率与物质浓度成正比。
（2）协助扩散或主动运输的共同点是都需要载体协助，在物质浓度较低时，随物质浓度的增大，运输速率也逐渐增大，到达一定物质浓度时，由于受膜上载体数量的限制，运输速率不再随浓度增大而增大。
底物浓度对酶促反应速度的影响曲线
底物浓度对酶促反应速度的影响曲线1. 序言底物浓度对酶促反应速度的影响曲线是一个在生物化学和酶动力学领域中备受关注的主题。
了解底物浓度对酶反应速度的影响可以帮助我们更好地理解生物体内酶的工作原理和代谢调控。
本文将对底物浓度对酶促反应速度的影响进行全面评估，并探讨其内在的机制。
2. 概述酶反应速度的定义酶是生物体内一类催化剂，能够加速化学反应的速率而不被消耗。
酶与底物之间的反应速度可以表征酶的活性。
酶促反应速度通常用反应物消失或产物生成的速率来描述。
酶反应速度受多个因素的影响，其中底物浓度是一个关键因素。
3. 底物浓度对酶促反应速度的影响曲线底物浓度对酶促反应速度的影响通常由一个叫做米氏动力学方程的曲线来描述。
米氏动力学方程由麦克斯韦-波尔兹曼方程推衍而来，其中底物浓度的增加将导致酶反应速度的增加，但增速将逐渐减缓。
这是因为酶的活性位点最初是空闲的，当底物与酶结合后，活性位点会被占用。
随着底物浓度的增加，活性位点逐渐被饱和，反应速度达到最大值，之后不再随底物浓度增加而增加。
4. 酶动力学参数的解释对于底物浓度对酶反应速度的影响曲线，通常会引入一些重要的酶动力学参数来解释。
其中最重要的参数是酶的最大反应速率（Vmax）和底物浓度为一半时的反应速率（Km）。
Vmax代表酶在饱和底物浓度下的最大催化能力，Km则表示底物浓度为一半时，酶反应速度的一半。
这两个参数可以通过拟合实验数据得到，进而通过计算来评估酶的活性和亲和力。
5. 底物浓度对酶反应速度的生理重要性了解底物浓度对酶反应速度的影响对于揭示生物体内代谢调控的机制具有关键意义。
在生物体内，不同底物的变化会引起底物浓度的波动，从而影响酶反应速度。
这种调控机制可以通过调节底物浓度来控制代谢途径的速率。
一些代谢疾病，如糖尿病，正是由于底物浓度的异常导致酶反应速率发生改变，从而引发一系列的病理生理变化。
6. 个人观点和理解对我而言，底物浓度对酶促反应速度的影响是一个既有理论又有实际应用价值的重要主题。
底物浓度对酶促反应速度的影响
7、利用上述结果， 即求出Vm与Km值。
定至微弱而持续的微红色。
4、在4分钟、8分钟时，分别取出10ml反
应液，加入2号、3号小三角瓶，同上操
作，记下耗去NaOH毫升数。
5、以滴定度（即耗去的NaOH毫升数）
对时间作图，得一直线，其斜率即初速 度为V40（相对于40g/L的酪蛋白浓
度）。
6、然后分别量取30g/L、20g/L、10g/L
底物浓度对酶促反应速度 的影响
实验目的
• 了解底物浓度对酶促反应的影响
• 掌握测定米氏常数Km的原理和方法
实验原理
• 酶促反应速度与底物浓度的关系可用米氏方 程来表示：
v
Km S
Vm S
v ── 反应初速度（微摩尔浓度变化/min）； Vm── 最大反应速度（微摩尔浓度变化/min）； [S] ── 底物浓度（mol/L）； Km── 米氏常数（mol/L）。
键水解。水解时有自由氨基生成，可用
甲醛滴定法判断自由氨基增加的数量而
跟踪反应，求得初速度。
实验器材
• 10～40g/L酪蛋白溶液（pH8.5）
• 中性甲醛溶液 • 标准0.1mol/L NaOH溶液。 • 胰蛋白酶溶液
实验步骤
1、取50ml三角瓶3个，加入5ml甲醛与1
滴酚酞，以0.1mol/L标准NaOH滴定至
1 Km 1 1 v Vm [ S ] Vm
• 于是实验时可选择不同的[S]，测对应的
v；以1/v对1/[S]作图，得到一个斜率
为Km/Vm的直线，其截距为－1/Km， 由此可以求得Km和Vm。
• 本实验以胰蛋白酶消化酪蛋白为例。
【精品】生物化学课后习题答案-第四章xt4
第四章酶化学 一、课后习题 1.判断对错。
如果不对，请说明原因。
（1） 生物体内具有催化能力的物质都是蛋白质。
（2） 所有的酶都具有辅酶或辅基。
（3） 酶促反应的初速度与底物浓度无关。
（4） 当底物处于饱和状态时，酶促反应的速率与酶的浓度成正比。
（5） 对于所有酶而言，Km值都与酶的浓度无关。
（6） 测定酶的活力时，必须在酶促反应的初速度时进行。
2.现有1g淀粉酶制剂，用水稀释1000ml，从中吸取0.5 ml测定该酶的活力，得知5min分解0.25g淀粉。
计算每克酶制剂所含的淀粉酶活力单位数。
（淀粉酶活力单位规定为：在最适条件下，每小时分解1g淀粉的酶含量为1个活力单位。
） 3.称取25mg蛋白酶配成25ml酶溶液，从中取出0.1ml酶液，以酪蛋白为底物，用Folin比色法测定酶活力，得知每小时产生1500ug酪氨酸;易取2ml酶液用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。
根据以上数据，解答以下问题。
（每分钟产生1pg酪氨酸的酶量为1个活力单位。
）（1）1mg酶液中所含的蛋白质量及活力单位； （2）比活力； （3）1g酶制剂的总蛋白含量及比活力。
4.当底物浓度[s]分别等于4、5、６和10Km时，求反应速率V相当于最大反应速度Vmax的几分之几？ 5.根据下列实验数据（表7-5），用Lineweaver-Burk作图法求;（1）非抑制反应下的Km和Vmax； （2）抑制反应下的Km和Vmax； （3）判断抑制作用的类型。
6.从某生物材料中提取纯化一种酶，按下列步骤进行纯化（表7-8）计算最后所得酶制剂的比活力，活力回收率和纯化倍数（纯化率）。
解析： 1.（1）不对，生物体内具有催化活性还有RNA酶。
（2）不对，只有结合酶有辅酶或辅基。
（3）不对，如果酶促反应的底物只有一种，当其他条件不变，酶的浓度也固定的情况下，一种酶所催化的化学反应速率与底物的浓度间有如下的规律：在底物浓度低时，反应速度随底物浓度的增加而急剧增加，反应速率与底物浓度成正比，表现为一级反应；当底物浓度较高时，增加底物浓度，反应速度虽随之增加，但增加的程度不如底物浓度低时那样显著，即反应速率不再与底物浓度成正比，表现为混合级反应；当底物浓度达到某一定值后，再增加底物浓度，反应速率不再增加，而趋于恒定，即此时反应速率与底物浓度无关，表现为零级反应，此时的速率为最大速率（Ｖmax），底物浓度即出现饱和现象。
底物浓度对酶促反应速度的影响
1/[S] 1/Vm
（林－贝氏方程）
2. Hanes作图法 在林－贝氏方程基础上，两边同乘[S]
[S]/V
[S]/V=Km/Vmax + [S]/Vmax
Km/Vm
-Km
[S]
Km与Vmax的意义
Km值 定义：Km等于酶促反应速率为最大反应速率一半时的底 物浓度。 意义： 1.Km是酶的特征性常数之一，只与酶的结构、底物 和反应环境（如，温度、pH、离子强度）有关， 与酶的浓度无关。
2.Km可近似表示酶对底物的亲和力；
3.同一酶对于不同底物有不同的Km值。
• Km最小的底物大多数是此酶的天然底物 如：己糖激酶对葡萄糖的Km 1.5mmol/L 对果糖的Km 所以葡萄糖为最适底物 • 一种酶对每一种底物都各有一个特定的Km 28mmol/L
V
Vmax
[S]
当底物浓度较低时 反应速度与底物浓度成正比； 反应为一级反应。
V
Vmax
[S]
随着底物浓度的增高 反应速度不再成正比例加速； 反应为混合级反应。
V
Vmax
[S]
当底物浓度高达一定程度 反应速度不再增加，达最大速度； 反应为零级反应
（一）米－曼氏方程式揭示单底物反应的 动力学特性 解释酶促反应中底物浓度和反应速率关 系的最合理学说是中间产物学说： E+S
推导过程
• 稳态：是指ES的生成速度与分解速度相等，即 [ES]恒定。
K1 ([Et]－[ES]) [S]＝K2 [ES] + K3 [ES]
整理得：
K2+K3 ([Et]－[ES])[S] (2) ＝ [ES] K1 K2+K3 令： ＝ Km （米氏常数） K1
影响酶促反应速度的因素
实践练习： 酶促反应的最适温度( ) 随时间延长而升高 是在某条件下，酶促反应速度最大时的温度 在人体内为50℃ 都不超过50℃
演讲完毕，感谢观看
实践练习： 简答题 影响酶促反应速度的因素有哪些？
（七）抑制剂对酶促反应速度的影响
1.不可逆性抑制
不可逆抑制剂与酶分子以共价键结合，使酶失活。（不能用透析立法去除）
① 有机磷化合物 有机磷杀虫剂能与胆碱酯酶的活性中心结合，使酶失活。
-Ser-OH
-Ser-O
P
O-R
O-R
O
P
O-R
O-R
O
X
胆碱酯酶
磷酰化胆碱酯酶（失活）
底物的消耗量
产物的生成量
单位时间
单位时间
或
v =
0 时 间
产 物
（二）酶浓度对反应速度的影响 v= k[E] （k为速度常数）
v
[S]
底物浓度对酶促反应速度的影响 底物浓度对酶反应速度的影响
呈现矩形双曲线（rectangular hyperbola）
温度（℃）
最适 温度
01
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅地阐述观点。
（六）激活剂对酶促反应速度
02
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅地阐述观点。
的影响
03
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅地阐述观点。
酶的激活剂：使酶由无活性
04
的物程度与下列那种因素无关（ ） A．作用时间 B．抑制剂浓度 底物浓度 酶与抑制剂的亲和力的大小
实践练习： 哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度（ ） 不可逆抑制作用 竞争性可逆抑制作用 非竞争性可逆抑制作用 抑制作用
霉菌毒素分解酶作用机理
霉菌毒素分解酶作用机理霉菌毒素分解酶是一类能够降解霉菌毒素的酶，具有广泛的应用前景。
本文将从霉菌毒素的危害、霉菌毒素分解酶的种类和作用机理等方面进行阐述。
一、霉菌毒素的危害霉菌毒素是由霉菌产生的一类具有毒性的化合物，广泛存在于食品、饲料、环境等各个领域。
霉菌毒素对人体和动物健康造成严重危害，可能引发急性或慢性中毒，甚至导致癌症、免疫抑制等疾病。
因此，有效降解霉菌毒素对于保障食品安全和动物健康至关重要。
二、霉菌毒素分解酶的种类目前已经发现的霉菌毒素分解酶种类较多，主要包括酯酶、氧化酶、水解酶等。
这些酶通过不同的反应途径将霉菌毒素分解为无毒或低毒的代谢产物，从而降低其对生物体的危害。
1. 酯酶酯酶是一类能够水解酯键的酶，对霉菌毒素的分解具有重要作用。
例如，黄曲霉毒素A（AFB1）是一种常见的霉菌毒素，可以通过酯酶的作用将其水解为无毒的代谢产物。
研究表明，不同来源的酯酶对AFB1的降解效果存在差异，因此选择合适的酯酶对于有效降解AFB1具有重要意义。
2. 氧化酶氧化酶是一类能够氧化有机物质的酶，对霉菌毒素的分解也具有重要作用。
例如，赤霉烯是一种常见的霉菌毒素，可以通过氧化酶的作用将其氧化为无毒或低毒的代谢产物。
研究表明，不同类型的氧化酶对赤霉烯的降解效果存在差异，因此选择合适的氧化酶对于有效降解赤霉烯具有重要意义。
3. 水解酶水解酶是一类能够水解化合物的酶，对霉菌毒素的分解同样具有重要作用。
例如，玉米赤霉烯醇（ZON）是一种常见的霉菌毒素，可以通过水解酶的作用将其水解为无毒或低毒的代谢产物。
研究表明，不同来源的水解酶对ZON的降解效果存在差异，因此选择合适的水解酶对于有效降解ZON具有重要意义。
三、霉菌毒素分解酶的作用机理霉菌毒素分解酶通过与霉菌毒素发生特定反应，使其分解为无毒或低毒的代谢产物。
其具体作用机理如下：1. 酶促反应霉菌毒素分解酶通过与霉菌毒素发生特定反应，使其发生结构改变或断裂，从而将其分解为无毒或低毒的代谢产物。
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较 ，一 ２ ８ ８ ７ Ｐ一 ０ ０ ６５。 ｔ ． １ ， ． ０
表 １
３组 底 物浓 度 Ｓ Ｅ积 分
３
讨
论
ｌ 组Ｓ ～３ Ｅ染 色 积 分 均 数 依 次 升 高 ，１ ０ｍＬ孵 育 液 里 氯
及 ２ ５ｍｇ氯 醋 酸 ＡＳＤ 萘 酚 （ 于 ０ ５ ｍＬ 二 甲 基 甲 酰 ． － 溶 ． 胺 ） 。取 每 例 患 者 骨 髓 片 ３张 ， ４ ℃ 甲 醛一 酮 缓 冲 液 ［］ ２ 经 丙 （Ｈ ．） ｐ ６ ６ 固定 １ｍｉ ， 洗 晾 干 ； 别浸 入 氯 醋 酸 Ａ － ｎ后 水 ］分 ＳＤ萘
（ ｌ ． 土 ５ ． ） （ ２ ． ± ６ ． ） 。结 论 适 当提 高底 物 浓 度 ， １ ３ １ ９ ３ 、１ ５２ ２ ８ 分 可提 高 Ｓ 染 色灵 敏 度 。 Ｅ 关键 词 ： 异 性 酯酶 ； 染 色 ； 积 分 ； 底 物 ； 固蓝 Ｂ 特 Ｂ盐 ； 白血病 Ｄ ： ０ ３ ６ ／． ｓ ． ６ ３４ ３ ． ０ １ ０ ． ５ ＯＩ １ ． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ７ — １ ０ ２ １ ． １ ０ ７ ， ｓ 文 献标 识 码 ： Ｂ 文章 编 号 ： ６ １８ ４ （ ０ １ ０ — １ ４０ １ ７ — ３ ８ ２ １ ） １０ １ — ２
ｌ 材 料 与 方 法
１ １ 一般 资 料 ．
慢 粒 急 变 期 （ ＭＬ Ｅ ） 特 发 性 血 小 板 减 少 Ｃ —Ｐ 、
性 紫 癜 （ＴＰ 、 性 粒 细 胞 白 血 病 未 分 化 型 （ ） 部 分 分 化 型 Ｉ ）急 Ｍ 及
（ ） 急性 粒 一 核细 胞 白血 病 （ ） 患 者 ３ 例 。 Ｍ２ 、 单 Ｍ 等 ｌ １２ 方 法 孵 育 液 配 制 ： ０ ０ ７ ｍ ｌＬ 磷 酸 盐 缓 冲 液 ． 取 ． ６ ｏ／
醋酸 Ａ － Ｓ Ｄ萘 酚 的 含量 ０ ２ ～２ｍｇ 染 色 结 果 （ 敏 度 ） 文献 ．５ ， 灵 与
Ｅｉ 相符 。结 果 说 明 氯 醋酸 Ａ ｌ不 Ｄ萘 酚浓 度 增 加 ， 固蓝 Ｂ 与 Ｂ 盐 耦 联 更 充 分 ， 分 （ 敏 度 ） 加 。１组 的 氯 醋 酸 ＡＳＤ萘 酚 积 灵 增 －
续表 １ ３组底 物 浓 度 Ｓ 积分 Ｅ
氯醋酸 Ａ － ＳＤ萘 酚 酯 酶 （ Ｅ 染 色 对 确 诊 急 性 粒 细 胞 白血 Ｓ） 病 具 有 重要 价 值 。但 Ｓ Ｅ染 色 灵 敏 度 不 如 过 氧 化 物 酶 染 色 。 故影响 Ｓ Ｅ染 色 的 多 种 因 素 值 得 细 致 研 究 。本 结 果 示 ３种 底 物浓度 Ｓ Ｅ染 色 积 分 确 实存 在 差 异 ， 文献 ［ ］ 相 符 ， 将 有 与 １不 先 关 情 况 报道 如 下 。
摘 要： 目的
３ １０） ４ ０ ０
探 讨 底 物 浓 度 对特 异 性 酯 酶 （ Ｅ 染 色积 分 的 影 响 。方 法 １ 患 者 中 ， 每 例 患 者 骨 髓 片 ３张 ， 别 浸 入 ３ Ｓ） 例 取 分
种 底 物 浓 度 孵 育 液 中 进 行 Ｓ 染 色 。 结 果 底 物 浓 度 ０ ２ 、 ． ２ ５ ｍｇ １ Ｅ ． ５ １ ０、 ． ／ ０ ｍＬ 的 Ｓ 染 色 积 分 均 数 分 别 为 （ ８ ± ５ １ 、 Ｅ ８ ．６ Ｌ ）
酚 浓 度 为 ０ ２ ／ ０ｍＬ（ ． ５ｍｇ １ １组 ） １ ０ ｒｇ １ （ 、 ． ／ ０ ｍＬ ２组 ） ２ ５ ａ 、 ． ｍｇ ｌ （ ／ ＯｍＬ ３组 ） 育 液 中反 应 ３ ｎ 水 洗 后 ， 苏 木 素 液 复 孵 ０ ｍｉ ； 用 染 。白血 病 （ 括 未 缓 解 及 复 发 ） 以原 粒 细 胞 或 原 始 细 胞 计 包 均
（ Ｈ７ ４ ９ ５ｍＬ， ３份 ； 份 均加 入 ｌ ｐ ． ） ． 共 每 Ｏｍｇ固蓝 Ｂ Ｂ盐 ， 分 但
别 加入 ０ ２ ．５ｍｇ氯 醋 酸 Ａ Ｄ 萘 酚 （ 于 ０ ５ｍＩ二 甲 基 甲 酰 溶 ．
胺 ） １ ０ｍｇ 醋 酸 ＡＳＤ 萘 酚 （ 于 ０ ５ ｍＩ 二 甲基 甲 酰 胺 ） 、． 氯 － 溶 ．
・ １１ ・ ４
国际检验 医学杂志 ２１ 年 １月第 ３ ０１ ２卷第 １ 期
Ｉｔ ａ Ｊｎ ａｙ ｎ Ｌ ｂＭｅ ａｕ ｒ Ｊ ｄ
！， ． ０ 婴！ １
・
经验 交流 ・
底 物 浓 度 对 特 异 性 酯 酶 染 色 积 分 的 影 响
周建 中
（ 西 省 赣 州 市 人 民 医院 血 液 科 江
２ 结 果
１ ～３组 Ｓ 染 色 积 分 均 数 依 次 升 高 ， 表 １ Ｅ 见 。Ｆ 处 理 一
３．ห้องสมุดไป่ตู้８ ， ７ ７ ８２ Ｐ＝０ ０ ００ Ｆ配 伍 ： ３ ． ５ ， ．０ ； ３ ４ ４ ４ Ｐ一 ０ ０ ０ Ｏ 即 不 ． ０ 。
同底 物 浓 度 之 间 及 不 同 患 者 之 间 比较 ， 异 有 统 计 学 意 义 。 差
算 积分 ； Ｃ Ｍ２ Ｒ及 Ｉ Ｐ均 以 中性 杆 状 核 粒 细 胞 、 性 分 叶 核 粒 Ｔ 中 细 胞计 算 积 分 。阳性 程 度 判 断 按 文献 ［ ］ 行 。 ３进
１ ３ 统计 学处 理 对 积 分 结 果 进 行 双 因素 方 差 分 析 及 Ｌ Ｄ ｔ ． Ｓ 检 验 。用 Ｐ ＭＳ ． 统 计 软 件 分析 。 Ｅ ３１
浓 度 为 ０ ２ ／ ０ｍＬ， 固蓝 Ｂ ． ５ｍｇ １ 为 Ｂ盐 浓 度 １ ／ ０ｍＬ的 １ ０ｍｇ １ ／
４ ， 联 反 应 不 充 分 ， 敏 度 最 低 ； 的 氯 醋 酸 ＡＳＤ 萘 酚 浓 Ｏ耦 灵 ３组 －