二级菌种和三级菌种的制备优秀课件
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《食用菌菌种的制备》PPT课件
• ③阔叶树木屑98％，麸皮1％, 尿素0.4％,碳酸钙0.3％,磷 酸二氢钾0.2％, 硫酸镁0.05％, 高锰酸钾0.05％, 料水比 1:1.3。
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• （2）棉籽壳培养基
• 以棉籽壳为主料，是一种应用较广泛的培 养基。配方主要有：
• ①棉籽壳78％，麸皮或米糠20％，蔗糖1％， 石膏粉1％，料水比1:1.2～1.4；
（1）拌料机或拌料槽及拌料、配料工具；
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• （2）衡器 磅称、工业天平、量杯等；
• （3）分装操作台（台高80cm左右）及分 装工具（装瓶机、装袋机；如人工装瓶， 需有压板，打孔棒等。）
• 2、灭菌室 应有灭菌设备，这里专指用于培养基
和其他物品消毒灭菌的灭菌锅。
（1）高压蒸汽灭菌锅； （2）常压蒸汽灭菌锅。
扩繁 ↓
原种培养基制备→灭菌→接种→培养→原种 ↓
↓▔▔▔▔▔▔▔▔ 栽培种培养基制备→灭菌→接种→培养→栽培用种
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5
二、常用设备仪器和药品
（一）设备
食用菌菌种生产流程应呈流水作业，菌种厂 应有配料室、灭菌室、冷却室、接种室、 培养室、贮藏室等。
1、配料室 要求地面平整光滑，有水电，并配备
下列用具、物品：
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第五步：摆斜面、无菌检查
• 灭菌锅压力降到0时，开锅取出试管，待其 温度降到约60℃时即可摆斜面，做法是： 在桌面平放2厘米厚的木条，将试管斜放在 木条上，培养基冷却后即凝固成斜面。斜 面长度一般为试管长度的1/2。无菌检查是 将斜面培养基放在37℃恒温箱中培养24小 时，培养基表面无任何杂菌长出即为合格 的培养基。
• （4）木屑浸出汁培养基
木屑500克，琼脂20克，细米糠100克，硫酸铵1 克，葡萄糖（或蔗糖）20克，水1000毫升。此配 方适用于木腐菌类的菌种分离与培养。
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• （2）棉籽壳培养基
• 以棉籽壳为主料，是一种应用较广泛的培 养基。配方主要有：
• ①棉籽壳78％，麸皮或米糠20％，蔗糖1％， 石膏粉1％，料水比1:1.2～1.4；
（1）拌料机或拌料槽及拌料、配料工具；
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• （2）衡器 磅称、工业天平、量杯等；
• （3）分装操作台（台高80cm左右）及分 装工具（装瓶机、装袋机；如人工装瓶， 需有压板，打孔棒等。）
• 2、灭菌室 应有灭菌设备，这里专指用于培养基
和其他物品消毒灭菌的灭菌锅。
（1）高压蒸汽灭菌锅； （2）常压蒸汽灭菌锅。
扩繁 ↓
原种培养基制备→灭菌→接种→培养→原种 ↓
↓▔▔▔▔▔▔▔▔ 栽培种培养基制备→灭菌→接种→培养→栽培用种
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二、常用设备仪器和药品
（一）设备
食用菌菌种生产流程应呈流水作业，菌种厂 应有配料室、灭菌室、冷却室、接种室、 培养室、贮藏室等。
1、配料室 要求地面平整光滑，有水电，并配备
下列用具、物品：
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第五步：摆斜面、无菌检查
• 灭菌锅压力降到0时，开锅取出试管，待其 温度降到约60℃时即可摆斜面，做法是： 在桌面平放2厘米厚的木条，将试管斜放在 木条上，培养基冷却后即凝固成斜面。斜 面长度一般为试管长度的1/2。无菌检查是 将斜面培养基放在37℃恒温箱中培养24小 时，培养基表面无任何杂菌长出即为合格 的培养基。
• （4）木屑浸出汁培养基
木屑500克，琼脂20克，细米糠100克，硫酸铵1 克，葡萄糖（或蔗糖）20克，水1000毫升。此配 方适用于木腐菌类的菌种分离与培养。
食用菌各级菌种的制作
3.木屑试管菌种保存法
用杂木屑按原种的培养基配制装入大 号试管，容量为管高的三分之二，擦净管 口塞紧棉塞，用牛皮纸包扎管口后高压灭 菌，然后移入母种，在25～28℃下培养， 待长满菌丝后，立即移到低温干燥环境保 存、或埋于尿素、硝酸铵或地洞中保存， 效果更好，并能延长保存时间。
4.冷冻干燥保藏法
菌丝形态
1 2 3 4 5 6 a b c d 孢子 孢子膨大 孢子萌发 菌丝分枝 菌丝体 放大的菌 丝体 细胞壁 细胞核 细胞质 细胞隔膜
特征 来源 2.概况 作用 生长点
集聚时多呈白色绒毛状
孢子萌发或菌丝片断伸长分支
吸收水分和养料，是营养器官
在菌丝尖端，向四周辐射伸展
蘑菇圈
蘑菇圈(fairyring):也叫仙人圈，仙人环，是由 于蘑菇菌丝辐射生长的缘故。菌丝由中间一点向 四周辐射生长，时间长了，中心点及老化的菌丝 相继死去，外面的生活力强，于是形成了自然的 菌丝体环，并长成蘑菇圈。
原种和栽培种培养好后，应立即用于扩接 栽培种或栽培生产，不宜保存过久，时间越长， 生活力越差，也越容易感染杂菌。若因特殊情 况不能及时使用，原种瓶口用牛皮纸包好，置 4～14℃条件下可保藏一年左右。栽培种短期 保存也可放于阴凉、干燥通风的室内，但种瓶 不宜堆叠过高，以免堆内发热，加速菌丝老化。
如何防止食用菌菌种退化
子实体
菌丝体
食用菌营 养器官，主要 功能是分解基 质，吸收营养。
次生菌丝体----双核菌丝
三生菌丝---结实性双核菌丝
二、菌丝及菌丝体的形态结构
(一)菌丝及菌丝体的正常形态结构
射状延 伸、分支的每一根细线，称为菌丝。细胞 管状，壁薄、透明，细胞内含有一个、两 个或多个细胞核。 菌丝体：是由基质内无数纤细的菌丝交 织而成的丝状体或网状体
第三章 食用菌菌种制作
用途
栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
生产总过程
子实体 母种
栽培
原种
栽培种
（二）状态不同的菌种
1.固体 菌种
概念 用固体基质培养的菌种 设备、工艺简单 特点 菌龄长而不一 发酵率较低
概念 用液体基质培养的菌种 2.液体 设备、工艺较复杂 菌种 菌龄短而一致 特点 发酵率高 易老化和自溶
三、菌种生产程序
2、气体灭菌法（熏蒸杀菌法）
适用：接种箱、接种室和菇房消毒。 常用药物：40%甲醛溶液、硫磺、菇保一号、 科达气雾消毒盒、克霉灵气雾消毒剂。
第二节 母种制作
一、母种培养基制作
二、菌种分离 三、母种扩繁
一 母种培养基制作
（一）营养液制作(PDA培养基)
1.
准备工作
（1）材料 马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、 水。 （2）仪器用具及消毒药品 电炉子、铝锅、玻 璃棒、漏斗、纱布、止水夹、漏斗架、切菜小刀、切 板、1000ml烧杯、捆扎绳、棉花、试管 （18mm×180mm）、试管架、铁丝筐、1.5cm厚的长木 条、标签、天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、牛 皮纸、皮筋、纱布、恒温培养箱、手提式高压灭菌锅、 超净工作台或接种箱、接种铲、酒精灯、火柴、记号 笔等。消毒药品包括：75％的酒精棉球、0.25%新洁 尔灭溶液、烟雾消毒王或菇保一号等。
二 菌种分离
（一）概念
菌种分离：用无菌操作的方法将所需要的食用菌 从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。
（二）关键
严格按无菌操作规程进行 无菌操作：任何一个操作过程都要注意避免把其 它任何无关的菌体带入到培养基中。 注意二点： 1．严格树立无菌观念； 2．严格遵循无菌操作规程。
第2章 菌种及种子制备.ppt.Convertor
第二章菌种及种子制备目录第一节、菌种选育第二节、菌种的衰退、复壮及保藏第三节、国内外菌种保藏机构第四节、种子制备菌种选育的理论基础：微生物遗传学、分子遗传学质粒（plasmid)：有时也称作核外基因，为非核染色体的共价闭环状DNA分子，具有自主复制功能，并带有某些特殊遗传性状的基因。
质粒据其所具有的性状分为致育因子（F因子）、耐药因子（R因子）等基因(gene)：一个含有特定的遗传信息的核苷酸序列，是遗传物质最小功能单位，其物质基础是DNA或RNA自然选育：利用微生物在一定条件下产生自发变异，通过分离、筛选，排除劣质性状的菌株，选择出维持原有生产水平或具有更优良生产性能的高产菌株，达到纯化与复壮菌种、保持稳定生产性能的目的。
其主要原理是把微生物群体分离。
自然选育的方法与步骤：（1）通过表现形态淘汰不良菌株（2）考察目的代谢产物产量（3）进行遗传基因型纯度试验，考察菌种纯度（4）传代稳定性试验：斜面传3-5代诱变育种：指人为地、有意识地将对象生物置于诱变因子中，使该生物体发生突变，从这些突变体中筛选具有优良性状的突变株的过程（提高了菌种发生突变的频率和变异幅度，提高获优机率）常用的诱变剂：物理诱变因子：紫外线、X射线、快中子等化学诱变因子：硫酸二乙酯（DES）、亚硝酸、吖啶橙生物诱变因子：噬菌体、转座子等影响诱变效果的因素：外部环境条件：如温度、氧气、pH、水分出发菌株的选择：生产菌株、野生菌株合适的诱变剂量：大多采用70-80%或更低的致死剂量出发菌株的生理状态：细菌-对数生长期；幼年孢子；营养体; 湿态敏感（106 个/mL孢子悬浮液或108个/mL的菌液）诱变效应的测定：直接法和浓缩法，培养后测定菌株的目的代谢产物量诱变方法：单因子、复合诱变优良突变株的筛选方法：随机筛选或半理性化筛选杂交育种：两个基因型不同的菌株通过接合使遗传重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株。
原始亲本：用来杂交的野生型菌株，可以是不同谱系的，也可以是相同谱系但代数相差较多的，遗传基础差别要大，特性清楚，遗传标记明显。
食用菌各级菌种的制作
感谢您的根据 菌种特性，选择合 适的培养基配方， 并进行灭菌处理
接种与培养：将菌种 接入培养基中，控制 好温度、湿度、光照 等条件，促进菌种的 生长繁殖
采收与保存：当菌种 长满整个培养基时， 进行采收并妥善保存 ，以备后续使用
栽培种制作
栽培种制作：将原种接种到栽 培种培养基中，培养成栽培种
接种方法：采用无菌操作技 术，保证菌种纯度
食用菌菌种制作
菌种制作的基本原理
菌种分离：从自 然界中分离出食 用菌的纯菌种
培养基制备：制 备适合食用菌生 长的培养基
接种与培养：将纯 菌种接种到培养基 上，进行培养
菌种鉴定：对培养出 的菌种进行形态学和 生物学鉴定，确保其 纯度和优良性状
菌种保藏：对优良 菌种进行保藏，以 备后续生产和研究 使用
鉴定：对分离 得到的菌种进 行形态学和生 物学鉴定，确 保其纯度和质
量。
保存：将纯化 的菌种进行低 温保存，以备
后续使用。
一级菌种的制作
母种的定义和作用
母种制作
母种制作所需的材料和工具
母种制作的具体步骤和注意事项
母种制作过程中的常见问题和解决方法
原种制作
母种制作：选择优良菌株，进行 培养基制备、接种、培养等步骤
培养基配方：根据菌株特性选择 合适的培养基配方
接种方法：采用无菌操作技术进 行接种
培养条件：控制温度、湿度、光 照等条件，促进菌丝生长
二级菌种的制作
栽培种制作
母种准备：选择优良菌株，制备培养基 原种制作：将母种接入原种培养基，培养至菌丝长满瓶 栽培种制作：将原种接入栽培种培养基，培养至菌丝长满瓶 接种方法：采用无菌操作技术，保证菌种纯度 培养条件：控制温度、湿度、光照等条件，促进菌丝生长 质量检测：对菌种进行质量检测，保证菌种质量和纯度
《食用菌菌种生产》PPT课件
钩悬法
25℃、24h现孢子粉 取出分离材料
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孢子印法
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3.接种孢子
用接种环 蘸孢子液或孢子粉
涂布于平板上
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〔二〕转管法
将母种移入新的过程
概念 过程
接种环取绿豆粒大母种 移入新斜面中部
种块勿太大 注意 原老种块勿再接入
传代次数勿太多
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三、原种、栽培种的接种
接
用接种耙取蚕豆大母种
〔一〕母种培养基的灭菌
灭菌与摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃）
摆斜面
20~30min
无菌检验 约30℃条件下→空白培养2~3天
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母基灭菌与摆斜面
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〔二〕原种、栽培种培养基的灭菌
高压灭菌 1.5kg/cm2（152kpa、128.1℃） 灭菌1~2h
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常压灭菌 100℃灭菌10h左右→再闷12h 要求 攻头、控中、保尾
再生母种
繁殖原种 保藏用种
特点 菌丝弱而少、不可直接栽培
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2.二级种〔原种〕
将母种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
概况
培养环境
大口瓶、较粗放的 液体或固体培养基
用途 扩大栽培种
特点 菌丝较多而壮、适应性较强
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3.三级种〔栽培种〕
将原种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
概况
培养环境
菌种袋、较粗放 固体培养基
用途 栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
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生产总过程
子实体
母种
栽培
栽培种
原种
食用菌各级菌种的制作
菌种种类 品种名称 菌种级别 代时 生产厂家 接种日期
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பைடு நூலகம்
用于生产
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污染
黄 水
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食用菌菌种的保存
无论是母种、原种或栽培种，如果未及
时使用，其菌丝就会很快衰老，降低生产力，
影响产量和质量。因此，菌种必须进行适当的
保存，其目的是防止退化，确保菌种纯一，防
止杂菌感染。
及时挑拣污染管
分离的母种要纯化→出菇试验 →使用
控制菌龄（即将长满斜面）
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母种培养
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2.原种 栽培种 的培养
培养时间：约30天
勿堆放过挤 及时挑拣污染瓶（袋） 栽培种的菌袋缺氧时可刺孔增氧 控制菌龄（菌丝长满后7~10天使用）
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四、原种、栽培种的制作方法
按配方称取原料→拌料→调节含水量65%左右→ 装袋→灭菌（1.5kg／cm2，1.5-2h）→冷却→接 种（接入黄豆大小一块菌种）→培养（25℃ 27℃）→菌丝长满瓶（袋）→培养7d-8d→扩大 成栽培种。
含水量65%左右判断：用手紧握培养料，手指 缝中有水珠渗出，但不滴下。
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一、常用培养料的配方和配制方法
木屑——米糠培养料：木生菇类，如： 木耳、银耳、香菇；
培 养 谷粒——多种菇类。 料
棉籽壳——米糠培养料：多种菇类。
整理版ppt
4
一、常用培养料的配方和配制方法
1、木屑米糠培养基（适用于木腐菌食用菌菌丝生长）
二、三级菌种制作技术 Microsoft Word 文档
二、三级菌种制作技术二、三级菌种营养条件相同，制作方法一致，所不同的是二级菌种(原种)是由一级菌种(母种)扩大培养来的，而三级菌种(栽培种)是由二级菌种扩大培养来的。
因此，相同内容一起介绍。
二、三级菌种生产的工艺流程为：配料(配制培养基)→装瓶(栽培种可以用塑料袋) →灭菌→接种→培养一、二、三级菌种培养基的配制(一)二、三级菌种培养基配制原则1．选择适宜的营养物质。
2．营养物质间配制的比例要恰当。
3．选择经济实用、来源广泛的原料。
4．适宜的pH值和含水量。
(二)二、三级菌种培养基常用的配方1．木屑培养基：阔叶树木屑78%，麸皮(或米糠)20%，蔗糖1%，石膏粉1%。
这是常见的木屑培养基配方。
适于制作香菇、平菇、黑木耳、金针菇、滑菇、灵芝、猴头菇等多种木腐型菌种。
2．棉籽壳培养基：棉籽壳78%，麸皮(或米糠) 20%，蔗糖1%，石膏粉1%。
适用于制作金针菇、平菇、凤尾菇、草菇、银耳、黑木耳、猴头菇等菌种。
注：其它配方参见课本。
(三)二、三级菌种培养基配制的具体方法及步骤1．称料：先称主料，再称辅料2．拌料：(1)将不溶性主料和辅料拌匀。
(2)将可溶性辅料加水制成母液，用时稀释。
(3)二者混合均匀，堆放片刻，使其吸足水分。
(4)检查含水量(手测法、称重法)3．调节pH值：因灭菌和代谢酸会使pH值下降，故灭菌前应将pH值比指定要求调高1左右。
pH值测定方法：用pH试纸测定并用1%的石灰水上清液或1%过磷酸钙澄清液调节。
4．分装培养料：分装容器：750ml菌种瓶，500ml罐头瓶，菌种袋分装要求：上紧下松，外紧内松，中间一个洞(直径 1～1.5cm)5. 清洁(洗或擦)瓶、袋外壁。
6．封口：菌种瓶用二层报纸或一层牛皮纸外加一层薄膜封口；菌种袋用袋口环套封口。
二、二、三级菌种培养基的灭菌1．灭菌方法及要求高压蒸汽灭菌：压力1.5kg/cm3，温度126～128℃，时间1～1.5h(谷粒和经过堆制发酵的粪草培养基应达到2～2.5h)。
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●接种室使用规程 ●超净工作台使用规程 ●接种箱（室）的杂菌检查
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●接种室使用规程
1.使用前半小时，把所需物品搬入接种 场所喷雾消毒，关闭门窗，开启紫外线 灯照射0.5h。 2.穿上工作服和鞋，戴好口罩、帽，用 2％来苏尔洗手。
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3.操作前，用酒精棉球擦手。操作时，减 少空气波动。两人操作时应配合默契，用 完的废棉球等应丢到废物桶内。 4.接种结束及时收拾台面，然后用石炭酸 喷洒。
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㈠培养料配制的原则
●要选择适宜的营养物质 ●营养物质配制的比例要适当 ●选择经济使用来源广泛的原料 ●适宜的酸碱度
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㈡培养料常用配方
常用的配方为78：20：1：1 78：指供应碳源的主料，包括木屑、玉米 芯、秸秆、稻草等。 20：指米糠、麸皮。 1：指糖。 1：石灰、石膏等
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木屑培养基
﹡阔叶树木屑75%，麸皮22%，蔗糖 1.5%，石膏粉1.4%，维生素B10.1%。
适用于平菇、凤尾菇、木耳、猴头、灵 芝、金针菇、榆黄蘑等菌种的培养。
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棉籽壳、蔗糖培养基
﹡棉籽壳78%，麸皮20%，蔗 糖 1%，石膏粉1%。
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棉球擦净。 4.开动机器约20min后，接种区空气净化完
成，即可接种。
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5.操作时，动作轻盈，头、手尽量置于接种 材料的下风侧，接种用具放在台面两侧。 6.接种结束，移去接种材料，再停止运转。 7.如经常使用，每2～3个月检查一次空气的 无菌程度。如不合标准，应及时更换超细纤 维过滤板。
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玉米芯、花生壳培养基
﹡花生壳78%，米糠20%，蔗糖1.5%，石膏粉 1%。 适用于平菇、香菇、木耳、猴头、灵芝等菌种 的培养。
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㈢培养料配制工艺流程
●称料 ●拌料 ●调节pH ●分装培养料 ●分装容器的封口
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●称料
将预处理过的培养料（以不刺破容器 为准，过4目的筛子），按生产规模进行称 取。先称主料，后称辅料。
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●灭菌效果的检验
随机抽样，置于25～30℃的条件 下，培养3～5d，若没有杂菌长出，说 明灭菌彻底。
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第二节 接种与培养
一、接种设备的使用规程 二、二级菌种和三级菌种的接种 三、二级菌种和三级菌种的培养
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一、接种设备的使用规程
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二、培养料的灭菌
●常压蒸气灭菌 ●高压蒸气灭菌 ●灭菌效果的检验
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●常压蒸气灭菌
当低层培养料的温度达到100℃ 时，保持8～12h，培养料内的杂菌 已被彻底杀死。
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●高压蒸气灭菌
在121～128℃、0.11～0.14MPa下， 木屑、棉耔壳培养料保持1～1.5h，谷粒 培养料则需2.0～2.5h。
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●分装容器的封口
﹡瓶装容器的封口：罐头瓶用12㎝×12㎝ ×0.004㎝的低压聚乙烯或聚炳烯膜封口；
﹡袋装容器的封口：用无棉盖体封口、拧口、折 口等。
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●分装培养料
分装培养料时，边装边压，松紧适中 （中下部稍松，上部稍紧），然后平整料面， 在料中央打洞。
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﹡料中央打洞的目的
1.增加培养料与空气的接触面积以利菌丝 生长； 2.便于固定接种块； 3.让部分菌种掉进洞内，增加接种点，缩 短发菌周期。
二级菌种和三级菌种的制备优 秀课件
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二级菌种和三级菌种接种
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第三章 二级菌种和三级菌种的制备
食用菌生产多采用三级菌种繁育体系， 也有采用二级菌种繁育体系的。经过扩大培 养，增加菌丝体的适应能力，使其粗壮;并 检验菌种生活力、纯度;扩大菌种数量，满 足生产需要。
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●拌料
将不溶性的料干混均匀，可溶性的 料加少量的水配成母液，边泼浇边混拌， 含水量为60%。
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●调节pH
将培养料堆闷0.5～1.0h后，测定酸 碱度，因为灭菌后pH下降1～1.5，所以 高调1～1.5，调致6.5～7.0较为合适。
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第三章 二级菌种和三级菌种的制备
第一节 培养料的配制与灭菌 第二节 接种与培养 第三节 质量鉴定 第四节 液体菌种生产和使用
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第一节 培养料的配制与灭菌
一、培养料的配制 二、培养料的灭菌
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一、培养基的配制
㈠培养料配制的原则 ㈡培养料常用配方 ㈢培养料配制工艺流程
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5.注意安全。如棉塞着火，用手紧握或用 湿布扑灭，勿吹。若有带菌物洒落，用抹布 沾石炭酸，收拾到废物桶内，用酒精棉球擦 手后再继续操作。
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●超净工作台使用规程
1.把超净工作台用75％酒精擦净。 2.搬入培养料和菌种。 3.接种工具事先高温灭菌备用。双手用酒精
棉籽壳、蔗糖培养基
﹡棉籽壳96%，蔗糖2%，过磷酸钙1%， 石膏粉1%。
适用于平菇、凤尾菇、毛木耳、金针 菇等菌种的培养。
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玉米芯、花生壳培养基
﹡玉米芯%，米糠或麸皮20%，蔗糖 1%，石膏粉1%。
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玉米芯、花生壳培养基
﹡玉米芯80%，米糠10%，玉米粉8%， 石膏粉1%，磷酸二氢钾0.2%。
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㈡培养料常用配方
木屑培养基 棉籽壳、蔗糖培养基 玉米芯、花生壳培养基
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木屑培养基
﹡阔叶树木屑78%，米糠或麸皮20%， 蔗糖1%，石膏粉1%。
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木屑培养基
﹡阔叶树木屑93%，米糠或麸皮5%， 蔗糖1%，尿素0.4%，碳酸钙0.4%， 磷酸二氢钾0.2%。
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●接种室使用规程
1.使用前半小时，把所需物品搬入接种 场所喷雾消毒，关闭门窗，开启紫外线 灯照射0.5h。 2.穿上工作服和鞋，戴好口罩、帽，用 2％来苏尔洗手。
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3.操作前，用酒精棉球擦手。操作时，减 少空气波动。两人操作时应配合默契，用 完的废棉球等应丢到废物桶内。 4.接种结束及时收拾台面，然后用石炭酸 喷洒。
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㈠培养料配制的原则
●要选择适宜的营养物质 ●营养物质配制的比例要适当 ●选择经济使用来源广泛的原料 ●适宜的酸碱度
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㈡培养料常用配方
常用的配方为78：20：1：1 78：指供应碳源的主料，包括木屑、玉米 芯、秸秆、稻草等。 20：指米糠、麸皮。 1：指糖。 1：石灰、石膏等
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木屑培养基
﹡阔叶树木屑75%，麸皮22%，蔗糖 1.5%，石膏粉1.4%，维生素B10.1%。
适用于平菇、凤尾菇、木耳、猴头、灵 芝、金针菇、榆黄蘑等菌种的培养。
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棉籽壳、蔗糖培养基
﹡棉籽壳78%，麸皮20%，蔗 糖 1%，石膏粉1%。
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棉球擦净。 4.开动机器约20min后，接种区空气净化完
成，即可接种。
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5.操作时，动作轻盈，头、手尽量置于接种 材料的下风侧，接种用具放在台面两侧。 6.接种结束，移去接种材料，再停止运转。 7.如经常使用，每2～3个月检查一次空气的 无菌程度。如不合标准，应及时更换超细纤 维过滤板。
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玉米芯、花生壳培养基
﹡花生壳78%，米糠20%，蔗糖1.5%，石膏粉 1%。 适用于平菇、香菇、木耳、猴头、灵芝等菌种 的培养。
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㈢培养料配制工艺流程
●称料 ●拌料 ●调节pH ●分装培养料 ●分装容器的封口
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●称料
将预处理过的培养料（以不刺破容器 为准，过4目的筛子），按生产规模进行称 取。先称主料，后称辅料。
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●灭菌效果的检验
随机抽样，置于25～30℃的条件 下，培养3～5d，若没有杂菌长出，说 明灭菌彻底。
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第二节 接种与培养
一、接种设备的使用规程 二、二级菌种和三级菌种的接种 三、二级菌种和三级菌种的培养
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一、接种设备的使用规程
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二、培养料的灭菌
●常压蒸气灭菌 ●高压蒸气灭菌 ●灭菌效果的检验
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●常压蒸气灭菌
当低层培养料的温度达到100℃ 时，保持8～12h，培养料内的杂菌 已被彻底杀死。
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●高压蒸气灭菌
在121～128℃、0.11～0.14MPa下， 木屑、棉耔壳培养料保持1～1.5h，谷粒 培养料则需2.0～2.5h。
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●分装容器的封口
﹡瓶装容器的封口：罐头瓶用12㎝×12㎝ ×0.004㎝的低压聚乙烯或聚炳烯膜封口；
﹡袋装容器的封口：用无棉盖体封口、拧口、折 口等。
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●分装培养料
分装培养料时，边装边压，松紧适中 （中下部稍松，上部稍紧），然后平整料面， 在料中央打洞。
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﹡料中央打洞的目的
1.增加培养料与空气的接触面积以利菌丝 生长； 2.便于固定接种块； 3.让部分菌种掉进洞内，增加接种点，缩 短发菌周期。
二级菌种和三级菌种的制备优 秀课件
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二级菌种和三级菌种接种
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第三章 二级菌种和三级菌种的制备
食用菌生产多采用三级菌种繁育体系， 也有采用二级菌种繁育体系的。经过扩大培 养，增加菌丝体的适应能力，使其粗壮;并 检验菌种生活力、纯度;扩大菌种数量，满 足生产需要。
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●拌料
将不溶性的料干混均匀，可溶性的 料加少量的水配成母液，边泼浇边混拌， 含水量为60%。
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●调节pH
将培养料堆闷0.5～1.0h后，测定酸 碱度，因为灭菌后pH下降1～1.5，所以 高调1～1.5，调致6.5～7.0较为合适。
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第三章 二级菌种和三级菌种的制备
第一节 培养料的配制与灭菌 第二节 接种与培养 第三节 质量鉴定 第四节 液体菌种生产和使用
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第一节 培养料的配制与灭菌
一、培养料的配制 二、培养料的灭菌
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一、培养基的配制
㈠培养料配制的原则 ㈡培养料常用配方 ㈢培养料配制工艺流程
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5.注意安全。如棉塞着火，用手紧握或用 湿布扑灭，勿吹。若有带菌物洒落，用抹布 沾石炭酸，收拾到废物桶内，用酒精棉球擦 手后再继续操作。
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●超净工作台使用规程
1.把超净工作台用75％酒精擦净。 2.搬入培养料和菌种。 3.接种工具事先高温灭菌备用。双手用酒精
棉籽壳、蔗糖培养基
﹡棉籽壳96%，蔗糖2%，过磷酸钙1%， 石膏粉1%。
适用于平菇、凤尾菇、毛木耳、金针 菇等菌种的培养。
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玉米芯、花生壳培养基
﹡玉米芯%，米糠或麸皮20%，蔗糖 1%，石膏粉1%。
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玉米芯、花生壳培养基
﹡玉米芯80%，米糠10%，玉米粉8%， 石膏粉1%，磷酸二氢钾0.2%。
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㈡培养料常用配方
木屑培养基 棉籽壳、蔗糖培养基 玉米芯、花生壳培养基
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木屑培养基
﹡阔叶树木屑78%，米糠或麸皮20%， 蔗糖1%，石膏粉1%。
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木屑培养基
﹡阔叶树木屑93%，米糠或麸皮5%， 蔗糖1%，尿素0.4%，碳酸钙0.4%， 磷酸二氢钾0.2%。