木霉菌生态学特性研究
木霉菌在水稻上的应用研究进展

木霉菌在水稻上的应用研究进展木霉菌(Trichoderma)是一种常见的真菌,具有广泛的生物学特性和生态学功能,被广泛应用于农业生产中。
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,其生产受到多种生物和非生物因素的影响。
近年来,人们对木霉菌在水稻上的应用进行了广泛的研究,尤其是在生物防治、促生和环境改良等方面取得了重要进展。
本文将综述木霉菌在水稻上的应用研究进展。
生物防治是木霉菌在水稻上应用的主要领域之一。
它可以通过竞争、产生抗生素和激活植物防御机制等方式,有效地控制水稻病原真菌的侵染。
研究发现,木霉菌可以抑制稻瘟病、纹枯病、稻曲病等多种水稻病害的发生和发展。
木霉菌可以通过竞争取代稻瘟病菌的营养,抑制其生长和侵染水稻的能力。
研究还发现木霉菌产生的抗生素可以抑制稻曲病菌的生长,从而减少病害的发生。
木霉菌在水稻病害防治中具有潜在的应用前景。
木霉菌还可以促进水稻的生长和发育。
研究表明,木霉菌产生的一些激素和生长调节物质可以促进水稻的根系生长和营养吸收。
木霉菌还可以降解土壤中的一些有机物质,释放出植物所需的营养元素。
木霉菌产生的酶可以分解土壤中的有机氮,从而提高水稻对氮的利用效率。
木霉菌还可以改良土壤结构,增加土壤透水性和保水性,促进水稻的生长和产量的提高。
木霉菌还具有环境改良的潜力。
研究发现,木霉菌可以降解土壤中的一些有害物质,如农药残留和重金属等。
木霉菌产生的酶可以降解农药分子的化学键,从而减少农药对环境的污染。
木霉菌还可以提高土壤中重金属的有效性,促进其迁移和转化,从而减少重金属在环境中的积累和毒性。
木霉菌在环境污染治理和修复方面也具有一定的潜力。
木霉菌在水稻上的应用研究取得了一系列重要的进展。
未来的研究可以进一步深入探究木霉菌的生物学特性和生态学功能,优化其应用技术和方式,推动其在水稻生产中的应用。
还应加强木霉菌与其他菌种的协同作用研究,以提高木霉菌的应用效果。
相信随着研究的深入和技术的不断提高,木霉菌在水稻上的应用前景将会更加广阔。
木霉菌在水稻上的应用研究进展

木霉菌在水稻上的应用研究进展水稻是世界上最重要的粮食作物之一,它是全世界超过一半的人口的主要食物来源。
水稻生长过程中往往会受到各种病害的侵袭,给农作物生产带来了巨大的损失。
寻找一种能够有效防治水稻病害的方法变得至关重要。
木霉菌是一种能够生长在木材上的真菌,在自然界中普遍存在。
近年来,人们逐渐发现木霉菌对水稻生长的积极影响,因此对木霉菌在水稻上的应用进行了深入的研究和探索。
本文将对木霉菌在水稻上的应用研究进展进行综述,以期为农业生产提供有益的参考和借鉴。
一、木霉菌对水稻的促进作用1.1 木霉菌对水稻生长的影响研究表明,木霉菌在水稻生长过程中能够发挥一定的促进作用。
木霉菌在水稻的根际区域生长,能够分解土壤中的有机质,释放出大量的微量元素和有机质,为水稻的生长提供了养分,并且能够促进水稻的根系生长和发育,增强水稻的抗病能力。
除了对水稻生长的促进作用外,研究还发现木霉菌对水稻的病害防治也有一定的作用。
木霉菌通过产生抗生素和挥发性有机化合物,能够抑制水稻病原菌的生长和繁殖,从而有效地防治水稻病害,提高水稻的产量和品质。
近年来,许多研究人员对木霉菌在水稻生长中的影响进行了深入的研究。
他们通过田间试验和室内培养等方法,系统地研究了木霉菌对水稻生长的促进作用和机制,揭示了木霉菌促进水稻生长的分子机制和代谢途径,为木霉菌在水稻上的应用奠定了科学的基础。
2.2 木霉菌对水稻病害的防治作用研究也有许多研究人员对木霉菌对水稻病害的防治作用进行了深入的研究。
他们通过分离鉴定水稻根际土壤中的木霉菌菌株,筛选出具有较强抑菌活性的菌株,并且研究了木霉菌产生抗生素和挥发性有机化合物的代谢途径,为进一步开发木霉菌制剂提供了理论和实践依据。
三、木霉菌在水稻上的应用前景基于目前对木霉菌在水稻上的应用研究进展,可以预见,木霉菌将成为未来水稻生产中的重要生物资源。
通过深入研究木霉菌的生理和生态特性,加强木霉菌在水稻上的应用研究,研发高效、环保的木霉菌制剂,将有望为水稻生产提供一种新的、可持续的病害防治方法。
土壤中多功能木霉菌的筛选鉴定及木霉多样性分析的开题报告

土壤中多功能木霉菌的筛选鉴定及木霉多样性分析的开题
报告
一、研究背景
多功能木霉菌是一类常见的土壤真菌,具有多种代谢功能,如分解有机物、制造物质、抗菌等,被广泛应用于生物技术领域。
然而,由于土壤环境的复杂性,单一的多功能
木霉菌菌株可能存在适应能力较差的情况。
因此,筛选并鉴定高适应性和多功能性的
多功能木霉菌菌株十分必要,并对木霉多样性进行分析是了解其生态学和生物多样性
的重要途径。
二、研究目的
本研究旨在从土壤样品中筛选和鉴定多功能木霉菌,并进行木霉多样性分析,探索其
生态习性和生物多样性。
三、研究内容和方法
(1)采集土壤样品
选取多种不同生境的土壤样品,如森林、草地、农田等,进行采集。
(2)分离和筛选
将采集到的土壤样品进行稀释和分离,得到单一的多功能木霉菌菌株。
对于筛选,采用代谢物、生长速度等指标,对分离得到的多功能木霉菌菌株进行筛选,并对其对多种有机物的降解效能进行测定。
(3)鉴定
对筛选得到的多功能木霉菌菌株进行鉴定,包括形态学和生物学特征、16S rRNA序列和基因分型等方法进行鉴定和分析。
(4)多样性分析
对筛选得到的多功能木霉菌菌株进行多样性分析,如利用基因测序,构建系统发育树,分析不同菌株之间的遗传距离及群落组成等。
四、预期结果
通过对多个生态环境中的土壤样品进行分离和筛选,鉴定得到多个具有高适应性和多
功能性的多功能木霉菌菌株,并通过多样性分析了解这些菌株的生态习性和遗传特征,对多功能木霉菌的学习和应用具有重要意义。
木霉菌在水稻上的应用研究进展

木霉菌在水稻上的应用研究进展1. 引言1.1 概述木霉菌是一种广泛存在于自然界中的真菌,具有多种生物学特性和生物活性成分。
近年来,随着对木霉菌的研究不断深入,人们发现它在水稻上的应用潜力逐渐被认可并受到关注。
木霉菌在水稻上的应用研究进展已经取得了一些重要的突破,为水稻的生产提供了新的思路和方法。
本文将从木霉菌的特点、木霉菌在水稻上的应用研究进展、木霉菌在水稻上的生物防治作用、木霉菌在水稻上的促生效应以及木霉菌在水稻上的植物抗逆作用等方面展开讨论,旨在全面了解木霉菌在水稻上的作用机制和应用前景。
通过对木霉菌在水稻生产中的多种作用及其机制进行系统综述,可以为今后相关研究提供参考和借鉴,促进木霉菌在水稻生产中的广泛应用和推广。
展望未来,木霉菌在水稻上的应用前景可期,有望成为水稻生产领域的重要技术手段和生产方式。
2. 正文2.1 木霉菌的特点木霉菌是一类广泛存在于自然界中的真菌,主要生长在潮湿、温暖的环境中。
它们通常以分解植物残体和有机物为主要营养来源,同时也具有一定的生物防治能力。
木霉菌的特点主要包括以下几个方面:1. 多样性:木霉菌属于真菌中的一个大类别,包括多种不同的物种,如木霉、白色木霉、黑色木霉等。
每种木霉菌都具有独特的形态特征和生长习性。
2. 耐受性:木霉菌对环境条件的适应能力较强,可以在各种不同的温度、湿度和pH值下生长繁殖。
这使得木霉菌在不同的生态环境中都能找到适合生存的空间。
3. 生长速度快:木霉菌的生长速度通常较快,可以在短时间内形成大片的菌丝体。
这使得木霉菌在水稻田中的应用具有快速的效果。
4. 生物活性物质产生:木霉菌在生长过程中会产生一些有益的生物活性物质,如抗生素、酶类等。
这些物质可以对水稻病原菌产生抑制作用,同时也可以促进水稻生长发育。
2.2 木霉菌在水稻上的应用研究进展目前,关于木霉菌在水稻上的应用研究主要集中在以下几个方面:研究木霉菌对水稻生长和发育的影响机制,包括促生效应、植物抗逆作用等。
木霉菌在水稻上的应用研究进展

木霉菌在水稻上的应用研究进展木霉菌(Trichoderma)是一类土壤真菌,能够在病菌和植物之间进行生物调节,对植物的生长发育和抗病能力有着明显的促进作用。
近年来,木霉菌在水稻生产中的应用越来越受到重视,并且在提高水稻产量、品质、抗病能力等方面取得了一定的研究进展。
木霉菌的促生效应木霉菌的促生效应主要表现在以下几个方面:(1)促进根系生长:木霉菌通过分泌激素、活性酶、有机酸等,刺激水稻根系生长,增加根系表面积和吸收面积,提高水稻对营养和水分的吸收能力。
(2)促进叶片生长:在木霉菌菌株接种后,水稻叶片的面积和数量都有所增加,叶绿素含量也有所增加,叶片的光合作用能力得到了提高,从而提高了水稻的产量。
(3)促进生殖生长:木霉菌能够产生激素,刺激水稻花粉管的生长和发育,加快水稻的结实速度,提高水稻籽粒的生产率和品质。
木霉菌的抗病能力木霉菌除了具有促生效应外,还具有一定的抗病能力。
研究表明,木霉菌的菌丝体和代谢物对于多种水稻病原菌和病虫害具有一定的抑制作用,如枯草芽孢杆菌、稻瘟病菌、赤霉素病菌等。
因此,木霉菌在水稻生产中的应用还可以达到生物防治病虫害的效果。
木霉菌在水稻生产中的应用研究从20世纪70年代开始,至今已有40多年的历史。
其中,木霉菌制剂的研发和应用是其最主要的应用形式。
(1)木霉菌菌剂木霉菌菌剂是将木霉菌种体或其代谢产物制备成的一种微生物制剂。
其主要应用形式为土壤施用和种子涂覆,以提高水稻的产量和质量。
国内外已有多个品牌的木霉菌制剂上市,并在各种田间试验中取得了一定的效果。
(2)木霉菌基因工程近年来,随着生物技术的发展,木霉菌基因工程也成为其应用的一个新方向。
利用基因工程技术,可以增强木霉菌的促生、抗病能力,使其更适应水稻生产的需要。
总体来讲,木霉菌在水稻生产中的应用研究尚处于初步阶段,需要深入研究其应用效果及其在水稻生产中的具体应用方法。
木霉菌在水稻上的应用研究进展

木霉菌在水稻上的应用研究进展
木霉菌是一种常见的真菌,它具有较高的生物活性和广泛的应用潜力。
近年来,研究人员在水稻上的木霉菌应用研究领域取得了一些重要的进展。
木霉菌可以用于水稻种子的活化处理。
研究发现,木霉菌孢子能够在水稻种子表面形成一层特殊的菌丝,这种菌丝具有一定的保护作用,能够抵抗一些病原菌的侵袭,提高水稻种子的发芽率和成活率。
木霉菌可以用于水稻病害的防治。
水稻是一种重要的粮食作物,但常常受到一些病原菌的侵袭,导致产量下降。
研究发现,木霉菌能够产生一些特殊的抗生素和酶类物质,对水稻病原菌具有抑制作用。
将木霉菌应用于水稻病害的防治中,能够有效地降低病害发生的风险,提高水稻产量和质量。
木霉菌还可以用于水稻的有机肥料制备。
木霉菌在分解有机物的过程中,能够产生一些有机酸和酶类物质,这些物质能够有效地促进水稻根系的发育和吸收养分。
通过利用木霉菌分解有机物,可以制备出具有较高肥力的有机肥料,对于提高水稻产量和土壤质量具有重要意义。
木霉菌在水稻上的应用研究还包括其在水稻生长调控和抗逆性提高方面的应用。
研究发现,木霉菌能够产生一些植物生长调节物质,例如生长素等,这些物质能够促进水稻的生长和发育。
木霉菌还能够增加水稻抗逆性,提高其对环境胁迫的适应能力。
木霉菌在水稻上的应用研究取得了一些重要的进展。
当前的研究重点主要集中在木霉菌的菌丝形成机制、抗病机制、有机肥料制备机制以及植物生长调控和抗逆性提高机制等方面的研究。
相信随着研究的深入和技术的进步,木霉菌在水稻生产中的应用前景将会更加广阔。
木霉菌生物防治及促进植物生长机制研究进展

木霉菌生物防治及促进植物生长机制研究进展摘要:木霉菌的主要特征是适应能力强,可存在于植物根系中,对于植物的生长和抗性的增强有着重要的作用。
初步研究发现,木霉菌属于重要的防治资源,被视为当前生物防治研究的核心。
从宏观角度来看,生物防治机制分为四大类,首先是竞争作用,其次是重寄生作用,第三是抗生作用,第四是诱导植物抗性。
木霉菌通过自身的特征,改变土壤微生物的环境,使土壤中生物群落结构更加合理,为土壤提供充足的养分,此时,植物的抗病性也在随之增强。
本文中,笔者对木霉菌进行了深入的分析,探讨了其在生物防治角度的重要作用,为促进植物生长研究提出了广泛的思路。
关键词:促进植物生长;木霉菌;木霉生物肥;生物防治机制前言微量元素是植物生长的前提,也是提高植物抗病性的重要因素。
木霉菌通过自身能力能够帮助植物吸收养分,并且实现对土壤中微量元素的固定。
常见的是固氮和解磷等。
初步研究发现,木霉菌与植物根系结合以后,为植物氮元素的储存提供了有利的条件,尤其是大量菌根的存在,为氮元素的运输打下了坚实的基础。
另外,木霉菌对于土壤中磷的吸收也有重要的作用。
铁元素对于植物的生长同样意义非凡,而在碱性条件下,铁元素往往以复合物的形式存在,这对于植物的生长是非常不利的,此时,木霉菌将抑制铁元素的吸收,尤其是将铁氧化物排除在外,减轻其对植物的损伤。
1木霉菌的生物防治机制1. 1竞争作用竞争作用在生物的生长中较为常见,不少植物也会因为竞争能力的不足而被淘汰。
竞争作用体现了多个角度,首先是营养物质的竞争,其次是光照等的竞争。
木霉菌与植物根系的结合,可提高植物的竞争能力。
首先来说,木霉菌属于腐生型真菌,其适应能力较强,可在短时间内繁殖并迅速生长,这也是提高植物抗性的有效手段,为植物的健康生长创造了条件。
其次,木霉菌抗性强,往往会对其他的病原菌形成抑制作用,进而从侧面角度确保了植物的生长。
近年来研究发现。
木霉菌广泛存在于植物根系表面,其根系周边菌落的密度较低,而营养物质含量丰富,这关系到植物的健康生长。
木霉菌在水稻上的应用研究进展

木霉菌在水稻上的应用研究进展木霉菌是一种在自然界中普遍存在的真菌,具有多种生物活性和生物学功能。
近年来,关于木霉菌在水稻上的应用研究逐渐受到人们的关注,并取得了一定的进展。
本文将对木霉菌在水稻上的应用研究进展进行综述,以期为相关研究提供参考和借鉴。
一、木霉菌的生物学特性木霉菌是一种分布广泛的真菌,主要生长在植物的凋落物、土壤和有机质中,是一种重要的腐生菌。
木霉菌的生长环境对其生物学特性有一定影响,主要包括温度、湿度、营养物质和微生物种群等因素。
在适宜的生长条件下,木霉菌可以产生大量的孢子,形成白色或灰色的绒状菌丝体,具有较强的生长和繁殖能力。
木霉菌在水稻上的应用研究主要集中在其对水稻生长发育、产量和质量等方面的影响,以及其在水稻病虫害防治中的应用。
下文将从这两个方面对木霉菌在水稻上的应用研究进展进行详细介绍。
二、木霉菌对水稻生长发育的影响1. 木霉菌对水稻的生长促进作用研究表明,木霉菌可以促进水稻的生长发育,提高水稻的生物产量和质量。
木霉菌可以产生生长激素和生长调节物质,促进水稻幼苗的生长,增加根系的发达和吸收营养元素的能力,提高光合作用和养分利用效率。
木霉菌还可以促进水稻的开花结果和籽粒充实,增加水稻的籽粒产量和品质。
木霉菌可以增强水稻的抗逆性,提高水稻抵抗病虫害和环境胁迫的能力。
研究表明,木霉菌可以诱导水稻产生一些抗逆蛋白和抗氧化酶,提高水稻对生物、物理和化学胁迫的抵抗能力。
木霉菌还可以促进水稻产生一些次生代谢产物,增强水稻对病原菌和害虫的抗性。
三、木霉菌在水稻病虫害防治中的应用木霉菌可以有效防治水稻的多种病害,包括水稻纹枯病、水稻稻瘟病、水稻白叶枯病等。
木霉菌可以产生一些抗真菌物质,对水稻病原菌具有一定的杀灭和抑制作用。
木霉菌还可以诱导水稻产生一些抗病物质,增强水稻对病原菌的免疫能力。
木霉菌在水稻上的应用研究已经取得了一定的进展,未来的研究重点主要包括以下几个方面:1. 木霉菌的应用技术研究需要加强木霉菌在水稻上的应用技术研究,包括木霉菌的筛选鉴定、培养培育、制剂配方和施用方法等方面的研究。
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2001杨合同,徐砚珂,王加宁,唐文华。
木霉菌类生物防治菌的生态学特性。
山东植物病理研究。
中国农业出版社,北京,Pp132-138木霉菌类生物防治菌的生态学特性杨合同,徐砚珂,王加宁(山东省科学院生物研究所,济南,250014)唐文华(中国农业大学植物病理系,北京,100094)摘要:在多种植物根际能分离到对棉花枯萎病菌有拮抗作用的木霉菌。
本文分离并鉴定的拮抗性木霉菌有绿色木霉菌(Trichoderma viride),哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)和康宁木霉菌(Trichoderma koningii)。
木霉菌的菌落伸展速度在菌株间差别不明显。
木霉菌菌株的产孢能力比较强,多数菌株在每克培养基中的分生孢子产量均在21×108个/克干重以上。
木霉菌可以耐受土壤的抑菌作用,加入土壤7天后的回收率均在13.1%以上;木霉菌接种棉花种子后可以进入棉花植株内部,有的可以到达茎的中部。
木霉菌显示出明显的根际效应,不同菌株在棉花根际的定殖能力有很大差异。
前言良好的适应性,多机制性和广谱性是木霉菌在生物防治研究工作中受到广泛关注的重要原因。
优秀木霉菌类生物防治菌的分离与筛选与样本的来源有很大关系,普遍认为生防菌株应当尽可能来自病害衰退田,或者寄主植物的周围环境,如根表,根际及其生长所在的土壤(Baker et al, 1974; Cook et al, 1983)。
木霉菌分布广泛,能够从很多环境如土壤,污水,植物组织等分离得到,但是木霉菌类生防菌株对于植物是否有选择性,则少有研究。
本文采集了多种样品进行木霉菌的分离,以棉花为宿主植物,以棉花立枯病菌、枯萎病菌和黄萎病菌为指示菌株,筛选了木霉菌类生物防治菌,研究了他们的生态学特性,希望为木霉菌的宿主专化性提供证据。
材料与方法1 生防菌株的分离与筛选1.1 样品的处理采集并供分离的植物样品12科近20种的植物,分别是禾本科:小麦、早熟禾;豆科:蚕豆;菊科:泥胡菜;十字花科:播娘蒿;锦葵科:木槿,棉花;百合科:葱、蒜;堇菜科:紫花地丁;蔷薇科:玫瑰、西府海棠;栋科:香椿;忍冬科:锦带花;伞形科:芹菜;大戟科:菠菜,等等。
其它样品包括各种食用菌的患病子实体,主要包括木耳、灵芝和各种磨菇。
分离时,取植物根际土壤(在实验室内将根系土壤稍风干,轻拍根系,使粘附土壤脱落,然后以灭菌水充分漂洗根上残留的土壤,漂洗液即为根际土样。
1.2 分离方法木霉菌的分离用PDA培养基(含氯霉素100ppm)。
将样品稀释102-105倍,取0.1ml于培养基平板,用灭菌的L形玻璃棒涂匀,置于28℃恒温箱中培养,真菌产孢之前纯化,保存于PDA斜面上。
TSM培养基(MgSO4·7H2O 0.2g,K2HPO4 0.9g,KCl 0.15g,NH4NO3 1.0g,葡萄糖3.0g,氯霉素0.25g,玫瑰红0.15g,敌克松60%可湿性粉剂0.3g,PCNB0.2g,琼脂20g)也用于木霉菌的分离(唐文华等,1992)。
1.3 筛选木霉菌生防菌株的指示性状(1)平板上对目标病原菌的拮抗作用,以抑菌圈的有或无来判断。
(2)平板上对目标病原菌的重复寄生能力。
以上测定所用的指示菌株为:棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani) Rhs-1,本研究室分离保存;棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum) AG-158; 棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae) V-19,由中国农业科学院植保所棉病研究室提供。
1.4 木霉菌的鉴定在显微镜下观察菌丝,分生孢子及厚垣孢子的形态,按Bissett(1984,1991a,1991b,1991c),Rifai(1969)和文成敬等(1993)的方法鉴定。
2 生态学特性测定2.1 拮抗作用测定对于细菌和放线菌,采用双层平板法进行。
在平板上点种分离物,在NA培养基上于28℃培养拮抗菌至合适时间,再用氯仿将培养好的菌落熏蒸30分钟杀死,然后将混有病原菌繁殖体的PDA培养基倾于平板上,于28℃继续培养,观察拮抗圈的有无及大小。
木霉菌则在PDA 培养基上培养24小时后直接接种于混有病原菌繁殖体的PDA平板上,于28℃继续培养,2-3天后观察抑菌圈的大小。
2.2 重复寄生能力测定在PDA平板上对峙培养挑战病原菌和待测拮抗菌,当两菌落接触后,将平板直接置于显微镜下观察拮抗体对病原菌的寄生现象,包括单位病原菌菌丝上拮抗菌的寄生点,菌丝的寄生方式,在两个菌落交叉处于显微镜下计数病原菌菌丝被木霉菌寄生的百分数,表示寄生能力的强弱。
2.3 木霉菌生长速度测定制备PDA平板,玉米琼脂(玉米粉3g, 琼脂1.6g, 水100ml)平板和NA平板,取在PDA平板上活化3次的直径为0.6cm的琼脂块接种于三种平板中央,28℃培养,菌落覆盖整个平板时测量菌落的直径,计算菌落每天的扩展速度。
2.4 木霉菌分生孢子产量比较比较了三种培养基质(麸皮,木屑和麦糠)中部分木霉菌菌株的产孢能力,将分生孢子含量约为105孢子/克的悬浮液接种到干热灭菌的基质中,使接种后的基质含水量达到65%(W/W),置于灭菌的直径为20cm玻璃培养皿中,28℃条件下培养,培养期间每隔6小时左右用灭菌玻璃棒搅拌一次,6天后分生孢子不再增加,取出培养物,风干,显微镜下计数每克培养物的分生孢子数。
2.5 土壤抑菌作用对木霉菌的影响于中国农业大学科学园采集健康棉田土壤,风干后分成3份,其中一份不作任何处理,一份121℃蒸汽灭菌,一份加入10ppm的多菌灵,然后接种木霉菌的分生孢子悬浮液于3份土壤样品中,不作处理和加入多菌灵的土壤样品各留下不接种样品作为空白对照,以消除土著真菌菌落的干扰。
分生孢子的接种量控制在108cfu/克左右,含水量控制在30%(W/W),接种后立即测定一次木霉菌的实际含菌量,将土壤样品保存于密封塑料袋内,置于28℃环境中。
7天后,分离计数木霉菌,以第一次计数为基数,计算回收率。
2.6 木霉菌进入棉花植株内部播种以木霉菌分生孢子悬浮液处理的鲁棉12号种子于健康土壤中,20-30℃培育,21天后棉花长出真叶时分成根部和茎部两部分,检测木霉菌是否进入棉花植株以及进入到哪一个部位,包括(1)根部;(2)地上部近地表1/3;(3)地上部中间1/3;(4)地上部顶端1/3。
分离之前用75%的酒精将组织消毒10分钟,然后用灭菌水充分洗涤。
在PDA培养基上分离,于28℃培养。
2.7 木霉菌在棉花根际的定殖能力测定在健康土壤中播种露白的鲁棉12号种子,用含菌量为108cfu/ml的木霉菌分生孢子悬浮液浇在种子上,合每粒种子0.1ml,盖同样的土壤2cm厚,于20-30℃的温室内培育。
30天后,小心地取出棉株,用含有链霉素50ppm的PDA培养基分别测定棉花根际和周围土壤中的木霉菌含量,计算两者比例(R/S),作为木霉菌根际定殖能力的指标。
以紧贴根表的土壤作为根际部分,以离植株主根3-5cm,离土表2cm, 而且没有须根的土壤作为周围(非根际)土壤。
计数时以未接种木霉菌的棉花为对照,扣除背景木霉菌和其它真菌。
结果1 木霉菌类生物防治菌的分离和筛选1.1 分离与筛选在多数植物根际均能分离到对棉花枯萎病菌有拮抗作用的木霉菌菌株,小麦和棉花根际样品中分离到的拮抗性木霉菌菌株最多,各有14株和18株。
可以看出拮抗性木霉菌的来源十分广泛,能从多种植物根际分离到。
1.2 木霉菌种类鉴定:通过鉴定发现三个木霉菌的种,即(1)绿色木霉菌(Trichoderma viride),编号为LTR-2,T1-1,T2-1,Q1和Q2为绿色木霉菌;(2)哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum),编号为Tc和T22为哈茨木霉菌;(3)康宁木霉菌(Trichoderma koningii),编号为Tk。
2 木霉菌生防菌株的生态学特性2.1 木霉菌的拮抗能力用热,微波和用氯仿杀死的木霉菌对三种病原菌都不表现抑菌能力。
但是不杀死木霉菌,以木霉菌接种混合有病原菌的PDA平板,培养后则多数可以发现在菌落周围有抑菌圈。
测定了19个木霉菌菌株在PDA平板上对棉花立枯病菌,枯萎病菌和黄萎病菌的抑菌圈,几乎所有测试菌株对三种病原菌都有抑菌能力,但是不同菌株的抑菌活性有较大差异,对枯萎病菌抗菌活性较强的菌株有:T1-1,T2-1,T4,T5,T6,LTR-2,Q1,Q2和Sxb,其中以T1-1的抑菌圈最大。
对立枯病菌拮抗活性较强的菌株有:T2-1,T5,LRR,LTR-2,Q1和Sxb,而对黄萎病菌拮抗活性较强的菌株有T1,T1-1,LR,LTR-2,Q1和Q2,可见LTR-2,T1-1,T5,Q1和Q2的拮抗活性为最强。
2.2 木霉菌对病原真菌的重复寄生能力对峙试验中观察到木霉菌与棉花枯萎病菌的菌落相交叉后约4天左右木霉完全覆盖病菌菌落,并大量产孢,显出绿色。
在显微镜下可以看到木霉菌对病原菌有明显的寄生现象,寄生方式包括缠绕、平行生长、穿透等。
观察表明,所有木霉菌对病原菌的老龄菌丝特别是枯萎病菌的老龄菌丝寄生能力都不强,表现为木霉菌菌落覆盖病原菌菌落的扩展速度减慢而后停止,显微镜下菌丝寄生率明显下降。
测定了12个木霉菌菌株对棉花立枯病菌,枯萎病菌和黄萎病菌的重复寄生能力。
根据对菌丝的寄生率,可知所有木霉菌菌株都能强烈地寄生立枯病菌,多数菌株(除T22外)也能强烈地寄生黄萎病菌,但是对于枯萎病菌来说,菌株间的差别就比较明显,LTR-2,LRR,LR,Q1,Q2,T1-1,T2-1和T22能100%地寄生枯萎病菌菌丝,而其余4个菌株的菌丝寄生率则较低。
这说明木霉菌菌株间的重复寄生能力是不同的,对于不同的病原真菌来说,寄生情况也不同。
2.3 木霉菌生长速度在PDA,玉米琼脂和NA平板上测定了19个木霉菌菌株的菌落伸展速度于菌株间差别不明显,菌落扩展速度都在 3.5cm/天左右。
这说明大多数木霉菌属于快速生长类型,依据生长速度来筛选生防菌的价值有限,但是木霉菌快速生长的特性对于菌剂的大量生产十分有用,另外,如果菌株的竞争能力较强,这一特性可以使木霉菌在作用部位迅速建立有效群体,有利于生物防治效果的发挥。
2.4 木霉菌产生分生孢子的能力不同菌株间以及同一菌株在不同的基质上产生分生孢子的能力有明显的差异。
就基质而言,多数菌株在麸皮上的产孢量较高,在木屑和麦糠上的产孢量均少于麸皮。
对于不同的菌株而言,产孢量最大的是LR,即LTR-2的紫外诱变株产孢量最大,在麸皮培养基上产孢量达到了104×108/克干重,其次是LTR-2。
产孢量最少的是康宁木霉菌Tk7a,在麸皮上的产孢量仅为3.4×108/克干重。